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薄层色谱分离偶氮苯和苏丹实验报告一、实验目的1、掌握薄层色谱的基本原理和操作方法。
2、学习使用薄层色谱分离偶氮苯和苏丹混合物。
3、了解影响薄层色谱分离效果的因素。
二、实验原理薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种快速、简便、灵敏的分离分析技术。
它基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，从而实现分离。
在本实验中，偶氮苯和苏丹是两种结构和性质不同的化合物。
偶氮苯为芳香族化合物，苏丹为偶氮类染料。
选择合适的展开剂，使它们在薄层板上的迁移速度不同，从而达到分离的目的。
三、实验仪器与试剂1、仪器玻璃板（5×20cm）层析缸点样毛细管紫外灯喷雾器2、试剂偶氮苯苏丹硅胶 G羧甲基纤维素钠（CMCNa）石油醚乙酸乙酯四、实验步骤1、制备薄层板将 3g 硅胶 G 置于研钵中，加入 7mL 05% CMCNa 溶液，充分研磨均匀。
将调好的硅胶糊倒在洗净的玻璃板上，用玻璃棒均匀涂布，使其成为厚度约 025mm 的均匀薄层。
水平放置，在室温下晾干后，置于 110℃烘箱中活化 30 分钟，取出备用。
2、点样用毛细管分别吸取少量偶氮苯和苏丹的溶液，在距薄层板一端 1cm 处，轻轻点样，使样点直径不超过 2mm，每次点样后，用电吹风冷风档吹干，重复点样 2-3 次。
3、展开在层析缸中加入适量的展开剂（石油醚：乙酸乙酯＝ 9:1），将点好样的薄层板放入层析缸中，使展开剂液面低于样点。
盖好层析缸盖，让展开剂自下而上展开。
当展开剂前沿上升至距板顶端 1cm 左右时，取出薄层板，用铅笔标记展开剂前沿的位置，用电吹风吹干。
4、显色将展开后的薄层板置于紫外灯下观察，偶氮苯和苏丹会呈现出不同颜色的斑点。
5、计算比移值（Rf 值）用尺子测量样点中心至展开剂前沿的距离（a）和样点中心至原点的距离（b），计算 Rf 值：Rf ＝ a ／ b 。
五、实验结果与分析1、实验结果偶氮苯的 Rf 值约为 07，苏丹的 Rf 值约为 04。
苏丹红、苏丹黄、偶氮苯的薄层层析一、苏丹红(Sudan Red)苏丹红是一种常用的红色染料，被广泛应用于食品、化妆品、药品、指甲油等业界，能够赋予产品艳丽的色泽。
然而苏丹红也被认为是致癌物质之一。
为了避免食品安全问题，许多国家和地区禁止苏丹红的使用。
在分析检测方法方面，薄层层析技术是一种比较简单、快捷、经济的方法。
下面是针对苏丹红的薄层层析过程：试料：苏丹红试剂：正洁净丙酮、橄榄油(甘油)、硅胶G工具：薄层层析板、层析罐、玻璃棒、显色剂方法：1.将硅胶G加入根据需要加入橄榄油(甘油)加至湿润状态。
2.将硅胶G加至薄层层析板上。
3.将湿润硅胶G平均的铺置于薄层层析板上，待干燥。
4.取适量的苏丹红加入正洁净丙酮中，使其完全溶解（尽量不要加多）。
0.2克左右即可。
5.将Sudan Red加入到上一步得到的层析板中。
6.晾干后，将层析板塞于等温层析罐中，上面加入适量的正洁净丙酮，将罐盖好。
7.将等温层析罐放入直线扫描层析仪中，使其等温30-60分钟。
8.测定苏丹红的吸收峰，记录其波长和相对强度。
9.采用显色剂可更加准确的测定吸收峰的波长和相对强度，进而进行定量分析。
苏丹黄是一种荧光亮黄色的有机颜料，被广泛用于染料、涂料、食品、饮料等多个领域，亦为一种致癌物质。
因此，人们对其分析检测越来越重视。
下面是苏丹黄的薄层层析方法：试剂：苯酚，四氯化碳1.取得薄层层析板，并在上面用硅胶G均匀的抹上一层。
2.将苯酚和四氯化碳混合，其配比为1：1，得到的混合溶液为显色剂。
3.将苏丹黄与混合溶液按需要的含量混合，制成样品溶液。
4.将样品溶液放在层析板边缘上，慢慢靠近层析板中心。
5.用含四氯化碳小槽将薄层层析板放入液面中，控制好溶液高度。
6.让样品溶液慢慢上升，进行层析分离。
7.分离结束后，将层析板晾干。
8.将晾干的层析板放入紫外灯下进行检测，通过温和化学反应，苏丹黄将被氧化，产生出淡黄色的荧光。
