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联苯双酯对小鼠骨髓细胞辐射损伤的防护作用研究

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联苯双酯对小鼠骨髓细胞辐射损伤的防护作用研究董辉;侯沁莲;姜道利;唐卫生;田真源;周则卫;李德冠【摘要】目的探讨联苯双酯对辐射致小鼠骨髓细胞损伤的防护作用.方法体外无菌分离小鼠骨髓细胞,联苯双酯孵育30 min后给予1Gy照射,18h后观察对骨髓细胞的细胞活力、细胞凋亡以及活性氧水平的影响.体内实验C57小鼠分为四组,对照组、联苯双酯组、照射组和照射给药组.其中照射组和照射给药组给予4Gy全身照射,对照组和联苯双酯组给予假照射(0Gy).联苯双酯组和照射给药组在受照后灌胃联苯双酯(450mg/kg),持续给药7d,对照组和联苯双酯组给予相同体积的生理盐水.在照射第9天取骨髓细胞,计数单侧股骨骨髓细胞数量以及观察骨髓细胞的凋亡、活性氧水平以及克隆形成能力.结果体外实验中,联苯双酯在5μmol/L有一定的保护作用.在给予1 Gy照射后18 h,与对照组相比,照射组细胞活力显著下降、凋亡率以及活性氧水平显著升高(P＜0.05);与照射组比较,照射给药组中联苯双酯可提高受照骨髓细胞的细胞活力,降低骨髓细胞凋亡率和活性氧水平(P＜ 0.05).体内实验中,与对照组比较,照射组可显著降低骨髓细胞计数和克隆形成能力,提高骨髓细胞活性氧水平(P＜0.05);与照射组比较,照射给药组中联苯双酯可显著改善骨髓细胞克隆形成能力,降低骨髓细胞活性氧水平.结论联苯双酯可降低骨髓细胞活性氧水平,对骨髓细胞辐射损伤有一定的防护作用.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2017(014)004【总页数】5页(P4-7,26)【关键词】辐射;活性氧;联苯双酯;骨髓细胞;细胞凋亡【作者】董辉;侯沁莲;姜道利;唐卫生;田真源;周则卫;李德冠【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192【正文语种】中文【中图分类】R811.5联苯双酯（dimethyl dicarboxylate biphenyl，DDB）是我国科学家在研究中药五味子中发现的一种新药，也是人工合成五味子丙素的中间产物，是临床治疗病毒性肝炎和药物性肝损伤引起转氨酶升高的常用药物[1]。

前期研究Li发现联苯双酯具有清除自由基活性，而Lin则进一步研究发现联苯双酯不仅能提高肿瘤化疗敏感性，还能抑制肿瘤细胞，提高肿瘤细胞的凋亡率[2-3]。

曹波等则研究发现联苯双酯还具有抗炎功能，能够抑制Cox-2酶以及IL-4，IL-8等炎症因子表达[4-8]。

Li 则发现联苯双酯还可引起损伤肝脏中SOD及GSH升高，从而治疗肝脏损伤[9]。

而联苯双酯在辐射损伤中的作用未见报道。

因此本文探讨联苯双酯对骨髓细胞辐射损伤的防护作用，并对其作用机制进行了初步的研究。

1.1 小鼠与分组C57BL/6L小鼠，雄性，体重18～22 g，10～12周龄，SPF级，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号为SCXK（京）2012-0001。

