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三种抗酸染色法检测痰结核分枝杆菌结果分析郑浩;柳晓金;齐海亮;冯建纯;朱桂云;郑立恒【摘要】Objective:To assess the value of applying three diverse techniques(direct smear method,flotation smear,centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method) to detection of the mycobacterium in sputum for diagnosis of pulmonary tuberculosis.Methods:The sputum samples were ob-tained from 1 500 suspected tuberculosis patients and respectively detected by the direct smear ,flotation smear and centrifuging the liquored sputa and col-lecting bacteria method for comparison of the positive sputum .Results:Direct smear,flotation smear,and centrifuging the liquored sputa and collecting bac-teria method revealed positive rate of 22.0% (244/1 500),22.0% (330/1 500) and 22.4% (336/1500),respectively.The difference was significant between direct smear and flotation smear,and direct smear and centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method .Of the three techniques,flo-tation smear and centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method led to higher detection rate (χ2 =78.68,P<0.001 for the former;χ2 =2.50,P>0.05 for the latter).However,the positive results were not significant between flotation smear and centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method(χ2 =2.50,P>0.05).Co nclusion:Centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method can be rapid and simple in detection of the mycobacterium in sputum with higher positive findings,thus it is worthy of wider clinical recommendation for diagnosis of pulmonary tuberculosis.%目的：探讨涂片法、漂浮集菌法和夹层杯法三种方法检测痰中结核分枝杆菌对于肺结核的诊断价值。
268例痰涂片抗酸染色阳性结核分枝杆菌培养工作体会摘要：目的：通过对268例分枝杆菌培养结果进行分析，总结了实验室分枝杆菌培养工作在结核病防治工作中的意义和价值，以及提高培养的阳性率的方法。
