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药理药化收稿日期:2006-09-26; 修订日期:2006-12-26作者简介:刘建华(1977-),女(汉族),河南浚县人,现任河南农业大学牧医工程学院讲师,硕士学位,主要从事中草药活性成分物质基础研究工作.不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化活性影响的研究刘建华1,韩立强1,赵汉雨2,莫 娟1,张素梅1,潘玉善1(1.河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450002;2.河南农业大学机电工程学院,河南郑州 450002)摘要:目的研究不同提取方法对虎杖蒽醌类成分及其抗氧化作用的影响。
方法采用回流、索氏、微波及超声四种提取方法,测定四种提取液中的游离蒽醌和总蒽醌的含量;采用DPPH ,FRAP 两种方法测定其抗氧化活性,并分析蒽醌类成分和抗氧化活性之间的关系。
结果在对游离蒽醌的测定中以索氏法为最高(0.53%),其次为超声(0.45%),各种方法之间相比差异显著(P <0.05);在对总蒽醌的测定中,结果如下:索氏(1.16%)>超声(1.15%)>微波(1.04%)>回流(0.80%);抗氧化活性测定发现,以回流液的抗氧化能力最强,其次是微波,二者与超声和索氏的相比有显著性差异(P <0.05);相关性分析发现,蒽醌的含量与抗氧化活性呈显著的负相关(P <0.01)。
结论不同提取方法影响虎杖蒽醌类成分和抗氧化活性,蒽醌类成分和抗氧化活性之间具有负相关的关系。
关键词:提取方法; 虎杖; 蒽醌; 分光光度法; 抗氧化中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2007)04-0850-03E ffect of D ifferent Extraction M et hods on t he Content of Anthroquinone Co m pound and its Antiox i d ative Activity in Polygonu m cuspidatu m Sieb .et Zucc .L I U J ian -hua 1,HAN L i -qiang 1,ZHAO H an -yu 2,M O J uan 1,ZHANG S u -m e i 1,PAN Y u -shan1(1.Engineering Colle ge of Ani m a lHusbandry and Veterinary Scie nc e ,H e nan Agricult u ralUniversity ,Zhe ngzhou 450002,China ;2.M ec han ic a l and E lectric a l Eng i n eeri n g Colle ge ,H e nan Agricultura lU niversity ,Zhe ngzhou 450002,China )Abst ract :O b jective To explore t he eff ec t of differen t ex traction m ethods on the conten t o f ant h roquinone compound and its an -tiox i dati ve ac tiv it y in Pol ygonu m cuspi da t u m S i eb .e t Zucc ..M eth o d s A n t hroqui none co m pound w as extrac t ed re s pecti ve l y by re -fl ux m ethod ,Soxhlet ex trac tion m e t hod ultrasound w ave m ethod and m icrow ave -assist ed ex tracti on .T he free and to t a l anthroqu i -none conten t and its antioxidati ve ac ti v it y w as de t e r m ined by spec tropho t om etry.T he correla tion be t w een