购买后饲养于中国医学科学院放射医学研究所SPF级动物房。

1.2 照射及给药在体外实验中骨髓细胞的照射剂量为1.0 Gy。

体内实验中小鼠按体重随机分为对照组，联苯双酯组，照射组和照射给药组，每组五只，共20只小鼠。

其中对照组和联苯双酯组给予假照射（0 Gy），照射组和照射给药组给予4.0 Gy全身照射。

Cammacell-40137Cs放射源为加拿大原子能公司产品，剂量率约为1.0 Gy/min。

所有小鼠在照射后当日灌胃给药。

照射后每天给药1次，持续给药7 d，共给药7次。

其中联苯双酯组和照射给药组小鼠的联苯双酯给药剂量为450 mg/kg。

对照组和照射组的小鼠给予同等体积的生理盐水。

在受照后第9天，取材进行相关体内指标检测。

1.3 试剂与仪器联苯双酯由药物室周则卫老师赠送；培养基（RPMI1640）及小牛血清购自美国Gibco公司；克隆培养基（M3534）购自加拿大Stem cell公司；活性氧试剂（S0033）购自南京碧云天公司；Annexin V凋亡试剂盒购自美国Ebioscience公司；Cell Titer-BlueTM试剂购自美国Promega公司。

日本Olympus倒置显微镜，日本Sysmex poch-100i全自动血液分析仪，美国Thermo CO2培养箱。

1.4 细胞活力测定脱颈处死小鼠，无菌取小鼠双侧股骨。

将骨髓细胞悬液接种96孔板，加入联苯双酯。

孵育30 min后，给予1.0 Gy照射，培养18 h检测细胞活力。

1.5 细胞凋亡检测将骨髓细胞按照凋亡试剂盒说明加入Annexin V和PI。

室温避光孵育15 min，用流式细胞仪检测。

1.6 单侧股骨有核细胞计数无菌取小鼠胫腓骨，反复冲洗三次。

用细胞计数仪计数，结果表示为×106/femur。

1.7 细胞活性氧检测骨髓细胞加入活性氧检测试剂后37℃水浴30 min，用流式细胞仪检测。

1.8 集落形成能力测定无菌收集小鼠骨髓细胞，计数。

每组取16×104细胞加入到4 mL M3534培养基中，种24孔板。

将24孔板置入37℃，5%CO2培养箱中培养。

在培养第5天计数，克隆细胞数≥30为阳性集落，CFU-GM以每2× 104个细胞形成的集落数表示。

1.9 统计学处理采用统计学软件SPSS15.0进行数据分析。

正态分布计量资料以（x±s）表示。

多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 联苯双酯对小鼠骨髓细胞活力的影响观察联苯双酯对骨髓细胞活力的影响（图1A）。

与0组相比，在0.5～5μmol/L浓度下，联苯双酯对骨髓细胞有一定的保护作用，在5μmol/L浓度有显著保护作用（P＜0.05）；当联苯双酯浓度50μmol/L及以上时，可显著减低骨髓细胞的细胞活力（P＜0.05）。

观察联苯双酯对体外受照骨髓细胞细胞活力的作用（图1B）。

与对照组相比，照射组和照射给药组骨髓细胞活力显著下降（P＜0.05）。

与照射组相比，照射给药组中骨髓细胞活力有明显升高（P＜0.05），表明联苯双酯在体外可显著降低辐射对骨髓细胞的辐射损伤。

2.2 联苯双酯对小鼠骨髓细胞数量及凋亡比例的影响观察联苯双酯对小鼠单侧股骨有核细胞数量的影响（图2A），与对照组相比，照射可显著减低小鼠单侧股骨细胞数量；与照射组相比，照射给药组可有效缓解辐射引起的骨髓有核细胞数量的降低（P＜0.05）。

在体外实验中（图2B），照射可显著提高骨髓细胞的凋亡率;联苯双酯则可显著降低照射引起的凋亡率（P＜0.05）。

在体内实验中（图2C），与对照组比较，照射引起骨髓细胞凋亡率增加；而与照射组比较，照射给药组中受照小鼠骨髓细胞的凋亡率降低（P＜0.05）。

以上结果表明联苯双酯可显著降低辐射引起的骨髓细胞凋亡，提高受照小鼠中的有核细胞计数。

2.3 联苯双酯对小鼠骨髓细胞活性氧水平的影响通过体内外实验观察联苯双酯对受照骨髓细胞活性氧水平的影响。

体外实验结果表明（图3A），与对照组相比辐射可显著引起骨髓细胞中活性氧的升高（P＜0.05）；而联苯双酯可显著降低受照骨髓细胞中活性氧的水平（P＜0.05）。

在体内实验中（图3B），尽管辐射引起的活性氧幅度没有体外高，但与对照组相比，辐射仍可显著增加受照小鼠骨髓细胞的活性氧水平（P＜0.05）；照射给药组中小鼠骨髓细胞的活性氧水平显著低于照射组中骨髓细胞的活性氧水平（P＜0.05）。

