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Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者：xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray，beaker，centrifuge tube，microscope，glass slide，pipette，scissors，forceps，copper mesh.解剖盘，烧杯，离心管，显微镜，载玻片，吸管，剪刀，镊子，铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程，在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。
简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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生命科学学院Life Science College细胞生物学实验报告姓名：柳伟雄班级：2013级生科一班学号：************ 同组者：曾玮璠山东大学实验报告2015年6月1日姓名：柳伟雄系年级：生科一班2013级同组者：曾玮璠科目：细胞生物学实验题目：小鼠染色体的制备、染色、观察一、目的和要求1.初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。
2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。
3.认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组形图。
二、原理凡处于活跃增殖状态的细胞，或者经过各种处理后，任何动物组织的细胞就可进入分裂，均可用于染色体分析。
在正常动物体内，精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。
给动物注射一定剂量的秋水仙素，即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。
本方法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌操作，易于推广。
骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。
但在取材方面，精巢又比骨髓要简易一些，故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。
对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处; 2. 用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞被胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上; 3. 空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。
Giemsa染色是最常用的染色方法之一，适用于多种细胞和染色体染色。
主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
三、试剂和器材1.试剂：秋水仙素、生理盐水（0.9%的NaCl溶液）、0.3%KCl低渗溶液、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液Giemsa染液的配制：吉姆萨粉(Giemsa stain)甘油(AR)甲醇(AR)将Giemsa粉放入研钵中，先加入少量甘油，研磨至无颗粒为止，然后再分批加入甘油，放56℃温箱中2h后，分批加入甲醇，将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。
— 104 —CHINESE JOURNAL OF ANATOMY V ol.44 No.2 2021 解剖学杂志 2021年第44卷第2期两种小鼠生精细胞染色体制备方法的探讨与评价*卢文亮 孟卫京 薛春梅 杨 静 宁伟霞 毛国丽 郭兴萍△（山西省生殖科学研究所，太原 030006）摘要 目的：比较改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法制作小鼠生精细胞减数分裂中期染色体标本的优劣。
方法：选用8~12周龄雄性Balb/c 小鼠，分别采用改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法进行减数分裂中期染色体制备，并用Giemsa 染色。
光镜下观察小鼠生精细胞减数分裂不同阶段分裂相细胞染色体形态并计数，计算各分裂相细胞的检出率。
结果：体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法对生精细胞减数分裂中期染色体核型的检出率分别为10.37%和6.46%。
秋水仙素处理小鼠的最适浓度是4 mg/kg ，体内注射秋水仙素制备法制得的核型分裂相比空气干燥直接制备法多，直接制备法得到的染色体核型边缘清晰，更便于计数。
结论：体内注射秋水仙素制备法的优势在于核型分裂相多，而空气干燥直接制备法的优势在于染色体核型边缘清晰，更便于计数，可根据不同实验需求进行选择。
关键词 生精细胞；减数分裂；标本制备；小鼠Discussion and evaluation on chromosome preparation methodsof spermato genic cells in two groups of mice *Lu Wenliang ， Meng Weijing ， Xue Chunmei ， Yang Jing ， Ning Weixia ， Mao Guoli ， Guo Xingping △（Shanxi Institute of Reproductive Science ， Taiyuan 030006， China ）Abstract Objective ： To compare the advantages and disadvantages of the modified colchicine injection and the direct air drying methods for preparing meiotic metaphase chromosome of mouse spermatogenic cells. Methods ： Male Balb/c mice aged 8 to 12 weeks were used to prepare meiotic metaphase chromosomes by the modified colchicine injection and air drying ， respectively ， and stained with Giemsa. Under light microscope ， the chromosome morphology was observed and the mitotic phase cells were counted at different stages of meiosis in spermatogenic cells ， and the rate of cells in each phase was calculated. Results ： The detection rate of chromosome karyotypes in meiotic metaphase of spermatogenic cells by two methods was 10.37% and 6.46% respectively. The optimum concentration of colchicine for the mice was 4 mg/kg ， and the karyotype obtained by injection of colchicine in vivo was more than that by direct preparation. The chromosome karyotype obtained by direct preparation had clear edges and was easier to count. Conclusion ： Colchicine injection in vivo can obtain more karyotypes ， while air drying direct preparation can obtain clear chromosome karyotype edge ， which is easier to count ， and can be selected according to the different experimental requirements.Key words germ cell ； meiosis ； specimen preparation ；mousedoi ： 10.3969/j.issn.1001-1633.2021.02.003·论 著·*山西省卫生健康委科研项目（2019004）第1作者E-mail ：*****************△通信作者，E-mail ：***************收稿日期：2020-07-16；修回日期：2020-11-15生精细胞减数分裂期染色体分析是遗传学、组织学胚胎学、细胞生物学和生殖生物学研究的重要手段[1-2]。
简述小鼠染色体制备的流程小鼠染色体制备。
选只小鼠，得挑健康的，不能是病怏怏的那种。
然后，得给它打麻药，让它舒舒服服地睡一觉。
这样咱们就能轻松取得细胞了。
取细胞这活儿，得迅速。
从骨髓或者脾脏里取，这得看实验需求。
取出来后，咱们得让细胞在低渗环境里待会儿，这样染色体就能胀大，看得更清楚。
然后，用固定液固定一下，这样细胞形态就稳定了。
接下来，就是染色和观察了。
用专门的染料给染色体上色，让它们变得五彩斑斓的。
然后，在显微镜下瞅瞅，看看这些染色体长啥样，数数有多少个。
这可得细心点，不能漏看了。
说起来，小鼠染色体制备这事儿，看着简单，其实挺考验技术的。
得选对小鼠，还得会取细胞、染色、观察。
不过，只要技术到位，就能得到清晰的染色体，为后面的研究打好基础。
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姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察一．实验目的1．了解快速制备动物染色体标本的方法，掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的制备方法。
2．观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征。
3．掌握小鼠睾丸染色体标本制备基本过程，了解操作步骤的原理。
二．实验原理（一）染色体染色体是基因的载体。
真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。
制备染色体标本无疑是细胞学最基本的技术之一，优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。
染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。
本实验采用的方法是从小鼠的睾丸细胞中获取。
染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断地运动变化的，一般在有丝分裂中期，染色体的形态最典型、最易辨认和区分。
因此，制备染色体标本获取的是中期细胞。
染色体特征：1.数目（2n=？）2.长度（绝对长度、相对长度）3.着丝粒位置（M/SM/ST/T）4.随体与次溢痕的数目、大小和位置5.带型分析（二）操作方法小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织（由于分裂活动旺盛，睾丸也可以）。
利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作，但其基本程序是简便的。
在小鼠睾丸中，细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。
通过小鼠睾丸得到染色体比较简便，一般不需要无菌操作。
用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂。
由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理、低渗、固定、制片、染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。
减数分裂是细胞分裂染色体数目减半时发生在性细胞的形成过程中。
哺乳动物在性成熟以后，精巢内的性细胞总是在分批分期不断的成熟，因此，对哺乳动物的精巢进行一定的技术处理，随时都可以获得减数分裂过程中各个时期染色体的标本。
