生物：5.3《血红蛋白的提取和分离》同步测试(新人教版选修1)

课题3 血红蛋白的提取和分离1.凝胶柱制作的顺序一般是()①橡皮塞打孔②挖凹穴③装玻璃管④盖尼龙网⑤盖尼龙纱⑥将橡皮塞插入玻璃管⑦接尼龙管、装螺旋夹⑧柱顶插入安装玻璃管的橡皮塞A.①③④⑤⑥⑧⑦②B.①②③④⑤⑥⑦⑧C.①②③④⑥⑤⑧⑦D.①②③⑦⑥⑤⑧④:选择合适的橡皮塞→打孔→挖凹穴→装玻璃管→盖尼龙网→盖尼龙纱→将橡皮塞插到玻璃管→接尼龙管→装螺旋夹→柱顶插入安装玻璃管的橡皮管。

2.蛋白质提取和分离分为哪几步?()A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定3.下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述,正确的是()A.红细胞的洗涤:加入蒸馏水,缓慢搅拌,低速短时间离心B.血红蛋白的释放:加入生理盐水和甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌C.分离血红蛋白:将搅拌好的混合液离心、过滤后,用分液漏斗分离D.透析:将血红蛋白溶液装入透析袋,置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h,应加入生理盐水,防止细胞破裂;将血红蛋白从红细胞中释放时,需要加入蒸馏水,以便使红细胞破裂释放出血红蛋白;透析时,应将透析袋置于pH为7.0的磷酸缓冲液中透析12 h。

4.红细胞中含有大量血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。

下列对血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是()A.血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D.可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定,提取和分离血红蛋白时,首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后配制成凝胶悬浮液,而不是用生理盐水;最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

10 血红蛋白的提取和分离1、下列有关凝胶色谱法的叙述，不正确的是A．凝胶色谱法是利用凝胶将相对分子质量不同的蛋白质分开的一种方法B．在洗脱过程中，相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部，所以最先洗脱出来C．凝胶内部有很多微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的蛋白质的大小无相应关系D．凝胶对要分离的物质没有吸附作用，所有要分离的物质最终都能被洗脱出来2、下列关于电泳的说法不正确的是( ）A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少D．用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小3、下列关于凝胶色谱柱的装填的说法不正确的是（）A.装填时，不能有气泡产生。

因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，影响分离效果B.在操作过程中，不能让洗脱液流干C.样品洗脱结束后，及时倒掉色谱柱中的凝胶D.干的凝胶要用蒸馏水充分溶胀后，才能装填4、下列关于透析的叙述，正确的是（）A.可采集猪血作为实验材料B.用蒸馏水重复洗涤红细胞C.血红蛋白释放后应低速短时间离心D.洗脱液接近色谱柱低端时开始收集流出液5、下列关于物质提取、纯化原理的叙述中，不正确的是（）A．采用凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同，在色谱柱中的移动速度不同B．使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质C．电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同，产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离D．离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同6、在血红蛋白的提取和分离过程中，下列有关在凝胶色谱柱上加入样品和洗脱的操作的叙述，不正确的是（）A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5 mL收集一管，连续收集流出液7、将经处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是（）①脂溶性物质②沉淀层③甲苯层④血红蛋白溶液A．①②③④ B．③②④①C．③①②④ D．③①④②8、下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是（）A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12h9、下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述，正确的是A.为了防止血液凝固，应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B.红细胞洗涤使用5倍体积的蒸馏水，直到离心后上清液不呈现黄色为止C.利用0.9%的NaCl对血红蛋白溶液的透析12小时，可以去除小分子杂质D.在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品10、已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如下图所示。

课题3 血红蛋白的提取和分离蛋白质的各种特性的差异如分子的______和______、所带________________、溶解度、________和对其他分子的亲和力，等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。

一、凝胶色谱法1．概念：凝胶色谱法也称做__________，是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。

