杆状病毒AcMNPVp48基因在昆虫细胞中的表达_袁美妗
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尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定肖昌;徐兴然;查云峰;张玉静;宣华;涂长春【期刊名称】《病毒学报》【年(卷),期】2006(22)6【摘要】利用改造的昆虫杆状病毒表达系统转移载体,成功地对尼帕病毒(NiV)和亨得拉病毒(HeV)的核蛋白基因进行了分泌表达。
重组蛋白表达的时效性分析结果显示,Sf9细胞感染重组病毒72~96h后,蛋白的表达量达到高峰,大规模表达可分别获得2.3~2.4mg/L纯化的目的蛋白。
应用Western blot、间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)对两种重组N蛋白与兔抗NiV和HeV阳性血清的反应性进行鉴定,结果表明两种重组N蛋白和阳性血清有很好的反应性,并且在血清学上有交叉反应。
该研究为今后开展流行病学调查和诊断试剂的研制打下了基础。
【总页数】5页(P466-470)【关键词】副粘病毒科;尼帕病毒;亨得拉病毒;核蛋白;杆状病毒;表达;反应原性【作者】肖昌;徐兴然;查云峰;张玉静;宣华;涂长春【作者单位】军事医学科学院军事兽医研究所病毒室;吉林大学农学部畜牧兽医学院;广东省农业科学院兽医研究所【正文语种】中文【中图分类】Q786【相关文献】1.减蛋下降综合征病毒重组 Knob-S 基因在杆状病毒系统中的表达及其免疫原性鉴定 [J], 郑金;陈滔;陆吉虎;高峰;候继波;黎满香;唐应华2.EBOV-Z和MARV的NP基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定 [J], 王宗尧;史子学;刘阳;朱紫祥;吴德峰;王水明;刘学辉;马志永3.鹅副粘病毒与鹅细小病毒主要免疫原性基因在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的共表达及其免疫 [J], 毕玉海;曹璐;李志杰;母连志;徐明;丁壮4.尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 [J], 肖昌;刘勇军;徐兴然;涂长春;张玉静5.亨得拉病毒核蛋白基因(N)在大肠杆菌的高效表达与反应原性鉴定 [J], 伍莉;肖昌;徐兴然因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
融合gp67信号肽的慈菇蛋白酶抑制剂基因在蚕体内表达
季平;吴祥甫
【期刊名称】《生物工程学报》
【年(卷),期】1999(15)3
【摘要】用AcMNPV的gp67信号肽与慈菇蛋白酶抑制剂基因(API2)融合,并整合到昆虫病毒表达载体Bm-BacPAK6中,受多角体蛋白基因启动子控制。
慈菇蛋白酶抑制剂在蚕体内成功地得到了高效表达,比较了gp67信号肽和慈菇蛋白酶抑制剂信号肽在昆虫表达系统中对表达产物的影响,发现表达产物都能分泌到血淋巴中,表达量很相似,但这两种信号肽在表达过程中都没有被切除,且不同信号肽对表达产物的生物活性有很大影响。
【总页数】5页(P310-314)
【作者】季平;吴祥甫
【作者单位】苏州大学蚕桑学院;中国科学院上海生物化学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】Q75
【相关文献】
1.家蚕表达人表皮生长因子gp67信号肽融合蛋白及生物活性的研究 [J], 吕正兵;张文平;于威;陈健;聂作明;张文伶;张晓燕;张耀洲
2.转Cry1Ac活性杀虫蛋白及慈菇蛋白酶抑制剂B基因的棉花 [J], 郭洪年;吴家和;陈晓英;罗晓丽;卢睿;石跃进;秦红敏;肖娟丽;田颖川
3.慈菇蛋白酶抑制剂对亚洲玉米螟消化酶的影响 [J], 黄娟;符文俊;邱鸿贵
4.慈菇蛋白酶抑制剂研究进展 [J], 潘进权;刘耘
5.慈菇蛋白酶抑制剂通过花粉管途径对小麦的导入及转基因植株分析 [J], 牟红梅;刘树俊;周文娟;文玉香;张文俊;魏荣瑄
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高致病性血清4型禽腺病毒hexon基因在昆虫细胞中的表达及鉴定梅梅;陆吉虎;张雪花;唐应华;侯继波【摘要】为获得杆状病毒表达的重组高致病性血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)六邻体蛋白(Hexon),本研究通过PCR从高致病性血清4型禽腺病毒基因组中扩增到hexon基因,克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-1,获得重组转移质粒pFastBac-hexon,将其转化DH10Bac大肠杆菌并筛选,获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-hexon,将重组杆状病毒穿梭质粒转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒rBV-hexon.间接免疫荧光试验和免疫印迹试验结果显示,Sf9细胞中的Hexon蛋白能够与血清4型禽腺病毒阳性血清发生特异性反应,蛋白质分子量约110000,表明Hexon蛋白在Sf9细胞中获得良好的表达.