ant hroquinone compound and anti ox i da tive activ ity wa s ana l y zed .Resu lts There w ere si gnificant difference s i n the ex tracti on conten t of free anthroquinone content a m ong t he four extracti on m e t hod sta t ed (P <0.05),Soxhlet ex trac tion me t hod w as t he h i ghest (0.53%),u ltra sound w ave m ethod w as be tter (0.45%).In t he de t e r m ina tion o f tota l an t hroquinone ,t he re s u lt w as :Soxhlet ex tracti on me t hod (1.16%)>u ltrasound wave me t hod (1.15%)m icro w ave -assisted >refl ux m ethod >ex traction .The re flux m e t hod w as be tter t han m icro -w ave -assist ed extrac ti on ,compared w it h Soxhlet ex traction me t hod and ultra s ound w ave m e t hod .T he re w e re significan t differ -ence s i n t he de ter m ination of its antiox i dan t ac tivit y (P <0.05).There w as sign ificant nega tive co rre l a tion be t ween anthroquinone compound and its anti ox i da tive acti v ity (P <0.01).Con cl u si on A nt h roquinone co m pound and antiox i dati ve acti v ity in Pol ygo -nu m cuspida t u m S ieb .e tZ ucc .w as aff ec ted by d iffe rent ex tracting me t hods ,t here wa s neg ative co rre lati on bet ween anthroquinone compound and antioxidative ac tivit y .K ey w ords :Ex tracti on m ethod ; Pol ygonu m cus pi da t um S ieb .e t Zucc .; A throquinone compound ; Spec trophotome try ; A nti ox i da tive acti v ity 虎杖系蓼科蓼属植物虎杖Polygonu m cus pi datu m S ieb .e t Zucc .的根茎和根,具有抗菌、抗病毒等广泛的治疗作用[1]。
蒽醌类化合物1.分布天然蒽醌类化合物多存在于高等植物、霉菌和地衣中，从动物中仅发现少量恩醌类化合物。
高等植物中。
茜草科植物中的蒽醌类化合物最多，芸香科、鼠李科、豆科[主要是山扇豆属（Cassia）]、蓼科[主要是大黄属（Rheum）和酸模属（Rumer）]、紫葳科、马鞭草科、玄参科[主要是毛地黄属（Digitalis）]及百合科植物中蒽醌类化合物也较多。
霉菌中一曲霉属（Aspergillus）以及青霉属（Penicillium）中蒽醌较多。
2．结构类型天然蒽醌类化合物多数是蒽醌的羟基、甲氧基和羧基衍生物。
绝大多数的天然蒽醌含羟基。
植物体内的蒽醌类化合物以游离形式或与糖苷的形式存在。
广义的蒽醌类化合物除了蒽醌衍生物外，还包括其其不同还原程度的产物，如氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮及蒽酮的二聚物。
其结构式如下：氧化蒽酚蒽酮蒽酚蒽酚、蒽酮羟基衍生物一般存在于新鲜植物中，该类成分可被逐步氧化。
