下载文档原格式
β-葡聚糖酶活性测定β-葡聚糖是由葡萄糖单体通过β-1，3和β-1，4糖苷键连接而成的D型葡萄糖聚合物，它主要存在于单子叶禾本科谷实中的糊粉层和胚乳细胞壁中。
β-葡聚糖酶属于水解酶类，能有效地降解β-葡聚糖分子中的β-1，3和β-1，4糖苷键，使之降解为小分子。
由于在饲料中，大麦的β-葡聚糖含量较高，难以被单胃动物消化利用，而且对饲料中各种养分的消化利用具有明显的干扰和抑制作用，成为麦类饲料中的抗营养因子。
在饲料中添加β-葡聚糖酶，能有效地消除β-葡聚糖的抗营养作用，促进饲料中各种养分的消化和吸收利用，增进畜禽健康。
在啤酒生产中，添加β-葡聚糖酶可以加快麦汁和啤酒的过滤速度、提高麦汁得率、增加可发酵糖的含量。
此外，β-葡聚糖酶在造纸工业、日化工业等其它许多方面也有着广泛的应用，对β-葡聚糖酶的研究将越来越受到人们的重视。
β-葡聚糖酶活力的测定方法主要有3种：还原糖测定法（分光光度法）、粘度测定法和底物染色法。
其中还原糖测定法简便实用，比较准确，而且结果重复性好，是广泛使用的一种酶活测定方法。
其原理是：β-葡聚糖酶能将β-葡聚糖降解成寡糖和单糖，其具有的还原基团在沸水浴条件下可与DNS试剂发生显色反应，显色的深浅与还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中β-葡聚糖酶的活力成正比，因此，可以利用比色测定反应液的吸光度值来计算还原糖的生成量，从而得出β-葡聚糖酶的活力。
但在该测定方法的具体操作中存在一些影响酶活力测定结果的因素，本文即对还原糖法测定β-葡聚糖酶活力的几个重要影响因素进行研究，并得出最佳测定条件。
1 材料与方法1.1 菌株与培养基1.1.1 发酵产酶菌株黑曲霉（Aspergillus niger）A47菌株，由本实验室保藏。
1.1.2 固态发酵培养基麸皮70 g、米糠27 g、NH4NO3 2.95 g、微量元素液0.05 ml、蒸馏水100ml，pH值5.0，121 ℃灭菌20 min。
_葡聚糖酶的特性_功能及应用研究葡聚糖酶（Glucanase）是一类能够降解葡聚糖（Glucans）的酶，能够水解α-1,4-糖基键和α-1,3-糖基键。
葡聚糖是一类多糖，包括淀粉、纤维素、甘露聚糖等，在生物界广泛存在。
葡聚糖酶具有多种特性和功能，并在不同领域得到广泛应用。
首先，葡聚糖酶具有广泛的底物特异性。
由于葡聚糖酶家族的多样性，不同的葡聚糖酶可以降解不同类型的葡聚糖。
例如，α-淀粉酶（α-Amylase）能够降解淀粉，β-葡聚糖酶（β-Glucanase）能够降解纤维素。
这种底物特异性使得葡聚糖酶有很高的应用潜力，可以用于不同领域的葡聚糖降解。
其次，葡聚糖酶在生物体内具有重要的消化功能。
例如，α-淀粉酶能够在口腔和胃中降解淀粉为糖，为身体提供能量。
β-葡聚糖酶则能够在植物细胞壁中降解纤维素，帮助植物释放能量。
这表明，葡聚糖酶在生物体内起着重要的消化功能，对于食物的利用和能量供应至关重要。
此外，葡聚糖酶也具有重要的工业应用价值。
在食品工业中，葡聚糖酶可以用于面包和饼干的制作，帮助改善面团的延展性和脆性。
在饲料工业中，葡聚糖酶可以被添加到畜禽饲料中，帮助提高饲料的消化率和营养价值。
在纺织工业中，葡聚糖酶可以被用于纤维的预处理，帮助去除纤维表面的葡聚糖，提高纤维染色效果。
在生物燃料领域，葡聚糖酶可以被用于植物纤维素的降解，提取出可转化成生物燃料的糖类物质。
最后，葡聚糖酶的研究也具有重要的生物学意义。
葡聚糖作为生物体内普遍存在的多糖，其降解过程涉及到多种酶类的参与，如α-淀粉酶、β-葡聚糖酶等。