方法：就我院2012年11月结核病实验室成立到2015年6月期间对6000多例就诊者的痰标本所做的痰涂片抗酸染色（萋尼氏法）显微镜检查，选取其中268例涂阳患者（包括初发患者、初治失败者、及大于5个月复发者，不包括其它时间段涂阳的随访者）进行罗氏培养。
结果：初发培阳率为96.7%，污染率为 1.86%，复发培阳率为73.3%，污染率为0。
结论：痰涂片抗酸染色阳性结核分枝杆菌的培养工作是为诊断结核病提供依据与参考的重要环节，对于结核病的防治工作具有重要的意义和价值。
关键词：痰涂片；抗酸染色阳性；结核分枝杆菌培养；工作体会分枝杆菌的分离培养不论是从传染病控制、流行病学调查研究，还是从临床诊疗的角度来看，都是结核病病原学诊断的“金标准”，同时，分离培养更为进行菌种鉴定和药敏实验提供菌株来源的重要环节[1]。
我院结核病实验室于2012年11月成立，主要任务是对就诊患者的痰标本进行涂片抗酸染色镜检，对阳性标本再做罗氏培养，并将培养出的菌株送至上级单位（南通市疾控中心）进一步做菌株鉴定和药敏实验。
通过对268例分枝杆菌培养结果的原因分析，笔者总结了痰涂片抗酸染色阳性结核分枝杆菌培养的工作体会，现报告如下。
1 材料与方法1.1 标本我院自2012年11月以来诊治过的268例涂阳患者（包括初发患者、初治失败者、及大于5个月复发者，不包括其它时间段涂阳的随访者）的痰标本。
1.2试剂与仪器使用珠海贝索生物技术有限公司的萋尼氏结核菌染色液进行抗酸染色、酸性罗氏培养管试剂进行培养，仪器有OLYMPUS-CX21FS1显微镜，Thermo孵箱，Esco classⅡ BSC安全柜。
1.2 培养方法按《中国结核病防治规划•痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》（2009版）标准化操作对本组患者的痰标本采用萋尼氏法进行痰涂片抗酸染色后均镜检，然后对阳性标本按《结核菌培养标准化操作及质量保证手册》（2010版）标准化操作进行罗氏培养。
两种染色方法检测抗酸杆菌的结果分析
袁薇;陈依江;张铭;陈慧娟;李扬;雷世光
【期刊名称】《贵州医药》
【年(卷),期】2013(37)3
【摘要】在结核病防治工作中,无论从结核病控制、流行病学调查和研究,还是从临床诊断的角度,结核分枝杆菌的分离培养都是结核病病原学诊断的＂金标准＂,但因结核分枝杆菌的分离培养需要一定的设备、技术和实验室环境设施条件,培养报告时间长达一至两月,远远不能满足临床诊断需要,因此,在中国结核病防治规划的框架下,推荐使用易于标准化、报告时间短,能够对诊断和疗效做出及时和准确评价并符合成本效益的直接涂片显微镜检查方法—萋-尼氏（Ziehl-Neelsen,Z-N）染色法和荧光染色法。
Z-N染色法已被广泛运用,因荧光染色法需荧光显微镜同时显微镜还需摆放于特殊的暗室环境而使用受限。
【总页数】3页(P263-265)
【作者】袁薇;陈依江;张铭;陈慧娟;李扬;雷世光
【作者单位】贵州省疾病预防控制中心,贵州贵阳550004
【正文语种】中文
【中图分类】R446.5
【相关文献】
1.两种染色方法检测抗酸杆菌的结果分析 [J], 袁薇;陈依江;张铭;陈慧娟;李扬;雷世光
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3.缸染法抗酸染色显微镜方法检查抗酸杆菌结果分析 [J], 王敏娣;孙丽娜;梁慧;邱颖;陈然
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结核分枝杆菌的形态染色
结核分枝杆菌的形态染色是临床//检验考试常考的一个知识点，下面进行总结：结核分枝杆菌细长且直，不同种可呈现丝状、球状、串珠状等多形性。
抗酸染色法医学'教育网搜集整理是以5%石碳酸复红加温染色后再经3%盐酸乙醇脱色，再以美蓝复染，结核分枝杆菌能抵
结核分枝杆菌的形态染色是临床//检验考试常考的一个知识点，下面进行总结：结核分枝杆菌细长且直，不同种可呈现丝状、球状、串珠状等多形性。
抗酸染色法医学'教育网搜集整理是以5%石碳酸复红加温染色后再经3%盐酸乙醇脱色，再以美蓝复染，结核分枝杆菌能抵抗酸酒精脱色，被染成红色，为抗酸染色阳性。