2.1蒽醌衍生物蒽醌衍生物是指蒽醌的α，β位连有不同取代基的衍生物。
（一）一取代蒽醌取代基多在β位，取代基可以是甲基、羟甲基、醛基等含碳侧链，也可以是羟基、甲氧基等取代基。
少数一取代基在α位。
顶生醌（tectoquinone）来源于马鞭草科的柚木（Tectona grandis L.fil），大戟科的Acatypha india，茜草科的羊角藤（Morinda umbellate L.）等植物。
顶生醌是少数不具有羟基取代的蒽醌之一，结构式如下：R顶生醌 H2-羟甲基蒽醌 OH2-羟甲基蒽醌存在于茜草科植物百眼藤（Morinda parvifolia）根中，体外实验有细胞毒作用，体内可抗白血病。
（二）二取代蒽醌取代基主要是羟基、甲基、醛基、甲氧基等。
含碳取代基通常在β位。
已发现的二取代基蒽醌的两个取代基多数在同一个环上。
二取代蒽醌的代表化合物是茜草素（alizarin）结构如下：R茜草素 H茜素-2-甲醚 CH2（三）三取代蒽醌自然界存在较多的三取代蒽醌。
关于大黄蒽醌类化合物研究的综述中药化学课改实验科目单位：安徽中医学院班级：09中药（1）班组别：第3组成员：李明星，李友连，刘军，刘长倩，鲁守芽，庞秀秀中药化学教研组2012年6月1日关于大黄蒽醌化合物的研究李明星，李友连，刘军，刘长倩，鲁守芽，庞秀秀（09中药（1）班第三小组）[摘要]主要介绍大黄中蒽醌类化合物的药理作用、几种主要提取分离技术以及蒽醌类化合物的检识鉴定等。
[关键词]大黄；蒽醌类化合物；药理作用；提取分离技术；检识大黄为蓼科多年生草本植物掌叶大黄(Rheum palmatum L)、唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim ex Reg)或药用大黄(Rheum officinale Baill)的根和根茎,本品性寒、味苦,具有攻积导滞、泻火、凉血、活血祛淤、利胆退黄等功效[[1]，是常用中药之一。
大黄所含成分大体上可分为蒽醌类、多糖类、鞣质类、蒽酯类[2]，而蒽醌类物质是其疗效的主要组成成分，故对其研究颇多，这些蒽醌类物质主要有：大黄酸（1,8-二羟基-3-羧基蒽醌,Rhein）；大黄素（1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌，Emodin）；芦荟大黄素（1,8-二羟基-3-羟甲基蒽醌，Aloe-emodin）；大黄酸（1,8-二羟基-3-甲基蒽醌，Chrysophanol）；大黄素甲醚（1,8-二羟基-3-甲氧基-6-甲基蒽醌，Physcion）其结构式：本文将对大黄的主要有效成分蒽醌类化合物进行详细综述。
1、大黄蒽醌类化合物的药理作用及临床应用1、泻下作用。
大黄是中医中传统的泻剂之一,大黄素和番泻苷等是致泻的主要成分。
有研究表明大黄中的葱醒类衍生物具有明显的导泻作用[3]。
2、保肝利胆作用。
大黄还有利胆的作用, 增加肝胆汁流量, 促进排胆, 松弛奥狄括约肌, 结合大黄广谱的抗菌、消炎、抗毒作用, 可用于治疗胆系感染、胆石症。
大黄的利胆保肝、解毒,促进肝细胞修复,以及促进肠道对毒物的排除等作用,为治疗胆道疾患、病毒性肝炎等病症提供了药理学基础[4]。
蒽苷及醌类的品种醌类蒽苷，大黄巴番，虎决何茜，萘醌紫草，丹参酮丹。
1 大黄：①含蒽醌衍生物，有游离状态的和解离状态的，其中以结合状态者为主，游离状态者占少部分。
游离蒽醌衍生物有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素，大黄素甲醚等，为大黄的抗菌成分。
结合型蒽醌衍生物，为游离蒽醌类的葡萄糖苷、双葡萄糖苷或双蒽酮苷，为大黄的主要泻下成分，其中以双蒽酮苷最强，双蒽酮苷为番泻苷 A、B、C、D、E、F等。
②含鞣质类物质，有没食子酰葡萄糖、没食子酸、d-儿茶素，为收敛成分。
③尚含挥发油、有机酸、脂肪酸、甾醇及多种无机元素。
2 虎杖：①蒽醌化合物，以游离型为主，结合型的含量较低;游离型蒽醌有：大黄素，大黄素甲醚，大黄酚、为大黄的抗菌成分；结合型蒽醌有：大黄素、大黄素甲醚的葡萄糖苷。
②二苯乙烯类化合物：芪三酚为抗菌成分，芪三酚苷有镇咳即降血脂作用。
③鞣制及酚性化合物。
④多种多聚糖。
⑤黄酮类化合物等。
3 何首乌：①二苯乙烯苷化合物，如 2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，有抗衰老、提高免疫能力、防止动脉硬化及保肝作用。
