miPS对小鼠辐射损伤的修复及作用机制研究

黄芪甲苷（AST-Ⅳ）对小鼠肺12C6+辐照损伤的防护效应及作用机理黄芪甲苷（AST-Ⅳ）是一种从黄芪中提取的天然药物成分，被广泛应用于中医药领域。

在癌症治疗和辐射损伤修复方面具有重要的潜力。

本文通过小鼠实验探讨了黄芪甲苷在辐射损伤防护方面的效应和作用机理，为辐射损伤的治疗提供理论依据。

实验选用小鼠肺12C6+辐照损伤模型，将小鼠分为对照组、辐照组和黄芪甲苷处理组。

对照组和辐照组注射等量的生理盐水，黄芪甲苷处理组在辐照前注射黄芪甲苷。

辐照剂量设定为5 Gray，辐射结束后观察小鼠的生存率、肺组织病理学变化和血清指标变化。

实验结果显示，辐照组小鼠的生存率显著低于对照组，而黄芪甲苷处理组的生存率显著高于辐照组。

辐照组小鼠的肺组织发生明显病理学变化，如炎症细胞浸润、肺泡壁损伤和纤维化，而黄芪甲苷处理组的肺组织变化较轻。

此外，辐照组小鼠的血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平显著升高，而黄芪甲苷处理组的这些指标变化较小。

进一步的分析表明，黄芪甲苷通过多种途径发挥对辐射损伤的防护作用。

首先，黄芪甲苷能够减轻辐射诱导的炎症反应，抑制炎症因子的释放，并减少炎症细胞的浸润。

其次，黄芪甲苷具有抗氧化作用，能够清除自由基，降低氧化应激反应，减轻辐射引起的氧化损伤。

此外，黄芪甲苷还能通过调节免疫反应和DNA损伤修复等机制，进一步提高肺部对辐射的耐受性。

综上所述，黄芪甲苷具有显著的防护效应，能够减轻小鼠肺12C6+辐照损伤所引起的病理学变化和血清指标的改变。

其作用机理主要包括抑制炎症反应、抗氧化作用和调节免疫反应等多种途径。

黄芪甲苷的应用为辐射损伤的治疗提供了新的思路和方法，并有望在临床上得到广泛应用。

然而，需要进一步的研究来验证黄芪甲苷在不同剂量和长期应用下的安全性和有效性综合研究结果显示，黄芪甲苷能够显著提高小鼠对辐照损伤的抵抗力，减轻病理学变化和血清指标的异常。

