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Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者：xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray，beaker，centrifuge tube，microscope，glass slide，pipette，scissors，forceps，copper mesh.解剖盘，烧杯，离心管，显微镜，载玻片，吸管，剪刀，镊子，铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程，在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。
简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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生命科学学院Life Science College细胞生物学实验报告姓名：柳伟雄班级：2013级生科一班学号：************ 同组者：曾玮璠山东大学实验报告2015年6月1日姓名：柳伟雄系年级：生科一班2013级同组者：曾玮璠科目：细胞生物学实验题目：小鼠染色体的制备、染色、观察一、目的和要求1.初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。
2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。
3.认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组形图。
二、原理凡处于活跃增殖状态的细胞，或者经过各种处理后，任何动物组织的细胞就可进入分裂，均可用于染色体分析。
在正常动物体内，精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。
给动物注射一定剂量的秋水仙素，即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。
本方法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌操作，易于推广。
骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。
但在取材方面，精巢又比骨髓要简易一些，故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。
对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处; 2. 用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞被胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上; 3. 空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。
Giemsa染色是最常用的染色方法之一，适用于多种细胞和染色体染色。
主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
三、试剂和器材1.试剂：秋水仙素、生理盐水（0.9%的NaCl溶液）、0.3%KCl低渗溶液、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液Giemsa染液的配制：吉姆萨粉(Giemsa stain)甘油(AR)甲醇(AR)将Giemsa粉放入研钵中，先加入少量甘油，研磨至无颗粒为止，然后再分批加入甘油，放56℃温箱中2h后，分批加入甲醇，将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。
— 104 —CHINESE JOURNAL OF ANATOMY V ol.44 No.2 2021 解剖学杂志 2021年第44卷第2期两种小鼠生精细胞染色体制备方法的探讨与评价*卢文亮 孟卫京 薛春梅 杨 静 宁伟霞 毛国丽 郭兴萍△（山西省生殖科学研究所，太原 030006）摘要 目的：比较改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法制作小鼠生精细胞减数分裂中期染色体标本的优劣。
方法：选用8~12周龄雄性Balb/c 小鼠，分别采用改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法进行减数分裂中期染色体制备，并用Giemsa 染色。
光镜下观察小鼠生精细胞减数分裂不同阶段分裂相细胞染色体形态并计数，计算各分裂相细胞的检出率。
结果：体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法对生精细胞减数分裂中期染色体核型的检出率分别为10.37%和6.46%。
秋水仙素处理小鼠的最适浓度是4 mg/kg ，体内注射秋水仙素制备法制得的核型分裂相比空气干燥直接制备法多，直接制备法得到的染色体核型边缘清晰，更便于计数。
结论：体内注射秋水仙素制备法的优势在于核型分裂相多，而空气干燥直接制备法的优势在于染色体核型边缘清晰，更便于计数，可根据不同实验需求进行选择。
关键词 生精细胞；减数分裂；标本制备；小鼠Discussion and evaluation on chromosome preparation methodsof spermato genic cells in two groups of mice *Lu Wenliang ， Meng Weijing ， Xue Chunmei ， Yang Jing ， Ning Weixia ， Mao Guoli ， Guo Xingping △（Shanxi Institute of Reproductive Science ， Taiyuan 030006， China ）Abstract Objective ： To compare the advantages and disadvantages of the modified colchicine injection and the direct air drying methods for preparing meiotic