②卵磷脂。
③蒽醌类衍生物。
主要为大黄素、大黄素甲醚、大黄酚及苷。
④鞣质。
⑤铁及锌含量较高。
4 紫草：紫草均含有多种相似的萘醌类色素并为紫草的有效成分。
这些萘醌类色素的母核均为紫草素。
其中以β，β，-二甲基丙烯酰紫草素，去氧紫草素，乙酰紫草素，β-乙酰基异戊酰阿卡宁为主要成分。
5 丹参：①脂溶性菲醌类化合物，如丹参酮Ⅰ、ⅡA、ⅢB、隐丹参酮等及其异构体。
②水溶性的酚酸类成分，如原儿茶醛，丹参酸 A、B、C、D、E、F、G,醚迭香酸等。
其中隐丹参酮是抗菌主要有效成份。
6 巴戟天：①蒽醌类化合物甲基异茜草素、甲基异茜草素-1-甲醚、大黄素-甲醚等。
②植物甾醇。
③树脂和多种氨基酸成分等。
7 茜草：①蒽醌类衍生物，如茜草素、羟基茜草素，异茜草素等。
②萘醌类衍生物，如大叶茜草素、2-氨基甲酰基-3-甲氧基1，4-萘醌等。
第四章醌类化合物醌类化合物包括醌类或容易转化为具有醌类性质的化合物，以及在生物合成方面与醌类有密切联系的化合物。
醌类化合物基本上具有αβ-不饱和酮的结构，当其分子中连有OH， OCH3等助色团时，多显示黄、红、紫等颜色。
在许多常用中药中，如大黄、虎杖、丹参、紫草等存在此类化合物，其中许多有明显的生物活性。
第一节结构与分类醌类化合物从结构上分主要有苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌等四类。
一、苯醌类苯醌类化合物从结构上可分为邻苯醌和对苯醌两大类，由于前者不稳定，故天然存在的苯醌类化合物多为对苯醌的衍生物，且醌核上多有-OH、-CH3、-OCH3等基团取代。
从中药软紫草（Arnebia euchroma）中分得的几个对前列腺素 PEG2生物合成有抑制作用的活性物质arnebinol、arnebinone等就属于对苯醌化合物。
二、萘醌类从结构上考虑可以有α（1，4），β（1，2）及amphi（2，6）三种类型。
但迄今为止自然界得到的几乎均为α-萘醌类。
萘醌类还原后即得到无色的萘氢醌，后者又可重新氧化得到萘醌，并重新显色。
许多萘醌类化合物具有明显的生物活性，如从中药紫草及软紫草中分得一系列紫草素及异紫草素衍生物，具有止血、抗炎、抗菌、抗病毒及抗癌作用，与其清热凉血的药性相符，可认为这些萘醌化合物为紫草的有效成分。
三、菲醌类天然菲醌类行生物包括邻醌及对醌两种类型。
如从中药丹参（Salvia miltionrrhiza）根中提取得到多种菲醌衍生物，其中丹参醌ⅡA 。
、丹参醌ⅡB、隐丹参醌、丹参酸甲酯、羟基丹参醌ⅡA等为邻醌类衍生物，而丹参新醌甲、丹参新醌乙、丹参新醌丙则为对醌类化合物。
丹参中菲醌类的鉴别方法是取少量样品，加浓硫酸2滴，丹参醌ⅡA显绿色，隐丹参醌显棕色。
丹参醌类成分具有抗菌及扩张冠状动脉的作用，由丹参醌ⅡA制得的丹参醌磺酸钠注射液已用于临床，用于治疗冠心病、心肌梗死。
丹参醌类结构上具有菲醌母核，但生源却属于二萜类。
第四章醌类化合物醌类化合物包括醌类或容易转化为具有醌类性质的化合物，以及在生物合成方面与醌类有密切联系的化合物。
醌类化合物基本上具有αβ-不饱和酮的结构，当其分子中连有OH， OCH3等助色团时，多显示黄、红、紫等颜色。
在许多常用中药中，如大黄、虎杖、丹参、紫草等存在此类化合物，其中许多有明显的生物活性。
第一节结构与分类醌类化合物从结构上分主要有苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌等四类。
一、苯醌类苯醌类化合物从结构上可分为邻苯醌和对苯醌两大类，由于前者不稳定，故天然存在的苯醌类化合物多为对苯醌的衍生物，且醌核上多有-OH、-CH3、-OCH3等基团取代。
从中药软紫草（Arnebia euchroma）中分得的几个对前列腺素 PEG2生物合成有抑制作用的活性物质arnebinol、arnebinone等就属于对苯醌化合物。
二、萘醌类从结构上考虑可以有α（1，4），β（1，2）及amphi（2，6）三种类型。
但迄今为止自然界得到的几乎均为α-萘醌类。
萘醌类还原后即得到无色的萘氢醌，后者又可重新氧化得到萘醌，并重新显色。
许多萘醌类化合物具有明显的生物活性，如从中药紫草及软紫草中分得一系列紫草素及异紫草素衍生物，具有止血、抗炎、抗菌、抗病毒及抗癌作用，与其清热凉血的药性相符，可认为这些萘醌化合物为紫草的有效成分。
三、菲醌类天然菲醌类行生物包括邻醌及对醌两种类型。