2．原理：大多数凝胶是由________化合物构成的小球体，内部有许多贯穿的通道，当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量____的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程______，移动速度______；而相对分子质量______的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在________移动，路程______，移动速度______。

相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。

3．凝胶材料：______性，______类化合物，如葡聚糖或________。

4．具体过程：（1）________混合物上柱。

（2）洗脱开始，____________的蛋白质进入凝胶颗粒内；相对分子质量______的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。

（3）___________的蛋白质被滞留；_____________的蛋白质向下移动。

（4）相对分子质量不同的分子完全分开。

（5）___________的蛋白质行程较短，已从________中洗脱出来，________________的蛋白质还在行进中。

提示：洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

二、缓冲溶液1．作用：在________内，能够抵制外界的________对溶液____的影响，维持____基本不变。

2．配制：通常由________溶解于水中配制而成。

调节缓冲剂的______就可以制得在不同________使用的缓冲液。

三、电泳1．概念：带电粒子在______的作用下发生______的过程。

2．原理：许多重要的生物大分子，如______、______等都具有________的基团，在一定pH下，这些基团会带上______或______。

人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题一、单选题1. 蛋白质提取过程中有关透析的叙述，错误的是A．用于透析的薄膜要具有选择透过性B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析可用于更换样品的缓冲液2. 在采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是（）A．调节pH B．维持红细胞的能量供应C．防止微生物生长D．防止血液凝固3. 凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶（Sephadex G75）,其中G、75的含义分别是（）A．G表示凝胶的使用量,75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度,75表示需加热至75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示每克凝胶及膨胀时吸水7.5 gD．G表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm34.用某种药物饲养动物一段时间，测得实验组比对照组动物血浆中血红蛋白含量明显偏高。

该药物的作用最可能是A ．增加血红蛋白的合成能力C ．对红细胞有破坏作用5. 血红蛋白由____________个肽链组成（ ）A ．2B ．4C ．3D ．56. 分离血红蛋白溶液时,离心后试管中的溶液分四层,血红蛋白在第__________层（ ）A ．一B ．二C ．三D ．四7. 洗涤红细胞时，离心所采用的方法是A ．低速长时间离心B ．低速短时间离心C ．高速长时间离心D ．高速短时间离心8. SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS 的作用是A ．增大蛋白质的相对分子质量B ．改变蛋白质的形状C ．掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D ．减少蛋白质的相对分子质量9. 随着人类跨入蛋白质组时代,对蛋白质的研究和应用越来越深入,首先要做的一步是（ ）A ．弄清各种蛋白质的空间结构B ．弄清各种蛋白质的功能C ．弄清各种蛋白质的合成过程D ．获得高纯度的蛋白质10. 制作凝胶色谱柱时,橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是（ ）A ．移液管头部5 cmB ．移液管尾部5 cmC ．移液管头部3 cmD ．移液管尾部3 cmD ．增加红细胞的合成数量B ．提高血浆蛋白的含量二、非选择题11. 蛋白质的各种特性的差异,可以用来分离不同种类的蛋白质,下列对这种特性的描述中正确的一项是……（ ）A ．分子的形状、大小和溶解度B ．所带电荷的性质和多少、吸附性质C ．对其他分子的亲和力D ．以上三项都是12. 使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）A ．电荷的多少B ．分子的大小C ．肽链的多少D ．分子形状的差异13. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是（ ）A ．相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B ．相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C ．相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D ．二者根本无法比较14. 蛋白质的提取和分离一般分为四步,符合要求的一项为（ ）A ．粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B ．粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C ．样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D ．纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理15. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是 A ．对其他分子的亲和力C ．所带电荷多少D ．相对分子质量的大小B ．溶解度（）入烧杯,加入五倍体积的__________缓慢搅拌__________min,低速短时间离心,重复洗涤__________次,至上清液中无__________，则表明红细胞洗16.采集血样后,及时分离红细胞。

