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抗酸染色一、原理本试剂盒采用WHO推荐的Ziehl-Neelsen法分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。
但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色。
齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用盐酸酒精处理也不脱色。
当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
二、试剂石碳酸复红染液、酸性酒精溶液、亚甲蓝溶液三、方法1.涂片：参见各标本操作程序涂片，涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，但勿靠近火焰2.固定：常用高温进行固定。
即手持载玻片一端，标本面朝上，在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次，共约3~4秒。
要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜，放置待冷后染色3.染色3.1 滴加石碳酸复红染液盖满玻片，染色10分钟或更久，无需加温3.2 流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水3.3 滴加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色1-2分钟，如有必要，需流水冲去溶液后，再次脱色至痰膜无可视红色为止3.4 流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水3.5 滴加亚甲蓝溶液，染色30秒钟3.6 流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水，待玻片干燥后镜检3.7 一张染色合格的玻片，痰膜肉眼观察为亮蓝色，无红色斑块四、结果判定1.干燥后油镜观察300个视野（观察时间不少于4min），抗酸性细菌呈红色，其它细菌或细胞呈蓝色2. 报告方式2.1 未找到抗酸杆菌2.2 找到抗酸杆菌±：可疑，发现抗酸杆菌1-2条/300视野2.3 找到抗酸杆菌1+：发现抗酸杆菌3-9条/100视野2.4 找到抗酸杆菌2+：发现抗酸杆菌1-9条/10视野2.5 找到抗酸杆菌3+:发现抗酸杆菌1-9条/1视野2.6 找到抗酸杆菌4+：发现抗酸杆菌≥10条/1视野五、注意事项1.每一玻片只能涂一份标本，以防脱落混淆2. 脱色时间需根据涂片厚薄而定，厚片可适当延长，以无红色脱出为止3. 冬季室温过低时，染色时间要适当延长4. 有时同一个抗菌体上红色深浅也有不同，观察时应注意5. 每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发，储存时应避免高、低温及阳光照射6. 在涂抹痰标本时，严禁对玻片加热7. 染色时勿使玻片上的染液干燥六、临床意义分支杆菌属（结核分支杆菌、麻风分枝杆菌、非典型分支杆菌）、放线菌抗酸染色阳性，可初步鉴定细菌。
Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2020Dec 31(23)肺结核是由于患者感染结核分枝杆菌所引起的慢性传染性疾病,目前对肺结核主要的辅助诊断方式包括结核分枝杆菌培养、结核菌素试验、涂片抗酸染色检查、常规聚合酶链反应检测和其他实验室检查,这些方式在诊断肺结核疾病中具有重要诊断价值,但也存在着较多不足,如痰培养周期较长、结核菌素实验易受到患者免疫力因素等影响或者部分检测方法的检测标本不易获得,这些不足一定程度上限制其应用于肺结核辅助诊断[1,2]。
T-SPOT.TB 是根据感染结核杆菌后体内T 细胞诱导出γ干扰素释放反应而设计的检查方式,可准确检测出机体内是否含有对结核分枝杆菌反应的特异性效应T 细胞,对肺结核具有较高的诊断价值[3],但目前缺少关于T-SPOT.TB 与痰涂片抗酸染色技术诊断肺结核效能比较的研究与报道,鉴于此本研究通过将77例高度疑似肺结核患者作为研究对象,旨在分析T-SPOT.TB 与痰涂片抗酸染色技术诊断肺结核灵敏度、特异度、准确度的差异,及其对不同年龄患者的检验效能。
道如下。
1资料与方法1.1一般资料选取2018年1月~2020年4月我院收治的高度疑似肺结核患者77例,其中男40例、女37例;年龄29~69(49.24±3.51)岁。