其作用机理涉及抑制炎症反应、抗氧化作用和调节免疫反应等多种途径。

㊀第41卷㊀第4期2021年㊀7月㊀辐㊀射㊀防㊀护Radiation ProtectionVol.41㊀No.4㊀㊀July 2021㊃辐射生物效应㊃低剂量辐射对小鼠肠道损伤的影响胡昌坤1,2,张雪梅2,3,马增春2,高㊀月2(1.安徽医科大学,合肥230032;2.军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京100850;3.广东药科大学,广州510006)㊀摘㊀要:采用3种不同低剂量(L 组0.04Gy /d ㊁M 组0.12Gy /d ㊁H 组0.2Gy /d )辐射对3组Balb /c 小鼠进行连续5天的照射(分别累积照射0.2㊁0.6㊁1.0Gy ),设立对照组(NC ),照射结束后测定小鼠体重㊁外周血象㊁脏器指数㊁小肠组织中丙二醛(MDA )含量㊁超氧化物歧化酶(SOD )活性㊁免疫细胞因子(IL -1β㊁IL -2㊁IL -6㊁TNF -α)㊁DNA 损伤㊁细胞凋亡等指标的变化㊂通过比较不同低剂量辐射下小鼠肠道损伤指标的变化,以探讨低剂量辐射小鼠肠道损伤最佳照射剂量,为低剂量辐射小鼠肠道损伤模型的建立提供科学依据㊂结果表明,连续照射5天后,各照射组相比于对照组,小鼠体重㊁脏器指数均有不同程度下降(脾脏指数L 组p <0.05㊁M ㊁H 组p <0.01);小肠组织中MDA 含量明显升高(L 组p <0.05㊁M ㊁H 组p <0.01);SOD 含量有不同程度下降;TNF -α㊁IL -2㊁IL -1β和IL -6作为代表性促炎因子呈剂量依赖性升高(IL -1β:M ㊁H 组p <0.05,IL -2:M 组p <0.05㊁H 组p <0.01,TNF -α:M ㊁H 组p <0.05);M ㊁H 组有明显DNA 损伤及细胞凋亡㊂通过以上结果得出本次低剂量辐射小鼠肠道损伤模型的最佳照射剂量及方法为0.12Gy /d 连续照射5天累积0.6Gy ㊂关键词:低剂量辐射;模型;小鼠;肠道中图分类号:R818文献标识码:A㊀㊀收稿日期:2020-12-24基金项目:国家自然科学基金项目(81873063)㊂作者简介:胡昌坤(1995 ),男,2018年毕业于安徽医科大学临床医学院药学专业,现为安徽医科大学基础医学院药学专业在读硕士研究生㊂E -mail:changkunhu@通讯作者:高月㊂E -mail:gaoyue@㊀㊀电离辐射在科技日益发展的今天应用于许多领域(科研㊁医学㊁军事㊁工业),对于长期在辐射环境下的工作人员,低剂量电离辐射(low dose radiation,LDR )也是一个重要的影响健康的因素[1],美国国家辐射防护和测量委员会(NCRP)在2020年发布的一份题为 整合辐射生物学和流行病学的信息以加强低剂量健康风险评估的方法 的报告,足以证明对低剂量引起健康风险的重视[2]㊂近几年来关于低剂量辐射致癌的报告[3],以及LDR 机制的研究普遍认为LDR 诱导的反应与高剂量电离辐射(how dose radiation,HDR)诱导的反应不同,存在着独特的生理机制[4],除了癌症,低剂量还会带来组织反应和非癌症健康影响(如白内障㊁中枢神经系统功能障碍和循环系统疾病)等一系列不确定性的健康风险,有证据表明,0.5Gy 以下的剂量也可能增加心血管疾病的长期风险[5-6]㊂所以对于辐射生物学领域来说最具争议的就是关于低剂量辐射的生物效应的探讨和研究㊂免疫系统对于机体是抵御外界侵入的重要防御系统之一[7],肠道作为人体最大的免疫器官,是人体防御外界侵入的第一道防线[8],放射性肠损伤一直以来以急性肠损伤研究较多[9],但是目前鲜有对于LDR 肠道损伤相关的研究[10],因此建立低剂量辐射小鼠肠道损伤模型对于预防低剂量辐射药物的研发与评价具有重要的研究意义㊂本文通过比较不同低剂量辐射下小鼠肠道相关损伤指标的变化,以此筛选出LDR 肠道小鼠损伤最优照射剂量㊂1㊀材料和方法1.1㊀实验动物及分组㊀㊀SPF 级雄性Balb /c 小鼠40只,6周龄,18~22g(北京维通利华实验动物技术有限公司提供),随机分为4组,分别为空白对照组(NC)㊁低剂量组(L 组,0.04Gy /d ˑ5d,累积0.2Gy)㊁中剂量组(M㊃513㊃㊀辐射防护第41卷㊀第4期组,0.12Gy/dˑ5d,累积0.6Gy)㊁高剂量组(H组,0.2Gy/dˑ5d,累积1.0Gy),每组10只小鼠㊂1.2㊀辐射源及主要仪器㊀㊀60Coγ射线照射源为军事医学研究院辐射医学研究所提供,单次照射剂量率为3.01cGy/min; PE VictorX型酶标仪,美国Perkin Elmer公司;全自动血细胞分析仪(Sysmex2000i)㊂1.3㊀实验试剂㊀㊀脂质氧化(MDA)检测试剂盒(货号S0131 M)㊁SOD活性检测试剂盒(货号S0101M)㊁TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(货号C1088)均购于碧云天生物技术有限公司,TNF-α㊁IL-1β㊁IL-2㊁IL-6ELISA检测试剂盒均购于酶免生物技术有限公司,γ-H2AX购于美国Cell Signaling Technology㊂1.4㊀检测指标与方法1.4.1㊀照射方法㊀㊀每天将小鼠置于离照射源最长距离(4m)处,并用铅砖全身屏蔽,以达到照射装置最低剂量率, 3种剂量分别连续照射5天㊂1.4.2㊀体重㊀㊀照射前1天及每天照射后立即对小鼠称重㊂1.4.3㊀脏器指数㊀㊀照射后24小时取小鼠脾脏和胸腺称重并计算脏器指数㊂1.4.4㊀外周血㊀㊀照射结束后24小时鼠眼球取血,用全自动血细胞分析仪(Sysmex2000i)测定白细胞计数(WBC)㊁红细胞计数(RBC)㊁血小板计数(PLT)㊁血红蛋白含量(HGB)㊁红细胞比容(HCT)等指标㊂1.4.5㊀小肠组织MDA含量㊁SOD活性㊀㊀照射结束后24小时取小鼠空肠组织匀浆,参照试剂盒说明书检测MDA含量㊁SOD活性㊂1.4.6㊀小肠组织细胞因子含量㊀㊀照射结束后24小时取小鼠空肠组织匀浆,参照试剂盒说明书检测TNF-α㊁IL-1β㊁IL-2㊁IL-6细胞因子含量㊂1.4.7㊀小肠组织DNA损伤㊀㊀照射结束后2小时取小鼠十二指肠固定并制作成石蜡切片,石蜡切片经脱蜡㊁抗原修复㊁封闭㊁标记㊁显色㊁复染等处理,进行免疫荧光γ-H2AX 抗体染色观察小肠组织DNA损伤㊂1.4.8㊀TUNEL法检测小肠组织细胞凋亡㊀㊀采用TUNEL细胞凋亡检测试剂盒,参照试剂盒说明书进行检测㊂石蜡切片经脱蜡㊁抗原修复㊁封闭㊁标记㊁显色㊁复染等处理,荧光染色观察小肠组织细胞凋亡情况㊂1.5㊀统计学分析㊀㊀采用SPSS22.0软件包进行统计学分析,计量资料以均值ʃ单次测量标准差表示,NC组与L㊁M㊁H组之间采用t检验,L㊁M㊁H组之间比较采用单因素方差分析㊂以p<0.05为差异具有统计学意义㊂图表使用Prism8.0制作㊂2㊀实验结果2.1㊀低剂量辐射对小鼠外周血象的影响㊀㊀对外周血象实验数据进行分析,结果列于表1㊂由表1可见,与对照组(NC)相比,照射组白细胞计数(WBC)均有所降低,其中H组有显著性差异(p<0.01),照射组血小板计数(PLT)均有所降低,L㊁M组显著降低(p<0.05),RBC㊁HGB㊁HCT亦有不同程度升高,但无统计学差异㊂以上结果表明,3种剂量照射后24小时均对小鼠造血系统有不同程度损伤㊂表1㊀各组小鼠照射后外周血象的变化Tab.1㊀Effects of low dose radiation on peripheral blood cells of mice2.2㊀低剂量辐射对小鼠体重的影响㊀㊀图1为各组小鼠照射期间体重的变化㊂由图1可见,小鼠照射期间体重变化与对照组相比,照射组体重有所降低,其中M组体重降低最多,但无㊃613㊃胡昌坤等:低剂量辐射对小鼠肠道损伤的影响㊀统计学意义㊂图1㊀各组小鼠照射期间体重的变化Fig.1㊀Changes in body weight afterirradiation in each group2.3㊀低剂量辐射对小鼠脏器指数的影响㊀㊀图2为照后24小时各组小鼠脏器指数的变化㊂由图2可见,与对照组(NC)相比,照射组脾脏指数(SI)均显著性降低(L 组p <0.05,M㊁H 组p <0.01),胸腺指数(TI)均有所降低但没有显著性差异㊂∗与对照组(NC)相比p <0.05;∗∗与对照组(NC)相比p <0.01;n =6㊂图2㊀各组小鼠照射后脏器指数的变化Fig.2㊀Changes of viscera index afterirradiation in each group2.4㊀低剂量辐射对小鼠小肠组织SOD 活性㊁MDA 含量的影响㊀㊀照射结束后24小时测定空肠组织中MDA 含量㊁SOD 活性,结果列于表2㊂由表2可见,与对照组(NC)相比,照射组小肠组织MDA 含量明显上升(L 组p <0.05,M㊁H 组p <0.01),SOD 活性有不同程度降低,但无统计学意义㊂2.5㊀低剂量辐射对小鼠小肠组织细胞因子的影响㊀㊀照射结束后24小时测定小鼠空肠组织细胞因子,结果示于图3㊂由图3可见,与对照组相比,各照射组中TNF -α㊁IL -2㊁IL -1β和IL -6作为代表性的促炎因子与照射剂量呈剂量依赖性升高,其中M㊁H 组中IL -1β㊁IL -6㊁TNF -α升高具有统计学意义(IL -1β:M㊁H 组p <0.05,IL -2:M 组p <0.05㊁H 组p <0.01,TNF -α:M㊁H 组p <0.05)㊂表2㊀照射后各组小鼠小肠组织中MDA 含量㊁SOD 活性Tab.2㊀MDA content and SOD activity in smallintestine of irradiated mice0.01;n =6㊂∗与对照组(NC)相比p <0.05;∗∗与对照组(NC)相比p <0.01;n =6㊂图3㊀照射后各组小鼠小肠组织中细胞因子的变化Fig.3㊀The expression of Cytokines in intestinaltissues of mice in each group2.6㊀低剂量辐射对小鼠小肠组织DNA 损伤程度㊀㊀在照射结束后2小时对小鼠十二指肠进行γ-H2AX 荧光染色,观察DNA 损伤程度,结果示于图4㊂由图4可见,与对照组相比,照射组中小肠组织有明显的DNA 损伤,其中M 和H 组中损伤现象最为严重,主要集中于小肠隐窝部位,L 组有相对较轻的损伤改变㊂2.7㊀低剂量辐射对小鼠小肠组织细胞凋亡的影响㊀㊀在照射结束后24小时对小鼠十二指肠进行TUNEL 荧光染色,观察细胞凋亡程度,结果示于图5㊂由图5可见,与对照组(NC)相比,照射组中小肠组织有明显细胞凋亡,其中M 组和H 组最为㊃713㊃㊀辐射防护第41卷㊀第4期图4㊀照射后各组小肠组织DNA 损伤变化(DAPI :细胞染色,Merge :双色整合)Fig.4㊀Changes of DNA damage in small