9.将层析板放入显色剂中，用显色剂复过程进行检测，最后根据相对迁移率计算定量分析。
一、实验目的1. 掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。
2. 学习并掌握偶氮苯的薄层色谱分离方法。
3. 了解偶氮苯的物理化学性质及其在实验中的表现。
二、实验原理薄层色谱（TLC）是一种用于分离和鉴定有机化合物的方法。
其基本原理是利用混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力强的组分则滞后，从而实现分离。
物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值Rf表示。
偶氮苯（C6H5N2）是一种有机化合物，具有顺式（Z）-反式（E）-异构体。
顺式偶氮苯的偶极距大，极性强，反式偶氮苯的偶极距为零，极性小。
因此，在薄层色谱中，两种结构的物质会分开，并具有不同的Rf值。
三、实验仪器与药品1. 仪器：硅胶薄层板、点样器、层析缸、紫外灯、比色计等。
2. 药品：偶氮苯标准品、无水乙醇、环己烷、乙酸乙酯等。
四、实验步骤1. 准备薄层板：将硅胶薄层板置于层析缸中，用无水乙醇润湿，使硅胶充分吸附在板上。
2. 点样：用点样器蘸取少量偶氮苯标准品，点于薄层板下端2.0cm处，标记为原点。
3. 展开剂选择：根据文献报道，选择环己烷与乙酸乙酯的混合溶剂或环己烷与乙醇的混合溶剂作为展开剂。
4. 展开实验：将薄层板放入层析缸中，加入适量展开剂，使溶剂前沿距离薄层板顶约1.0cm。
待溶剂前沿上升至预定位置后，取出薄层板，晾干。
5. 检测：用紫外灯照射薄层板，观察偶氮苯的斑点位置和颜色。
6. 测量Rf值：用比色计测量原点至偶氮苯斑点中心的距离和原点至溶剂前沿的距离，计算Rf值。
五、实验结果与分析1. 实验结果：在紫外灯照射下，薄层板上出现两个明显的斑点，分别对应顺式和反式偶氮苯。
2. Rf值计算：根据实验数据，顺式偶氮苯的Rf值为0.45，反式偶氮苯的Rf值为0.65。
3. 结果分析：实验结果表明，薄层色谱法可以有效地分离偶氮苯的顺式和反式异构体。
偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验的改进
改进偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验
随着现在科研方面的发展，大学教师和学生们都期望通过课堂实验来认识科学，而偶氮苯
顺反异构体薄层色谱分析已成为本科教学的实验基础，目的是帮助学生对数据分析有更深
刻的理解，研究并归纳经验数据。
为了优化偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验，需要提出一些改进措施。
首先，
需要扩展实验的范围，让学生通过实验获取更多的知识，如探究不同液体中不同物质对薄
层色谱的影响等。
其次，在给学生讲解薄层色谱分析方法时，应多次给予实例，给学生带
来更多活动内容，让学生更加熟悉实验内容。
另外，可以通过研究和讨论等方式，使学生
更深入地学习和了解偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析，对科学知识作出更深入的解析。
同时，建议将该实验分为实验一和实验二两部分，分别专门进行实验测试和数据分析，以
便教师和学生掌握教学实验的要点。
教师也可以将实验数据录制成视频，供学生随时参考
调阅。
此外，教师还可以提出一些小组活动，激励学生一起思考，以求在实验中得出有利的结论。
这些小组活动可以是专题研究、报告设计、数据分析等形式，增加学生探究热情，实现实
验知识的深入学习和研究。
考虑到偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验的特殊性，为了改进该课程的教学质量，在教学实验中加入上述改进措施，可以起到课堂激励学生，更好地吸引学生参与课堂
实验，加深学生对实验室理论知识的理解。
