大肠埃希菌
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大肠埃希氏菌检测标准
大肠埃希氏菌是一种常见的肠道细菌,也是食品检测中的重要指标之一。
以下是大肠埃希氏菌检测的标准:
首先,对于饮用水的检测,每升水中大肠埃希菌的数量不应该超过3个。
这是为了保证饮用水的安全性,避免因为水源水中大肠埃希菌超标而引起的肠道疾病。
其次,在水源水的检测中,经过加氯消毒的水源水,每升水中大肠埃希菌的数量平均不应该超过1000个。
这是为了保证水源水的质量,避免因为水源水中大肠埃希菌过多而影响饮用水的质量。
同时,在水源水的检测中,经过净化处理及加氯消毒后供作生活饮用水的水源水,每升水中大肠埃希菌的数量平均不应该超过10000个。
这是为了保证生活饮用水的水质,避免因为水源水中大肠埃希菌过多而影响人体健康。
此外,在食品检测中,对于生肉类的检测,每克生肉中大肠埃希菌的数量不应该超过100个。
这是为了保证生肉类的安全性,避免因为生肉类中大肠埃希菌过多而引起的肠道疾病。
最后,在食品检测中,对于加工过的肉制品的检测,结果应该为阴性。
这是为了保证加工过的肉制品的质量,避免因为加工过程中受到大肠埃希菌的污染而影响产品质量和人体健康。
总之,大肠埃希氏菌检测标准是为了保障人们的饮用水和食品安
全。
在检测过程中,需要采用科学的方法和先进的设备进行检测,确保数据的准确性和可靠性。
同时,也需要加强监管力度,保证食品生产过程中大肠埃希菌的含量符合标准要求,保障公众的健康和安全。
562023.9仔猪大肠埃希菌病的发生和防治孙 健(抚顺市农业综合行政执法队,辽宁 抚顺 113006)1 病原大肠埃希菌为革兰阴性短杆菌,长2~3微米,宽0.4~0.7微米,呈散在或成对出现,约50%的大肠埃希菌有周身鞭毛,致病性菌株常有荚膜和菌毛。
根据大肠埃希菌的致病作用主要分为6种,即产肠毒素性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌、肠道出血性大肠埃希菌、肠聚集性大肠埃希菌、肠道侵袭性大肠埃希菌以及产志贺毒素性大肠埃希菌,产肠毒素性大肠埃希菌是动物发生腹泻的主要病原体。
2 流行病学大肠埃希菌对幼年动物危害较大,可造成仔猪发生仔猪黄痢、白痢以及水肿病。
该病一年四季均可发生,主要的传染源为患病猪和带菌猪,病菌可随猪的粪便排出,污染饲料、水源以及动物的皮肤等,仔猪黄痢和白痢主要是由带菌母猪哺乳导致的。
大肠埃希菌为肠道内正常菌群,环境因素以及应激刺激可导致该病发生,生活环境卫生差、饲养密度过大、通风不良、饲料提供营养不足、天气突然变化、消毒不彻底等更易发生该病。
3 临床症状3.1 仔猪黄痢的临床症状仔猪黄痢主要发生于新生一周以内的仔猪,多见于1~3日龄仔猪,由产肠毒素性大肠埃希菌引起,潜伏期短,仔猪新生12小时内即可发病,死亡率高,死亡速度快,治疗未有效果就可死于败血症和肠毒血症。
根据发病速度可分为最急性型和急性型。
最急性型可见于出生后数小时内,仔猪无腹泻,病症表现为四肢瘫软和快速死亡。
急性型多见于出生后1~3天,一般为一窝仔猪有1~2头仔猪突然腹泻,全身无力衰弱,数小时内传染整窝仔猪,仔猪精神不振,站立不稳,吮吸无力,被毛杂乱,眼球下陷,腹泻排腥臭的黄色水样便或糨糊样稀便,粪便中或有凝乳块,粪便糊在后躯,最终因脱水迅速死亡。
仔猪黄痢在同一窝仔猪中传播较快,发病快,无慢性经过,死亡率高,一般可达九成,甚至整窝死亡。
3.2 仔猪白痢的临床症状仔猪白痢主要发生于10~30日龄的仔猪,一月龄以上的猪发生较少。
该病的主要表现为突然腹泻,排出恶臭、乳白色或灰白色的糨糊状稀便,病程长短不一,多数持续3~7天,一般可自愈,死亡率不高,疾病若反复发生可导致仔猪变为僵猪,影响养殖户经济效益。
Shandong Liaocheng Ehua Medicine CO., LTD大肠埃希菌(Escherichia coli)即大肠杆菌,为肠杆菌科埃希菌属的模式种。
用4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)和靛基质(Indole)试验检查大肠埃希菌,检验步骤为:增菌培养后,转种MUG-蛋白胨培养基培养,多数情况下不需要从混合菌中分离单个菌,如MUG、Indole 试验为阳性或阴性即可报告结果。