【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2018(034)004【总页数】4页(P862-865)【关键词】高致病性血清4型禽腺病毒;六邻体蛋白;hexon基因【作者】梅梅;陆吉虎;张雪花;唐应华;侯继波【作者单位】江苏省农业科学院动物免疫工程研究所,江苏南京 210014;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009;江苏省农业科学院动物免疫工程研究所,江苏南京 210014;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009;江苏省农业科学院动物免疫工程研究所,江苏南京 210014;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009;江苏省农业科学院动物免疫工程研究所,江苏南京 210014;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009;江苏省农业科学院动物免疫工程研究所,江苏南京 210014;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009【正文语种】中文【中图分类】S855.3禽腺病毒(FAdV)属于腺病毒科禽腺病毒属,主要分为5个种(A~E),12个血清型[1]。
多角体包裹型猪α干扰素在昆虫细胞中的表达郭建军;曾静;袁林;邱小忠【摘要】为了获得多角体包裹的重组猪α干扰素,应用Bac-to-Bac昆虫细胞杆状病毒表达系统,将多角体蛋白基因和编码成熟猪α干扰素的基因分别构建到pFastBac Dual载体的PH、P10启动子下,以多角体蛋白H1α-螺旋序列为信号肽.将构建质粒转化DH10BacTM感受态细胞进行同源重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染Sf9昆虫细胞获得重组病毒.通过间接免疫荧光、Western-Blot证明,多角体蛋白与猪α干扰素实现共表达,在信号肽引导下猪α干扰素被包埋进多角体;用微量细胞病变抑制法检测显示,多角体包裹的猪α干扰素有抗病毒活性,效价达到5亿U/mg以上.应用在昆虫细胞中表达的多角体包裹型猪α干扰素,在临床上为猪病毒性疾病的防治与治疗奠定了基础.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2017(045)023【总页数】4页(P41-44)【关键词】猪干扰素;多角体;杆状病毒表达;抗病毒活性【作者】郭建军;曾静;袁林;邱小忠【作者单位】江西省科学院微生物研究所,江西南昌330096;江西省科学院微生物研究所,江西南昌330096;江西省科学院微生物研究所,江西南昌330096;江西省科学院微生物研究所,江西南昌330096【正文语种】中文【中图分类】Q786干扰素(interferon,简称IFN)是人和动物细胞受到特定干扰素诱生剂刺激后,产生的一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种功能的细胞因子[1-2],是现今最理想的一种抗病毒生物制剂[3]。
猪α干扰素(porcine interferon,简称PoIFNα)属于干扰素Ⅰ型,机体的多种体细胞受病毒感染时均可产生猪α干扰素,具有较强的抗病毒作用[4-5]。
PoIFNα基因全长570 bp,编码含189个氨基酸残基的前体蛋白,其中前23个氨基酸为信号肽,其后的166个氨基酸为成熟的猪α干扰素蛋白[1-2]。
人降钙素在昆虫细胞中的表达刘颖;王宝利;郭刚;梁东春;张镜宇【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2003(031)007【摘要】目的:利用昆虫细胞杆状病毒系统表达重组人降钙素(recombinant human Calcitonin,rhCT),探索一条真核生物表达生物活性rhCT的新途径.方法:将人降钙索基因重组到pFastBac杆状病毒穿梭载体(baculovirusshuttle vector,Bacmid)中,构建重组人降钙索杆状病毒表达载体即小CT Bacmid,并将其转染昆虫细胞Sf 9,表达目的蛋白.并对表达产物进行分子量及免疫反应性鉴定,在初步纯化后对人降钙素表达产物进行大鼠体内低血钙活性检测.结果:证实目的基因在昆虫细胞中获得了表达,表达产物经大鼠体内低血钙活性测定具有生物活性.结论:成功构建了rhCT Bacmid并在昆虫细胞中表达出了具有生物活性的rhCT.【总页数】4页(P448-451)【作者】刘颖;王宝利;郭刚;梁东春;张镜宇【作者单位】300070,天津医科大学口腔医院;天津医科大学内分泌研究所;天津医科大学内分泌研究所;天津医科大学内分泌研究所;天津医科大学内分泌研究所【正文语种】中文【中图分类】Q8【相关文献】1.人CD4胞外区蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达纯化及性质鉴定 [J], 乔佳明;张芝晴;张振勇;李少伟;夏宁邵;顾颖2.人Cosmc胞外段蛋白在昆虫细胞Sf-9中的表达与纯化研究 [J], 谢秋玲;陶悦;张小秦;莫茜;金燕樑3.人修饰型降钙素和鼠酰胺化酶基因在昆虫细胞中的偶联表达 [J], 杨冠珍;陈珍珍;崔大敷;李伯良;吴祥甫4.重组人可溶性CD14在昆虫细胞表达系统中的表达 [J], 张杰;薛沿宁;郑莉;龙建银;刘农乐;王芳;王会信5.人MC1R基因在杆状病毒-昆虫细胞表达系统中的表达 [J], 李铁征;李小兵;齐翀;祝令伟;朱平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。