metaphase chromosome of mouse spermatogenic cells. Methods ： Male Balb/c mice aged 8 to 12 weeks were used to prepare meiotic metaphase chromosomes by the modified colchicine injection and air drying ， respectively ， and stained with Giemsa. Under light microscope ， the chromosome morphology was observed and the mitotic phase cells were counted at different stages of meiosis in spermatogenic cells ， and the rate of cells in each phase was calculated. Results ： The detection rate of chromosome karyotypes in meiotic metaphase of spermatogenic cells by two methods was 10.37% and 6.46% respectively. The optimum concentration of colchicine for the mice was 4 mg/kg ， and the karyotype obtained by injection of colchicine in vivo was more than that by direct preparation. The chromosome karyotype obtained by direct preparation had clear edges and was easier to count. Conclusion ： Colchicine injection in vivo can obtain more karyotypes ， while air drying direct preparation can obtain clear chromosome karyotype edge ， which is easier to count ， and can be selected according to the different experimental requirements.Key words germ cell ； meiosis ； specimen preparation ；mousedoi ： 10.3969/j.issn.1001-1633.2021.02.003·论 著·*山西省卫生健康委科研项目（2019004）第1作者E-mail ：*****************△通信作者，E-mail ：***************收稿日期：2020-07-16；修回日期：2020-11-15生精细胞减数分裂期染色体分析是遗传学、组织学胚胎学、细胞生物学和生殖生物学研究的重要手段[1-2]。
简述小鼠染色体制备的流程小鼠染色体制备。
选只小鼠，得挑健康的，不能是病怏怏的那种。
然后，得给它打麻药，让它舒舒服服地睡一觉。
这样咱们就能轻松取得细胞了。
取细胞这活儿，得迅速。
从骨髓或者脾脏里取，这得看实验需求。
取出来后，咱们得让细胞在低渗环境里待会儿，这样染色体就能胀大，看得更清楚。
然后，用固定液固定一下，这样细胞形态就稳定了。
接下来，就是染色和观察了。
用专门的染料给染色体上色，让它们变得五彩斑斓的。
然后，在显微镜下瞅瞅，看看这些染色体长啥样，数数有多少个。
这可得细心点，不能漏看了。
说起来，小鼠染色体制备这事儿，看着简单，其实挺考验技术的。
得选对小鼠，还得会取细胞、染色、观察。
不过，只要技术到位，就能得到清晰的染色体，为后面的研究打好基础。
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姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察一．实验目的1．了解快速制备动物染色体标本的方法，掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的制备方法。
2．观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征。
3．掌握小鼠睾丸染色体标本制备基本过程，了解操作步骤的原理。
二．实验原理（一）染色体染色体是基因的载体。
真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。
制备染色体标本无疑是细胞学最基本的技术之一，优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。
染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。
本实验采用的方法是从小鼠的睾丸细胞中获取。
染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断地运动变化的，一般在有丝分裂中期，染色体的形态最典型、最易辨认和区分。
因此，制备染色体标本获取的是中期细胞。
染色体特征：1.数目（2n=？）2.长度（绝对长度、相对长度）3.着丝粒位置（M/SM/ST/T）4.随体与次溢痕的数目、大小和位置5.带型分析（二）操作方法小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织（由于分裂活动旺盛，睾丸也可以）。
利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作，但其基本程序是简便的。
在小鼠睾丸中，细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。
通过小鼠睾丸得到染色体比较简便，一般不需要无菌操作。
用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂。
由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理、低渗、固定、制片、染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。
减数分裂是细胞分裂染色体数目减半时发生在性细胞的形成过程中。