通过研究葡聚糖酶的结构和功能，可以深入了解多糖降解的分子机制和调控机制，进而为糖代谢相关疾病的研究提供理论基础。
综上所述，葡聚糖酶具有广泛的特性和功能，并在食品工业、饲料工业、纺织工业、生物燃料领域等得到广泛应用。
此外，葡聚糖酶的研究也对生物学领域有重要的意义。
通过进一步研究葡聚糖酶的结构和功能，可以为更广泛的应用和研究提供理论基础。
β-葡聚糖酶最佳降解条件
β-葡聚糖酶（也称为β-gluconase）在降解葡聚糖（即β-葡聚糖）时，具有最佳的降解条件。
这些条件可以包括温度、pH 值和底物浓度等。
1. 温度：β-葡聚糖酶的最适工作温度通常在40-50℃之间。
在这个温度范围内，酶的活性最高，降解效率最佳。
2. pH值：β-葡聚糖酶的最适工作pH值通常在5-7之间。
不同的酶可能对pH值有不同的要求，但一般在中性至微酸性条件下表现最好。
3. 底物浓度：虽然β-葡聚糖酶可以降解各种浓度的葡聚糖，但最佳降解效果通常在适度的底物浓度下实现。
过高或过低的底物浓度都可能对酶的降解效率产生负面影响。
此外，酶的优化和工程也可以通过进一步改变反应条件来提高降解效率。
例如，选择适合的辅助酶、共培育或化学修饰等方法可以进一步优化β-葡聚糖酶的降解性能。
贝塔葡聚糖提取全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：贝塔葡聚糖是一种天然多糖，广泛存在于海藻、菌类和植物细胞壁中。
它具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等，因此受到了越来越多的关注。
贝塔葡聚糖的提取方法有很多种，其中以酶法和酸碱法为主要方法。
本文将介绍贝塔葡聚糖的基本信息、提取方法以及在医药、食品和化妆品等领域的应用。
一、贝塔葡聚糖的基本信息贝塔葡聚糖（Beta-glucan）是一种异聚体，由β-D-葡萄糖单元通过1,3和1,4的糖苷键连接而成。
它主要存在于植物细胞壁、真菌、酵母和海藻等中，并且具有多种结构和性质。
根据β-葡聚糖分子链中1,3和1,4键的数量和排列方式的不同，可以分成不同种类，如线型β-葡聚糖、支链β-葡聚糖等。
贝塔葡聚糖具有多种生物活性，包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、降血糖等。
其中最为突出的是其免疫调节作用，能够增强机体的免疫力，抗病毒、抗菌和抗炎等。
贝塔葡聚糖被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。
二、贝塔葡聚糖的提取方法1. 酶法提取：酶法是目前贝塔葡聚糖提取的主要方法之一。
主要步骤包括原料处理、酶解、分离和纯化等。
首先将含有贝塔葡聚糖的原料（如海藻、菌类等）进行粉碎和提取，然后加入适量的酶（如纤维素酶）进行酶解，使贝塔葡聚糖释放出来。
接着通过分离和纯化步骤获得纯净的贝塔葡聚糖。
2. 酸碱法提取：酸碱法是另一种常用的贝塔葡聚糖提取方法。
该方法主要是利用酸碱对贝塔葡聚糖原料进行溶解和分离。
首先将原料进行预处理，然后通过酸碱处理使贝塔葡聚糖溶解到溶液中，再通过沉淀、洗涤等步骤得到纯净的贝塔葡聚糖。
以上两种提取方法各有优缺点，选择适合的提取方法取决于原料的性质、成本和对产品纯度的要求等因素。
1. 医药领域：贝塔葡聚糖在医药领域有着广泛的应用。
其免疫调节、抗炎、抗氧化等生物活性使其成为一种重要的免疫增强剂和抗肿瘤药物。
近年来，贝塔葡聚糖也被发现对心血管疾病、糖尿病、肥胖等具有一定的预防和治疗效果，因此备受关注。