intestine of mice afterirradiation图5㊀照射后各组小鼠小肠组织细胞凋亡程度(DAPI :细胞染色,Merge :双色整合)Fig.5㊀The degree of cell apoptosis in small intestine tissue of mice after irradiation严重㊂3㊀讨论㊀㊀目前所认知的HDR 损伤具有全身效应,对于机体全身各个器官都有不同损伤㊂然而LDR 相对于HDR 有自己独特的作用机制[11],近年来低剂量辐射诱导的生物效应(细胞间介质㊁炎症和免疫反应㊁癌症和非癌症诱导)都与免疫系统密切相关[12-14]㊂Flockerzi 等人[15]对具有不同修复能力的小鼠品系的研究表明,分次低剂量辐射(每天100mGy)会增加DNA 损伤,累积剂量会影响肺实质中的复制和凋亡,从而影响肺功能㊂Cheda 等人[16-18]已经证明LDR 可以通过改变免疫细胞群和细胞因子释放以及增强先天性和适应性免疫细胞的相互作用来增强免疫反应㊂Tada [19]也提出长期LDR 可对中枢神经系统的整体㊁组织㊁细胞及基因水平产生影响,导致多种神经性疾病的发生㊂肠道作为人体最大的免疫器官,放射性肠损伤作为经典放射性损伤特征之一是辐射损伤热点研究领域[20]㊂然而对于LDR 肠道损伤国内外研究较少,所以我们此次研究LDR 对于小鼠肠道损伤的影响对LDR 肠道损伤相关研究提供了科学依据㊂本文主要从肠道辐射免疫损伤调控机理中三个方面:DNA 损伤㊁细胞凋亡㊁细胞因子以及其他一些经典指标(脏器指数,外周血象等)探讨低剂量辐射对小鼠肠道损伤的影响,前期大量的研究已经证明辐射会导致DNA 损伤,可以通过生物学指标改变的方法来测定[21]㊂γ-H2AX 作为DNA损伤指标测定的金标准[22],我们用γ-H2AX 免疫荧光来评价不同剂量下肠道早期DNA 损伤程度的变化㊂结果发现相对于对照组(NC),M㊁H 组小肠组织DNA 损伤最为明显㊂细胞凋亡是机体免疫损伤的标志之一,关于凋亡的机理已有诸多研究[23-24],通过测定小肠组织细胞凋亡程度来反映肠道免疫系统损伤,结果发现相对于对照组(NC),M㊁H 组小肠组织细胞凋亡最为明显㊂细胞因子㊃813㊃胡昌坤等:低剂量辐射对小鼠肠道损伤的影响㊀(cytokine)是由免疫细胞及相关细胞产生的一类调节细胞功能的高活性㊁多功能的多肽分子[25-26],在机体免疫应答㊁炎症反应等起着重要作用,越来越多的实验研究表明,低剂量全身外照射可以诱导细胞因子的产生,影响机体免疫功能[27],通过测定小肠组织中炎症细胞因子的变化来观察肠道损伤程度㊂结果表明,相比于对照组(NC),M㊁H组细胞因子有明显上升趋势并有相应统计学意义㊂综上所述,本文通过比较小鼠照射前后体重㊁脏器指数㊁MDA含量㊁SOD活性㊁DNA损伤㊁细胞因子㊁细胞凋亡等指标的变化,最终确定低剂量辐射小鼠肠道损伤模型的最佳照射方案为每天照射0.12Gy连续照射5天累积0.6Gy㊂本实验为低剂量辐射肠道损伤评价提供了新的科学依据与方法,后续研究用此照射剂量和方法进一步进行低剂量辐射药物干预实验㊂参考文献:[1]㊀Azzam E I.What does radiation biology tell us about potential health effects at low dose and low dose rates?[J].J RadiolProt,2019,39(4):S28-S39.[2]㊀Preston R J,Rühm W,Azzam E I,et al.Adverse outcome pathways,key events,and radiation risk assessment[J].IntJ Radiat Biol,2021,97(6):804-814.[3]㊀Fouad Y A,Aanei C.Revisiting the hallmarks of cancer[J].Am J Cancer Res,2017,7(5):1016-1036.[4]㊀Hatzi V I,Laskaratou D A,Mavragani I V,et al.Non-targeted radiation effects in vivo:A critical glance of the future inradiobiology[J].Cancer Lett,2015,356:34-42.[5]㊀Kreuzer M,Auvinen A,Cardis E,et 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[24]㊀Kundr t P,Friedland W.Impact of intercellular induction of apoptosis on low-dose radiation carcinogenesis[J].RadiatProt Dosimetry,2015,166(1-4):170-173.[25]㊀Babini G,Morini J,Baiocco G,et al.In vitroγ-ray-induced inflammatory response is dominated by culturing conditionsrather than radiation exposures[J].Sci Rep,2015,5:9343.[26]㊀Babini G,Ugolini M,Morini J,et al.Investigation of radiation-induced multilayered signalling response of theinflammatory pathway[J].Radiat Prot Dosimetry,2015,166(1-4):157-160.[27]㊀Suman S,Kumar S,Moon B H,et al.Low and high dose rate heavy ion radiation-induced intestinal and colonictumorigenesis in APC1638N/+mice[J].Life Sci Space Res(Amst),2017,13:45-50.Effects of low dose radiation on intestinal injury in miceHU Changkun1,2,ZHANG Xuemei2,3,MA Zenchun2,GAO Yue2(1.Anhui Medical University,Hefei23003;2.Institute of Radiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences,Academy of Military Sciences,Beijing100850;3.Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou510006) Abstract:Objective:To compare the changes of intestinal injury indexes in mice exposed to different low-dose radiation,so as to provide scientific basis for the establishment of intestinal injury model in mice exposed to low-dose radiation.Methods:Balb/c mice in three groups were irradiated with three different low dose rates(0.04 Gy/d,0.12Gy/d,and0.2Gy/d)for five consecutive days(cumulative exposure of0.2,0.6,and1.0Gy, respectively),and a control group(NC)was established.After the irradiation,the body weight,peripheral blood picture,organ index,malondialdehyde(MDA)content in small intestinal tissue,superoxide dismutase (SOD)activity,immune cytokine(IL-1β,IL-2,IL-6,TNF-α),DNA damage were determined,to explore the optimal dose of low dose radiation for intestinal injury in mice.Results:After five days of continuous irradiation,compared with the control group,the body weight and organ index of mice in each irradiation group were decreased to different extents(p<0.05in the spleen index L group,p<0.01in the M and H groups). MDA content in small intestinal tissue was significantly increased(p<0.05in Group L,and p<0.01in Group M and H);SOD content was decreased to different degrees.TNF-α,IL-2,IL-1βand IL-6,the typical proinflammatory factors,showed dose-dependent increases(IL-1β:M,group H p<0.05,IL-2:M group p< 0.05,group H p<0.01,TNF-α:M,group H p<0.05).Group M and H had significant DNA damage and apoptosis.Conclusion:The optimal dose and method for low dose rate radiation induced intestinal injury in mice is0.12Gy/d continuous irradiation and0.6Gy accumulation for5days.Key words:low dose radiation;model;mouse;intestinal㊃023㊃。