缸染法抗酸染色显微镜方法检查抗酸杆菌结果分析目的分析抗酸杆菌应用缸染法抗酸染色显微镜方法进行检查的结果。
方法方便选择2008年1月—2016年1月该单位收治的100例结核病患者作为观察组，并将该单位同期收治的100例结核病患者设为对照组，予以对照组单片分置染色，予以观察组单片浸入混合染色，比较两组检查结果。
结果观察组抗酸杆菌检出率95.00%，对照组抗酸杆菌检出率80%，对比差异有统计学意义（P＜0.05）。
观察组污染率0.00%，对照组污染率10.00%，对比差异有统计学意义（P 0.05），可进行对比。
1.2 方法两组患者在2周内已进行抗酸杆菌检查，若患者检查结果显示为阳性，则均取1份痰液标本，每份痰液标本均作直接涂片6张，自然干燥后，固定放置在100 mL初染剂中进行染色，时间为5 min，然后取出4片使用自来水冲洗，用脱色剂脱色后，再用自来水冲洗，其中2片放置在100 mL脱色剂中，剩下2片则放置在100 mL复染剂中。
上述涂片均各使用1张新玻片将其涂层尽量刮擦下来混入各染色组分中，并且当做当天的污染攻击染液组分。
其中对照组患者的标本直接涂片采取单片分置染色，观察组患者的标本直接涂片采取单片浸入混合染色，模拟进行平行检测。
同时取两组抗酸杆菌检查结果为阴性者的痰标本直接涂片3份，主要当做污染法阴性无污染对照。
1.3 统计方法选择SPSS 19.0统计学软件以及excel软件分析两组患者的全部数据资料，计数资料采用[n（%）]表示，采用χ2检验，以P <0.05 为差异有统计学意义。
2 结果2.1 两组患者镜检结果对比观察组患者的抗酸杆菌检出率为95.00%，对照组患者的抗酸杆菌检出率为80%，将两组患者的抗酸杆菌检出率进行对比，发现观察组明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
见表2。
2.2 两组患者污染率对比观察组患者的抗酸杆菌检查污染率为0.00%，对照组患者的抗酸杆菌检查污染率为10.00%，将两组患者的抗酸杆菌检查污染率进行对比，发现观察组明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。
抗酸染色结果判断标准
一、着色程度
抗酸染色后，细菌被染成红色或粉红色。
根据着色的深浅程度，可以初步判断细菌对抗酸的抵抗力。
着色较深的细菌对抗酸性能较强，而着色较浅的细菌对抗酸性能较弱。
二、阳性菌与阴性菌
抗酸染色可将细菌分为阳性菌和阴性菌两种类型。
阳性菌在抗酸染色后呈红色或粉红色，而阴性菌则呈蓝色或绿色。
这一区别有助于初步鉴别细菌的类型。
三、抗酸性能
不同种类的细菌对抗酸的抵抗力不同。
一般来说，结核分枝杆菌等细菌具有较强的抗酸性能，而其他细菌如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等则相对较弱。
因此，根据染色结果可以初步判断细菌的抗酸性能强弱。
四、菌种类型
不同的细菌具有不同的菌种类型，其抗酸性能也各不相同。
例如，结核分枝杆菌的抗酸性能较强，而麻风分枝杆菌的抗酸性能较弱。
因此，根据染色结果可以初步判断细菌的菌种类型。
五、数量与分布
在抗酸染色结果中，还可以观察到细菌的数量和分布情况。
如果染色后出现大量红色或粉红色的菌落，且分布较为均匀，则说明细菌数量较多且分布广泛；反之，则说明细菌数量较少或分布不均。
这一
观察有助于了解感染的程度和分布情况。
成人专升本微生物学习重点一、选择题1. 属于真核细胞型的微生物是A. 螺旋体B. 放线菌C. 真菌D. 细菌2. 青霉素抑菌作用的机制是A. 损害细胞膜B. 抑制四肽侧链与五肽交联桥的联结C. 干扰细菌DNA的分裂D. 干扰细菌蛋白质的合成3. 与细菌运动有关的特殊结构是A. 芽胞B. 鞭毛C. 菌毛D. 荚膜4. 进行革兰染色时，染色液的正确使用顺序是A. 结晶紫－95％酒精－碘液－稀释复红B. 结晶紫－碘液－95％酒精－稀释复红C. 稀释复红－碘液－95％酒精－结晶紫D. 结晶紫－稀释复红－95％酒精－碘液5. 下列有关菌落的叙述，错误的是A. 在液体培养基上生长B. 肉眼可见C. 由一个细菌形成D. 