β-葡聚糖酶的特性、功能及应用研究何玮璇张永亮（华南农业大学动物科学学院，广东广州610642）[中图分类号]S816.7[文献标识码]C[文章编号]1005-8613（2010）08-0019-03广东饲料第19卷第8期2010年8月β-葡聚糖是一类非淀粉性多糖（NSP ），作为谷物类植物细胞壁成分之一，在大麦、燕麦、小麦等胚乳细胞壁中含量尤为丰富。
因畜禽体内缺乏分解β-葡聚糖的酶，β-葡聚糖在消化道中吸水膨胀变得黏连等性质，使其成为限制麦类饲料营养成分有效利用的主要抗营养因子。
研究表明，饲料中添加β-葡聚糖酶可消除β-葡聚糖的抗营养作用，因此对β-葡聚糖酶特性及其应用的研究一直受到人们广泛关注，本文介绍了β-葡聚糖酶的特性与功能、研究与应用等方面，并对其应用前景和方向作了展望。
1β-葡聚糖酶的功能与特性1.1β-葡聚糖酶的种类及功能β-葡聚糖酶按来源可分为植物性β-葡聚糖酶和微生物性β-葡聚糖酶，后者又可再分为细菌性β-葡聚糖酶和真菌性β-葡聚糖酶，人和畜禽体内缺乏β-葡聚糖酶。
现在人们主要从细菌如枯草芽孢杆菌或真菌如黑曲霉、木霉等微生物中提取β-葡聚糖酶。
根据酶作用底物糖苷键的类型和机制，可将β-葡聚糖酶分为纤维素酶、昆布多糖酶、内切β-1，3-葡聚糖酶等，其名称与功能如表1所示。
其中因β-1，3-1，4-葡聚糖在和燕麦等胚乳细胞壁中含量达70%左右，习惯上人们把1，3-1，4-β-葡聚糖称为β-葡聚糖，把相应的β-1，3-1，4-葡聚糖酶称为β-葡聚糖酶。
[收稿日期]2010-7-05编码（EC ）习惯名系统名功能3.2.1.4纤维素酶1,4-（1,3；1,4）-β-D 葡聚糖-4葡聚糖水解酶内切纤维素和含有1,3、1,4糖苷键的β-D-葡聚糖的1,4糖苷键3.2.1.6昆布多糖酶1,4-（1,3；1,4）-β-D 葡聚糖-3（4）葡聚糖水解酶当葡萄糖残基的还原基团参与的糖苷键在其C(3)位被取代时,该酶水解葡萄糖残基的另一1,3或1,4-β糖苷键3.2.1.21β-葡萄糖苷酶（纤维二糖酶）β-D 葡萄糖苷葡萄糖水解酶水解β-D-糖苷的非还原性末端，释放出β-D-葡萄糖3.2.1.39内切1,3-β葡聚糖酶1,3-β-D-葡聚糖葡聚糖水解酶内切1,3-β葡聚糖中的β-1,3糖苷键3.2.1.58外切1,3-β葡聚糖酶1,3-β-D-葡聚糖葡聚糖水解酶外切1,3β葡聚糖，释放出葡萄糖3.2.1.71内切1,2-β葡聚糖酶1,2-β-D-葡聚糖葡聚糖水解酶内切1,2-β葡聚糖中的β-1,2糖苷键3.2.1.73地衣多糖酶（1,3,-1,4-β-葡聚糖酶）1,3-1,4-β-D-葡萄糖4-葡聚糖水解酶内切1,3-1,4-β-D-葡萄糖中的1,4糖苷键3.2.1.74外切1,4-β葡聚糖酶1,4-β-D-葡聚糖葡聚糖水解酶从纤维素的非还原性末端切下葡萄糖3.2.1.75内切1,6-β葡聚糖酶1,6-β-D-葡聚糖葡聚糖水解酶内切1,6-β-葡聚糖3.2.1.91外切β-1,4-葡聚糖纤维二糖水解酶β-1,4-葡聚糖纤维二糖水解酶逐个切下纤维素非还原性末端的纤维二糖残基注：参考Pitson et a1．(1993)表1β-葡聚糖水解酶的名称及功能19··1.2β-葡聚糖酶的分子结构不同种类的β-葡聚糖酶结构差异很大，如植物来源和细菌来源的β-葡聚糖酶无论是氨基酸排列还是三维空间结构上基本没有相似性。
配合饲料中β-葡聚糖酶酶的加工及检测由于β-葡聚糖酶制剂的商品化生产，使得大麦可作为饲料原料添加到家禽日粮中，并且不会因高β-葡聚糖水平而降低家禽的生产性能及产生粘性粪便（Campbell和Bedford，1992）。
目前，β-葡聚糖酶已广泛用于世界大麦产区。