纳入标准:(1)经患者临床常规检查及患者临床表现初诊为高度疑似肺结核;(2)无身体其他组织器官严重损伤;(3)患者及家属均知情同意,且签署知情同意书;排除标准:(1)认知障碍或者精神疾病患者;(2)临床资料缺损;(3)妊娠期或哺乳期女性。
本研究经我院医学伦理委员会审核批准。
1.2方法所有患者均接受T-SPOT.TB 与痰涂片抗酸染色技术及其他帮助临床最终诊断的检查如胸部X 线检查、结核分枝杆菌培养等。
T-SPOT.TB :所用试剂盒购自上饶美康盛德医学检验所,取患者静脉血5ml ,混入肝素抗凝摇匀,培养于结核特异抗原靶蛋白A 管、非特异性从健康元植物雪球凝集素B 管和空白对照C 管,离心后对单个核细胞进行洗涤并计数,混合抗原加入到抗γ-干扰素的反应孔,孵育后洗涤并加标记二抗,最后加染色液干燥后镜下记录每个反应孔中酶联斑点数,当C <0.5时,若A-C/B-C ≥0.16判为阳性,否则为阴性;当0.5≤C ≤2.5时,若A-C ≥1.5判为阳性,否则为阴性。
肺结核病人的护理张荣结核病是由结核分支杆菌感染所致的传染病，全身各脏器都可受累，以肺结核最为常见，最近几年本病的发病呈增加趋势。
肺结核是呼吸系统传染病，由于结核菌侵犯肺组织所致。
传染源为病人和带菌者，主要过呼吸道传播。
是国人咯血的常见原因。
1.病因结核分枝杆菌①染色：涂片抗酸染色（+）；②分型：分枝杆菌有人、牛、鼠、非洲型，致病主要人型及少数牛型；③培育：生长缓慢，培育需2～8 周才长出菌落；④抵抗力：对外界环境抵抗力强，完全灭菌-焚烧痰纸。
2.机制人感染结核菌后是不是发病决定于结核菌数量、毒力、机体免疫力及变态反映。
肺结核类型一、原发型肺结核(Ⅰ型)：为原发结核感染引发的临床病征。
包括原发综合征及胸内淋巴结结核。
并发淋巴结支气管瘘时，如淋巴结肿大比较显著，两肺内只有较少的播散性病变时，仍归本型。
二、血行播散型肺结核(Ⅱ型)：包括急性血行播散型肺结核(急性粟粒型结核)及亚急性、慢性血行播散型肺结核。
三、浸润型肺结核(Ⅲ型)：是继发型肺结核的主要类型。
肺部有渗出、浸润及/或不同程度的干酪样病变。
可见空洞形成。
干酪性肺炎和结核球也属于本型。
四、慢性纤维空洞型肺结核(Ⅳ型)：是继发型肺结核的慢性类型。
常伴有较普遍的支气管播散性病变及明显的胸膜增厚。
肺组织破坏常较显著，伴有纤维组织明显增生而造成患处肺部组织收缩和纵隔、肺内的牵拉移位，临近肺组织常呈代偿性肺气肿。
五、结核性胸膜炎(Ⅴ型)：临床上已排除其他原因引发的胸膜炎。
临床表现：一、全身症状：全身毒性症状表现为午后低热、乏力、食欲减退，体重减轻、盗汗等。
当肺部病灶急剧进展播散时，可有高热，妇女可有月经失调或闭经、。
二、呼吸系统：一般有干咳或只有少量粘液。
伴继发感染时，痰呈粘液性或脓性。
约1／3病人有不同程度的咯血。
当炎症波及壁层胸膜时，相应胸壁有刺痛，一般并不剧烈，随呼吸和咳嗽而加重。
慢性重症肺结核，呼吸功能减慢，出现呼吸困难。
实验室和其他检查：一、结核菌检查痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据。
免疫荧光染色与传统抗酸染色在肺结核病理诊断中的应用分析摘要：背景：肺结核是一种由结核分枝杆菌感染引起的呼吸系统传染病，发病率和死亡率均居于传染类疾病第二位。
目前对于肺结核的病理诊断方法主要有传统的抗酸染色和新兴的免疫荧光染色，不同的方法各有其优缺点。
目的：探讨免疫荧光染色与传统抗酸染色在肺结核病理诊断中的应用价值，得出最适合于病理实验室的抗酸杆菌检测方法。
方法：收集2021年8月至2022年8月在眉山市中医医院就诊时临床怀疑为肺结核的病人进行肺穿刺且组织学诊断为肉芽肿性炎伴干酪样坏死的组织学标本183例，每例由科室技术老师按标准操作制作两张切片后分别进行传统抗酸染色和免疫荧光染色，比较两种方法的镜检表现和阳性检出率。
结果：结核分支杆菌在免疫荧光染色法时镜检更清晰，阳性检出率更高。
关键词：肺结核；免疫荧光染色；抗酸染色；病理诊断结核病已经成为我国重大的传染病之一，是严重危害人类健康的呼吸道传播疾病。
据WHO的数据统计报告,我国不仅仅是世界范围内22个结核病流行最严重国家之一，同时也是27个耐结核病药物流行严重的国家之一。
目前,我国结核病的年发病人数高达130万，约占全球发病人数的14.3%，位居全球的第二位。
因此，结核病已经成为我国危害人们健康最严重的呼吸道传染病[1]。
因此积极诊治肺结核，预防其传播和流行具有重大意义，而准确的诊断肺结核是临床进行有效抗结核治疗的基础和前提。