一个菌落包含成千上万个细菌6. 细菌的繁殖方式是A. 有丝分裂B. 二分裂C. 孢子生殖D. 复制7. 正常菌群在医学上的意义主要是A. 生物拮抗作用B. 营养作用C. 免疫作用D. 以上A+B+C8. 最有效杀死芽胞的方法是A. 流通蒸汽法B. 巴氏消毒法C. 高压蒸汽灭菌法D. 煮沸法9. 紫外线杀菌的机制是A. 破坏细菌的细胞壁B. 破坏细菌的细胞膜C. 抑制细菌蛋白质的合成D. 影响细菌核酸的复制及转录10. 使相应细菌裂解的噬菌体称为是A. 温和噬菌体B. 毒性噬菌体C. 前噬菌体D. 溶原性细菌11. 关于内毒素的叙述,下列叙述错误的是A. 由革兰阴性菌产生B. 化学成分是脂多糖C. 耐热,使用高压蒸汽灭菌法仍不能将其破坏D. 经甲醛处理可制备成类毒素12. 可与IgG Fc段结合的细菌表面物质是A. M蛋白B. Vi抗原C. 葡萄球菌A蛋白D. 大肠杆菌K抗原13. 下列项鉴定致病性葡萄球菌重要的依据是A. 金黄色色素B. 发酵甘露醇C. 凝固酶阳性D. 发酵葡萄糖14. 淋病奈瑟氏菌可引的疾病是A. 性病淋巴肉芽肿B. 包涵体结膜炎C. 新生儿淋菌性结膜炎D. 沙眼15. 无动力的肠道杆菌是A. 伤寒沙门菌B. 志贺菌C. 大肠埃希菌D. 变形杆菌16. 在初步鉴别肠道致病菌和非致病菌上具有重要意义的试验是A. 葡萄糖发酵试验B. 乳糖发酵试验C. 菊糖发酵试验D. 甘露醇发酵试验17. 在悬滴标本中呈穿梭样运动的细菌是A. 大肠埃希菌B. 伤寒沙门菌C. 幽门螺杆菌菌D. 霍乱弧菌18. 芽胞位于菌体顶端、正圆形、膨大使细菌呈“鼓槌状”的细菌是A. 葡萄球菌B. 肺炎链球菌C. 破伤风梭菌D. 产气荚膜梭菌19. 在牛奶培养基中产生“汹涌发酵”现象的细菌是A. 肉毒梭菌B. 破伤风梭菌C. 产气荚膜梭菌D. 炭疽芽胞杆菌20. 结核分枝杆菌抗酸染色的结果是A.紫色B. 红色C. 绿色D. 棕褐色21.病毒大小常用的测量单位是A. 纳米（nm）B. 微米（μm）C. 毫米（mm）D. 厘米（cm）22. 病毒增殖的方式是A. 二分裂B. 减数分裂C. 复制D. 有丝分裂23. 病毒进入宿主细胞内增殖，不能复制出病毒体的称为A. 显性感染B. 顿挫感染C. 隐性感染D. 持续性感染24. 病毒垂直传播的方式是A. 呼吸道B. 消化道C. 胎盘、产道D. 皮肤粘膜25. 亚急性硬化性全脑炎属于感染的类型是A. 隐性感染B. 潜伏感染C. 慢性感染D. 慢发病毒感染26. 以下叙述，错误的是A. 在采集标本时必须无菌操作B.进行标本采集时，应在感染早期（发病1-2天内）采集C. 标本采集后最好在采集后12-24h内送到病毒实验室D. 如需运送，应将标本放入保温瓶内冷藏27. 初次分离流感病毒最常用的是A. 鸡胚卵黄囊B. 鸡胚尿囊腔C. 鸡胚羊膜腔D. 人胚羊膜细胞28. 流感病毒分甲、乙、丙型的依据是A. 流行病学特征不同B. 临床特征不同C. NP和MP抗原性不同D. HA和NA抗原性不同29. 对流感病毒HA描述错误的是A. 引起人和动物的红细胞凝集B. 流感病毒分型的依据之一C. 抗HA抗体可以中和感染D. 可与宿主细胞膜表面HA受体结合30. 2岁以下幼儿秋季腹泻最重要的病原体是A. 脊髓灰质炎病毒B. 轮状病毒C. 肠道病毒71型（EV71）D. 柯萨奇病毒31. 小儿麻痹症的病原体是A. 脊髓灰质炎病毒B. 乙型脑炎病毒C. 单纯疱疹病毒D. 麻疹病毒32. 引起手足口病的主要病毒是A. 风疹病毒B. 单纯疱疹病毒C. 水痘-带状疱疹病毒D. 肠道病毒71型（EV71）33.被狂犬咬伤的伤口，下列哪项处理不正确A. 立即用20%肥皂水清洗伤口B. 用70%酒精及碘酒涂擦伤口C. 使用大量抗生素D. 局部注射高价抗狂犬病病毒血清34. HIV的传播方式不包括A. 性接触B. 输血传播C. 垂直传播D. 食具、餐具传播35. 钩端螺旋体最常用的培养基是A. Korthof培养基B. TCBS琼脂培养基C. SS琼脂培养基D. 罗氏培养基36. 下列没有细胞结构的微生物是A．真菌 B．放线菌C．病毒 D．螺旋体37. 不属于细菌基本结构的是A. 细胞膜B. 质粒C. 