不过，有关热处理对添加到饲料中β-葡聚糖酶影响的研究报道仍然有限。
Eeckhout 等（1995）对在50～95摄氏度下调质和在72～91摄氏度下制粒的商品仔猪料中的β-葡聚糖酶活性进行了测定。
结果表明，即使在最低温度下，饲料中的β-葡聚糖酶活性在加工后亦丧失40%，而在最高温度下，仅保存7%的活性，并且2/3的活性是在调质期间丧失的。
另一方面，Esteve-Garcia等（1997）发现，添加到肉仔鸡料中的β-葡聚糖酶经过接近80摄氏度的调质与制粒温度仍能保留大部分的活性。
其所使用的酶被制成微细颗粒。
这表明，β-葡聚糖酶可以稳定的形态添加到饲料中。
至少有2个试验对肉用雏鸡在饲喂经热处理的酶补充日粮后的生产性能进行了测定。
McCracken等（1993）在大麦基础日粮中添加了一种稳定形态的商品酶混合物，其中含有β-葡聚糖酶和木聚糖酶活性，日粮在制粒前于85摄氏度温度下加热15分钟。
结果表明，日粮在未补充外源性酶的情况下进行热处理，使饲料营养物质的表观消化率降低、肉用雏鸡肠道内容物的粘度增加及粪便干物质含量减少；但在补充外源性酶的情况下进行热处理，则提高了饲料营养物质的消化率，并消除了热处理引起的不利效应。
这充分说明，酶在85摄氏度温度下仍保持活性。
Vukic-Vranjes等（1994）测定了两种日粮中添加商品酶混合物的效应，其中一种日粮含有20%的大麦。
该酶混合物含有β-葡聚糖酶、木聚糖酶、淀粉酶和果胶酶活性。
这两种日粮在70～75摄氏度下调质，在110～120摄氏度下制粒或挤压膨化。
与制粒相比，挤压膨化对雏鸡生产性能产生不利影响。
同时，挤压膨化还使饲料的体外粘度增加，这表明高温使饲料中非淀粉类多糖的溶解度增加。
β-葡聚糖酶活力测定方法(NY/T911-2004)∙ 1.原理β-葡聚糖酶能将木聚糖降解成还原性糖。
还原性糖在沸水浴条件下可以与3,5-二硝基水杨酸（DNS)试剂反应显色反应。
反应液颜色的深度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中β-葡聚糖酶的活力成正比。
因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算反应液中β-葡聚糖酶的活力。
∙ 2. 操作∙ 2.1.标准葡萄糖曲线的制作2.1.1 吸取PH5.5的0.1M乙酸-乙酸钠+缓冲溶液4.0mL,加入DNS试剂5.0mL，沸水浴加热5min。
用自来水冷却至室温，用水定容至25.0mL,制成标准空白样。
2.1.2 分别吸取葡萄糖溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL和7.00mL,分别用PH5.5的0.1M醋酸缓冲溶液定容至100mL,配制成浓度为0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.30mg/mL、0.40mg/mL、0.50mg、0.60mg/mL和0.70mg/mL葡萄糖标准溶液。
2.1.3 分别取上述浓度系列的葡萄糖标准溶液各2.00mL（做两个平行），分别加入到刻度试管中，再分别加入2.0mL缓冲液94.4)和5.0mLDNS试剂。
电磁振荡3s-5s,沸水浴加热5min。
然后用自来水冷却到室温，在用水定溶液至25mL。
以标准空白为对照调零，在540min处测定吸光度A值。
以葡萄糖糖浓度为Y轴、吸光度A值为X轴，绘制标准曲线。
每次新配制DNS试剂均需要重新绘制标准曲线∙ 3. 酶样测定吸取10.0mLβ-葡聚糖溶液,37℃平衡20min。
吸取10.0经过适当稀释的酶液，37℃平衡10min。