在病理诊断中，肺结核的确诊依靠肺组织学标本进行抗酸染色找到确切结核分枝杆菌,但其阳性率低，易漏诊误诊,目前科室新开展了免疫荧光染色来辅助诊断抗酸杆菌，我们有必要进行相关的对比实验,分析两种方法的优缺点,找到最佳实验方法，提高抗酸分枝杆菌检出率及病理诊断的准确率,指导临床合理用药和精准治疗,争取消除肺结核,保障广大人民群的生活质量。
1 资料与方法1.1一般资料参与研究的对象为2021年8月至2022年8月眉山市中医医院就诊时临床怀疑为肺结核的病人进行肺穿刺且组织学诊断为肉芽肿性炎伴干酪样坏死的组织学标本183例。
结核分枝杆菌痰培养方法结核病是一种大家较为熟知的慢性传染性疾病，由结核分枝杆菌感染引起。
可通过空气传播，且感染剂量很低，人吸入很少的结核分枝杆菌即可引起感染。
该疾病会在任何年龄发病，而免疫力低下的患者更容易感染结核分枝杆菌。
近年来，随着艾滋病发病率的增加，耐药性结核分枝杆菌的出现，吸毒人群的增多以及免疫抑制剂的应用等，我国结核病发病率仍然较高。
结核病已成为威胁人类健康的全球性的严重的公共卫生问题。
如何知道自己得了结核病呢？当人体感染结核杆菌后，因感染的部位不同，会出现不同的临床症状。
例如肺结核患者主要会表现出咳嗽，咳痰，咯血，胸痛，低烧，盗汗，乏力等一些呼吸道疾病症状。
而感染肾脏时，患者会出现尿急，尿痛，血尿等泌尿系统症状。
大部分患者感染结核杆菌后会出现不同程度的低热，盗汗，虚弱等等。
当人体出现以上症状时，即可高度怀疑为结核病。
出现自觉症状后，就医后医生首先会建议患者进行影像学诊断，以此来确定结核分枝杆菌感染的脏器部位，同时也会进行体液培养来进一步确定患者是否感染了结核杆菌，通常会采取患者的痰液来进行检验。
让我们进一步来了解一下吧。
一、什么是结核杆菌？结核杆菌即为结核分枝杆菌。
它是引起结核病的病原体，而结核杆菌是一种较为古老的细菌，早在4500年前的古埃及，人们就已经发现了这种细菌的存在。
古代时大家将肺结核患者称为肺痨患者。
在1882年，该病菌由一名德国的细菌学家郭霍发现后，才被正式命名为结核菌。
结核分枝杆菌是一类专性需氧菌，它生长较为缓慢。
对干燥，冷，酸碱等抵抗力非常的强，在紫外线的照射下，痰液中的结核杆菌需要经过六个小时左右才会被彻底杀死。
目前痰培养是确定结核杆菌感染的主要检查项目，经过痰液培养分离细菌可以发现，结核分枝杆菌革兰染色不易着色，需用特殊染色方法荧光染色或萋—尼抗酸染色。
经抗酸染色后菌体为红色细长直或略弯的杆菌，该细菌没鞭毛，无芽孢，有荚膜，多数有异染颗粒。
荧光染色、抗酸染色如图：从致病性角度分析可见，结核杆菌本身不会产生内外毒素，其致病物质主要是他的荚膜、脂质以及蛋白质。
抗酸染色液说明【产品名称】通用名称：抗酸染色液【包装规格】100ml*2/盒、250ml*2/盒、500ml*2/盒【预期用途】抗酸染色液用于分枝杆菌、诺卡菌等细菌抗酸染色，包括荧光染色。
【检验原理】结核菌、麻疯杆菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层类脂或脂质之皮膜而不易着色，但一经着色后，酸性酒精的作用亦是不容易把它脱色。
利用此特性并以增强的染色液予以染色，然后再以酸性酒精加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)，也就易于鉴别。
【主要组成成份】试剂组成：抗酸染色液包括石碳酸复红染色液、亚甲基蓝染色液。
【贮存条件及有效期】有效期：未开封试剂有效期为24个月。
贮存条件：本试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的5~30℃室温环境。
【样本要求】待检标本应为菌株或有菌株的标本。
【检验方法】涂片经固定水洗后或石蜡切片脱蜡水洗后：1、将石碳酸复红染色液滴加于切片上，然后在微火加热至有蒸汽出现，水洗；2、用0.5%盐酸酒精分化至无红色染料脱落，水洗；3、亚甲基蓝染色液作对比染色20～60秒，水洗；4、酒精脱水，二甲苯透明、中性胶封固、镜检。
【检验结果的解释】抗酸杆菌呈红色，其他组织呈浅蓝色。
【检验方法的局限性】有些细菌有染色嗜变性，不一定完全是染色原因，应根据菌体形态加以确定。
【注意事项】1.该该染色液仅用于体外诊断。
2.涂片厚薄要均匀，自然干燥后再加热固定。
3.试剂贮存时，尽量避免高温及光亮环境，以免影响品质和效果。
标示有效期过后，请不要使用。
4.本品应由专业人士使用及进行结果的判断。
5.所用标本应视为具有传染性物质。