KGF联合G-CSF对受照小鼠放射防护作用的研究的开题报告题目：KGF联合G-CSF对受照小鼠放射防护作用的研究背景与意义：放射治疗广泛应用于恶性肿瘤的临床治疗中。

然而，放射治疗常常造成机体的副作用，包括造血系统受损、免疫系统受损、胃肠道损伤等，严重影响了患者治疗效果和生存质量。

有效的放射防护对于缓解放射副作用具有重要作用。

KGF是一种重要的上皮细胞生长因子，可促进上皮细胞增殖和修复，被广泛应用于各种上皮细胞损伤的修复治疗。

G-CSF是一种促进白细胞生成和释放的重要因子，被广泛应用于化疗药物的副作用缓解。

以往研究表明，KGF和G-CSF联合应用可促进小鼠骨髓造血功能的恢复。

目前，相关研究表明KGF和G-CSF联合应用可能对放射治疗的副作用缓解具有一定作用，但尚有待进一步验证。

因此本项研究旨在探讨KGF联合G-CSF对受照小鼠放射防护作用的影响，为放射治疗的副作用缓解提供实验依据。

研究内容与方法：材料：40只C57BL/6小鼠。

方法：1. 将小鼠随机分为四组，每组10只。

分别为：未受照组、单独注射KGF组、单独注射G-CSF组、注射KGF+G-CSF联合组。

2. 对三个注射组的小鼠注射KGF或G-CSF，剂量为40 μg/ kg，每天注射一次，持续7天。

3. 对受照组和三个注射组的小鼠进行4 Gy的X射线全身照射。

4. 观察小鼠的体重变化、存活率、造血功能、免疫功能和胃肠道功能等指标，比较各组之间的差异。

预期结果：本项研究预计结果将为解决放射治疗的副作用缓解问题提供重要实验依据。

我们预计KGF和G-CSF联合应用能够减轻受照小鼠的副作用，提高其存活率和生存质量。

结果将为KGF和G-CSF联合应用于放射治疗的副作用缓解提供新的思路和理论依据。

参考文献：1. Lu L, Xue L. Keratinocyte growth factor-2 accelerates haematopoietic recovery in mice after chemotherapy/radiotherapy-induced bone marrow injury through enhanced marrow niche function. Hematol Oncol, 2017, 35(4): 497-503.2. Liu L, et al. Long-term regulation of preserved intestine atrophy by keratinocyte growth factor. Biomed Res Int, 2021, 6646633.3. Gruber M, et al. Granulocyte colony-stimulating factor enhances the immune response to vaccination with a Streptococcus pneumoniae polysaccharide vaccine in aged mice. Mech Ageing Dev, 2019, 178: 58-65.。

《荔枝草提取物对UVB辐射皮肤光损伤的保护作用及机制实验研究》一、引言随着现代社会生活节奏的加快，紫外线辐射已经成为导致皮肤光损伤的主要因素之一。

皮肤长期暴露于紫外辐射（UVB）中，易导致皮肤细胞受损，出现晒伤、皮肤老化、色斑等问题。

因此，寻找有效的紫外线防护手段是保护皮肤健康的重要任务。

近年来，众多研究将焦点投向了天然植物提取物的抗氧化性能。

本文通过实验研究，探讨荔枝草提取物对UVB辐射皮肤光损伤的保护作用及机制。

二、材料与方法1. 材料荔枝草提取物：采用市售优质荔枝草提取物。

实验动物：选用健康成年小鼠作为实验对象。

UVB光源：选用适合模拟太阳光中UVB辐射的紫外光源。

2. 方法（1）分组与处理：将小鼠随机分为对照组、UVB照射组和荔枝草提取物处理组。

UVB照射组和荔枝草提取物处理组再分为不同时间点（如照射后2小时、24小时等）的亚组。

（2）UVB照射：对UVB照射组和荔枝草提取物处理组的小鼠进行UVB辐射。

（3）荔枝草提取物处理：在UVB照射前、照射后，以及在无UVB照射情况下给予荔枝草提取物涂抹处理。

（4）样品采集：不同时间点收集小鼠皮肤组织样本。

（5）检测指标：通过观察和检测皮肤组织中的细胞形态、氧化应激指标、炎症因子等，评估皮肤光损伤程度及荔枝草提取物的保护作用。

三、实验结果1. 荔枝草提取物对UVB辐射皮肤细胞的保护作用实验结果显示，经过荔枝草提取物处理的皮肤组织在UVB 照射后，细胞形态损伤程度明显低于未处理组，说明荔枝草提取物能够有效地保护皮肤细胞免受UVB辐射的损害。

2. 荔枝草提取物对氧化应激的抑制作用实验检测结果显示，UVB照射后，皮肤组织中的氧化应激指标（如MDA含量、ROS水平等）明显升高，而经过荔枝草提取物处理的皮肤组织，其氧化应激指标升高程度较低，说明荔枝草提取物能够抑制氧化应激反应。

3. 荔枝草提取物的抗炎作用实验发现，UVB照射后，皮肤组织中的炎症因子（如IL-1、TNF-α等）水平明显升高，而经过荔枝草提取物处理的小鼠，其炎症因子水平较低，说明荔枝草提取物具有抗炎作用。