如从中药丹参（Salvia miltionrrhiza）根中提取得到多种菲醌衍生物，其中丹参醌ⅡA。
、丹参醌ⅡB、隐丹参醌、丹参酸甲酯、羟基丹参醌ⅡA等为邻醌类衍生物，而丹参新醌甲、丹参新醌乙、丹参新醌丙则为对醌类化合物。
丹参中菲醌类的鉴别方法是取少量样品，加浓硫酸2滴，丹参醌ⅡA显绿色，隐丹参醌显棕色。
丹参醌类成分具有抗菌及扩张冠状动脉的作用，由丹参醌ⅡA制得的丹参醌磺酸钠注射液已用于临床，用于治疗冠心病、心肌梗死。
丹参醌类结构上具有菲醌母核，但生源却属于二萜类。
2015年执业药师中药专一《醌类化合物（一）》一、结构与分类（一）苯醌类苯醌类化合物分邻苯醌，对苯醌两类。
邻苯醌不稳定故天然存在的主要为对苯醌的衍生物。
（二）萘醌类天然存在的萘醌类分为α(1，4)、β(1，2)及amphi(2，6)三种类型。
大多数是α-萘醌类衍生物，多为橙色或橙红色结晶，少数呈紫色。
（三）菲醌类天然菲醌分为邻菲醌及对菲醌两种类型，如从中药丹参根中分离得到的多种菲醌衍生物，具有抗菌和扩张冠状动脉作用。
丹参含很多菲醌类化合物（四）蒽醌类广泛存在于植物界，是许多中药的有效成分。
目前已发现近200种。
分为单蒽核和双蒽核两大类。
1．单蒽核类(1)蒽醌及苷类根据羟基在蒽醌母核的分布，可将羟基蒽醌分为两类①大黄素型羟基分布在两侧的苯环上，呈黄色，主要存在于蓼科植物中。
②茜草素型羟基分布在同一侧的苯环上，多为橙黄或橙红色，主要存在于茜草科植物中。
(2)氧化蒽酚类蒽醌在碱性溶液中被锌粉还原成氧化蒽酚及其互变异构体蒽二酚，二者均不稳定，较少存在于植物中。
(3)蒽酚或蒽酮蒽醌在酸性条件下被还原成蒽酚及其互变异构蒽酮。
蒽酚或蒽酮衍生物一般存在于新鲜植物中，在加工贮藏中会缓缓氧化为蒽醌。
储存2年以上的大黄检测不到蒽酚类成分。
2．双蒽核类(1)二蒽酮类二蒽酮类可以看成是二分子蒽酮相互结合而成的化合物，又分为中L 连接(C 10-C 10’)和Ⅱ位(C 1-C 1’或C 4-C 4’)相连。
多以苷的形式存在。
如番泻苷A，B，C，D ，能致泻。
二蒽酮类化合物C 10-C 10’，键与一般的C-C 键不同，易于断裂成相应的蒽酮类化合物，经FeCI 3氧化生成蒽醌类化合物。
(2)二蒽醌类两个蒽醌环都是相同对称的，由于空间位阻的排斥，两个葸环呈反向排列。
【A型题】例题1．大黄素型蒽醌母核上的羟基分布情况是A．在一个苯环的B位B．在两个苯环的§位C．在一个苯环的o或B位D．在两个苯环的Q或B位E．在醌环上【答案】D。
走近醌类化合物姓名：学号：专业：生物技术一．引言醌类化合物即指醌类或易转变为具醌类性质的化合物，及在生物合成方面与醌类有密切联系的化合物。
其分子中含不饱和环二酮结构（醌式结构）或具有容易转变成这样结构的部分，包括苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌等，因不饱和酮结构，醌类分子与助色团（-OH、-OMe等）连接后多显色，故常作动植物、微生物色素而广泛存在于自然界中。
诸多醌类化合物中，以蒽醌及其形成的衍生物最为重要，构成不少中药的有效成分，如蓼科大黄、何首乌、虎杖、茜草科茜草、豆科决明子、番泻叶、百合科芦荟、唇形科丹参、紫草科紫草等。
本文将对蒽醌类化合物作详细介绍，并进一步探讨其生物活性的应用前景。
关键词：醌类化合物、环二酮结构、蒽醌类化合物、紫外光谱、红外光谱、质谱、1H-NMR二．蒽醌类化合物结构类型1. 单蒽核类1.1. 蒽醌及其苷类天然蒽醌以9，10－蒽醌最为常见，其C-9、C-10为最高氧化状态，较为稳定。
根据羟基在蒽醌母核的分布，可将羟基总醌分为两类。
1.1.1. 大黄素型此类蒽醌其羟基分布于两侧的苯环上，多数化合物呈黄色。
1.1.2. 茜素型这一类蒽醌的所有羟基均分布于苯环一侧。
1.2. 氧化蒽酚衍生物蒽醌在碱性溶液中可被锌粉还原生成氧化蒽酚及其互变异构体蒽二酚，二者均不稳定易氧化。
1.3. 蒽酚或蒽酮衍生物蒽酮在酸性溶液中被还原或氧化，生成蒽酚及互变异构体蒽酮。
1.4. C-糖基蒽衍生物这类蒽衍生物是以糖作为侧链通过碳－碳键直接与苷元相连而成。
2.双蒽核类2.1. 二蒽酮类衍生物即二分子蒽酮脱去一分子氢后相互结合而成的化合物，其上下两环的结构相同且对称，又可分为中位连接体和α位连接体等形式。
2.2. 二蒽醌蒽醌类脱氢缩合或二蒽酮类氧化均可形成二蒽醌类。
天然二蒽醌类中两个蒽醌环都是相同且对称的，呈反向排列。