改良抗酸染色法在检测痰结核分枝杆菌中的应用李玉雪;柳晓金;王薇;范蓉;安翠平【摘要】目的比较痰涂片传统抗酸染色、改良抗酸染色、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术四种方法检测痰中结核分枝杆菌对于肺结核的诊断价值.方法 207例确诊结核患者和145例其他肺部感染患者的痰液,分别用痰涂片传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养及Xpert MTB/RIF技术检测抗酸杆菌,比较四种方法的灵敏度及特异性.结果痰涂片传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术检测痰中结核分枝杆菌的敏感度分别为20.3％、59.9％、55.6％和69.1％;特异性分别为99.3％、99.3％、100％和99.3％.结论与传统抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术相比,改良抗酸染色法具有简单、快速、敏感性高、特异性强和成本低廉等优点,是临床肺结核快速诊断的有效检测方法,值得基层实验室推广.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2018(025)007【总页数】4页(P1070-1073)【关键词】改良抗酸染色法;结核分枝杆菌;检测方法【作者】李玉雪;柳晓金;王薇;范蓉;安翠平【作者单位】石家庄市第一医院检验科,河北石家庄050011;石家庄市第五医院感染科,河北石家庄050021;石家庄市第一医院检验科,河北石家庄050011;石家庄市第一医院检验科,河北石家庄050011;石家庄市第一医院检验科,河北石家庄050011【正文语种】中文肺结核是由结核分枝杆菌（MTB）主要经呼吸道传播引起的慢性传染病。
据2010年全国第5次结核病流行病学抽样调查结果显示，全国活动性肺结核患者高达499万例，每年新发结核患者约100万例［1］。
实验室检查为结核病的早期诊断提供病原学依据。
抗酸染色镜检结果分级报告标准
抗酸染色（Acid-faststaining，AFS）是一种常用的细菌检测方法，尤其适用于结核菌的检测。
在临床诊断中，上呼吸道分枝杆菌、非结核分枝杆菌、耐药结核菌等也常使用抗酸染色进行检测。
因此，对抗酸染色镜检结果的分级报告标准具有重要意义。
二、分级标准
根据抗酸染色镜检结果的细胞数目和染色程度，可将结果分为以下4个级别：
1. 阴性：未见抗酸杆菌。
2. 弱阳性：在400个视野内发现1-9个抗酸杆菌。
3. 中阳性：在400个视野内发现10-99个抗酸杆菌。
4. 强阳性：在400个视野内发现≥100个抗酸杆菌。
三、注意事项
1. 在镜检过程中，应保证充分染色和清晰的视野，避免误判。
2. 镜检结果应与临床表现相结合，进行综合分析。
3. 鉴别分枝杆菌和结核分枝杆菌需要进一步进行生化和分子生物学检测。
4. 对于弱阳性和中阳性结果，建议进行复查和增加样本量，以提高检测准确性。
四、总结
抗酸染色镜检是一种快速、简便、经济的检测方法，适用于各种细菌的检测。
合理的分级报告标准有助于指导临床诊断和治疗，提高
检测准确性和阳性率。
痰抗酸染色法实验报告
痰抗酸染色法实验报告
引言：
结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病，在全球范围内都有一定的感染率。
痰液中的结核分枝杆菌是结核病的主要致病因素，因此及早检测结核菌的存在对于疾病的预防与治疗都具有重要意义。
本实验通过痰抗酸染色法，对痰液样本中的结核分枝杆菌进行检测。
实验器材与试剂：
1. 应用气浮式石英炉
2. 血涂片镜片
3. 尼氏染色液
4. 碘酒
5. 脱色液
6. 新精巫微机控制带状电热器
7. 灭菌显微盖片
8. 生化气体培养蓄压针
实验步骤：
1. 首先，将痰液样本加热至80°C，保持30分钟，以杀灭其中的非结核分枝杆菌。
2. 用无菌无毒玻璃棒将痰液涂抹于血涂片上。
3. 放置血涂片于加热石英炉中，以100°C加热5分钟，以使细菌附着于玻璃片上。
4. 将玻璃片放入尼氏染色液中浸泡10分钟。
5. 将玻璃片除去超出染色液的部分后，放入碘酒中浸泡1-2分钟。
6. 用脱色液冲洗玻璃片2-3次。
7. 吹干玻璃片表面的液体，然后在显微镜下观察。
实验结果及分析：
通过显微镜观察，在痰液样本中，我观察到许多红色染色的结核分枝杆菌。
根据这些结构的形态特点以及对病原学、生理学的综合判断，可以确定这些结构确实是结核分枝杆菌。
结论：
本实验通过痰抗酸染色法，成功检测到痰液样本中的结核分枝杆菌。
该实验方法简单、方便且准确，可用于临床检测及结核病的诊断。