2.4 联苯双酯对小鼠骨髓细胞克隆形成能力的影响照射后第9天，无菌取骨髓细胞接种，进行粒单系集落形成试验（Colony forming unitgranulocyte-macrophage,CFU-GM）。

与对照组相比，照射对小鼠CFUGM具有明显的抑制作用，可引起受照小鼠骨髓细胞克隆形成能力显著下降（P＜0.05）。

而与照射组相比，照射给药组则可显著提高骨髓细胞CFU-GM （P＜0.05），表明联苯双酯可提高受照小鼠骨髓细胞的克隆形成能力。

见图4。

造血系统对辐射高度敏感，是急性放射病发病的重要基础及预防诊治的关键问题，其中骨髓细胞在造血系统中发挥重要作用[10]。

近年来随着核科技的进步及广泛应用，辐射防护剂研究重新成为热点。

现临床使用的细胞因子及氨磷汀均存在一些缺陷，因此寻找新的辐射防护药物成为放射医学亟待解决的问题[11-12]。

研究发现白藜芦醇、黑茶、益气养阴液等单体、中药及复方均对辐射损伤有一定防护作用[13-16]。

联苯双酯作为我国科学家在研究中药五味子中发现的一种新药。

本文主要研究联苯双酯对骨髓细胞辐射损伤的防护作用。

本文首先观察了联苯双酯对骨髓细胞活力以及凋亡的影响。

辐射可引起骨髓细胞的凋亡，造成小鼠单侧股骨有核细胞计数下降[17]。

而我们结果表明，在体内外实验中，联苯双酯均可有效地缓解骨髓细胞辐射损伤，提高受照骨髓细胞活力和股骨有核细胞计数，降低骨髓细胞的凋亡比例。

这提示联苯双酯对造血系统辐射损伤具有保护作用。

前期研究发现联苯双酯可引起损伤肝脏中SOD及GSH升高，对肝脏损伤有治疗作用[9]。

本研究观察了联苯双酯对骨髓细胞体内外受照后活性氧水平的影响。

结果表明联苯双酯在体内外实验中均可有效降低受照骨髓细胞中的活性氧水平。

这可能与先前报道中联苯双酯可引起细胞中SOD以及GSH等具有清除自由基活力酶的表达有关。

在骨髓细胞中存在大量的造血干细胞与造血祖细胞，其中增造血祖细胞殖活跃，更易受到辐射损伤[18]。

CFU-GM检测骨髓细胞中造血祖细胞的克隆形成能力。

实验结果发现与对照组比较，照射组小鼠骨髓细胞克隆形成数显著下降，表明辐射可显著降低骨髓细胞的克隆形成能力。

而与照射组相比，照射给药组小鼠骨髓细胞的克隆形成数显著升高，提示联苯双酯可对骨髓细胞的克隆形成能力有保护作用。

综上所述，电离辐射可对骨髓细胞造成损伤。

我们研究发现联苯双酯不仅能够提高受照小鼠单侧股骨细胞计数和细胞活力，还能降低受照骨髓细胞中活性氧水平和细胞的克隆形成能力，表明联苯双酯有一定的辐射损伤防护效果，更深层机制有待进一步探讨。

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富硒长双歧杆菌DD98对X射线所致放射性肝损伤小鼠的保护作用