三．蒽醌类化合物理化特征1. 化学性质1.1. 酸性蒽醌类衍生物多具酚羟基，呈酸性，易溶于碱性溶剂。
实验四大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定一、概述植物来源：大黄系蓼科植物掌叶大黄(Rheum palmatum L．)、唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim. ex Balf．)或药用大黄(Rheum offcinale Baill．)的干燥根及根茎。
大黄记载于《神农本草经》等许多文献中，具有泻下、健胃、清热解毒等功效。
自古以来，大黄在植物性泻下药中占有重要位置，是一味很早就被各国药典收载的世界性药材。
功效：大黄具有多方面的生物活性，其抗菌、抗感染及抗肿瘤活性有效成分主要为蒽醌类衍生物，如：大黄酸、大黄素和芦荟大黄素；止血的主要有效成分为大黄酚；泻下的有效成分是结合型的蒽苷类。
蒽醌类衍生物占大黄总化学成分的3％～5％，该类成分少部分以游离状态存在，大部分与葡萄糖结合成苷的形式存在。
此外，大黄还含有鞣质等多元酚类化合物，含量在10％一30％之间，具止泻作用，与蒽苷的泻下作用恰恰相反。
主要化学成分的结构及物理性质大黄中含有多种游离的羟基蒽醌及其与糖所形成的苷类化合物，已知的游离羟基蒽醌主要有以下5种化合物。
大黄酸(rhein)，C15H806，黄色针晶，m.p321—322℃(330℃分解)，UVλmax431，258，231，204。
可溶于碱水，微溶于乙醇、苯、三氯甲烷、乙醚和石油醚，不溶于水。
大黄素(emodin)，C15H1005，橙黄色针晶(乙醇)，m.p256—257℃。
UVλmax436，289，266，253，222。
可溶于碱水，微溶于乙醚、三氯甲烷，不溶于水。
芦荟大黄素(aloe emodin)，橙色针晶(甲苯)，m.p223～224℃。
UVλmax429，287，254，225，202。
可溶于乙醚、苯及碱水，不溶于水。
大黄素甲醚(physcion)，砖红色单斜针状结晶(苯)，m.p205—207℃。
溶于苯、三氯甲烷及甲苯，不溶于甲醇、乙醇、乙醚和丙酮，不溶于水。
蒽及醌类成分分析摘要: 综述蒽醌类化合物的测定方法的最新进展，包括荧光分析法、分光光度法、高效液相色谱法(HPLC) 、毛细管电泳法(CE)、质谱联用法等，举例证明了每种分析方法的特点，为富含蒽醌类成分的药材和制剂的质量评价提供参考。
关键词: 蒽醌类荧光分析法分光光度法HPLC CE 质谱联用法醌类化合物[1,2]是天然产物中一类比较重要的活性成分，是指分子内具有不饱和环二酮(醌式结构)或容易转变成这样结构的天然有机化合物。
醌类化合物主要包括苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌等类型；蒽醌类成分包括蒽醌衍生物及其不同程度的还原产物，例如氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮以及蒽酮的双聚物等。
蒽醌类化合物一般为黄色、橙色或红色，许多蒽醌类化合物具有生理活性。
蒽醌类化合物大致分布在30余科的高等植物中，含量较多的有蓼科、鼠李科、茜草科、豆科、百合科、玄参科等，在地衣类和真菌中也有发现。
各种蒽醌及其苷都具有多方面的生物活性, 主要表现为降血脂、降胆固醇、利尿、抗氧化、抗过氧化等重要作用。
但是蒽醌类化合物也有多种毒性作用, 主要引起胃肠的各种不适, 严重的可能会导致胃肠出血、呼吸困难、心悸和流体损耗。
因此各种类型中成药、保健品中蒽醌类物质的质量控制十分重要。
目前分析蒽醌类成分含量的方法有荧光分析法、分光光度法、高效液相色谱法(HPLC) 、毛细管电泳法(CE)、质谱联用法等, 本文就其进展进行概述。
1、荧光分析法荧光分析法是材料元素分析的一种方法，它是利用一定波长的x射线照射材料，元素处于激发态，从而产激发出光子，形成一种荧光x射线。
由于不同元素的激发态的能量大小不一样，所以产生的荧光x射线不同，进而根据荧光x射线的波长和强度，得出元素的种类和含量。
物质的相对荧光光谱可作为定性和定量分析的重要手段, 蒽醌类属于多环芳烃,有较强的荧光。
荧光分析法的灵敏度高、选择性好、专属性强、信息量丰富、检测限低等优点, 已被广泛用于药物的测定工作。
物质的相对荧光光谱可作为定性和定量分析的重要手段, 蒽醌类属于多环芳烃, 有较强的荧光。
