血小板聚集率检测及临床意义

血小板检验及临床意义血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。

虽则有些方法能应用于多种检测目的，但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。

故在检测时应合理地运用。

血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。

通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。

由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类，在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。

1 血小板数量检查1.1目测计数法将血液用适当的稀释液作一定量稀释，混匀后充入计数池内，在显微镜下计数一定体积内的血小板数量，经过换算得出每升血液中血小板数。

1.2细胞分析仪计数法1.2.1电阻抗法血小板通过小孔引起电阻变化，产生的脉冲经数字化后，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板数目。

1.2.2光散射法折射率与细胞内容物有关，血小板有别于红细胞等其它非血小板颗粒，其折射率较低，通过低角度光散射即可与红细胞区别。

2 血小板形态、结构检查瑞氏染色，显微镜观察；MPV检查，应用全自动血细胞计数仪检测。

3 血小板功能检查3.1血块收缩试验(CRT)血块收缩时有相应的血清析出，计算占原有血量的百分数。

3.2血小板粘附试验一定量血液与一定表面积的异物接触后，即有相当数目的血板粘附于异物表面上，测定接触面后血小板数之差，可求出占血小板总数的百分率。

3.3血小板聚集试验血小板聚集是血小板的主要功能之一，主要有比浊法、剪切诱导血小板聚集测定法、散射性粒子检测法、全血电阻抗法、血小板计数法、微量反应板法等。

3.3.1比浊法在特定的搅拦条件下，在富含血小板血浆中加入诱导剂后，由于血小板发生聚集，悬液的浊度随之下降，根据描记曲线可以计算血小板聚集程度及速度[1]。

3.3.2剪切诱导测定法不加诱聚剂，血小板在高剪切力环境下血小板聚集，根据比浊法的原理采用旋转式铁板流体测定仪，仪器绘制成聚集曲线，以观察体外血小板聚集变化。

4 注意事项4.1全部用具和稀释液要特别清洁，无污染。

血小板聚集试验临床意义概念：血小板聚集platelet aggregation,PAg是指血小板与血小板之间的粘附,显示活化的血小板相互作用聚集成团的特征;在富含血小板的血浆PRP或全血WB中,加入致聚剂亦称诱导剂连续搅拌能诱发这种现象;血小板聚集试验platelet aggregation test,PAgT参考范围：时最大聚集率MAR±,μm时±比浊法;2.肾上腺素μg/±比浊法;3.胶原±比浊法;4.瑞斯托霉素±比浊法；玻片定性法大多数在++～+++;5.玻片法30s不出现凝集为异常;影响因素：1.最好采用硅化或塑料注射器,玻璃试管等须涂硅处理或使用塑料制品;因为玻璃可以激活凝血反应;2.止血带不应扎得太紧,时间最好不超过5min,强调采血顺利,以防激活凝血反应;3.必须在采血后3h内检测完毕;4.必须避免用EDTA作抗凝剂,防止血浆中Ca2+的过度被螯合;首选枸橼酸钠抗凝;5.由于是比浊法,故避免溶血、红细胞混杂及牛奶、豆浆等脂类物质对检测的干扰;6.阿司匹林、双嘧达莫、肝素、双香豆素类药物在检测前1周内不能应用;7.血小板聚集试验受当日的环境和试剂影响颇大,最好每次以正常人血小板作对照;8.血小板聚集作用随血浆中枸橼酸钠浓度的降低而增高,因此在贫血患者中应加入较正常者为多的抗凝剂;9.采血后的标本以放在15～25℃的室温下为宜,低温会使血小板激活,聚集能力增加;临床意义：1PAgT增高：反映血小板聚集功能增强;见于高凝状态和或血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、静脉血栓形成、肺梗死、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症、抗原-抗体复合物反应、人工心脏和瓣膜移植术等;2PAgT减低：反映血小板聚集功能减低;见于获得性血小板功能减低如：尿毒症、肝硬化、MDS、原发性血小板减少性紫癜、急性白血病、服用抗血小板药物、低无纤维蛋白原血症等;还见于遗传性血小板功能缺陷,不同的血小板功能缺陷病对各种诱导剂的反应不同;医学教|育网搜集整理血小板无力症：ADP、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集减低和不聚集；巨大血小板综合征：ADP、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集正常,但瑞斯托霉素诱导的血小板不凝集；贮存池病：致密颗粒缺陷时,ADP诱导的聚集常减低,无二相聚集；胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集正常；α颗粒缺陷时,血小板凝集和聚集均正常；血小板花生四烯酸代谢缺陷：ADP诱导的聚集常减低,无二相聚集,胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集均低下;。

血小板聚集试验临床意义概念：血小板聚集（platelet aggregation,PAg）是指血小板与血小板之间的粘附，显示活化的血小板相互作用聚集成团的特征。

在富含血小板的血浆（PRP或全血（WB）中，加入致聚剂（亦称诱导剂）连续搅拌能诱发这种现象。

血小板聚集试验(platelet aggregation test，PAgT)参考范围：1.ADP0.5μm时最大聚集率（MAR）0.627±0.143，ADP1.0μm时MAR0.678±0.178（比浊法）。