结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用目的建立结核分枝杆菌的荧光定量PCR检测方法,探讨荧光PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。
方法根据结核分枝杆菌基因保守序列设计引物和探针，并构建标准品。
对102例培养涂阳的结核痰液标本和45例非结核感染者的痰标本，应用荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌。
结果荧光定量PCR、抗酸染色法检测结核分枝杆菌的特异性分别为100%、30%。
结论荧光定量PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有重要的应用价值。
【关键词】结核;分枝杆菌;抗酸染色;荧光定量PCREstablishment and application of fluorescence quantitative PCR for detection of Mycobacterium tuberculosis.ZHU Yu-lan, WANG Dian-peng, GAO Zhao-xian, et al.International Travel Agency Health Care Center, Shenzhen Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau,Shenzhen 518033, Guangdong, P. R. ChinaAbstract：Objective To constitute a method for detection of Mycobacterium tuberculosis by fluorescence quantitative PCR and evaluate the application value of fluorescence quantitative PCR in detection of Mycobacterium tuberculosis in sputum. Methods The primers and probe were designed and constitute a standards. The suptum samples from 102 tuberculosis patients and 45 non-tuberculosis patients were detected by fluorescence quantitative PCR and acid-fast stain. Results The positive rates and specificity of fluorescence quantitative PCR, acid-fast stain,were100% and 30% respectively. Conclusion Fluorescence quantitative PCR is a rapid method for diagnosis of tuberculosis, which shows a high specificity and sensitivity. It is a useful tool for diagnosis of tuberculosis in the future.Key words：Tuberculosis; Mycobacterium tuberculosis; Acid-fast stain; Fluorescence quantitative PCR结核病是严重危及全球的公共卫生问题之一，自1985年以来结核病疫情在全球范围内急剧上升，据世界卫生组织报道，目前全球有近1/3的人感染了结核杆菌，即20亿人口感染了结核杆菌，其中活动性肺结核病人约2 000万，每年新增结核病人约800～1 000万，每年约有300万人死于结核病［1～3］。
抗酸染色步骤及注意事项制片：（1）涂片：左手持菌液试管，右手持接种环，用接种环从试管培养液中取一环菌，于载玻片中央涂成薄层（事先在背面做好标记圆圈）即可，或先滴一小滴无菌水于载玻片中央，用接种环从斜面上挑出少许，与载玻片上的水滴混合均匀，涂成一薄层。
拔或塞试管塞时，应将试管口通过火焰略加烧灼，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