核质D. 细胞壁38. 细菌结构中，最耐热的是A. 芽胞B. 鞭毛C. 荚膜D. 中介体39.与细菌粘附能力有关的结构是A. 菌毛B. 芽胞C. 中介体D. 鞭毛40. 去除热原质的最好方法是A. 蒸馏法B. 高压蒸汽灭菌法C. 滤过法D. 巴氏消毒法41. 菌落概概念称为是A. 从培养基上脱落的细菌B. 细菌在培养基上繁殖而形成肉眼可见的细胞集团C. 一个细菌在培养基上生长繁殖而形成肉眼可见的细胞集团D. 一个细菌细胞42. 杀灭物体上所有微生物的方法称为是A. 消毒B. 灭菌C. 防腐D. 抑菌43. 普通培养基最常用的灭菌方法是A. 高压蒸汽灭菌B. 煮沸灭菌C. 滤过除菌D. 紫外线杀菌44. 转化过程中受体菌获得供体菌遗传物质的方式是A. 细胞融合B. 通过性菌毛C. 通过噬菌体D. 直接摄取45. 内毒素的主要成分是A. 肽聚糖B. 蛋白质C. 脂多糖D. 核酸46. 临床上90%可引起人类疾病的链球菌是A. 甲型溶血性链球菌B. A群链球菌C. B群链球菌D. 肺炎链球菌47. 脑膜炎奈瑟菌引起的疾病是A. 乙脑B. 流脑C. SSPED. 结核性脑膜炎48. 无动力的肠道杆菌是A. 伤寒沙门菌B. 志贺菌C. 大肠埃希菌D. 变形杆菌49. 肥达试验可辅助诊断的疾病是A. 结核B. 痢疾C. 肠热症D. 急性胃肠炎50. 能分解乳糖的肠道杆菌是A. 变形杆菌B. 伤寒沙门菌C. 大肠埃希菌D. 志贺菌51. 下列属于缺陷病毒的是A. HAVB. HBVC. HCVD. HDV52. 病毒进入宿主细胞内增殖，不能复制出病毒体的称为A. 显性感染B. 顿挫感染C. 隐性感染D. 持续性感染53. 不属于病毒水平传播的方式是A. 呼吸道B. 消化道C. 胎盘、产道D. 皮肤粘膜54. 亚急性硬化性全脑炎属于感染的类型是A. 隐性感染B. 潜伏感染C. 慢性感染D. 慢发病毒感染55. 流感病毒分为若干亚型的依据是A. 流行病学特征不同B. 临床特征不同C. NP和MP抗原性不同D. HA和NA抗原性不同56. 与亚急性硬化性全脑炎有关的病毒是A. 风疹病毒B. 单纯疱疹病毒C. 水痘-带状疱疹病毒D. 麻疹病毒57. 流感病毒传代培养最常用的是A. 鸡胚卵黄囊B. 鸡胚尿囊腔C. 鸡胚羊膜腔D. 人胚羊膜细胞58. 肠道病毒的核酸类型是A. 单正股RNAB. 单负股RNAC. 双股RNAD.单股DNA59. 下列通过粪-口途径传播的病毒组是A. 脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、ECHO病毒、柯萨奇病毒B. EV71、流感病毒、脊髓灰质炎病毒、ECHO病毒C. 柯萨奇病毒、甲型肝炎病毒、麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒D. 麻疹病毒、ECHO病毒、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒60. 艾滋病的病原体是A. 狂犬病病毒B. 麻疹病毒C. HIVD. HBV61. 患者出现Ⅰ期梅毒症状，检查病原体应取A. 血液B. 尿液C. 下疳渗出液D. 梅毒疹渗出液62.下列微生物染色方法正确的是A. 新生隐球菌-革兰染色B. 钩端螺旋体-镀银染色C. 立克次体-碘液染色D. 结核杆菌-Giemsa染色二、简答题1. 简述细菌生长繁殖的条件有哪些？（1）营养物质（2）酸碱度（3）温度（4）气体2. 简述外毒素的主要特性有哪些？（1）存在部位：由活的细菌释放至细菌体外（2）细菌种类：以革兰氏阳性菌多见（3）化学组成：蛋白质（4）稳定性：不稳定,60℃以上能迅速破坏（5）毒性作用：强,微量对实验动物有致死作用（6）抗原性：强,可刺激机体产生高效价的抗毒素3. 简述破伤风梭菌的防治原则。
1. 掌握结核分枝杆菌的菌落特征、镜下形态及染色特性。
2. 理解抗酸染色的原理，熟悉实验操作步骤。
3. 能够正确观察并记录实验结果，为临床诊断提供依据。
二、实验原理结核分枝杆菌属于革兰氏阳性菌，其细胞壁含有大量脂质，尤其是分枝菌酸，这使得该菌对苯胺类染料不易着色。