哺乳动物在性成熟以后，精巢内的性细胞总是在分批分期不断的成熟，因此，对哺乳动物的精巢进行一定的技术处理，随时都可以获得减数分裂过程中各个时期染色体的标本。
课程教学C ur r i cul um T e ac hi ng 爝煎逦尉动物遗传学教学实验‘q、鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作，方法改进的研究张燕军赖双英苏蕊张文广(内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018)摘要“减数分裂期染色体制备实置F’是动物遗传学实验课程重要内容。
本文介绍了小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作的改进方法，通过本方法可制备和观察到大量分散良好、背景清晰、染色体结构紧凑的睾丸细胞减数分裂各期分裂相，得到较好的实验效果。
关键词动物遗传学睾丸细胞减数分裂染色体改进中图分类号：G424文献标识码：AA ni m al G enet i cs T eachi ng Exper i m ent’’M ous e Tes t i s M ei ot i cC hr om os om e Speci m en’’M et hods I m pr ovem entZ H A N G Y anj un，L灿Shuangyi ng，SU R ui，Z H A N G W enguang(C ol l ege of A ni m al Sci e nce，I n ner M ongol i a A gr i cul t ur al U ni ve r s i t y,H ohhot，I nne r M ongol i a010018)A bs t r ac t’’P r epa ra t i on of m ei ot i c cl l r om os om es e xper i m e nt”i s al l i m port a nt pa r t of ani m al ge net i c s experi m ent cour se．Thi sar t i cl e des cr i bes t he m ous e t est i s m ei ot i c chr om os om e s peci m en of t he i m pr o ved m et hod，can be prepar ed by t hi s m e t hod and obs erved a l ar ge num be r of w el l—di sper s ed，cl ea r backgr ound，com pact t es t i cul ar m ei ot i c cl l r om os om e st r uct ur e of e ach phas e of t he di vi s i on，ge t be t t e r ex per i m ent al r es ult s．K ey w or ds ani m al gen et i cs；t est i cul a r cel l s；m ei osi s；cl l r om os om e；i m pr ovem ent遗传学既是一门历史悠久的学科，又是一门发展迅速、实践性很强的学科，研究范围正在不断拓宽和深化，新技术、新方法不断涌现。
小鼠睾丸输出管注射法建立转基因小鼠的试验研究作者：王鹤曹文广来源：《天津农业科学》2013年第04期摘要：应用玻璃针将脂质体包裹的质粒pEGFP-C1通过睾丸输出管注射到4周龄昆明（KM）小白鼠睾丸曲精细管内。
共注射6只小鼠，其中一只注射后马上做石蜡切片观察转染液注射入曲细精管内的情况，其他5只继续饲养，1周后取1只小鼠培养睾丸的支持细胞，观察是否有荧光出现。
4周后，用PCR法检测剩余4只小鼠睾丸组织曲细精管基因组中的外源DNA，4只都显示为阳性。
表明用睾丸输出小管注射法将外源基因导入小鼠睾丸是一条简便可行的新途径。
关键词：小鼠；转基因；睾丸输出管注射法中图分类号：S865.1文献标识码：ADOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.04.008Construction of Transgenic Mice by Testicular Efferent Duct InjectionWANG He1，2， CAO Wen-guang2（1. College of Animal Science， Xinjiang Agriculture University， Urumqi， Xinjiang 830052， China； 2.Institute of Animal Science， Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100193， China）Abstract： Using glass needle plasmid pEGFP-C1 liposome-encapsulated was injected into the testicular efferent of 4 weeks male KM mice. Do immediately after an injection of paraffin sections to obserne the transfection solution was injected into the seminiferous tules， remanent mouse to continue to raise， after a week， take one mouse cultivating testicular sertoli cells. After four weeks， exogenous DNA in the PCR method for detecting the remaining four mouse testis seminiferous tubules genome， all as positive. The result indicated that the data in this study to transgenic animals could be established by testicular efferent injection.Key words： mice；transgenic；testis efferent injection转基因动物在生命科学、医学、生物制药等领域有着广泛的研究和应用前景，因此，科学家们一直在探索一种更简便易行、经济实用而又高效的转基因方法。
