阪崎肠杆菌科菌种鉴定细菌成分
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长春阪崎肠杆菌科鉴定流程肠杆菌科是一类重要的革兰氏阴性菌,包括了大肠杆菌、沙门氏菌、鲍曼不动杆菌等多种细菌。
其中,长春阪崎肠杆菌是一种致病菌,能够引起食物中毒、泌尿生殖道感染等疾病,因此对其的鉴定非常重要。
下面介绍一下长春阪崎肠杆菌科鉴定的流程。
1. 样本采集首先,需要对患者的样本进行采集。
常见的样本包括粪便、血液、尿液等。
在采集样本的过程中,需要注意保持样本的无菌状态,避免外界细菌的污染。
2. 细菌培养然后,需要将样本进行细菌培养。
将样本接种到适宜的寒暖贮藏培养基上,进行培养。
需要注意控制培养基的温度、湿度等条件,保证细菌能够生长繁殖。
3. 形态观察在细菌培养的过程中,需要不断观察菌落的形态、颜色等特征。
长春阪崎肠杆菌的菌落一般为圆形或不规则形状的,表面光滑或稍微粗糙。
颜色一般为乳白色、淡黄色或灰白色。
4. 生化试验接下来,需要进行生化试验。
长春阪崎肠杆菌一般可以通过氧化-发酵反应、氧化酶试验、甲烷蓝试验等生化试验进行鉴定。
其中,氧化-发酵反应是一种常见的鉴定方法,可根据菌落的形态、气泡、酸碱度等鉴定细菌。
氧化酶试验可检测细菌是否含有氧化酶,通过观察菌液的颜色、气味等来判断。
甲烷蓝试验可检测细菌是否能够分解葡萄糖产生酸。
5. 分子生物学检测最后,对于一些难以通过传统生化试验鉴定的长春阪崎肠杆菌,可以进行分子生物学检测。
常见的分子生物学检测方法包括PCR、DNA测序等,能够检测菌株的基因序列,进一步确认菌株的种属。
总之,长春阪崎肠杆菌科的鉴定流程是一个较为复杂而严格的过程,需要仔细控制每一个步骤,细致地观察每一项指标,保证鉴定结果的准确性。
阪崎肠杆菌检测标准1. 引言阪崎肠杆菌〔Hafnia alvei〕是一种革兰氏阴性菌,属于肠杆菌科。
它在自然环境中广泛存在,也可以在人和动物的消化道内找到。
阪崎肠杆菌可以对人类和动物造成感染,引起各种疾病,如泌尿系统感染、呼吸道感染和胃肠道感染等。
为确保食品和饮用水的平安,阪崎肠杆菌的检测标准十分重要。
2. 检测方法2.1 阪崎肠杆菌的培养方法阪崎肠杆菌可以在一般细菌培养基上生长,常用的培养基包括MacConkey琼脂培养基和Eosin Methylene Blue〔EMB〕琼脂培养基。
培养时一般在37°C下孵育24-48小时。
2.2 阪崎肠杆菌的生化检测阪崎肠杆菌可以通过一系列的生化反响进行检测和鉴定。
常用的生化试验包括氧化/发酵葡萄糖试验〔O/F试验〕和酮糖酸盐〔Voges-Proskauer〕试验等。
2.3 阪崎肠杆菌的PCR检测PCR〔聚合酶链式反响〕是一种常用的分子生物学方法,可以快速、准确地检测阪崎肠杆菌。
通过特定的引物在PCR反响中扩增阪崎肠杆菌的DNA片段,然后通过凝胶电泳进行检测和鉴定。
3. 检测标准3.1 食品中阪崎肠杆菌的检测标准根据国家食品平安标准,食品中阪崎肠杆菌的检测标准如下: - 生肉制品:阪崎肠杆菌在每克样品中不得超过10 CFU; - 加工食品:阪崎肠杆菌在每克样品中不得超过100 CFU; - 饮用水:阪崎肠杆菌在每100毫升样品中不得检出。
3.2 环境中阪崎肠杆菌的检测标准根据环境保护标准,阪崎肠杆菌的检测标准如下: - 水质:阪崎肠杆菌在每升水样中不得超过100 CFU; - 空气:阪崎肠杆菌在每立方米空气中不得超过100 CFU; - 土壤:阪崎肠杆菌在每克土壤样品中不得超过1000 CFU。
4. 检测流程4.1 样品采集从食品、饮用水或环境样品中采集足够数量的样品。
使用无菌容器收集,并确保样品处于最正确的保存条件。
4.2 样品处理将采集的样品经过适当的处理,在无菌条件下进行前处理,如制备悬浮液或稀释样品。
食品克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检测依据:GB 4789.40-2016 第一法 第二法一、克罗诺杆菌属定性检验无菌操作称(量)取样品100g或ml置于灭菌锥形中,加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水,摇动充分溶解,36±1℃培养18±2h,移取1mL转种于10mLST-Vm肉汤,44±0.5℃培养24±2h。
轻轻混匀培养物,各取1环,分别划线于两个阪崎杆菌显色培养基平板,36±1℃培养24±2h。
挑取可疑菌落,划线于TSA平板,25±1℃培养48±4h。
观察,挑取可疑菌落进行生化鉴定。
二、克罗诺杆菌属平板计数法无菌操作称(量)取样品100g(ml)、10g(ml)、1g(ml)置于灭菌锥形中,加入900mL、90mL、9mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水,摇动充分溶解,36±1℃培养18±2h,移取1mL转种于10mLST-Vm肉汤,44±0.5℃培养24±2h。