辐射诱导的DNA双链断裂及修复机制研究DNA是生命的基础，是我们身体内存储和传递遗传信息的核心分子。

然而，有一些因素会造成DNA的损伤，例如紫外线、化学物质等，而另一种比较特殊的因素就是辐射。

辐射是指一类高能量粒子或波，包括X射线、gamma射线和饱和脉冲电磁辐射等，它们对人体的影响可以从表层的皮肤一直到基因水平。

在生物体内，DNA双链断裂是辐射最常见的损伤形式之一。

与单链断裂相比，双链断裂更加严重，因为双链断裂无法保持两条链的基因序列同构性，这会在一定程度上影响到细胞的生存和繁殖。

因此，了解DNA双链断裂的形成和修复机制具有重要的意义。

在DNA双链断裂的形成中，辐射能量会导致DNA双链断裂或者DNA叉突，最终导致DNA断裂。

大多数的DNA双链断裂事件由端接酶介导的非同源端糖基转移所引起。

换言之，端接酶是在DNA双链之间形成化学结合位点，随后发生两条不同的DNA双链，在末端上切割和修复。

然而，在某些情况下，这种修复机制可能会失败，从而导致DNA互连和染色体重排列的发生。

此外，许多维修机制可以减少DNA双链断裂事件的出现，包括自然修复系统和非自然修复系统。

自然修复系统是由蛋白质和酶组成的系统，它们能够在细胞内寻找DNA损伤并进行修复以防止肿瘤等问题的发生。

然后，非自然修复系统是由一些基因和调节因子组成的，它们可以在DNA双链断裂事件发生后进行更加彻底的修复，特别是可以避免错误的染色体重排列。

研究表明，辐射所引起的DNA双链断裂不仅会导致DNA的损伤，还会激活一些自然修复系统。

例如，p53是一种在细胞DNA损伤时激活的蛋白质，它能够调节DNA修复机制并让细胞有足够的时间来修复DNA损伤。

除此之外，还有许多其他的蛋白质和酶可以修复DNA双链断裂事件。

总结来说，辐射所引起的DNA双链断裂事件是一种常见的DNA损伤形式。

然而，在生命演化过程中，生物体还发展出了许多有效的DNA修复机制，包括自然修复和非自然修复。

第41卷第5期(总第245期)辐射防护通讯2021年10月•专题报告•低聚壳聚糖对小鼠的辐射损伤防护作用探讨郭剑平1,张华屏2,周朝东1,杨仲田3(1.中国辐射防护研究院GLP中心,太原,030006;2.山西医科大学,太原,030001;3.中国辐射防护研究院,太原,030006)摘㊀要㊀探讨低聚壳聚糖对受γ射线照射小鼠辐射损伤防护作用㊂采用γ射线照射小鼠,检测骨髓有核细胞数㊁淋巴细胞凋亡数㊁脾脏脏器系数㊁细胞凋亡相关基因和P53蛋白㊁GADD45蛋白变化㊂流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR技术检测凋亡基因,Western blot方法检测蛋白表达㊂结果表明,与单纯照射组相比,低聚壳聚糖能提高受照小鼠的存活率;提高骨髓有核细胞数,降低骨髓淋巴细胞凋亡细胞数量;下调脾脏凋亡相关基因Bax㊁caspas-3,上调Bc1-2,Bcl-2/Bax比值升高;抑制P53蛋白㊁GADD45蛋白表达㊂结果提示,低聚壳聚糖可能通过抑制P53蛋白㊁GADD45蛋白表达,影响凋亡相关基因表达,抑制凋亡细胞的产生,促进造血功能恢复,从而起到保护受照损伤小鼠作用㊂关键词:㊀低聚壳聚糖;辐射防护;小鼠中图分类号:R818文献标识码:A文章编号:1004-6356(2021)05-0031-05㊀㊀壳聚糖是自然界广泛存在的甲壳素经脱乙酰化得到的产物,是天然多糖中唯一的碱性多糖㊂小于20个单糖的壳聚糖称为低聚壳聚糖㊂有研究表明低聚壳聚糖具有抗辐射损伤作用[1-2],并且毒性极低㊂本文从组织㊁细胞㊁蛋白和基因表达水平探讨低聚壳聚糖的辐射损伤防护效果及机理,为筛选高效㊁低毒的辐射防护药物提供参考依据㊂1㊀实验材料1.1㊀低聚壳聚糖以食品级大分子壳聚糖为原料,敏化剂协同作用,经辐照降解氧化后制备而成㊂分子量<2kD,分散系数1.21㊂使用前用蒸馏水配制成溶液㊂1.2㊀实验动物6周雄性清洁级SX1近交系小鼠,山西省肿瘤研究所动物实验室提供,许可证号:SCXK(晋) 2007-001㊂1.3㊀辐照源60Coγ源,活度1.2ˑ1015Bq,中国辐射防护研究院钴源房㊂1.4㊀主要仪器和试剂1.4.1㊀仪器BD FACSAria型流式细胞仪,贝克曼公司;转印槽/伯乐转膜仪,BIO-RAD,Trana-Blot;化学发光检测系统试剂,BIO-RAD;化学发光荧光成像系统,Chemi Doc XRS㊂1.4.2㊀试剂凋亡试剂盒(Annexin V-FITC),凯基公司,国产;beta-actin抗体,sc-47778,Santa Cruz Biotechnol-ogy;P53抗体:sc-73566,Santa Cruz Biotechnology㊂2㊀实验内容和方法2.1㊀小鼠30天存活率实验小鼠按给药浓度随机分5组,每组10只,口服灌胃,给药剂量为0(单纯照射组)㊁200㊁13㊀收稿日期:2021-08-06作者简介:郭剑平(1970 ),女,1991毕业于山西大学生物系生物专业,学士;2001年毕业于中国辐射防护研究院劳动卫生与环境卫生专业,硕士㊂研究员㊂300㊁400和500mg/kg,每天给药1次,连续14天,给药第7天对小鼠进行全身照射,吸收剂量7Gy,剂量率70cGy/min㊂观察不同处理组30天小鼠存活情况,统计30天存活率㊁平均存活天数,计算保护指数[3]㊂保护指数ȡ1.2为有保护作用㊂2.2㊀骨髓有核细胞数实验小鼠随机分为正常对照组㊁单纯照射组㊁低聚壳聚糖组(300mg/kg),每组10只㊂连续灌服低聚壳聚糖21天,每天1次㊂正常对照组和单纯照射组灌服蒸馏水㊂给药第7天后两组小鼠均接受3.5Gy60Coγ射线全身照射,剂量率0.5Gy/min㊂照射后第14天取小鼠股骨,用1mL白细胞稀释液冲出骨髓液,并调整细胞浓度,用细胞计数板在显微镜下计数骨髓有核细胞数㊂2.3㊀骨髓细胞凋亡实验小鼠随机分为正常对照组㊁单纯照射组㊁低聚壳聚糖组(300mg/kg),每组6只㊂给药第14天后两组小鼠接受5Gy60Coγ射线全身照射,剂量率0.5Gy/min㊂照射后6㊁12㊁24和48h取出两大腿股骨,用PBS液冲出骨髓细胞,混匀㊂处理并调整细胞浓度为105/mL,按试剂盒说明方法染色,用流式细胞仪检测凋亡细胞率[4]㊂2.4㊀脾脏器系数实验小鼠随机分为正常对照组㊁单纯照射组㊁低聚壳聚糖组(300mg/kg)3个实验组,每组40只㊂连续灌服低聚壳聚糖14天,每天1次㊂正常对照组和单纯照射组灌服蒸馏水㊂给药第14天后两组小鼠均接受7Gy60Coγ射线全身照射,剂量率0.33Gy/min㊂在照后第5㊁10㊁15㊁20㊁30天,各组分别取5只存活小鼠脾脏,称取并记录脾脏重量㊂2.5㊀细胞凋亡相关基因表达变化实验小鼠随机分为正常对照组㊁单纯照射组㊁低聚壳聚糖组(300mg/kg)3个实验组,每组10只㊂给药第14天后两组小鼠接受5Gy60Coγ射线全身照射,剂量率0.5Gy/min㊂照射后6h,摘取动物脾脏,每个脾组织分别进行RT-PCR方法检测Bax㊁Bcl-2㊁Caspase-3,以GAPDH为参照,Photoshop7.0分析条带㊂各基因RT-PCR试验条件见表1㊂表1㊀各基因RT-PCR试验条件一览表基因上下游基因扩增条件Gapdh Up:tgaacgggaagctcactggDown:tccaccaccctgttgctgga94ħ20ᵡ58ħ20ᵡ72ħ20ᵡbax