通过加热或延长染色时间，可以使结核分枝杆菌着色。
分枝菌酸一旦与染料结合后，就很难被酸性盐酸乙醇脱色剂脱色，从而保持复红的颜色，实现抗酸染色的目的。
经抗酸染色后的结核分枝杆菌呈红色，而其他非抗酸菌和细胞杂质被染成蓝色。
三、实验器材与试剂1. 实验器材：载玻片、接种环、酒精灯、显微镜等。
2. 实验试剂：卡介苗、金黄色葡萄球菌混合生理盐水溶解液、石炭酸复红染液、3%盐酸酒精、美蓝染液等。
四、实验步骤1. 细菌涂片的制备：用接种环分别取卡介苗溶解液和金黄色葡萄球菌，在载玻片上均匀涂抹，并加热干燥固定。
2. 初染：在涂膜上滴加石炭酸复红染液，使染液完全浸没涂膜。
用镊子夹住玻片，置于酒精灯外焰上缓缓加热，至有蒸汽冒出时，离开火焰。
待蒸汽消失后再次加温，加温过程中不断补加染液，持续约5分钟，然后室温下自然冷却，流水冲洗玻片上的多余染液。
3. 脱色：用3%盐酸酒精脱色，至无红色染液流下为止，流水冲洗。
4. 复染：用吕氏美蓝复染1分钟，水洗，吸干，镜检。
五、实验结果1. 在显微镜下观察，可见结核分枝杆菌呈红色，其他非抗酸菌和细胞杂质被染成蓝色。
2. 与金黄色葡萄球菌对照，金黄色葡萄球菌呈蓝色，而结核分枝杆菌呈红色。
1. 抗酸染色是诊断结核病的重要方法之一，通过观察结核分枝杆菌的形态和染色特性，可以初步判断是否存在结核分枝杆菌感染。
2. 在实验过程中，加热和脱色是关键步骤，需要严格控制时间和温度，以确保实验结果的准确性。
3. 本实验结果表明，结核分枝杆菌对石炭酸复红染液具有抗酸性，而金黄色葡萄球菌则不具有抗酸性。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了抗酸染色的原理和操作步骤，熟悉了结核分枝杆菌的形态和染色特性。
痰抗酸染色法实验报告
痰抗酸染色法实验报告
引言：
结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病，在全球范围内都有一定的感染率。
痰液中的结核分枝杆菌是结核病的主要致病因素，因此及早检测结核菌的存在对于疾病的预防与治疗都具有重要意义。
本实验通过痰抗酸染色法，对痰液样本中的结核分枝杆菌进行检测。
实验器材与试剂：
1. 应用气浮式石英炉
2. 血涂片镜片
3. 尼氏染色液
4. 碘酒
5. 脱色液
6. 新精巫微机控制带状电热器
7. 灭菌显微盖片
8. 生化气体培养蓄压针
实验步骤：
1. 首先，将痰液样本加热至80°C，保持30分钟，以杀灭其中的非结核分枝杆菌。
2. 用无菌无毒玻璃棒将痰液涂抹于血涂片上。
3. 放置血涂片于加热石英炉中，以100°C加热5分钟，以使细菌附着于玻璃片上。
4. 将玻璃片放入尼氏染色液中浸泡10分钟。
5. 将玻璃片除去超出染色液的部分后，放入碘酒中浸泡1-2分钟。
6. 用脱色液冲洗玻璃片2-3次。
7. 吹干玻璃片表面的液体，然后在显微镜下观察。
实验结果及分析：
通过显微镜观察，在痰液样本中，我观察到许多红色染色的结核分枝杆菌。
根据这些结构的形态特点以及对病原学、生理学的综合判断，可以确定这些结构确实是结核分枝杆菌。
结论：
本实验通过痰抗酸染色法，成功检测到痰液样本中的结核分枝杆菌。
该实验方法简单、方便且准确，可用于临床检测及结核病的诊断。
抗酸染色镜检结果分级报告标准
抗酸染色镜检是临床上常用的一种检测方法，特别是在结核病等疾病的诊断和治疗过程中。
为了更好地标准化抗酸染色镜检结果的分级报告，本文对抗酸染色镜检结果的分级报告标准进行了详细的介绍和解释，旨在提高抗酸染色镜检结果的准确性和可重复性。
二、抗酸染色镜检结果分级报告标准
1. 阳性：在高倍镜下观察到结核分枝杆菌，可分为以下几级：
（1）+：观察到1-9个结核分枝杆菌；
（2）++：观察到10-99个结核分枝杆菌；
（3）+++：观察到100个以上的结核分枝杆菌。
2. 阴性：未观察到结核分枝杆菌。
3. 不确定：在高倍镜下有一些异常的结构，但不能确定是否为结核分枝杆菌。
如果有疑问，应该继续观察或进行其他检测，以明确结果。
三、结论
本文对抗酸染色镜检结果的分级报告标准进行了详细的介绍和
解释，旨在提高抗酸染色镜检结果的准确性和可重复性。