原理:利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物,产生颜色或荧光反应作为指示系统来鉴定目标菌。
实验证明,96%的大肠埃希菌含β-葡糖苷酸酶(GUD)。
MUG被GUD水解,产生荧光,由于荧光反应的敏感度较颜色的反应强,易于观察。
通常将MUG与靛基质试验结合,来检测大肠杆菌。
如MUG与Indole试验的反应不一致时,则需将供试液的增菌培养物用EMB琼脂平板分离培养、革兰染色、镜检及生化试验鉴别。
2.仪器、设备及用具2.1无菌室微生物检查应有单独的无菌室,每个无菌室应有独立的净化空气系统。
2.2 净化工作台2.3 培养箱(36℃±1℃)。
2.4 高压蒸汽灭菌器。
2.5 显微镜(1500×)。
2.6 恒温水浴(45℃±1℃)。
2.8 离心机(500~4000r/min)。
2.9 电冰箱。
2.10 匀浆仪。
2.11 366nm紫外灯。
2.12 玻璃器皿、器具[参照细菌、霉菌和酵母菌计数2.2.2]。
3.试液、指示液。
3.1 0.9%无菌氯化钠溶液。
3.2 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。
3.3 pH7.2无菌磷酸盐缓冲液。
3.4 靛基质(Kovacs)试液。
3.5甲基红试液。
3.6 V-P试液。
3.7 革兰染色液。
3.8 中性红指示液。
3.9 亚甲蓝指示液。
3.10 溴麝香草酚蓝指示液。
3.11 酸性品红指示液。
3.12 曙红钠指示液。
4.培养基4.1 营养肉汤4.2 营养琼脂4.3 胆盐乳糖(BL)培养基。
大肠埃希菌1.概况:大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群,婴儿出生数小时后就进入肠道中并终生伴随,能为宿主提供一些营养作用的合成代谢产物,宿主免疫能力下降或细菌侵入肠道外组织或器官,即可成为条件致病菌,引起肠外感染,以化脓性感染和泌尿道感染最为常见,某些血清型大肠埃希菌具有致病性,能导致人类腹泻。
2.形态:中等大小的革兰阴性杆菌无芽孢,多数菌株有周身鞭毛,能运动;有菌毛包括普通菌毛和性菌毛3.体内分布:大肠杆菌在人和动物的肠道内,大多数于正常条件下是不致病的共栖菌,在特定条件下(如侵入肠外组织或器官)可致病。
但少数大肠杆菌与人和动物的大肠杆菌病密切相关,它们是病原性大肠杆菌,正常情况下极少存在于健康机体。
4.培养:兼性厌氧菌,营养要求不高,在普通的琼脂平板37℃培养24小时后,埃希菌形成圆形凸起灰白色S型菌落。
在液体培养基中均匀浑浊的生长。
5.生化反应:能发酵葡萄糖等多种糖类,产酸并产气,绝大多数菌株能发酵乳糖,可与沙门菌,志贺菌等区别。
吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验(IMViC试验)为++--,IMViC试验为此结果,可判断为典型的大肠埃希菌,表明被检物已被粪便污染,有传播肠道传染病的危险6.抗原构造:大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种,已确定的大肠杆菌菌体(O)抗原有173种,表面(K)抗原有80种,鞭毛(H)抗原有56种。
O抗原凝聚相对较慢,呈颗粒状。
H抗原刺激机体主要产生IgG类抗体,H抗原的凝集出现较快,呈絮状。
K抗原位于O抗原外层,为多糖,与细菌侵袭力有关。
7.生物学特性:本属细菌对干燥、腐败、日光等因素具有一定的抵抗力,在外界条件下可以生存数周或数月。
对化学消毒剂的抵抗力不强,一般常用消毒剂和消毒方法均能达到消毒目的。
通常情况下,对多种抗菌药物敏感。
但由于长期滥用抗生素,对常用抗生素耐药现象普遍,不仅影响该病防制效果,而且亦成为公共卫生关注的问题。
8.致病物质定植因子:又称黏附素(adhesin),可与黏膜表面细胞的特异性受体相结合而定植于黏膜,这是大肠杆菌引起的大多数疾病的先决条件。
大肠埃希菌的鉴定流程及相应试验结果下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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埃希菌属及其鉴定本属以大肠埃希菌为代表种。