up:tgcagaggatgattgctgacdown:gatcagctcgggcactttag94ħ20ᵡ56ħ20ᵡ72ħ20ᵡBcl-2Up:aggagcaggtgcctacaagaDown:gcattttcccaccactgtct94ħ20ᵡ56ħ20ᵡ72ħ20ᵡCaspase3Up:gggcctgttgaactgaaaaaDown:ccgtcctttgaatttctcca94ħ20ᵡ54ħ20ᵡ72ħ20ᵡ2.6㊀细胞P53蛋白质㊁Gadd45蛋白质实验小鼠随机分为正常对照组㊁单纯照射组㊁低聚壳聚糖组(300mg/kg),每组10只㊂给药第14天后两组小鼠接受5Gy60Coγ射线全身照射,剂量率0.5Gy/min㊂照射后6h,摘取动物脾脏,用West-ern blot方法检测P53蛋白质和Gadd45蛋白质㊂2.7㊀统计分析用卡方检验对30天存活率进行检验,用t检验对两样本均数差别的显著性进行检验㊂3㊀结果和讨论3.1㊀结果3.1.1㊀30天存活率不同浓度低聚壳聚糖对受照小鼠30天存活率㊁平均存活时间和保护指数的影响检测结果列于表2㊂表2㊀不同浓度低聚壳聚糖对受照小鼠30天存活率㊁存活天数㊁保护指数的影响药物浓度(mk/kg)动物数量30天存活率(%)存活天数(天)保护指数单纯照射组101011.5 2001030∗20.3∗ 1.74 3001040∗20.7∗ 1.83 4001030∗19.1∗ 1.68 5001020∗16.7∗ 1.45㊀∗与单纯照射组比较,p<0.01㊂㊀㊀由表2可见,与单纯照射组相比,各低聚壳聚糖组(200~500mg/kg)的小鼠30天存活率分别 23辐射防护通讯㊀2021年10月第41卷第5期提高20%㊁30%㊁20%和10%,平均存活时间差异显著,其中300mg/kg组在各组中的30天存活率㊁平均存活天数和保护指数最高(保护指数ȡ1.2为有效)㊂故后期试验采用的药物浓度均为300mg/kg(称为 低聚壳聚糖组 )㊂3.1.2㊀有核细胞数和骨髓细胞凋亡低聚壳聚糖对受照小鼠骨髓有核细胞数和骨髓细胞凋亡的影响结果列于表3和表4㊂由表3可见,低聚壳聚糖组骨髓有核细胞数显著高于单纯照射组㊂由表4可见,低聚壳聚糖组的凋亡细胞下降, 6~12h变化较大,与单纯照射组相比差异显著㊂表3㊀低聚壳聚糖对受照小鼠骨髓有核细胞数的影响组别动物数量骨髓有核细胞数(106/L)正常对照组1019.43ʃ2.60单纯照射组10 4.43ʃ1.60低聚壳聚糖组1010.33ʃ2.18∗㊀∗与单纯照射组比较,p<0.01㊂表4㊀低聚壳聚糖对受照小鼠骨髓细胞凋亡的影响照射后时间(h)正常对照组单纯照射组低聚壳聚糖组616.81ʃ5.70∗32.85ʃ10.7620.36ʃ2.53∗1216.81ʃ5.70∗30.05ʃ2.2323.38ʃ8.71∗2416.81ʃ5.7014.49ʃ2.1014.22ʃ1.074816.81ʃ5.7014.73ʃ1.5014.08ʃ3.51㊀∗与单纯照射组比较,p<0.01㊂3.1.3㊀脾脏器系数低聚壳聚糖对受照小鼠不同时间脾脏脏器系数的影响结果列于表5㊂由表5可见,低聚壳聚糖组照射后第5~20天,脾脏器系数值有缓慢上升趋势,与单纯照射组相比差异显著㊂表5㊀低聚壳聚糖对受照小鼠不同时间脾脏脏器系数的影响照射后时间(天)正常对照组单纯照射组低聚壳聚糖组50.599ʃ0.027∗0.098ʃ0.0110.343ʃ0.282∗100.599ʃ0.027∗∗0.099ʃ0.0160.344ʃ0.282∗150.599ʃ0.027∗∗0.114ʃ0.0160.357ʃ0.270∗200.599ʃ0.027∗∗0.114ʃ0.0160.368ʃ0.263∗∗300.599ʃ0.027∗0.330ʃ0.0680.591ʃ0.475∗㊀∗与单纯照射组比较,p<0.05;∗∗与单纯照射组相比,p<0.01㊂3.1.4㊀脾脏凋亡基因低聚壳聚糖对受照小鼠6h脾脏凋亡基因的影响变化情况列于表6㊂由表6可见,与正常对照组相比,低聚壳聚糖组凋亡相关基因Caspas-3下调,Bax上调,Bcl-2上调,Bcl-2/Bax比值提高,比值高于1;与单纯照射组相比差异显著㊂表6㊀低聚壳聚糖对受照小鼠6h脾脏凋亡基因变化情况基因正常对照组单纯照射组低聚壳聚糖组Bax0.45ʃ0.140.68ʃ0.020.59ʃ0.05 Bcl-2㊁Ca0.85ʃ0.070.48ʃ0.160.86ʃ0.06∗Caspas-30.31ʃ0.190.97ʃ0.120.27ʃ0.06∗Bcl-2/Bax 2.09ʃ0.920.71ʃ0.23 1.46ʃ0.12∗㊀∗与单纯照射组比较,p<0.05㊂3.1.5㊀P53蛋白质㊁Gadd45蛋白质表达㊀图1为Western blot方法检测P53㊁Gadd45蛋白结果㊂低聚壳聚糖对受照小鼠脾脏P53蛋白质表达水平的影响见图2(a),对Gadd45蛋白质表达水平的影响见图2(b)㊂由图2可见,与单纯照射组相比,低聚壳聚糖组的蛋白质表达水平降低㊂图1㊀Western blot方法检测P53、Gadd45蛋白结果3.2㊀讨论电离辐射能够引起机体组织器官的严重损伤,而机体的各个组织器官对辐射的敏感性是有差异性的,其中骨髓是机体重要的中枢免疫及造血器官,脾脏是机体重要免疫器官,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,同时脾脏也是机体血液储存的重要器官㊂小鼠受到照射后,骨髓有核细胞数降低,但低聚壳聚糖组有核细胞数显著提高㊂5Gy照射后骨髓细胞凋亡发生在6~12h,24h后下降,与文献报道一致[5]㊂与单纯照射组相比,低聚壳聚糖组6~12h凋亡细胞发生数明显下降,表明低聚壳聚糖能够抑制辐射引起的细胞凋亡,减少由于照射造成的骨髓细胞损失,有效保护骨髓细胞的 33低聚壳聚糖对小鼠的辐射损伤防护作用探讨㊀郭剑平图2㊀低聚壳聚糖对受照动物脾脏P53、Gadd45蛋白表达的影响造血功能,具有一定的辐射防护作用㊂低聚壳聚糖组小鼠脾脏器系数在照后20天内变化不大,到30天时,接近正常对照组㊂低聚壳聚糖在动物照射损伤后,调节脾脏相关凋亡基因表达,最后表现出降低脾脏脏器系数的减少,对受损动物免疫功能的恢复起到积极的作用㊂细胞凋亡是影响细胞辐射敏感性的重要事件,减少细胞凋亡,保持细胞存活是辐射损伤防治的重要措施之一㊂P53在损伤细胞存活中起重要作用并因此被誉为 基因警察 ㊂本实验单纯照射组P53蛋白质增加,而低聚壳聚糖组P53蛋白质表达水平降低,说明低聚壳聚糖对辐射所致的P53蛋白质表达水平有抑制作用㊂P53诱导细胞凋亡的机制是通过Bax/Bcl-2这一比值的转换而完成㊂Bcl-2和Bax是一对关系密切的凋亡基因,在细胞凋亡调控中起重要作用㊂Bcl-2抑制细胞的凋亡,Bax则促进细胞的凋亡㊂Bcl-2/Bax比例对决定细胞命运起着关键的作用㊂当Bcl-2/Bax比值>1时,细胞凋亡无明显增加;而Bcl-2/Bax比值<1时,细胞凋亡增加明显㊂本实验中低聚壳聚糖组促凋亡基因Bax㊁Caspas-3表达均下调,抑制凋亡基因Bcl-2表达上调,Bcl-2/Bax比值>1,与单纯照射组相比有差异显著㊂表明低聚壳聚糖有抑制辐射损伤小鼠脾组织细胞凋亡的作用㊂研究表明,DNA损伤使P53蛋白活力上升,P53通过对Bcl-2和Bax表达的调节,降低细胞对凋亡刺激因素的耐力[6]㊂可见, P53能同时在mRNA水平激活Bax基因的表达和抑制bcl-2基因的表达㊂P53诱导凋亡可能部分通过改变细胞内Bax㊁Bcl-2的比例得以实现㊂本实验中单纯照射组结果与以上结论相同㊂低聚壳聚糖抑制P53蛋白表达,通过诱导凋亡,在mRNA 