∙吸取2.00mL经过适当稀释的酶液（已经过37℃平衡），加入到刻度试管中，再加入5mLDNS试剂，电磁振荡3s-5s。
然后加入8.0g/lβ-葡聚糖溶液2.0ml，37℃保温30min,沸水浴加热5min。
葡聚糖内-1,3-β-葡糖酶葡聚糖是一种多糖，由许多β-葡萄糖分子组合而成。
这种多糖在自然界广泛分布，包括植物、真菌、细菌和动物中。
葡聚糖在这些生物中具有多种重要功能，如提供结构支持、膜层保护、细胞间信号传递和免疫应答等。
葡聚糖内-1,3-β-葡糖酶（PG）是一种能够降解葡聚糖的酶类。
它可以催化葡聚糖的水解反应，将其分解成低聚糖和单糖。
目前，许多真菌中的PG已被分离和鉴定，其中以酵母菌的PG最为广泛研究。
PG对于细胞生长和分化、细胞壁合成和重组、藻类和真菌的招募、植物抵御病原菌的作用等有重要影响。
PG的生物学功能也被广泛研究和应用于医药和农业领域。
近年来，PG的研究是一个非常热门的课题。
研究人员通过分子生物学和基因工程技术得到了大量的PG基因序列。
同时，PG的表达也受到广泛关注，特别是在微生物发酵、细胞壁结构和医药领域。
在微生物发酵中，PG可以通过控制其基因表达来产生大量低聚糖和单糖。
这些产物对某些工业生产和食品添加剂有广泛的应用，比如说肉制品和面包。
在真菌和植物内，PG对于细胞壁合成和重组起着重要作用。
在细胞壁合成中，PG可以加速和协调细胞壁的合成。
在细胞壁重组中，PG的表达可以加快细胞壁的降解和合成，使细胞获得更好的结构和保护。
在医药领域，PG被广泛研究，用于治疗某些疾病。
例如，PG可以作为免疫调节剂，增强宿主对病原菌的抵御能力。
它也可以用作抗肿瘤药物，破坏肿瘤细胞壁，促进细胞凋亡。
总之，PG在生物界中是起着重要作用的酶类。
它拥有丰富的生物学功能和广泛的应用价值。
我们期待在未来的研究中能够更深入地了解PG的作用机制，扩大它的应用范围，并进一步应用于医药和农业领域。
β-葡聚糖成分β-葡聚糖，又称为β-葡聚糖纤维，是一种由葡萄糖分子通过β-1,4-糖苷键连接而成的多糖。
它是一种重要的膳食纤维，具有多种生理功能和保健作用。
β-葡聚糖在自然界中广泛存在于植物细胞壁、真菌和海藻等生物体中。
它是一种不可被人体消化酶降解的纤维素，通过进入肠道后与益生菌相互作用，对人体健康起到重要作用。
β-葡聚糖具有调节肠道菌群平衡的作用。
肠道菌群是人体肠道内生活着的大量微生物，对人体的健康起着重要作用。
β-葡聚糖可以被益生菌利用为能量来源，促进益生菌的生长繁殖，抑制有害菌的生长，维持肠道菌群的平衡。
这对于预防和改善肠道疾病，如便秘、腹泻和炎症性肠病等，具有重要意义。
β-葡聚糖对免疫系统具有调节作用。
研究表明，β-葡聚糖可以增强机体的免疫力，促进免疫细胞的活性和增殖，增加免疫球蛋白的合成，提高机体对外界病原体的抵抗能力。
此外，β-葡聚糖还可以调节炎症反应，减轻炎症病变。
因此，β-葡聚糖被广泛应用于免疫调节和抗炎治疗。
β-葡聚糖还具有降低血脂、降血糖和抗肿瘤等作用。
研究表明，β-葡聚糖可以通过调节血脂代谢，降低血液中的胆固醇和甘油三酯含量，预防心血管疾病的发生。
同时，β-葡聚糖还可以通过提高胰岛素敏感性，促进葡萄糖的利用和降低血糖水平，有助于预防和治疗糖尿病。
β-葡聚糖的应用领域非常广泛。
在食品工业中，β-葡聚糖常被用作功能性食品的添加剂，如益生菌饮料、膳食纤维补充剂等。
在医药领域，β-葡聚糖被广泛应用于免疫调节和抗炎治疗，如肠道炎症、过敏性疾病和免疫缺陷等。
此外，β-葡聚糖还可以用于环境保护和工业生产等领域。