1.细菌特性大肠埃希菌为革兰阴性杆菌,直杆状,周鞭毛,能运动,有菌毛。
具有O抗原、H抗原、K抗原,其血清型别按O∶K∶H的顺序排列,以数字表示,如O111∶K58∶H2;O157∶H7等。
兼性厌氧,营养要求不高,菌落为灰白色、圆形,在肠道选择培养基上能发酵乳糖产酸形成不同颜色的菌落。
生化特征为:发酵多种糖类产酸产气,KIA:AA+-,脲酶-;IMViC++--。
2.临床意义大肠埃希菌是临床最常见的革兰阴性杆菌,也是医院感染常见病原菌,可引起各种肠道外感染和肠道内感染。
引起肠道内感染的亦称为致腹泻大肠埃希菌,分为五组:(1)肠产毒性大肠埃希菌(ETEC) ETEC致病机制主要通过产生LT和ST肠毒素导致腹泻和中毒症状,是旅游者腹泻和婴幼儿腹泻的常见病因,导致恶心、腹痛、低热和类似轻型霍乱的急性水样腹泻。
(2)肠致病性大肠埃希菌(EPEC)是婴儿腹泻的重要病原菌,可导致发热、呕吐、严重水泻和粘液便,常引起婴儿脱水性酸中毒。
(3)肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)与志贺菌有共同抗原,可引起类似志贺菌肠炎的症状,如发热、腹痛、水泻或典型菌痢的里急后重症状,并出现脓血粘液便。
(4)肠出血性大肠埃希菌(EHEC)主要血清型为O157∶H7,引起出血性结肠炎(HC)。
表现为腹痛、水泻、血性便。
主要见于婴幼儿。
以暴发流行为主。
O157∶H7感染者中有少部分可发展成为溶血性尿毒综合征(HUS),出现溶血性贫血、血小板减少性紫癜和急性肾功能不全。
(5)肠凝聚性大肠埃希菌(EaggEC)引起婴儿急性或慢性水样腹泻伴脱水,偶有腹痛、发热与血便。
3.微生物学检验(1)标本采集无菌方法采集各类感染标本及时送检;粪便标本宜采集新鲜、有脓血、粘液的部分。
(2)检验方法1)显微镜检查为革兰阴性杆菌。
2)分离培养标本接种于BAP、SS、MAC/EMB培养基、或增菌培养基,置35℃孵育18~24h,观察菌落。
水质中的总大肠菌群耐热大肠菌群大肠埃希细菌的关系本文将探讨水质中的总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃希细菌之间的关系。
总大肠菌群是指在水样中检测到的所有大肠菌科细菌的数量,包括致病和非致病菌;而耐热大肠菌群则是指在高温条件下仍能生存和增殖的大肠菌科细菌的数量,通常是指热带地区水源中的污染指标。
而大肠埃希细菌是一种常见的致病菌,可能会引起胃肠道感染和疾病。
在水质监测中,通常会对总大肠菌群和耐热大肠菌群进行检测,以评估水源是否受到污染。
如果水样中的总大肠菌群或耐热大肠菌群数量超标,则可能存在致病菌的污染,需要进行更进一步的检测,以确定是否存在大肠埃希细菌等致病菌。
因此,总大肠菌群和耐热大肠菌群是评估水源污染程度的重要指标,而大肠埃希细菌则是其中的一个可能存在的致病菌。
对于大肠埃希细菌的检测和控制,需要采取有效的水源保护和治理措施,以确保水质安全。
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大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析大肠埃希菌是一种常见的细菌,通常存在于人和动物的肠道中。
尽管它通常对人体无害,但它也是一种致病菌,可以引起多种疾病,尤其是在免疫系统较弱的人群中。
大肠埃希菌的耐药性是当前医学界关注的焦点之一,因为耐药性的加强给治疗这种细菌感染带来了更大的挑战。
本文将就大肠埃希菌的临床分布和其耐药性进行分析。
大肠埃希菌的临床分布大肠埃希菌是引起泌尿道感染、腹泻以及败血症等疾病的主要致病菌之一。
根据世界卫生组织的数据显示,大肠埃希菌感染是全球范围内最常见的细菌感染之一,每年影响数百万人。
其主要临床表现包括发热、腹痛、腹泻、尿频、尿痛、脓尿等。
在免疫功能低下、慢性疾病患者、婴幼儿及老年人中尤为常见。
大肠埃希菌主要通过食物、饮水和接触传播,是一种常见的食源性致病菌。
大肠埃希菌在医院内也是一种重要的医院感染病原体,尤其是在重症监护病房、外科手术室等感染压力较大的科室中。
由于过度使用抗生素以及抗生素的滥用,大肠埃希菌对多种抗生素产生了不同程度的耐药性。
其中最具挑战性的是对第三代头孢菌素和氟喹诺酮类抗生素的耐药性。
