丙氨酸氨基转移酶试剂盒(液体)(紫外-乳酸脱氢酶法)SOP

乳酸脱氢酶（LDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0685规格：100T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体7mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入1.3mL双蒸水充分溶解备用，配好后可分装成小管-20℃保存，可保存两周，禁止反复冻融；试剂三：液体7mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存；丙酮酸钠标准液：液体1mL×1支，4℃保存，2μmol/ml。

产品简介：LDH（EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD+/NADH之间互变。

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：1.细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2.血清（浆）样品：直接检测。

3.丙酮酸钠标准液：取100μL标准液，倍比稀释至1、0.5、0.25、0.125、0μmol/mL，用2、1、0.5、0.25、0.125、0μmol/mL做标准曲线。

血清丙氨酸氨基转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。

⑴样本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸的氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙酮酸和L谷氨酸。

⑵丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸的同时还原型辅酶I（NADH+ H+）被氧化为辅酶I（NAD+），而使波长340nm处的吸光度值下降。

通过对波长340nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性。

(3)样本中内源性丙酮酸的干扰，可由试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）在测定的延迟时间内快速、完全地消除，不会对测定产生干扰。

ALTL-丙氨酸 + -酮戊二酸丙酮酸 + L-谷LDH（乳酸脱氢酶）氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸 + NAD+ + H2O3 标本3.1病人准备：12小时禁食。

3.2 类型：血清。

3.3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ALT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1 L丙氨酸 600mmol/L 乳酸脱氢酶＞1820U/L（R1）：NADH 0.26mmol/LTris缓冲液 80mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液80mmol/L α氧代戊二酸36mmol/LEDTA 5.0mmol/4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

血清丙氨酸氨基转移酶测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。

ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮LDH（乳酸脱氢酶）酸+ L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。

因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。

2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。

2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。

3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

6. 实验材料6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/LL-丙氨酸800mmol/LLDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/La-酮戊二酸18mmol/LNADH 0.18mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

7. 仪器：日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

丙氨酸氨基转移酶乳酸脱氢酶偏低下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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丙氨酸氨基转移酶67 天冬氨酸转移酶 108 乳酸脱氢酶635 面部发黄人体中有很多酶，其中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转移酶和乳酸脱氢酶是三种常见的酶。

当这些酶的水平异常升高时，可能会导致一些健康问题，比如面部发黄。

下面我将详细介绍这三种酶和面部发黄的相关信息。

首先，丙氨酸氨基转移酶（简称AST）是一种存在于细胞质和线粒体中的酶，其功能是催化丙氨酸和α-酮戊酸之间的转化反应。

AST主要存在于肝脏、心肌、肾脏和骨骼肌等组织中，当相关组织受损时，AST会释放到血液中。

因此，AST水平的异常升高常常与这些组织的病变有关。

其次，天冬氨酸转移酶（简称ALT）是一种存在于细胞质中的酶，主要存在于肝脏细胞中。

ALT在糖原代谢、脂肪代谢和蛋白质代谢中发挥重要作用。

由于ALT主要存在于肝脏中，因此当肝脏受损时，ALT会释放到血液中，导致血液中ALT水平升高。

与AST一样，ALT水平的异常升高通常与肝脏病变有关。

最后，乳酸脱氢酶（简称LDH）是一种存在于细胞质中的酶，其功能是将乳酸转化为丙酮酸。

乳酸脱氢酶存在于几乎所有组织和细胞中，包括肝脏、心肌、肌肉和肾脏等。

当这些组织受损或细胞破坏时，乳酸脱氢酶会释放到血液中，导致血液中LDH水平升高。

面部发黄可能是由于肝功能异常引起的。

肝脏在人体中起着重要的代谢和排毒作用，当肝脏受损或功能受限时，会导致黄疸的出现，即皮肤和黏膜发生黄色机制改变。

一旦肝脏出现功能异常，比如肝炎、肝硬化或药物性肝病等，就会导致一系列的代谢异常，进而影响血液中各种酶的水平。

其中AST、ALT和LDH等酶的水平的升高就是其中一个常见的表现。

当面部出现黄色，同时伴随着AST、ALT和LDH等酶的升高时，我们应该尽快去医院进行相关检查，以确定肝功能是否受损。

医生可能会建议进行肝功能检查，比如检查肝功能酶、肝脏超声等，从而确定是否存在肝脏相关的疾病。

酶水平异常升高并不意味着肝脏的病变，还有其他一些疾病或情况也可能导致酶水平的升高，比如心肌细胞破坏、肌肉损伤、急性胰腺炎等。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）试验标准操作程序Standard Operation Procedure of Alanine Aminotransferase（ALT）Test (Siemens Adiva 2400)1．目的 32．范围 33.术语 34.测定原理 34.1原理 34.2公式 35.试剂组成 35.1试剂盒： 35.1.1试剂成分以及浓度 35.1.2有效期 46.试剂校准及量值溯源 4 6.1校准步骤 46.2量值溯源体系图 47.参数设定 48.干扰性 59.方法学特性 59.1精密度 59.2 可分析范围： 69.3相关回归统计 610工作程序 610.1样本准备 610.2标本的拒收 610.4质量控制 610.5标本测定 710.6临床意义 711.生物参考区间 812安全性和注意事项 813.主要参考文献 81．目的1.1主要用于定量测定血清或血浆中ALT的活性1.2本程序用于操作的规范化2．范围2.1住院病人，门诊病人，体检人群3.术语3.1．丙氨酸氨基转移酶测定是基于Wroblewski and LaDue的工作工程序，后经H.U. Bergmeyer改良的IFCC推荐的方法进行.4.测定原理4.1原理丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化L-丙氨酸转氨基到a-酮戊二酸（a-KG），形成L-谷氨酸盐和丙酮酸盐在乳酸脱氢酶的作用下还原为乳酸盐，同时将NADH氧化为NAD+。