相对于经典荧光法, 同步荧光法在提高选择性和灵敏度等方面均有显著效果,更适合于混合物的直接分析。
陈伟、林新华、黄丽英、罗红斌[3]等应用等吸收点双波长分光光度法对芦荟中芦荟苷含量测定进行研究。
方法: 依据芦荟苷与芦荟大黄素的光谱特征,361.4nm为测定波长, 480.9nm 为参比波长。
结果: 芦荟苷线性范围1×10-6~ 1×10-4mol/L, 回收率为97. 4%~101.6%,RS为D 0. 55%~0.74%, 芦荟大黄素对测定不干扰结论: 本方法简便可靠,重现性好, 为芦荟资源的进一步开发利用及质量控制等提供新的方法和重要依据。
2、分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。
在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与众不同波长相对应的吸收强度。
用分光光度法测定蒽类成分的含量, 常以1,8- 二羟基蒽醌为参考标准,利用蒽醌类成分在碱性溶液中变红的反应, 进行测定, 此法的关键在于蒽醌类成分的提取及显色。
Paris 等认为中药大黄,以硫酸水解,氯仿提取较好,用乙醚提取则杂质较多。
一般以5%氢氧化钠- 2%氢氧化氨(1:1) 的混合液为显色剂,因其稳定性差,不同时间吸收度不同,从而影响结果。
陈军等[4]、马长清等[5]对分光光度法进行了改进,改进后的方法操作简便,结果可靠, 稳定性好, 不易受日光照射影响,弥补了碱液法显色后不稳定、易衰减的缺点。
林新华等[6]运用双波长标准分光光度法同时测定芦荟中蒽醌类化合物芦荟大黄素甙和芦荟大黄素的含量, 达到改善选择性又不降低灵敏度的目的, 样品加标回收率均在100%±5%范围内。
3、高效液相色谱法( HPLC)HPLC是近年来发展最快和使用最广的分析方法, 具有分离效能高、分析速度快、选择性好和检测灵敏度高等优点, 在有效成分定量分析中最为常用,其中又以反相高效液相色谱(RP-HPLC)法应用最广。
钱启辉, 田莉, 陈象清[7]等人建立高效液相色谱法测定肠必清肠溶颗粒剂中番泻苷A、B含量。
实验以C18 柱为分析柱, 以50%乙腈(含0.25mmol/ L十六烷基三甲基溴化铵和0.25mmol/L磷酸二氢钠，每200ml 加入冰醋酸75μl)为流动相，流速为1ml/min, 检测波长为270nm。
结果：在0.25 μg/ml~80.0 μg/ml浓度范围内呈线性关系 (番泻苷A：r=0.9997; 番泻苷B:r=0.9997), 番泻苷A、番泻苷B测定方法重现性较好( RSD＜2%) 的紧密度均＜2%，回收率均＞98%。
朱铁梁, 张静泽, 高文远, 陈虹[8]等，采用高效液相色谱法( HPLC)测定大黄和大黄甘草汤样品中水解蒽醌和游离蒽醌的含量。
使用的色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm，5μm)；流动相:A相甲醇；B相1%冰醋酸溶剂系统，线性梯度洗脱，流速 1.0 ml/min ，检测波长为254 nm，柱温35 ℃。
结果:本文建立了HPLC方法检测并比较大黄和大黄甘草汤中结合型蒽醌以及游离型蒽醌的含量，精密度、重复性以及稳定性RSD均小于3% ，加样回收率为97.39%～104.43%。
研究结果表明大黄药材单煎或与甘草合煎样品中检测到芦荟大黄素，大黄酸，大黄素，大黄酚及大黄素甲醚5个共有峰，其含量分别为大黄中游离型蒽醌总量为( 10.383±0.114 ) mg/g，结合型蒽醌总量为( 7.315 ±0.082 )mg/g；而大黄甘草汤中游离型蒽醌总量为 (12 .587 ±0.112)mg/g，结合型蒽醌总量为( 8.299 ± 0.054 )mg/g，大黄单味药材相及与甘草配伍后样品中蒽醌类成分含量存在差异。
大岛俊幸等[9]用反相高效液相色谱法对何首乌和夜交藤中的主要有效成分大黄素、大黄素甲醚、大黄酚及大黄酸等蒽醌成分进行定量分析,以TSK- gel 80Ts 为固定相,甲醇- 水- 磷酸(720:280: 1)为流动相。
样品用70%甲醇提取浓缩后用氯仿萃取, 可分离出游离型和结合型蒽醌的定量用试液。
以往, 是根据总蒽醌含量和游离型蒽醌含量的差值求得结合型蒽醌的含量, 而本文是在同一样品中直接测定结合型和游离型蒽醌的含量,此法也适于测定其它含蒽醌类成分的生药。