总结起来，β-葡聚糖是一种重要的膳食纤维，具有调节肠道菌群、增强免疫力、降血脂、降血糖和抗肿瘤等多种生理功能和保健作用。
随着对其研究的不断深入，β-葡聚糖在医药和食品工业中的应用前景将会更加广阔。
我们应该加强对β-葡聚糖的研究，挖掘其更多的生物活性和应用价值，为人类的健康和幸福做出更大的贡献。
植物β－1，3－葡聚糖酶的研究进展β-1,3-葡聚糖酶参与了植物的多种生长发育过程，包括细胞分裂、小孢子发生、花粉萌发、育性、韧皮部胼胝质去除、受精、种子萌芽及植物生长调控等过程。
20世纪70年代以前，对β-1,3-葡聚糖酶的研究主要集中于它对植物本身不同发育阶段的作用，随着分子生物学技术在植物抗病基因工程中的逐步应用，β-1,3-葡聚糖酶基因的抗病研究取得了快速发展。
目前，β-1,3-葡聚糖酶基因在植物抗病基因工程研究中已被认为是最具吸引力的基因之一。
1 β-1,3-葡聚糖酶基本生物学特性和分类已知的β-1,3-葡聚糖酶均属于糖基水解酶第十七家族，其成员具有共同的氨基酸序列结构：(LIVM)一x一(LIVM-FVW)3一(STAG)-E-(ST)-G- W-P-(Srr)-X-G．(Lan等，1998)，β-1,3-葡聚糖酶分为外切酶和内切酶，目前主要研究的是内切酶。
它的分子量为32-37kD，等电点从酸性到碱性。
它的作用底物为以β-1,3-苷键连接起来的多聚糖，以随机作用方式将多聚糖分解成为糊精或寡聚糖。
各种类型的β-1,3-葡聚糖酶已从多种植物中分离出来。
根据其等电点、定位、mRNA表达模式及序列的同源性等特点可将其分为四种不同类型。
I类葡聚糖酶为碱性，主要存在于液泡中，体外具较强抑菌活性。
碱性β-1,3-葡聚糖酶通常具有1个液泡定位的羧基末端多肽(carboxyl terminal polypetide，CTPP)结构，CTPP中往往含有糖基化位点即CTPP切除信号氨基酸结构， CTPP的缺乏使得β-l,3-葡聚糖酶分泌到胞外，因此，CTPP存在与否成为β-1,3-葡聚糖酶分类的重要依据。
现已分离出三种编码I类葡聚糖酶的cDNA，它的前体蛋白含有N一端信号肽及C一端液泡导向肽序列。
在根及老叶中组成型表达．占可溶性蛋白的5％-10％，且主要分布在叶的表皮细胞层中。
受病源菌、乙烯、水杨酸、伤口、UV等因素诱导，但被auxin ／cytokine所抑制，并受发育的调节。
Ⅱ类葡聚糖酶具有较低等电点，被称为酸性葡聚糖酶。
主要分布在细胞间隙，在体外无抑菌活性，它的氨基酸序列中不具有C一端延伸序列。
与I类酶有55％同源性，但Ⅱ类酶与I类酶在血清学上具有相似性。
它主要包括PR2(又称PR-36)。
PR-N，PR-O(又称PR-37)，能被病原菌诱导，I类葡聚糖酶与Ⅱ类葡聚糖酶相比．只有54％~59％的同源性。
Ⅲ类酶属于分布在胞外的诱导物释放型β-1,3-葡聚糖酶(PR-Q’)，分子量为35KD(又称PR-35)。
PR-Q’由烟草花叶病毒(TMV)诱导表达，其诱导速度慢于或相同于Ⅱ类葡聚糖酶，持续时间也较短嘲。
Ⅳ类葡聚糖酶为酸性胞外非诱导型β-1,3-葡聚糖酶(PR-O’)，分子量为25KD,是一种二聚体，不能被病原物诱导㈣。
与Ⅱ类、Ⅲ类酶相似性较小，且与前三种酶均不能发生抗血清交叉反应。
2 β-1,3-葡聚糖酶抗病机制研究植物受病原物侵染时常产生一些PR蛋白进行抵御，β-1,3-葡聚糖酶即是其中之一。
PR类蛋白是由植物寄主基因编码的、在病理或相关条件下诱导产生的蛋白质,PR类蛋白与植物系统获得性抗性fSystemic acquired resistence,SARl和系统诱导性抗性fInduced Systemic Resistance ISRl的建立密切相关。