富硒长双歧杆菌DD98对X射线所致放射性肝损伤小鼠的保护作用

富硒长双歧杆菌DD98对X射线所致放射性肝损伤小鼠的保护作用陆春怡，高斐，朱慧，钱志祥，杨萍，李振，毛文伟，殷瑜，陈代杰（上海交通大学药学院，上海 201100）摘要：本研究旨在讨论富硒长双歧杆菌DD98（Selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98，Se-DD98）对X射线所致发射性肝损伤小鼠的保护作用。

雄性SPF级balb/c小鼠随机分为5组：正常对照组、辐射对照组、Se-DD98高剂量组、Se-DD98低剂量、DD98对照组，连续给药28 d并监测体重。

第29 d采用X射线全身照射，实验结束后进行指标检测。

与辐射对照组的体重（24.44 g）和肝脏指数（4.49%）比较，Se-DD98高剂量组体重（26.96 g）及肝脏指数（5.10%）显著改善、血清肝功能指标（ALT、AST）和体内氧化压力水平（MDA、LDH）显著降低，抗氧化酶活力（CA T、SOD、GSH-Px）显著升高。

实时荧光定量PCR结果表明，Se-DD98高剂量组肝脏中Sod1（3.58）和Gpx1（7.14）表达显著上调，分别上调16.41、10.19倍，促炎因子IL-1β表达（2.16）显著下调1.61倍，抑炎因子IL-10（7.09）显著上调1.40倍。

此外，Se-DD98高、低剂量组均能减轻X射线所致的肝脏损伤。

最后，Se-DD98高剂量组各项指标与正常对照组相比差异不大，与辐射对照组差异显著。

因此，富硒长双歧杆菌DD98可以通过减少氧化压力水平、增强抗氧化酶活力及抑制组织炎症来缓解X射线所致的小鼠放射性肝损伤。

关键词：X射线；肝损伤；氧化应激；抗氧化；炎症；富硒长双歧杆菌DD98文章篇号：1673-9078(2021)06-10-19 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2021.6.0957 Protective Effects of Selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98 on X-Ray Radiation-induced Hepatic Tissueinjury in MiceLU Chun-yi, GAO Fei, ZHU Hui, QIAN Zhi-xiang, YANG Ping, LI Zhen, MAO Wen-wei, YIN Yu, CHEN Dai-jie (School of Pharmacy, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 201100, China) Abstract: The purpose of this study was to examine the protective effects of selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98 (Se-DD98) on X-ray-induced hepatic damage in mice were investigated. Male SPF-grade balb/c mice were randomly divided into 5 groups: normal control group, radiation control group, Se-DD98 high-dose group, Se-DD98 low-dose group and DD98 control group. After 28 days of administration, the body weights of mice were monitored. Whole body X-ray irradiation was used on the 29th day, and then relevant indicators were measured after the experiment. Compared with the body weight (24.44g) and liver index (4.49%) of the radiation control group, the body weight (26.96 g) and liver index (5.10%) of the Se-DD98 high-dose group increased significantly, with the levels of their serum liver function indicators (AL T, AST) and body oxidative stress indicators (MDA, LDH) decreasing significantly, and the activities of their antioxidant enzymes (CA T, SOD, GSH-Px) increasing significantly. Real-time fluorescent quantitative PCR results showed that the expression of Sod1 (3.58) and Gpx1 (7.14) in the liver of the Se-DD98 high-dose group was significantly up-regulated (by 16.41 and 10.19 times, respectively), and the expression of pro-inflammatory factor IL-1β (2.16) was significantly down-regulated (by 1.61 times). The mRNA levels of hepatic Sod1 (3.58) and Gpx1 (7.14) were significantly up-regulated respectively by 16.41 and 10.19 times in Se-DD98 high-dose group. In addition, both the high- and引文格式：陆春怡,高斐,朱慧,等.富硒长双歧杆菌DD98对X射线所致放射性肝损伤小鼠的保护作用[J].现代食品科技,2021,37(6):10-19 LU Chun-yi, GAO Fei, ZHU Hui, et al. Protective effects of selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98 on X-ray radiation-induced hepatic tissueinjury in mice [J]. Modern Food Science and Technology, 2021, 37(6): 10-19收稿日期：2020-10-19基金项目：国家自然科学基金项目(81872775)；上海市科技人才计划项目（17XD1423200）作者简介：陆春怡（1996-），女，硕士在读，研究方向：微生物与生化药学通讯作者：朱慧（1993-），女，博士在读，研究方向：微生物与生药学；陈代杰（1957-），男，博士，教授，研究方向：微生物药物研究10low-dose Se-DD98 groups could reduce X-ray-induced liver damage. Finally, the indices of the Se-DD98 high-dose group differed very little from the normal control group but differed significantly from the radiation control group. Therefore, Se-DD98 can alleviate X-ray-induced hepatic damage in mice through reducing the level of oxidative stress, boosting the activities of the antioxidant enzymes and inhibiting tissue inflammation.Key words: X-ray; hepatic damage; oxidative stress; anti-oxidation; inflammation; selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98放射治疗在多种肿瘤的治疗中发挥着重要作用。