5.3血红蛋白的提取和分离每课一练（人教版选修1）一、选择题1．凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是() A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C．将酶或细胞固定在凝胶中D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度【解析】凝胶的种类较多，但每一种凝胶内部都有孔隙，其共同点是改变蛋白质分子通过凝胶时的路径。

【答案】 A2．(2013·咸阳高二检测)下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是()A．是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B．在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，最后流出C．凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其空隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D．一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来【解析】凝胶内部微细的多孔网状结构，若空隙过大，所有蛋白质分子都能进入，不能起到分离的作用。

【答案】 C3．用凝胶色谱法分离蛋白质的实验中，相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为图中哪一个()【解析】题图所示，相对分子质量较大的蛋白质容易通过凝胶间隙，先被洗脱出来；相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部，后被洗脱出来。

【答案】 B4．血红蛋白的提取和分离一般分为四步，符合要求的是()A．粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B．粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C．样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D．纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理【解析】血红蛋白的提取和分离一般可分为四大步，包括样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品处理；再经过透析法去除小分子的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量与血红蛋白不同的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

课题3 血红蛋白的提取和分离一、选择题1．用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质（）A．路程较长，移动速度较慢B．路程较长，移动速度较快C．路程较短，移动速度较慢D．路程较短，移动速度较快2．下列各项中，一般不影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是（）A．层析柱的柱高B．层析柱的直径C．缓冲溶液D．样品的分布3．的蛋白质能进入凝胶内部通道（）A．相对分子质量大的B．吸附性高的C．相对分子质量小的D．溶解度低的4．SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是（）A．增大蛋白质的相对分子质量B．改变蛋白质的形状C．掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D．减少蛋白质的相对分子质量5．在装填色谱柱时，不得有气泡存在的原因是（）A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果B．气泡阻碍蛋白质的运动C．气泡能与蛋白质发生化学反应D．气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密6．将释放出的血红蛋白以2000r/min的速度离心10min后，可以看到试管中的溶液分为4层，其中哪一层是血红蛋白水溶液（）A．第一层无色透明B．第二层白色C．第三层红色透明D．第四层暗红色7．利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（）A．相对分子质量大的B．溶解度高的C．相对分子量小的D．所带电荷多的8．下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中不正确的是（）A．血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过颜色来判断什么时候应该收集洗脱液B．用生理盐水重复洗涤红细胞C．血红蛋白释放后应低速短时间离心D．不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的PH范围内，以维持其结构和功能9．下列有关提取和分离血红蛋白实验的叙述，错误的是（）A．该实验的材料必须选用鸡血B．通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，为此样品的粗提取C．凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D．电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小差异分离蛋白质10．凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是（）A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C．将酶或细胞固定在细胞中D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速率。

专题五课题三一、选择题1．利用凝胶色谱法什么样的蛋白质先洗脱出来()A．相对分子质量大的B．溶解度高的C．相对分子质量小的D．所带电荷多的解析：相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，首先洗脱出来。

答案：A2．蛋白质提取和分离分为哪几步()A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析：A中凝胶色谱操作及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。

答案：C3．在蛋白质的提取和分离中，关于对样品处理过程中，分析无误的是()A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果C．洗涤过程选用0.1%的生理盐水D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质解析：洗涤红细胞的目的是去除血浆中除血红蛋白以外的杂蛋白；洗涤时离心速度过大，时间过长，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果；洗涤过程选用0.9%的生理盐水。

答案：D4．使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中，相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为图中()解析：本题考查对凝胶色谱法分离蛋白质原理的理解，相对分子质量较大的蛋白质留在颗粒外面，相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部；蛋白质相对分子质量大的通过凝胶间隙先被洗脱，蛋白质相对分子质量小的进入凝胶内部而后被洗脱。

答案：B5．下列各项中，一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质的分离度的是()A．层析柱的高度B．层析柱的直径C．缓冲溶液D．样品的分布解析：分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关。