水平激活Bcl-2基因的表达和抑制Bax基因的表达,改变细胞内Bcl-2㊁Bax的比例,提高细胞对凋亡刺激因素的耐力,导致凋亡细胞的减少,抑制了DNA损伤对细胞的凋亡作用㊂Gadd45是一个生长阻滞和DNA损伤基因,是P53下游靶基因㊂Gadd45可以通过P53依赖及非依赖两条途径被诱导表达增高,参与细胞周期检查点㊁细胞凋亡㊁DNA损伤修复以及信号传导等重要细胞生命活动的调节[7-8]㊂在电离辐射的作用下,Gadd45可以通过P53依赖的方式表达上调㊂研究表明,高剂量X射线照射可引起P53蛋白增多诱导Gadd45增加[9],本实验单纯照射组Gadd45㊁P53蛋白质表达水平升高,与研究结果一致㊂但低聚壳聚糖组Gadd45㊁P53蛋白质表达水平均有降低趋势㊂低聚壳聚糖间接参与DNA损伤修复㊁细胞凋亡㊁细胞周期等重要细胞生命活动的积极调控,减少由于照射引起的造血细胞和免疫细胞数量损失,并维持其功能的实现,导致动物存活率的提高㊂低聚壳聚糖提高存活率的影响因素很多,其中抑制细胞凋亡是有效因素之一㊂本研究结果证实低聚壳聚糖具有辐射损伤保护作用,它可能通过抑制P53蛋白㊁GADD45蛋白质水平表达,影响凋亡相关基因表达,从而抑制凋亡细胞的产生,促进骨髓和脾脏细胞数量的恢复,从而有效提高了受到致死剂量γ射线照射小鼠的30天存活率㊂4㊀结语核能属于清洁能源,随着人类对核能利用的日趋广泛,对辐射损伤机制和防护药物的研究逐渐成为人们关注的热点,开发高效㊁低毒的理想抗辐射损伤药物就变得尤为重要㊂氨磷汀(WR2721)作为唯一被美国食品药品监督管理局 43辐射防护通讯㊀2021年10月第41卷第5期(FDA)批准的辐射防护剂,可通过清除自由基㊁诱导细胞缺氧㊁保护DNA及促进DNA损伤修复等机制发挥辐射防护特性,但毒副作用较大,且临床效果不尽人意㊂大多数传统的辐射防护剂不良反应较大㊁防护时间窗较窄及给药途径受限等,临床仍缺乏理想的抗辐射药物㊂低聚壳聚糖来源广泛,制备技术成熟,不仅具有良好的生物降解性,还有良好的生物相容性以及生物粘附性,其降解产物无毒性,无免疫原性,可以考虑作为辐射防护剂并进行更深入的开发研究㊂初步证明低聚壳聚糖具有一定的辐射损伤保护作用,药物的防护作用机理研究将在今后的工作中进一步探讨㊂参考文献:[1]Gulik E S,Kostesha N I.Radio protective efficacy ofchitosan,dissolved naqueous extract of Abies Sibirica[J].RadiatsB-iol Radioeco,l2004,44(5):563-565.[2]Il in L A,Andrianova I E,Glushkov V A,et al.Medi-cal-prophylactic properties of the low-molecular-weightchitosanaten vironmental radiation injury[J].RadiatsBiol Radioeco,2004,44(5):547-549.[3]王月英,周则卫,沈秀,等.E838对IRM_2和ICR小鼠的辐射防护作用[J].中国比较医学杂志,2004, 14(6):332-335.[4]杨明晶,俞萍,石根勇,等.低剂量辐射小鼠骨髓细胞凋亡率的变化[J].江苏预防医学,2007,18(1):1-4.[5]马淑梅,刘晓冬,鞠桂芝.不同剂量X射线全身照射对小鼠骨髓细胞周期进程的影响[J].辐射防护, 2002,22(4):236-239.[6]邹仲敏.P53蛋白调节射线所致细胞凋亡[J].国外医学放射医学核医学分册,1996,20(2):88-91.[7]Kastan M B,Zhan Q,EL-Deity W S,et al.A mammali-an cell cycle checkpoint pathmay utilizing P53and de-fective in ataxia-telangiectasia[J].Cell,1992,71(4): 587-597.[8]Gujuluva C N,Back J H,Shin K H,et al.Effect of UV irradiation on cell cycle,viability and the expression of P53and Gadd45gene in normal and HPV-immortlized human oral keratinocytes[J].Oncogene,1994,9(7): 1819-1827.[9]牟颖,刘树铮,刘建香.X射线全身照射对小鼠胸腺细胞Gadd45及Rb蛋白表达的影响[J].中华放射医学与防护杂志,1998,18(6):408-409.Discussion on the Protective Effect of Oligochitosan onRadiation Damage in MiceGuo Jianping1,Zhang Huaping2,Zhou Chaodong1,Yang Zhongtian3(1.GLP Center,China Institute for Radiation Protection,Taiyuan,Shanxi030006;2.Shanxi Medical University,Taiyuan,Shanxi030001;3.China Institute for Radiation Protection,Taiyuan,Shanxi030006) Abstract㊀The protective effect of oligochitosan on radiation damage in mice exposed to gamma rays was explored by means of flow cytometry,RT-PCR,Western blotting.The changes in bone marrow nucleated cells,lymphocyte apoptosis,spleen organ coefficient,cell apoptosis-related genes,P53protein and GADD45protein were tested.As compared with the control group,γ-ray exposed mice with a gavage of oligochitosan showed an improved survival rate,increase numbers of bone marrow nucleated cells,re-duced numbers of apoptotic cells in bone marrow lymphocytes.For the test group,oligochitosan was ob-served to be able to down-regulate Bax,caspas-3and up-regulate Bc1-2for apoptosis-related genes, which give rise to anincreased Bcl-2/Bax ratio,and inhibite expression of P53protein and GADD45pro-tein also.It suggests that oligochitosan may inhibit the expression of P53protein and GADD45protein, affect the expression of apoptosis-related genes,inhibit the production of apoptotic cells,and promote haematopoietic function recovery,and thus protect mice from radiation damage.Key words:㊀Oligochitosan;Radiation protection;Mice(责任编辑:吴启庆)53低聚壳聚糖对小鼠的辐射损伤防护作用探讨㊀郭剑平。