当归蛋白对小鼠的辐射防护作用

当归蛋白对小鼠的辐射防护作用

当归蛋白对小鼠的辐射防护作用李娴;王香玲;何火聪;李玲玲;陈翠煌;潘剑茹【期刊名称】《辐射研究与辐射工艺学报》【年(卷),期】2018(036)004【摘要】通过80％硫酸铵沉淀与Sephadex G-50凝胶过滤层析,从当归饮片中得到分子量为18.33 kDa的当归蛋白(命名AP).用X射线对小鼠进行全身照射至吸收剂量6 Gy,建立急性照射损伤模型,以阿米福汀为对照,监测小鼠的体质量、外周血白细胞数、胸腺指数、脾脏指数、脾集落形成单位(CFU-S)、脾脏表观、脾组织病理分析和脾脏抗氧化活力等指标,检验当归蛋白AP的辐射防护效应.结果表明,当归蛋白AP可使受照小鼠的外周血白细胞数量、胸腺指数、脾脏指数、CFU-S和脾脏的过氧化氢酶活力分别增加135％、103％、23％、219％和180％,改善脾白髓损伤,使其体质量下降率减少94％.结果提示,当归蛋白AP对小鼠具有辐射防护作用.【总页数】7页(P15-21)【作者】李娴;王香玲;何火聪;李玲玲;陈翠煌;潘剑茹【作者单位】福州大学生物科学与工程学院福州 350108;福州大学生物科学与工程学院福州 350108;福建医科大学附属肿瘤医院福建省肿瘤医院放射生物学及肿瘤放射治疗学研究室福州 350014;福州大学生物科学与工程学院福州 350108;福州大学生物科学与工程学院福州 350108;福州大学生物科学与工程学院福州350108【正文语种】中文【中图分类】R852.7;TL71【相关文献】1.当归多糖对亚急性辐射损伤小鼠的防护作用研究 [J], 孙元琳;顾小红;李德远;汤坚2.耐辐射球菌PprI蛋白对急性放射损伤小鼠防护作用的初步研究 [J], 陈洁;张永芹;毕洁静;杨占山3.当归及当归多糖对辐射所致大鼠肝肾损伤的防护作用 [J], 卢志伟;许小敏;王磊;张利英;何进鹏;丁楠;李程豪;苏韫;刘永琦4.当归补血汤对辐射损伤小鼠的防护作用 [J], 冯璟;于远望5.加味当归补血汤对X线辐射荷瘤小鼠肝脏的防护作用 [J], 龚继勇;张奉梅;徐恒卫;郑应馨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银杏叶提取物辐射防护作用的研究