轻轻混匀培养物,各取1环,分别划线于两个阪崎杆菌显色培养基平板,36±1℃培养24±2h。
挑取可疑菌落,划线于TSA平板,25±1℃培养48±4h。
挑取可疑菌落进行生化鉴定。
注:+生长或有可疑菌落;-未生长或无可疑菌落。
计算及结果:定性检验:得100g(mL) 计数法,查MPN检索表,得MPN/g,mL电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:。
奶粉中的健康杀手——克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检测标准解读!克罗诺杆菌属(Cronobacterspp.)是由Iversen等人于2008年建议创立的隶属于肠杆菌科的一个新属,该属是寄生在人和动物肠道内的一种有周生鞭毛、能运动、兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
该菌的发展经历了4个时期:1起初该菌因其产生黄色素,被认为是肠杆菌属中阴沟肠杆菌的生物变形种──黄色阴沟肠杆菌;21989年,Farmer通过DNA杂交、生化反应、黄色素产生及抗生素敏感性等实验,发现该菌与阴沟肠杆菌有所不同,为此更名为“阪崎肠杆菌”;32008年,Iversen等人通过荧光扩增片段长度多态性、自动核糖体分型、16SrRNA基因测序、DNA-DNA杂交和表型阵列等多种分子生物学技术研究,将该菌由种(阪崎肠杆菌)扩大为属(克罗诺杆菌属),这个新属包括6个种;42012年,Joseph等利用16SrRNA基因序列分析和多位点测序技术对克罗诺杆菌属进行分类研究,提出将克罗诺杆菌属分为7个种。
克罗诺杆菌属是一种重要的食源性条件致病菌,可通过污染婴幼儿配方奶粉等食品导致新生儿脑膜炎、菌血症和坏死性小肠结肠炎。
其名字“克罗诺”(Cronos)来源于希腊神话,克罗诺是希腊神话中十二个泰坦巨神之一,传说他的每个孩子一出生就被他一口吃掉,其行为表现和该菌的致病特性很吻合,因此“Cronobacterspp.”被译成“克罗诺杆菌属”。
该菌作为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌,对其相关产品的检测及监管尤为重要,常用的检测方法有:另外,2016年12月23日卫计委发布了新标准GB 4789.40-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》,将于2017年6月23日实施,并将代替GB 4789.40-2010、SN/T 1632.1-2013。
该标准与GB 4789.40-2010相比,主要变化有:1.修改了标准名称标准名称中“阪崎肠杆菌检验”改为“克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验”。
阪崎肠杆菌科菌种鉴定细菌成分
一、引言
阪崎肠杆菌科(Sakazakii Enterobacteriaceae)是一种常见的细菌科,包含多种致病性菌种。
其中的阪崎肠杆菌(Cronobacter sakazakii)是一种已知的人类致病菌,能引起新生儿脑膜炎、败血症、肺炎等严
重感染。
因此,对于阪崎肠杆菌科菌种鉴定的准确性和全面性要求极高。
二、样品采集与处理
1. 采集样品:从食品、环境等来源中采集样品,如奶粉、水源等。
2. 处理样品:将样品进行预处理,如加入缓冲液等,以保证后续操作
的可靠性和准确性。
三、培养基选择与制备
1. 培养基选择:常用的培养基有Luria-Bertani(LB)、营养琼脂(NA)、大肠杆菌选择性培养基MacConkey(MAC)等。
2. 培养基制备:按照标准配方制备培养基,并进行灭菌处理。
四、细胞分离与纯化
1. 细胞分离:将样品接种到培养基中,进行静置或摇床培养,使菌落
生长。
2. 细胞纯化:通过不同的方法,如差速离心、磁珠分离等,将目标细
菌分离纯化。
五、生化鉴定
1. 氧化酶试验:检测细菌是否具有氧化酶活性。
2. 婴儿食品模拟液培养:将细菌接种到婴儿食品模拟液中进行培养,
观察是否能够生长。
3. 阳性和阴性反应检测:通过添加不同的试剂观察细菌是否产生阳性
或阴性反应。
六、分子生物学鉴定
1. PCR扩增:使用特异性引物对目标基因进行PCR扩增。
2. 16S rRNA序列分析:对PCR扩增得到的16S rRNA序列进行测序和比对,并与数据库中的已知序列进行比较。
七、质谱鉴定
1. MALDI-TOF MS技术:利用MALDI-TOF MS技术对目标菌株进行质谱分析,并与数据库中的已知质谱图谱进行比对。
八、总结
阪崎肠杆菌科菌种鉴定需要综合应用多种方法,包括样品采集与处理、培养基选择与制备、细胞分离与纯化、生化鉴定、分子生物学鉴定和
质谱鉴定等。
在实际操作中,需要根据具体情况选择合适的方法,并注意操作规范和安全性。