2.肾上腺素0.4μg/mlMAR0.678±0.178（比浊法）。

3.胶原0.2mg/mlMAR0.717±0.193（比浊法）。

4.瑞斯托霉素1.5mg/mlMAR0.875±0.114（比浊法）；玻片定性法大多数在++～+++。

5.玻片法30s不出现凝集为异常。

影响因素：1.最好采用硅化或塑料注射器，玻璃试管等须涂硅处理或使用塑料制品。

因为玻璃可以激活凝血反应。

2.止血带不应扎得太紧，时间最好不超过5min，强调采血顺利，以防激活凝血反应。

3.必须在采血后3h内检测完毕。

4.必须避免用EDTA作抗凝剂，防止血浆中Ca2+的过度被螯合。

首选枸橼酸钠抗凝。

5.由于是比浊法，故避免溶血、红细胞混杂及牛奶、豆浆等脂类物质对检测的干扰。

6.阿司匹林、双嘧达莫、肝素、双香豆素类药物在检测前1周内不能应用。

7.血小板聚集试验受当日的环境和试剂影响颇大，最好每次以正常人血小板作对照。

8.血小板聚集作用随血浆中枸橼酸钠浓度的降低而增高，因此在贫血患者中应加入较正常者为多的抗凝剂。

9.采血后的标本以放在15～25℃的室温下为宜，低温会使血小板激活，聚集能力增加。

临床意义：1）PAgT增高：反映血小板聚集功能增强。

见于高凝状态和（或）血栓前状态和血栓性疾病，如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、静脉血栓形成、肺梗死、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症、抗原-抗体复合物反应、人工心脏和瓣膜移植术等。

血小板检查方法以及临床意义摘要】目的探讨血小板功能检测对于临床相关疾病的诊断和抗血小板药物的筛选及相关研究有着重要的意义。

目前，血小板功能检测的实验与方法日益增多，但所有这些检测方法均有不足之处，因而有必要研究和发展一种操作简便、检测灵敏度高的方法。

对近年来血小板功能检测方法诸如血小板的一般功能检测、血小板黏附功能测定、血小板聚集功能测定、血小板释放功能测定、血小板凝血活性检测和流式细胞术在血小板功能检测中的应用等研究进展进行了综述，并对研究前景作了简单的展望。

【关键词】血小板检查方法临床意义红骨髓中的造血干细胞分化成巨核细胞后，其胞质断离脱落即形成血小板。

初生成的血小板体积较大，黏着力强，易于聚集和发生释放反应，有很强的止血和凝血功能，在循环血液中只有初生成的血小板具有止血功能，且只能维持2天。

老化的血小板75％被脾、肝和骨髓的网状内皮细胞吞噬和破坏，其余老化的血小板在循环过程中破坏。

正常人的血小板为圆形或椭圆形小体，直径2～3μm。

血小板离体后极易聚集、变性、破坏，而且不易与其他小颗粒区别，所以计数较难。

因此，血小板计数必须严格按操作规程操作，仔细观察辨认，才可获得较准确的结果。

(一)试剂血小板稀释液有两类。

一类是不破坏红细胞，以柠檬酸钠甲醛液为代表，其优点是当血液被稀释100～200倍时，可同时做红细胞计数，缺点是血小板混杂在大量红细胞之间，计数时容易遗漏。

在血小板显著减少的情况下这种方法更不适用。

另一类稀释液是能破坏红细胞，由于红细胞完全被溶解，视野清晰，计数方便，稀释倍数可低至20，误差范围较小，尤其适用于血小板减少患者。

缺点是如经验不足可能把红细胞碎片误认为血小板。

我国目前多选用后一类稀释液。

(二)操作1．在一清洁试管内加0.38ml稀释液。

2．常规毛细血管取血20μl，与上述稀释液混匀。

3．静置3～5分钟，待红细胞完全溶解后再摇匀，然后取少量混悬液滴入计数池内。

4．放置10～15分钟(如空气干燥应放入湿室)等血小板完全下沉后用高倍镜进行计数。

血小板白细胞聚集体及其临床意义【关键词】血小板白细胞聚集体阻碍因素抗血小板药物临床医治最近几年来，心脑血管疾病的发生率有着明显的增高，其中许多病理生理方面的因素需要去探讨。

血小板白细胞聚集体（platelet-leukocyte aggregates，PLA）作为一种阻碍血栓形成的因素，近几年慢慢引发国内外心脑血管病专家的重视。

研究PLA的发生机制有利于加深对疾病本身的熟悉，指导疾病的诊断和医治，有利于对疾病本身的监测，形成更深层次的疾病预警。

1 PLA的发生机制研究说明，血小板和白细胞别离活化后，其表面的黏附分子增加，黏附分子通过配体彼此结合和（或）通过纤维蛋白原在黏附分子之间的桥接作用形成PLA。

血小板活化后，血小板膜表面的P-选择素和糖蛋白（GP）IIb/IIIa的表达增加。

P-选择素即CD62P，是一种跨膜糖蛋白，要紧存在于活化血小板的α颗粒和内皮细胞的Weibel-Palade小体(Weibel-Palade body，WPB)，伴随着血小板活化，P-选择素迅速定位于活化血小板的表面。

P-选择素糖蛋白受体-1(P-selectin glycoprotein ligand-1，PSGL-1)，也是一种跨膜糖蛋白，其作为P-选择素的结合配体，几乎表达于所有白细胞的表面。

体内外实验已经证明，PSGL-1是唯一与P-选择素具有高亲和力的配体，且抗PSGL-1单克隆抗体能够完全阻断血流状态下白细胞在表达P-选择素细胞上的转动和静止状态下白细胞与表达P-选择素细胞的黏附[3]。

活化血小板能够通过表面的P-选择素和白细胞表面的PSGL-1结合形成PLA。

另外，白细胞表面的黏附受体Mac-1（CD11b/CD18）和血小板表面的GPIIb/IIIa别离与纤维蛋白原形成桥接作用，从而也形成PLA[4]。

已有临床研究说明，PLA尤其是血小板-单核细胞聚集体(platelet monocyte aggregates，PMA)能够作为评判血小板活化的指标。