（2）干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，但勿靠近火焰。
（3）固定：常用高温进行固定。
即手持载玻片一端，标本面朝上，在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次，共约3~4秒。
要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜，放置待冷后染色。
染色：（1）初染：滴加石炭酸复红溶液2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热5分钟，待标本冷却后用水冲洗。
（2）脱色：（3）复染：用碱性美兰溶液复染1分钟，水洗，用吸水纸吸干后用油镜观察: 1、油不要滴太多2、在调节焦距的时候要特别注意与载玻片之间的距离不要弄坏工具3、调节时应该从下往上调节4、在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。
5、用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。
如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→油镜程序。
在加油区内重找应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。
6、油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去，然后再用干擦镜纸擦干净。
结果判定:1.干燥后油镜观察300个视野（观察时间不少于4min），抗酸性细菌呈红色，其它细菌或细胞呈蓝色2. 报告方式2.1 未找到抗酸杆菌2.2 找到抗酸杆菌±：可疑，发现抗酸杆菌1-2条/300视野2.3 找到抗酸杆菌1+：发现抗酸杆菌3-9条/100视野2.4 找到抗酸杆菌2+：发现抗酸杆菌1-9条/10视野2.5 找到抗酸杆菌3+:发现抗酸杆菌1-9条/1视野2.6 找到抗酸杆菌4+：发现抗酸杆菌≥10条/1视野质量控制：每次用卡介苗做阳性对照大肠埃希菌ATCC25922做阴性对照注意事项：1.每一玻片只能涂一份标本，以防脱落混淆2. 脱色时间需根据涂片厚薄而定，厚片可适当延长，以无红色脱出为止3. 冬季室温过低时，染色时间要适当延长4. 有时同一个抗菌体上红色深浅也有不同，观察时应注意5. 每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发，储存时应避免高、低温及阳光照射6. 在涂抹痰标本时，严禁对玻片加热7. 染色时勿使玻片上的染液干燥临床意义：分支杆菌属（结核分支杆菌、麻风分枝杆菌、非典型分支杆菌）、放线菌抗酸染色阳性，可初步鉴定细菌。
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版本号：161214
抗酸染色液(Kinyoun 冷染法)
【产品组成】
【保存条件】
室温,避光,12个月
【产品概述】
分枝杆菌的细胞壁内含有大量脂质包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般丌易着色。
传统的染色方法要经过加热和延长染色时间来促使其着色。
分枝杆菌中的分枝菌酸不染料一旦结合后，就很难被酸性脱色液脱色，故名抗酸染色。
其中最具代表性是结核杆菌Ziehl －Neelsen 染色法，该法是WHO 推荐热染的方法。
抗酸染色液(Kinyoun 冷染法)属于冷染色液，无需加热，相对较抗酸热染液安全。
其染色原理是在室温条件下，分枝菌酸不复红结合成复合物，经亚甲蓝复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
该染色法较改良Kinyoun 冷染法要深，更适用于常规抗酸染色，推荐该Kinyoun 冷染法作为实验室或临床上标准抗酸染色法。
【使用方法】
1、接种环挑取待检样本，涂布于载玻片上，自然干燥。
2、滴加Kinyoun 复红染色液，染色5～10min 。
3、不必加热，蒸馏水冲洗。
4、用Kinyoun 脱色液脱色至无红色为止。
5、蒸馏水冲洗。
6、用亚甲蓝染色液染色30～60s 。
7、蒸馏水冲洗。
8、轻轻吸干水分，自然干燥。
9、油镜镜检。
【染色结果】
【注意事项】
1、每次使用后盖紧试剂瓶，以防试剂挥发和污染。
2、上述试剂均对人体有刺激性，请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