样品的分布也影响分离度，缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷，因此也影响分离度。

只有层析柱的直径一般不会影响分离度。

人教版高中生物 选修1 专题5课题3 血红蛋白的提取和分离 同步练习题一、单选题1. 选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料的好处是（）A．血红蛋白是有色蛋白B．红细胞无细胞核C．红细胞蛋白质含量高D．红细胞DNA含量高2. 血红蛋白呈红色的原因是（）A．含有O2B．含有CO C．含有CO2D．含有血红素3. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（）A．对其他分子的亲和力B．溶解度C．所带电荷多少D．相对分子质量的大小4. 缓冲液的作用是在一定范围内，抵制外界的影响来维持（）A．温度基本不变B．pH基本不变C．渗透压基本不变D．氧气浓度基本不变5.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A．电荷的多少B．分子的大小C．肽链的多少D．分子形状的差异6. 下列操作正确的是（）A．分离红细胞时采用低速长时间离心B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D．透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液，透析12h7. 血红蛋白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（）A．无色透明的甲苯层B．脂溶性物质的沉淀层C．血红蛋白的水溶液D．其他杂质的暗红色沉淀物8. 凝胶柱制作的顺序一般是①橡皮塞打孔②挖凹穴③装玻璃管④盖尼龙网⑤盖尼龙纱⑥将橡皮塞插入玻璃管⑦接尼龙管、装螺旋夹⑧柱顶安装带玻璃管的橡皮塞A．①→③→④→⑤→⑥→⑧→⑦→②B．①→②→③→④→⑤→⑥→⑦→⑧C．①→②→③→④→⑥→⑤→⑧→⑦D．①→②→③→⑦→⑥→⑤→⑧→④9. 下列关于凝胶色谱柱的操作,正确的是( )A．将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B．将橡皮塞下部用刀切出凹穴C．插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D．将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片10.对于凝胶色谱柱的装填哪项是错误的（）A．凝胶充分溶胀后配成凝胶悬浮液，在尼龙管打开的情况下一次性缓慢倒入色谱柱内B．色谱柱内一旦发现有气泡产生就必须重装C．装填时可轻轻敲打色谱柱，使凝胶装填均匀D．当凝胶表面干燥后，用300mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤11. 样品的加入和洗脱的操作不正确的是（）A．加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B．用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面C．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内D．等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口12. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在本课题中的作用是（）A．对分离的蛋白质进一步纯化B．对分离的蛋白质的纯度进行鉴定C．检测分离的蛋白质的活性D．提高蛋白质的活性13. 下列哪种现象表示凝胶色谱柱的装填性能良好（）A．色带均匀、狭窄、平整B．色谱柱内有气泡C．色谱柱内有气泡D．色谱柱装填不均匀14. 凝胶柱的制作常用玻璃管，在选择玻璃管时应考虑的因素有（）①玻璃管的高度②玻璃管的直径③样品的体积④缓冲液的pHA．①②③④B．①②③C．②③④D．①②④15. 凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶（Sephadex G75）,其中G、75的含义分别是（）A．G表示凝胶的使用量,75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度,75表示需加热至75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示每克凝胶及膨胀时吸水7.5 gD．G表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm316. 关于对样品处理过程的分析，正确的是 ( )A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤次数、离心速度及离心时间都会影响实验效果C．洗涤过程选用0.1％的生理盐水D．在血液中加入柠檬酸钠能够加速红细胞破裂17. 下列操作可以达到目的的选项是（）选项操作目的A 溶解海藻酸钠时用大火加热海藻酸钠可以快速溶解B 将装有蛋白质粗制品的透析袋（玻璃纸制成）放入透析液中蛋白质与其他小分子化合物分离C 提取DNA时，在切碎的洋葱中加入洗涤剂溶解DNAD 在PCR扩增DNA时加入引物合成子链的原料A．A B．B C．C D．D18. 将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾。