辐射对小鼠免疫系统损伤远期影响研究
李德冠;王月英;路璐;吴红英;张俊伶;王小春;张恒;常建辉;孟爱民
【期刊名称】《中国药理通讯》
【年(卷),期】2011(028)002
【摘要】目的：免疫系统对辐射极为敏感，受照后会形成损伤，且恢复也很缓慢。

本研究探讨4Gy Csy射线一次性全身照射小鼠免疫细胞对LPS刺激反应性的远期影响。

【总页数】1页(P84-84)
【作者】李德冠;王月英;路璐;吴红英;张俊伶;王小春;张恒;常建辉;孟爱民
【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所,天津300192
【正文语种】中文
【中图分类】R782.4
【相关文献】
1.低剂量X射线辐射对BALB/C小鼠免疫系统的影响 [J], 谢漪;党秉荣;张红;邴涛;郝冀芳;郭红云;王小虎
2.苞叶雪莲水提物对小鼠免疫系统辐射防护作用的研究 [J], 张国良;李文辉;郭娜;
侯宇;王承红;李天芊;于书慧
3.狗枣猕猴桃多酚对60Coγ射线辐射损伤小鼠免疫系统保护作用的研究 [J], 左丽丽;李昰奇;富校轶;高永欣;王振宇;王舒然
4.低剂量连续辐射引起的小鼠免疫系统的变化 [J], 谢漪;张红;党秉荣;郝冀芳;王小
虎
5.妊娠对小鼠肠黏膜免疫系统中T淋巴细胞活化的影响研究 [J], 张立波;张建苹
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小鼠子宫内膜干细胞损伤修复调控机制的研究发表时间：2018-12-13T15:06:46.090Z 来源：《医药前沿》2018年34期作者：叶国柳靳丽杰王玲玲周玉[导读] 人类子宫内膜是一种高度再生组织，一个生育年龄妇女的子宫内膜要经历超过400个周期以上的增长，分化，和脱落。

（蚌埠医学院第一附属医院妇产科安徽蚌埠 233004）【摘要】目的：本研究组通过对经典Wnt信号通路的干涉，观察其对子宫内膜损伤后修复的影响，探讨小鼠子宫内膜干细胞损伤修复调控机制的研究，为子宫内膜损伤修复障碍及其引发疾病的干细胞治疗方法提供新的研究思路。

方法：利用Wnt/β-catenin信号通路转基因报告鼠（BAT-gal小鼠）建立子宫内膜损伤模型，了解Wnt信号分布和表达的变化；western blot和QPCR等方法检测来证实Wnt信号通路激动剂Wnt-7a和阻断剂SFRP-2后Wnt信号通路的调节变化。

通过直接荧光显微镜观察和免疫组化染色后显微镜下观察,证实产后小鼠子宫内膜边缘（SP）群干/祖细胞分离纯化并进行培养后移植到损伤的宫腔内，能在宫腔内存活和迁移并且对损伤内膜组织发挥修复作用。

结果：A.通过特殊的X-gal染色确证Wnt/β-catenin信号通路存在于子宫内膜损伤修复中并起着重要作用。

证实产后小鼠子宫内膜边缘（SP）群干/祖细胞分离纯化并进行培养后移植到损伤的宫腔内，能在宫腔内存活和迁移并且对损伤内膜组织发挥修复作用。

证实Wnt/β-catenin信号通路在（SP）群干/祖细胞修复损伤子宫内膜中的调节作用。

结论：Wnt/β-catenin信号通路在（SP）群干/祖细胞修复损伤子宫内膜中的调节作用。

【关键词】子宫内膜干细胞；调控；损伤修复【中图分类号】R324 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）34-0176-021.引言人类子宫内膜是一种高度再生组织，一个生育年龄妇女的子宫内膜要经历超过400个周期以上的增长，分化，和脱落。

水飞蓟宾对0J小鼠致肝损伤的改善机制研究【摘要】本研究旨在探讨水飞蓟宾对0J小鼠致肝损伤的改善机制。

通过药理作用的分析发现，水飞蓟宾具有一定的保肝作用。

实验设计包括对照组和实验组的设立，观察水飞蓟宾对肝损伤的影响。

实验结果显示，水飞蓟宾能够显著减轻0J小鼠的肝损伤程度。

进一步的机制探讨表明，水飞蓟宾可能通过调节氧化应激和抗炎作用来改善肝损伤。

实验验证结果进一步证实了水飞蓟宾的保肝作用。

本研究得出水飞蓟宾对0J小鼠致肝损伤具有显著改善作用的结论。

这一研究意义在于为水飞蓟宾的药理作用提供了新的实验数据，同时也为治疗肝损伤提供了新的方法。

未来的研究可以进一步探讨水飞蓟宾在其他肝病模型中的作用机制。

【关键词】关键词：水飞蓟宾，0J小鼠，肝损伤，改善作用，药理作用，实验设计，实验结果，机制探讨，实验验证，研究意义，展望。

1. 引言1.1 研究背景水飞蓟宾是一种中草药，被广泛应用于治疗肝脏疾病。

由于现代生活方式和环境污染的影响，肝损伤已成为全球性问题。

0J小鼠是一种常用的实验动物模型，被广泛用于研究肝脏疾病。

目前关于水飞蓟宾对0J小鼠致肝损伤的改善机制的研究还比较有限，因此有必要对其进行深入探讨。

水飞蓟宾中含有丰富的生物活性成分，具有抗氧化、抗炎和保护肝脏功能的作用。

一些前期研究已经证实了水飞蓟宾对肝损伤的保护作用，但其具体的药理作用机制尚不清楚。

本研究旨在通过建立0J小鼠模型，探讨水飞蓟宾对致肝损伤的改善作用，并进一步探讨其可能的机制。

这将有助于揭示水飞蓟宾在肝脏疾病治疗中的作用机制，为临床应用提供科学依据。

1.2 研究目的本研究的目的是探讨水飞蓟宾对0J小鼠致肝损伤的改善机制，通过实验验证水飞蓟宾的药理作用，从而揭示其对肝损伤的保护效应。

具体而言，我们将深入研究水飞蓟宾在肝损伤模型中的作用机制，包括对肝功能指标、炎症因子表达、氧化应激水平等的影响。

通过实验设计和实验结果的详细分析，我们希望能够探讨水飞蓟宾对肝损伤的具体作用途径，为进一步研究开发肝损伤治疗新药物提供理论依据。