在实际应用中，应该严格按照标准进行操作和报告，以保证检测结果的可信性。
- 1 -。
结核分枝杆菌的抗酸染色原理
结核分枝杆菌是一种革兰氏阳性杆菌，可以通过抗酸染色方法进行检测。
抗酸染色是一种特殊的染色方法，主要用于检测酸性杆菌，如结核分枝杆菌、炭疽杆菌等。
抗酸染色的原理是利用染色剂（如石蜡油、丙酮、苏木精、乙醇等）使细胞壁的脂质层变性，从而使细胞内的染色体暴露出来。
然后，在酸性条件下使用胶体染料如苏木精、甲基蓝和石蕊红等，这些胶体染料能够与细胞内的染色体结合，使其呈现出红色或蓝色。
对于结核分枝杆菌来说，由于其细胞壁中含有非常高比例的脂质，因此在抗酸染色中会呈现出红色或者粉红色，而其他细菌则会呈现出不同的颜色。
这种抗酸染色法可以快速准确地检测结核分枝杆菌的存在，是结核病的诊断标准。
需要注意的是，抗酸染色并不是100%准确的，因为有些非结核分枝杆菌也可以呈现出抗酸染色阳性。
因此，在临床上需要配合其他检测方法，如培养和PCR 等，以确定结核分枝杆菌的存在。
抗酸染色液说明书
【产品名称】
抗酸染色液
【包装规格】
货号：DM0035
单瓶包装规格分别为：20ml、100ml、250ml、500ml、5000ml；
每套/盒包装规格分别为： 3×20ml/盒、3×100ml/盒、3×250ml/盒、3×500ml/盒。
【预期用途】
用于分枝杆菌、诺卡菌等抗酸性菌的涂片染色。
【检验原理】
本染色方法系在参照世界卫生组织(WHO)所推荐的标准Ziehl-Neelsen法进行改良的，主要用于对结核杆菌等抗酸性菌的化学染色，抗酸染色有两种常用方法：①碱性复红法又称萋-尼氏(Ziehl-Neelsen)法；
②荧光染料金胺O法(也称金胺罗丹明法)。
本染色液采用的是改良碱性复红法，可以不用加温，属于Kinyoun 冷染色法，无需加热，相对较抗酸热染液安全，其染色原理是在室温条件下分枝菌酸与复红结合成复合物，经亚甲蓝复染后分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
结核菌、麻疯杆菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层类脂或脂质之皮膜而不易着色，但一经着色后经酸性乙醇的作用亦是不容易把它脱色，利用此特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸性乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色),也就易于鉴别。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、石碳酸复红染色液苯酚、品红
2、酸性乙醇脱色液盐酸、乙醇
3、亚甲蓝染色液亚甲蓝
【储存条件及有效期】
5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
挑取痰标本中干酪样、脓样或可疑部份，于玻片正面均匀涂抹卵圆形痰膜，自然干燥，染色前加热固定。
【检验方法】
1、挑取待检样本，涂布于载玻片上，自然干燥或火焰固定；
2、滴加石碳酸复红染色液盖满玻片，染色；
3、无需加热，流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水；
4、自玻片边缘滴加酸性乙醇脱色液盖满玻片，脱色，如有必要，需流水洗去酸性乙醇脱色液，再次脱色至无红色为止；
5、流水自玻片一端轻缓冲洗，沥去玻片上剩余的水；
6、滴加亚甲蓝染色液，染色，流水自玻片一端轻轻冲洗，沥去玻片上剩余的水，待玻片干燥后镜检(一张染色合格的玻片，痰膜肉眼观察为亮蓝色，无红色斑块)。
【检验方法的局限性】
仅限用于抗酸性菌的染色。
【注意事项】
1、用油镜观察时，禁止使用香柏油，必须使用显微镜专用的镜油(Immersion oil)。
2、酸性乙醇脱色液不够用时，可自制5%盐酸乙醇溶液替代。
3、冬季室温过低时，染色时间要适当延长。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。