2014-2015年人教版选修一5.3血红蛋白的提取和分离同步作业一、单项选择1. DEAE-纤维素离子交换层析法可用于分离纯化蛋白质，主要是由于（）A．蛋白质的溶解度不同B．蛋白质与层析介质吸附力不同C．蛋白质分子能与其对应的配体进行特异性结合D．蛋白质所带电荷不同2. 利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是( )A．蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小B．蛋白质相对分子质量的大小C．蛋白质所带电荷的多少D．蛋白质溶解度的大小3. 凝胶色谱法分离蛋白质时由色谱柱下端最先流出的是( )A.相对分子质量较小的蛋白质B.相对分子质量较大的蛋白质C.凝胶颗粒D.葡萄糖或琼脂糖分子4. 下面说法不正确的是( )A.在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B.缓冲溶液通常由1--2种缓冲剂溶解于水中配制而成1C.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D.透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内5. 使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量时，可选用一组已知相对分子质量的标准蛋白同时进行电泳，根据已知相对分子质量的标准蛋白的电泳区带位置，用电泳迁移率和相对分子质量的对数作标准曲线，可以测出未知蛋白的相对分子质量。

下列说法不正确的是( )A.SDS能与蛋白质形成复合物而掩盖不同蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率取决于分子的大小B.与已知相对分子质量的标准蛋白的电泳带相等，只能估计出待测蛋白质的相对分子质量C.SDS在引发剂和催化剂的作用下参与构成聚丙烯酰胺凝胶D.如果只是分离混合物而不需要测定蛋白质的相对分子质量时，就无需加入SDS，此时的电泳迁移率取决于所带电荷和分子的大小6. 关于凝胶色谱柱的装填，除哪项外均为正确解释( )A.交联葡聚糖凝胶(SephadexG75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值B.色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装C.用300mL物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12hD.凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液7. (多选)电泳实现样品中分子的分离是利用了( )A．各种分子带电性质的差异B．分子本身的大小C．电荷的多少D．分子形状的差异8. 利用凝胶色谱法分离蛋白质时，蛋白质洗脱出来的顺序是( )①相对分子质量最大的②相对分子质量最小的③相对分子质量适中的A．①②③ B．③②① C．①③② D．②①③29. 下列有关叙述错误．．的是（）A．用醋酸菌制作果醋时，需通入氧气B．利用凝胶色谱法可分离相对分子质量不同的蛋白质C．进行DNA粗提取时，用酒精提取含杂质较少的DNAD．接种前需对培养基、培养皿、实验操作者的双手等进行灭菌处理10. 下列有关电泳的叙述，不正确的是( )A．电泳的支持介质可用醋酸纤维薄膜，滤纸、琼脂凝胶等B．带电粒子的电荷量、粒子大小和形状都可以影响泳动速度C．点样时，应将有记号的一面向上平铺在玻璃板上进行点样D．电泳时，电流强度越大，电泳效果越好二、非选择题11. 商品化植酸酶主要来自微生物，首先筛选出产酶的菌株，然后制备植酸酶，请根据下面的流程图回答以下问题：(1)Ⅰ中的主要成分有哪些？________________；Ⅱ中包含哪些成分？________________。

血红蛋白的提取和分离
一．选择题
．凝胶色谱法是根据（）分离蛋白质的有效方法。

分子的大小相对分子质量的大小带电荷的多少溶解度
．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（）基本不变。

温度渗透压氧气浓度
．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（）的电极移动。

相同相反相对相向
.哺乳动物和人的成熟的红细胞中的（）与氧气的运输有关。

血红蛋白肌红蛋白肌动蛋白肌球蛋白
．血液由血浆和各种血细胞组成，其中（）的含量最多。

白细胞血小板红细胞淋巴细胞
．为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（）。

. .甲苯.蒸馏水.柠檬酸钠
．将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为层，其中第层是（）
无色透明的甲苯层脂溶性物质的沉淀层血红蛋白的水溶液其他杂质的暗红色沉淀物
非选择题
．电泳利用了待分离样品中各种分子以及、的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。

答案：带电性质的差异；分子本身的大小；形状的不同
．你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？
答案：血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步。

包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；在经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。