实验四小鼠生殖细胞染色体有带核型标本制备及带型分析【实验原理及目的】真核体生殖细胞的形成是采取一种特殊方式的细胞分裂,即减数分裂。
在这一过程中,染色体只复制一次而核连续分裂两次,从而使细胞染色体数目减半。
本实验以小鼠精巢为实验材料,掌握小鼠精巢染色体及其有带核型标本的制作方法,了解不同带型的特点,观察减数分裂过程中不同时期染色体及细胞类型。
【实验材料及器具】性成熟的雄性小鼠、0.04%秋水仙素、2%柠檬酸钠、0.075mol/LKCl、冰醋酸、甲醇、pH6.8 磷酸缓冲液、pH6.8Giemsa 稀释液、0.1%胰酶溶液、0.1mol/LHCl、5%氢氧化钡溶液、2×SSC 溶液、天平、解剖器材、注射器、平皿、吸管、10ml 离心管、离心机、载玻片、染缸、水浴锅、恒温箱、恒温烤片仪、显微镜、显微照相设备、图片放大器材、胶卷、像纸及显定影器材等。
【实验方法及步骤】1.秋水仙素处理:取小鼠睾丸前3~4h,于小鼠腹腔内注入0.04%秋水仙素、每10g 体重注射0.1ml。
2.取细精小管:用断脊髓法处死动物,解剖取其睾丸置于2%柠檬酸钠溶液的平皿中。
然后用小剪刀剪开其外层白膜,用眼科镊子从睾丸中挑出细精小管,在平皿中用2%柠檬酸钠洗涤后置于5ml 2%柠檬酸钠溶液的离心管中。
3. 制备细胞悬液:待细精小管沉于离心管底后,用滴管头将细精小管研碎,经反复研磨和吹打,使处于减数分裂过程中的各期细胞游离于溶液中,弃大块膜状物制成细胞悬液。
4. 收集细胞:1500r/min 离心10min,弃上清,其沉淀物即是处于减数分裂过程中的各期细胞。
5. 低渗;.加0.075mol/LKCl 于离心管中,立即将沉淀物吹散打匀使细胞悬浮于离心管溶液中后,置37℃水浴低渗处理20min。
6. 固定:低渗处理后的细胞以1500r/min 离心10min,弃上清后,沿管壁加入新配甲醇-冰醋酸固定液(3:14ml。
立即将细胞团吹散打匀,置室温固定20min,即第一次固定。
小鼠染色体制备流程嘿，朋友们！今天咱来聊聊小鼠染色体制备流程这档子事儿。
你想啊，这小鼠就像是一个小小的生命宝藏，而染色体就是藏在里面的神秘密码。
要把这些密码给弄清楚，可得有一套靠谱的办法。
先说说怎么挑选小鼠吧。
这就好比你去菜市场买菜，得挑那新鲜的、精神的。
咱得找健康活泼的小鼠，可别挑到病恹恹的，不然后面的事儿可就难办咯。
然后呢，得给小鼠来个温柔的处理。
就像给小朋友洗澡一样，得小心翼翼的。
把小鼠固定好，别让它乱跑乱动，不然咱可没法下手。
接下来就是关键步骤啦！要把小鼠的细胞弄出来。
这就好像是从一个大宝藏里往外挖宝贝似的。
用合适的方法，把细胞从它身体里弄出来，还得保证这些细胞完好无损。
细胞弄出来后，还得让它们乖乖听话，进行培养。
这就像是养花儿一样，得给它们合适的环境、营养，让它们茁壮成长。
等细胞培养好了，就该进行染色啦！这就像是给它们穿上漂亮的衣服，让它们变得与众不同，这样我们才能更好地看清它们。
哎呀，你说这过程是不是挺有意思的？就像一场小小的冒险，每一步都充满了挑战和惊喜。
在整个过程中，可得细心再细心，耐心再耐心。
可别像个马大哈似的，一不小心就搞砸了。
咱做这个可不是瞎折腾，这是为了探索生命的奥秘呀！通过了解小鼠的染色体，说不定就能解开很多关于生命的谜题呢。
所以啊，朋友们，别小看了这小鼠染色体制备流程。
虽然它看起来有点复杂，但只要咱用心去做，就一定能做好。
就像爬山一样，虽然过程辛苦，但当你爬到山顶，看到那美丽的风景时，一切都值了！总之，小鼠染色体制备流程是一个既有趣又有意义的事儿，让我们一起好好去探索吧！。
小鼠雄性生殖细胞染色体制备方法的改进
陈晓东;吴玲
【期刊名称】《包头医学院学报》
【年(卷),期】2001(000)003
【摘要】@@ 目前制备小鼠雄性生殖细胞染色体标本大多采用徐惟安的方法[1],该方法只使用常规仪器和试剂即可完成,但我们在使用中感到空气干燥法操作技术不易掌握,且精原细胞和初级精母细胞染色体要分别制备.我们在实验中经过反复摸索,提出一些改进意见.
【总页数】1页(P228-228)
【作者】陈晓东;吴玲
【作者单位】包头医学院卫生毒理学教研室;包头医学院卫生毒理学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R321.1
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1.敌枯双对雄性小鼠生殖细胞分裂比率及精原细胞染色体畸变的影响 [J], 彭鲁英;王云
2.辐射诱发雄性小鼠各阶段生殖细胞染色体... [J], 孙淑清;李永安
3.香烟烟雾提取物致雄性小鼠生殖细胞染色体畸变与睾丸组织中SOD和MDA含量的变化 [J], 陈晓东;吴玲;罗绥兰
4.对二氯苯染毒雄性小鼠体细胞与生殖细胞染色体畸变分析 [J], 李明;陆清香;李永
林;田桂英;于朝贵
5.雄性小鼠生殖细胞染色体制备方法的研究 [J], 王彬;孙晓玲;刘丽波
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小鼠染色体制备方法初探
唐慕湘;张兴华;陈家强;王配军
【期刊名称】《解剖学研究》
【年(卷),期】2011(33)2
【摘要】目的改进小鼠染色体制备过程中的关键环节,提高分裂中期染色体制备效果。
方法严格选材,改进小鼠实验前用药剂量及时间,控制滴片高度,把握染色时间。
结果染色体颜色呈鲜艳的玫瑰红色,形状呈均匀的圆盘状分布。
结论掌握染色体制备的原理是改进实验方法的基础,严格规范操作方法是关键。
【总页数】2页(P160-160)
【关键词】小鼠;染色体;制备;方法
【作者】唐慕湘;张兴华;陈家强;王配军
【作者单位】湖北医药学院形态学实验室;湖北医药学院解剖教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
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1.小鼠睾丸染色体标本的制备方法的研究 [J], 洪燕;罗丹;龚玮
2.小鼠骨髓细胞染色体标本制备方法的改进 [J], 刘庆军;孙永君
3.小鼠骨髓细胞中期染色体标本制备方法的改进 [J], 刘星;冯昆;张青峰;姬可平;王燕
4.小鼠骨髓细胞有丝分裂染色体标本制备方法的优化 [J], 高振华;吴浩浩;赵志辉;
许英梅;Aguzey Harry;程贵兰;生冉;许嫣红
5.两种小鼠生精细胞染色体制备方法的探讨与评价 [J], 卢文亮;孟卫京;薛春梅;杨静;宁伟霞;毛国丽;郭兴萍
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