4、毛细管电泳法( CE)4.1毛细管区带电泳法(CZE)毛细管区带电泳法(CZE)又称毛细管区带电泳自由溶液电泳, 是毛细管电泳最基本，应用最广泛的一种分离模式。
它的分离依据是基于试样组分质荷比的差异。
Junko Koyama等[10]利用环式糊精(CD)改造的毛细管区带电泳法对天然药物中大黄素、大黄酸及其糖苷进行同时测定,电解液由0.03mol/L 四硼酸钠中加入适当体积的10%氢氧化钠、0.005mol/L α- CD和10%乙腈组成。
大黄素、大黄素- 8-β- D- 糖苷、大黄酚、大黄酚- 8-β- D- 糖苷的线性范围分别为5～50、25～150、5～75、50～500μg/ml , 大黄素和大黄酚的加标回收率分别为96.1%～105.3%、99.2%～103.3%。
4.2胶束电动毛细管色谱法(MEKC)MEKC是将离子型表面活性剂加到缓冲液中, 如果浓度达到或超过临界胶束浓度, 表面活性剂的单体就结合形成胶束, 而溶质则在流动的水相和起固定相作用的胶束相之间分配, 并由于其在胶束中不同的保留能力而产生差速迁移。
大黄中的5种蒽醌类衍生物能在10min内,在含有25mmol/L脱氧胆酸钠的50mmol/L硼酸- 氢氧化钠(pH=11)缓冲溶液中成功分离, 但其中大黄酚和大黄素甲醚重现性不佳。
此方法回收率高于90%,芦荟大黄素、大黄素、大黄酸的检测限分别为0.66 、0.94 、0.96 μg/ml , 线性范围分别为 2.64～21.12、5.64～56.4、4.80～33.60μ/ml , 加标回收率分别为90.61%( RSD=1.45%) 、93.39%( RSD=1.21%) 、92.31%(RSD=1.10%), 日内和日间重现性RSD在0.96%～1.85%之间。
此方法分析时间短,所需样品量少,抗污染及抗干扰能力较高,故分析中草药较合适[11]。
刘训红, 李俊松, 张月婵, 蔡宝昌, 尹娣等[12] , 建立胶束电动毛细管色谱二极管阵列检测法(MEKC-DAD同) 时测定大黄及其炮制品中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚及大黄素甲醚含量。
选择胶束电动毛细管电泳分离模式, 用未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μ×64.5cm,有效长度56cm)为分离通道,以25mmol.L-1硼砂-25mmol.L -1 SDS -10%乙腈(pH10.90)为背景电解质溶液,运行电压为12kV,运行温度为24℃,检测波长为254nm,压力进样为5kPa,5s 。
结果: 大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚及大黄素甲醚浓度分别在 2.4 ～47.0,2.4 ～48.4,2.1 ～41.4,1.9 ～37.0,3.8 ～75.0 μ g/ml 范围内呈良好线性关系( r≥0.9994 ) ,加样回收率( n=5)分别为99.5%(RSD=3.7%),101.4%(RSD=2.4%),98.5%(RSD=3.8%),101.3%(RSD=3.9%),101.4%(RSD= 3.1% ) 。
说明该方法简单、准确, 重现性好, 可用于大黄饮片内在质量的评价和控制。
4.3毛细管电色谱法(CEC)毛细管电色谱( capillary electro chromatography ，CEC)以内含色谱固定相的毛细管为分离柱，兼具毛细管电泳及高效液相色谱的双重分离机理，既可分离带电物质也可分离中性物质。
毛细管电色谱法是用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法。
因此，毛细管电色谱法可以说是HPLC和HPCE的有机结合，它不仅克服了HPLC 中压力流本身流速不均匀引起的峰扩展，而且柱内无压降，使峰扩展只与溶质扩散系数有关，从而获得了接近于HPCE水平的高柱效，同时还具备了HPLC 的选择性。
颜流水, 王宗花, 罗国安,王义明等[13]，在进一步改进仪器结构的基础上, 将梯度加压毛细管电色谱用于同时分离大黄片提取液中5种蒽醌类活性成分, 以建立适于中药等复杂体系中多组分分离分析的快速有效的新方法。
实验结果显示, 大黄提取液中的5种蒽醌化合物可在22min 内完全分离,梯度洗脱微柱液相色谱的柱效为等度洗脱微柱液相色谱的6.63 倍, 梯度毛细管电色谱的柱效为梯度微柱液相色谱的 4.6 倍。