根据蛋白质之间氨基酸序列的相似程度，目前已经发现的PR蛋白可分为十一类，β-1,3-葡聚糖酶属于PR2类，在植物的抗病过程中扮演着重要角色。
β-1,3-葡聚糖是真菌细胞壁的重要结构成分。
许多真菌的菌丝尖端β-1,3-葡聚糖暴露在表面，能够直接受到β-1,3-葡聚糖酶的攻击。
体外抑菌实验表明，β-1,3-葡聚糖酶对菌丝生长具有抑制作用。
不过，只有液泡定位的碱性葡聚糖酶能够降解菌丝壁，从而抑制生长，而胞间定位的类型则没有抑菌活性。
当然，真菌也合成一些葡聚糖酶抑制蛋白fGlucanase Inhibitor Protein RIPl，RIP特异性地抑制寄主内源葡聚糖酶的活性旧，这反映了植物与微生物共进化的一种关系。
更为重要的是，在水解过程中由真菌细胞壁释放出来的寡糖能够作为植物多种抗病反应的激发因子。
激发子作为病原菌——植物相互识别的重要信号分子，是指能诱导植物产生任何防卫反应的因子fHahn 1996)。
杜良成和王钧(1992)的研究已证实病菌来源的激发子可诱导植物B-1,3-葡聚糖酶不同程度的表达。
SA作为一种非生物激发子，可诱导植物PR基因表达。
被用于PR基因启动子的调控机制研究ffShah和 Klessig，1996)。
激发子和SA诱导植物的全面抗病反应，可作为诱导物诱导与抗病反应有关的酶类如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4一香豆酸-CoA联结酶)等的积累，由此对植保素、木质素等抗病物质的合成与积累，增强植物的抗病性起促进作用。
这方面的报道集中在大豆与大豆疫病菌的互作研究中。
在大豆中，已经发现葡聚糖激发子结合蛋白GEBP fGlucan Elicitor Binding Protein GEBP)，定位于大豆根部细胞的质膜上，能够特异性地结合β-1,3-葡聚糖酶降解过程中释放出来的寡糖激发子，诱导植物的防卫反应。
3 β－l,3-葡聚糖酶在植物中的发育调节及其可诱导性β-1,3-葡聚糖酶是重要的水解酶，它们不仅在植物抗病中起作用，还在植物发育中起作用，包括谷类发芽、胚轴和胚芽鞘发育、韧皮部运输和胼胝质的运动、微管组织运输调节和细胞壁生物合成、花的发育、小孢子形成、花粉管发育、果实成熟、植物衰老以及固定和愈创性葡聚糖的清除以及调控胚乳发育、育性调控及种子后成熟．也用于研究转化体基因沉默现象等方面。
这些不同的发育过程均与β-1,3一葡聚糖酶有密切关系， Leubner Metzger等利用反义基因技术揭示了3-1,3-葡聚糖酶在打破烟草种子休眠中所起的重要作用。
Stieglitz(1977)在研究Lilium的小孢子发育过程中发现，β-1,3-葡聚糖酶在小孢子从四分体状态释放出来之前有一个增长的峰值。
随后小孢子的胼胝质壁被溶解，释放出成熟的花粉类。
已证实此过程中内切葡聚糖酶起关键作用。
但此酶在小孢子成熟之前如何被准确诱导的机理还不清楚。
将修饰过的β-1,3-葡聚糖酶导人烟草中使其在绒毡层中提前表达，使转基因植株育性降低。
而在牵牛及高粱体中一些雄性不育突变体中发现是因为葡聚糖酶在小孢子发育过程中提前释放．从而造成小孢子发育异常。
Van de Rhee(1993)对碱性葡聚糖酶5’调控序列的研究表明：在1476b0的启动子序列中，1476至44bp之间的片段对发育调控的表达是必需的。
在正常植物体中葡聚糖酶在整株植物中的分布是不均衡的，根部和基部老叶中含有很高的酶活性，而顶部幼叶中几乎检测不到，究其原因，可能是由于发育调节或激素对它的控制作用。
Felix(1985)研究认为，组织培养中，烟草中一种特异的内切β-1,3-葡聚糖酶受到生长素和分裂素的调节。