根据国内的研究数据显示,大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶等第三代头孢菌素的耐药率逐年上升。
氟喹诺酮类抗生素如左氧氟沙星、环丙沙星的耐药性也呈逐年增强的趋势。
大肠埃希菌的耐药性造成了临床治疗的困难,使得原本有效的抗生素治疗失效,从而延长了感染的病程,增加了治疗的难度和费用。
大肠埃希菌的耐药性也给临床医生带来了较大的挑战,往往需要根据病原菌的耐药性情况来选择更合适的抗生素治疗,以避免治疗失败。
耐药性的产生主要是由于抗生素的滥用和不规范使用,特别是在临床和畜牧业中的过度使用,导致细菌对抗生素产生了适应性。
大肠埃希菌本身也存在着多种耐药基因,使其更容易在抗生素的压力下形成耐药菌株。
针对大肠埃希菌的耐药性问题,应该采取综合性的措施来加以解决。
首先是加强对抗生素的合理使用,减少滥用和不必要的使用,避免产生耐药菌株。
大肠埃希菌
埃希菌属:大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、伤口埃希菌
致病因素;侵袭力K抗原和菌毛与炎症相关
内毒素与发热、休克、DIC相关
肠毒素耐热肠毒素和不耐热肠毒素cAMP水平升高,与腹泻相关
所致疾病:肠道外感染:泌尿系统感染、菌血症、胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎
常见于肠穿孔激发腹膜炎、腹腔内脓肿、肠道手术后激发感染肠道内感染:微腹泻至霍乱样严重腹泻、溶血性尿毒综合征
根据其不同的血清型,毒力和所致临床症状的不同,分为:
危险因素感染类型发病年龄主要临床表现
肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)海外旅行旅行者腹泻成人、儿童水样便
肠致病型大肠埃希菌(EPEC) 急性腹泻﹤2岁婴儿、成人水样便
肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC) 海外旅行志贺样脓血便成人粘液脓血便,含红白细胞
肠出血型大肠埃希菌(EHEC) 未熟牛肉牛奶出血性肠炎儿童、老人血便、发热(白)肠凝聚型大肠埃希菌(EaggEC)急、慢性腹泻儿童腹泻水泻、呕吐
ETEC:儿童腹泻和旅行者腹泻
EPEC;:黏液便但无血液
EIEC:志贺样脓血便(有红细胞、白细胞)
EHEC:多为水源性或食源性感染,人与人之间通过粪口感染,产生Veno细胞毒素,抑制蛋白质合成并致Veno细胞病变,
潜伏期3--5天,血便中无白细胞
EaggEC:::与世界各地慢性腹泻有关。
形态结构;:格兰阴性直短杆菌,多有鞭毛,能运动;引起场外感染的菌株有荚膜和周身菌毛
抗原成分:O抗原多糖磷脂复合物(LPS),耐热,分型基础
H抗原不耐热蛋白质
K抗原多糖荚膜抗原,对热稳定
血清型按O:K:H顺序
培养特性:兼性厌氧,营养要求不高
血琼脂上产生β溶血
肠道选择培养基,发酵乳糖,形成有色菌落
发酵多种糖产酸产气,吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐(1MVC)试验结果为+ + - -
动力、吲哚、脲酶(MIU)反应为+ + -
克氏铁琼脂上斜面和底层产酸产气,硫化氢阴性(AA+ -)
微生物学检验
采集标本;:静脉血,血培养
痰液、脓、分泌物等
尿液,3000r/min 10min,沉淀物涂片
镜检:格兰阴性杆菌
分离培养:痰液血平板、巧克力平板、沙保弱氏培养基
尿液血平板、MAC、沙保弱氏培养基
血液血培养
鉴定:EMB上,扁平、粉红色有金属光泽
MAC上粉红色或红色
SS上红-粉或中央为粉红色,周围无色的菌落
XLD上,不透明黄色的菌落
大肠埃希菌一般不产生硫化氢
血清分型:ETEC:生化反应鉴定加血清分型加肠毒素测定
EPEC:生化反应鉴定加血清分型
乳糖阳性
用ELISA和细胞培养来检测EPEC
EIEC;:生化反应加血清分型及毒力鉴定
多数此型菌动力阴性,乳糖不发酵或迟缓发酵,
O152 和O124,,与志贺菌有的抗血清有交叉反应
豚鼠眼结膜试验:角膜上皮细胞出现大量细菌
和志贺菌鉴别:醋酸钠、葡萄糖胺利用试验和黏质酸盐产酸
大肠埃希菌均阳性,志贺菌均阴性
EHEC:生化鉴定加血清分型
O157 :H7 ,不发酵山梨醇。