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银杏叶提取物辐射防护作用的研究施雨露;刘照轩;陈强;张小楠;徐效义【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2013(017)011【摘要】目的利用深部x射线照射小鼠,形成辐射损伤,研究银杏叶提取物对小鼠抗辐射功能的影响.方法通过计算小鼠骨髓细胞的微核率和染色体畸变率来考察银杏叶提取物的辐射防护作用.实验组剂量为5 mgL/kg,10 mg/kg,20 mg/kg,阳性对照组给予生理盐水.结果三种不同剂量的银杏叶提取物均使小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率及骨髓细胞染色体畸变率有明显的降低( P<0.01).结论银杏叶制剂可能通过清除自由基对骨髓细胞产生一定程度的保护作用,而且这种保护作用达到了平台期,呈现相同程度的辐射抗性.【总页数】2页(P1973-1974)【作者】施雨露;刘照轩;陈强;张小楠;徐效义【作者单位】吉林大学基础医学院病原,免疫细胞遗传实验中心,吉林,长春130021;吉林大学药学院,再生医学系;吉林大学公共卫生学院;吉林大学基础医学院病原,免疫细胞遗传实验中心,吉林,长春130021;吉林大学第一医院,肿瘤中心【正文语种】中文【中图分类】R818.05【相关文献】1.银杏叶提取物对早期中耳放射性损伤防护作用的实验研究 [J],2.关于银杏叶提取物对早期中耳放射性损伤防护作用的实验研究 [J], 徐艳3.多糖的辐射防护作用机制研究 [J], 拜思琼;黎晨;何俊霞;肖文媛;郭淼;郭忠4.白藜芦醇对IEC-6细胞辐射损伤的防护作用及机制研究 [J], 秦浩人;孙婉君;张恒;阎皓;张诗武;朱思伟;王辉5.基于代谢组学研究补肾解毒方对辐射损伤大鼠的防护作用机制 [J], 曹惠敏;刘冬书;雷宁;李延晖;张蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

荞麦芦丁对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

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荞麦芦丁对小鼠免疫性肝损伤的保护作用储金秀;李光民;王建行;刘淑梅;韩婷;韩淑英【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2013(23)24【摘要】目的探讨荞麦花叶中芦丁(RBFL)对卡介苗加脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用.方法采用卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立小鼠免疫性肝损伤模型,不同剂量RBFL进行干预,同时设立联苯双酯为阳性对照药,观察小鼠的一般状况,测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)活性,计算肝质量指数,观察肝脏病理变化,评价其对免疫性肝损伤的保护作用.结果与模型组比较,RBFL各剂量组均能显著改善BCG 加LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠的一般状况,对抗其血清中ALT及肝脏指数的升高,并能减轻肝脏病理损伤.结论 RBFL对卡介苗加脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤具有保护作用.【总页数】4页(P21-24)【作者】储金秀;李光民;王建行;刘淑梅;韩婷;韩淑英【作者单位】河北联合大学药理学,河北唐山063000;河北省唐山市妇幼保健院放射科,河北唐山063000;河北联合大学药理学,河北唐山063000;河北联合大学药理学,河北唐山063000;河北联合大学药理学,河北唐山063000;河北联合大学药理学,河北唐山063000【正文语种】中文【中图分类】R961【相关文献】1.荞麦花叶芦丁对高糖刺激血管损伤的保护作用 [J], 张博男;张静怡;储金秀;王树华;韩淑英2.荞麦花叶芦丁对乙醇所致小鼠肝细胞损伤的保护作用 [J], 储金秀;张博男;韩淑英;余红3.荞麦花叶芦丁对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用 [J], 勾向博;徐菁蔓;王建行;姜妍;韩淑英4.五味子不同组分对小鼠免疫性肝损伤的保护作用研究 [J], 王晓丽; 单莹莹; 王佳烨; 李正祎; 王春梅; 李贺; 陈建光; 孙靖辉5.左旋紫草素对ConA诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用 [J], 努力比亚·阿不都克尤木;胡利萍;秦冬梅;鲁晓擘因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。