当两种激素同时加人培养基时，90％的酶活性被抑制，而当从前者培养基移人加有一种激素或不加激素的培养基时，此酶的表达量到第七天时比前者增加了约10倍。
Eichholz(1983)认为是激动素(kinetin)阻碍了B-1,3-葡聚糖酶的重新合成p回。
Felix(1986)则认为阻碍β-1,3-葡聚糖酶的合成并不是激动素独立作用的结果，而是由于分裂素和生长素两者生理浓度共同决定。
β-1,3-葡聚糖酶基因的表达不仅与病原菌侵染有关，还与其他生物或非生物诱导物有关。
非生物诱导包括物理因素和化学因素。
1987年Dean R．A．发现，机械或干冰损伤、电磁处理可不同程度地诱导烟草对霜霉病(Peronosporatabacina)的抗性；紫外线处理各种豆类的下胚轴可使植株叶片获得对炭疽病fColletotrichumlinderthianum)的抗性。
后来陆续报道X一射线、局部热处理等也具有诱导抗病性的功能。
已有100多种化学物质被用作诱导因子，较早使用的是乙酰水杨酸钠、多聚腺苷酸等，可以诱发烟草对TMV的抗性，由此形成了20世纪70-80年代对诱导抗性研究的第一个热潮。
董汉松等在烟草抗赤星病的研究中建立了诱导因子谱，同时也发现有诱导感病性的化学物质，如马来酰肼等，表明感病性也和抗病性一样，可以由不同的物质诱导产生。
生物诱导包括：(1)真菌。
这类因子包括病原和非病原菌、致病力不同的菌株及其不同结构和分子组分，前人已有不少综述。
在烟草抗赤星病诱导中，已从全国各烟区分离的209个赤星菌株中选出致病力弱的菌株用作诱导因子，并已成功地用于大田试验，取得良好效果。
(2)细菌。
可用作诱导因子的细菌包括死体和活体，病原细菌和非病原细菌及细菌的不同成分，如菌体脂多糖(LPS)、胞外多糖(EPS)等。
目前，已有不少报道证明，细菌的无毒基因favrl或过敏／致病基因(hrp)产物，起抗病防卫激发子的作用。
(3)病毒。
1929年首次报道病毒的交叉保护现象。
今后，有两方面的工作值得注意，一是已证明病毒诱导的抗病性对不同作用、不同类型病原物都有效。
例如，烟草普通花叶病毒仃MV)可诱导对TMV和霜霉病等12种病害的抗性：二是病毒辅助因子的作用，如含卫星RNA 的CMV诱导烟草对赤星病的抗性。
董汉松研究表明，RNA的存在使效果明显增强，但田波实验室报道认为，抗病诱导作用主要。
4 β-1,3-葡聚糖酶基因信息研究β-1,3-葡聚糖酶cDNA编码长度为359个氨基酸的多肽．前体酶在N端含有21个亲水碱基．是蛋白转移的信号肽序列，C端含有22个残基．推测其中含有N糖基化位点．这在成熟蛋白中是没有的，在最初的多肽合成后，前体酶进行加工，将前体酶中的信号肽序列和糖基化位点切除，随后才产生成熟的酶。
从20世纪60年代起，许多植物中的B—l'3一葡聚糖酶基因信息已被逐渐研究清楚，如大麦、水稻、玉米、高粱、小麦、拟南芥、鹰嘴豆、大豆、早熟禾、三叶胶树、西红柿、亚麻、香蕉、烟草、菜豆、豌豆、桃树、马铃薯、葡萄等。
Mohnen和Shinshi(1985)最早获得碱性葡聚糖酶基因序列，它们利用激素诱导的烟草总RNA构建了eDNA文库。
利用分离的mRNA体外翻译后杂交筛选的方法获得了含有约lkb 插入片段的β-l，3一葡聚糖酶基因片段的克隆，并由此获得了对应的mRNA和完整基因序列，其基因全长为1083bp，开放阅读框编码359个氨基酸组成的多肽，分子量为39KD。
而成熟蛋白的分子量比前体蛋白小4KD。
其中N端信号肽约为2KD．因此前体蛋白还经历了其他的加工过程，即C端多肽序列(2KD)在进入液泡时被切除，成为成熟的葡聚糖酶[31,32]。