（一）实验目的： 1、了解薄层层析分离有机化合物的原理及应用范围； 2、掌握薄层的制备、点样、展开、显色的操作； 3、了解紫外灯检出斑点及常用的薄层展开系统、显色剂；
4、了解值Rf 值的意义及计算。
（二）实验内容： 应用薄层层析分离顺反偶氮苯
1、制备薄层
2、配制展开剂
3、检出斑点
4、计算Rf 值
(三)实验用仪器、设备： 名称 线路或示意图中符号 规 格 实验室编号 备注 薄板
载玻片
2块 硅胶G
青岛海洋化工厂AR CMC
0、5-1%浓度 偶氮苯
尺
层析缸
环己烷
AR 苯
AR
(四)实验用详细线路图或其他示意图:
点样 薄层层析展开
(五)实验有关原理及原始计算数据,所应用的公式:
薄层层析是六十年代发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。
它兼具了柱色谱和纸色谱的优点，既可用于少量样品（0、01微克）的分离，也可用于 制备分离，应用极为广泛。
R f 值是衡量物质在薄层上分离及鉴定的一个数值，R f 值彼此相差较远，
说明物质分离较好
O
B
R f 值=原点至斑点中心的距离/原点至溶剂前沿的距离
=AO/BO
偶氮苯的光化异构体
N N
C 6H 5
C 6H 5
hv
活化分子
N N
C 6H 5C 6H 5
N N
C 6H 5
C 6H 5
+
反式
偶氮苯最常见的形式是反式异构体，反式偶氮苯在光的照射下能吸收紫外光形成活化分子，活化分子失去能量会回到顺式或反式基态
(六)实验数据记录: 1、薄层板的制备：
称取2克硅胶于8毫升1%CMC 溶液中，调成糊状，用研钵的杵在薄板上
涂布均匀，用手轻轻振动，使其成平整薄层，平铺在玻板上，空气下干燥。
2克硅胶可铺8块载玻片。
2、点样
待薄层干燥后，进行点样，先在薄板底线1-1、5厘米处画一条线，将待 分离样品溶于低沸点溶剂中，用毛细管点样，样品斑点要小，点样间距1-1、5 厘米。
1.薄层色谱用的吸附剂一般是氧化铝,硅胶,硅藻土,聚酰胺等,薄层板制作时,除吸附剂外,还添加一些另外物质. 硅胶H 即为纯硅胶 硅胶G 硅胶+石膏,适合于板上作记号 硅胶GF254 含石膏可在254纳米紫外灯下观察荧光的物质 硅胶GF254+365 含石膏可在254,365纳米紫外灯下观察荧光的物质 粘合剂石膏(2CaSO 4.H 2O)还可用淀粉，羟甲基纤维素钠（CMC）代替，加 粘合剂的薄板叫硬板。
2、具有较大极性的化合物在薄层板上呈现较强吸附力，
它们的Rf 值较小， 因此利用化合物极性不同，在不同展开剂上显示不同Rf 值，可以达到分离。
3、薄层板制作方法分干法，湿法两种。
3、展开：
配制的展开剂置于密闭层析缸中，展开剂用量约在缸底部1厘米高，将薄板轻轻放入，用上行法展开。
4、显色：
待展开剂距上沿约1厘米处，取出薄板，溶剂挥发，紫外灯下看萤光，或 用显色剂显色。
5、计算Rf 值
（六） 注意事项
(八)对实验结果实验中某些现象的分析讨论：
1、薄板涂布不匀，有气泡，致使分离不佳，在硅胶与CMC混合时要研磨，清除气泡。
2、光照后的顺式斑点不明显，有时Rf值计算有误，可以在紫外灯下再观察。
3、如是分离别的化合物，应该加显色剂。
4、点样时斑点尽可能小，以免在展开时造成扩散，分离不佳。
通过本试验，要求学生掌握不同色谱技术的特点，原理及其应用。
一般讲：
1、薄层色谱应用简单，普及，应该牢固掌握，作为今后化学研究中不可 缺少的工具，并应用该技术来探索柱色谱分离的最佳条件。
2、柱色谱用于纯品制备，特别是较大量混合物的分离，结构鉴定，离不开柱色谱的应用。
3、气相色谱用于定量、定性分析，但对于加热易分解，不挥发性物质不 适用。
(九)实验方法指示及注意事项:
1、光异构化：0、1克反偶氮苯溶于5毫升无水苯中，将此溶液分为二个试管，置一试管在太阳光下照射一小时，另一试管用黑纸包好，照射要完全，使 分离现象明显。
2、薄板制成后可以在105-1100C的烘箱中活化1-2小时，然后置干燥器中备用，不活化之薄板分离效果也可。
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