光吸收的改变与ALT的活性成正比，采用双波长（340/410nm）速率法测定。

4.2公式L-丙氨酸 +a-酮戊二酸丙酮酸盐 + L-谷氨酸盐丙酮酸盐+ NADH 乳酸盐 + NAD5.试剂组成5.1试剂盒：Siemens Advia 2400配套试剂5.1.1试剂成分以及浓度试剂成分浓度试剂1 L-丙氨酸610 mmol/L LDH（猪心脏）≥ 1.2 KU/L 叠氮化纳0.09%试剂2 a-酮戊二酸93 mmol/L警告：该试剂含有动物来源的成份，防止病原携带及污染注意：高浓度叠氮化纳易在铜或铅制管道内形成易爆品，在排放前大量用水进行稀释，按相关医疗废物排放标准进行排放，5.1.2有效期在2-8℃下保存，未开封的试剂盒上有效期内均有效。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）
一、检测原理
L-丙氨酸与a-酮戊二酸在ALT作用下生成丙酮酸，丙酮酸加还原型辅酶I（NADH），在乳酸脱氢酶（LDH）作用下转化成L-乳酸和氧化型辅酶I（NAD+）。

利用NADH在340nm波长有特征性吸收峰，可连续监测NADH吸光度下降的速度，而求出血清中ALT活性。

二、参考区间
血清：女性7—40U/L；男性9—50U/L
三、临床意义
1、丙氨酸氨基转移酶是一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶(相当于工业生产中的催化剂)，起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用，它广泛存在于人体各种组织.器官.肌肉.骨骼中，以肝脏细胞的细胞浆中最多。

2、谷丙转氨酶升高临床意义就在于对急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV携带者、重型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的诊断和分析，ALT的升高只表示肝脏可能受到了
损害。

除了肝炎，其他很多疾病都能引起谷丙转氨酶转氨酶升高。

3、在急性肝炎及慢性肝炎与肝硬化活动，肝细胞膜的通透性改变，谷丙转氨酶就从细胞内溢出到循环血液中去，这样抽血检查结果就偏高，转氨酶反映肝细胞损害程度。

但谷丙转氨酶缺乏特异性，有多种原因能造成肝细胞膜通透性的改变，如疲劳、饮酒、感冒甚至情绪因素等等。

4、上述原因造成的转氨酶增高一般不会高于60个单位，转氨酶值高于80个单位就有诊断价值，需到医院就诊。

另外需要注意，谷丙转氨酶活性变化与肝脏病理组织改变缺乏一致性，有的严重肝损患者谷丙转氨酶并不升高。

因此肝功能损害需要综合其他情况来判断。

5、ALT在各组织的含量：肝脏>肾>心脏>骨。

凤庆县人民医院质量管理体系文件生化室SOP文件编号：FQYY-LAB-SH-CZ-01~47第二版编制：鲁伟审核：李树荣批准：李树荣生效日期：2012年10月1日凤庆县人民医院检验科目录目录目录修订页临床标本采集程序1.目的:规范临床标本的采集，减少实验前的影响因素。

2.范围:适用于为协助疾病诊断和治疗而进行的临床生化样品采集活动。

临床样本包括血液、尿液、胸腹水等各种体液。

3.职责:临床生化实验室：指导临床各科室正确采集标本，提高实验结果的准确性。

4.程序:4.1 静脉血的采集：4.1.1 静脉血标本采集前病人应注意的问题：4.1.1.1 避免剧烈运动，一般主张抽血前24小时不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在起床前抽血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后取血。

4.1.1.2 注意合理饮食。

除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食12小时后空腹取血，延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会变化.饮酒对实验亦有影响。

4.1.1.3 药物的影响。

很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果，病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。

4.1.2 静脉血标本采集前医生、护士应注意的问题：4.1.2.1.检验申请单填写要求：检验申请单用钢笔或黑笔填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。

填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。

4.1.2.2 采用一次性真空采血管，多项化验时应首先将血注入血常规管，然后是抗凝管（注意要正确使用抗凝剂），最后是非抗凝管。

4.1.2.3 采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜，止血带使用应少于1分钟，以免引起血液淤滞，造成血管内溶血或血液某些成分的改变。

4.1.2.4 当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血，以降低对血糖、血钾等实验结果的影响。

4.1.2.5 血标本应防止溶血，影响溶血的因素有:使用止血带时间过长；抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡；容器污染；血液中泡沫注入试管；标本放置时间过长；突然受冷或受热及离心力过大等。