黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的探讨_赵丽元

酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-高效液相色谱法在检测饲料中黄曲霉毒素B1含量中的比对研究作者：***来源：《中国动物保健》2022年第05期摘要：为了探讨酶联免疫吸附法检测饲料中黄曲霉毒素B1含量的可行性，试验采用酶联免疫吸附法（ELISA法）比对免疫亲和柱-高效液相色谱法（IAC-HPLC法），对饲料中黄曲霉毒素B1含量进行了检测，对检测结果的准确度、精密度和样品加标回收率进行了分析。

ELISA法线性方程相关系数为0.9952，相对标准偏差（RSD）为1.6%～8.1%，平均加标回收率为105.6%～111.8%。

结果表明，ELISA法的准确性、重现性、稳定性好;且ELISA法检测结果与IAC-HPLC法检测结果的相对标准偏差（RSD）为5.4%～19.2%，两种方法的检测结果的偏差可以接受，表明ELISA法能满足检测需求。

关键词：酶联免疫吸附法;免疫亲和柱-高效液相色谱法;饲料;黄曲霉毒素B1黄曲霉毒素，是黄曲霉菌和寄生曲霉菌分泌的次级代谢产物，主要分为B、G类，其中黄曲霉毒素B1的含量最多，危害性最大，该毒素具有强致癌性、致畸性、致突变性。

黄曲霉毒素B1可以侵害畜禽肝脏，导致肝脏变性、坏死等，进而导致畜禽肺脏、肾脏、脾脏、胃、直肠等器官发生病变;导致畜禽的免疫力降低;導致畜禽生长发育迟缓，采食量降低、食物利用率低;母畜不育或产仔少等问题。

黄曲霉毒素B1主要污染粮食作物及其副产品，其中，花生和玉米及其副产品污染最为严重，几乎无法避免，该毒素性质稳定，持续高压灭菌2h仅能降低其25%～33%的毒力，而且只有在282℃的高温下才能被裂解，所以世界各国都严格设定“限量标准”。

黄曲霉毒素B1污染饲料主要源于原料污染、储存条件不当饲料霉变污染和加工过程污染。

要预防黄曲霉毒素B1毒害畜禽，就要及时准确测定饲料原料及饲料成品中黄曲霉毒素B1含量，因而制定准确实用的检测方案至关重要，进而加强原料的筛选、饲料的品控，更好的保护畜禽健康，发挥畜禽生产性能，将饲料价值充分发挥。

免疫亲和柱净化柱后光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法同时测定制马肾中4种黄曲霉毒素作者：孙艳杰赵磊李正刚王路宏来源：《中国民族民间医药·上半月》2023年第12期【摘要】目的：建立免疫親和柱净化柱后光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法同时测定制马肾中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量。

方法：样品采用70％甲醇作为提取溶剂，经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生后，通过荧光检测器测定其中黄曲霉毒素的含量。

结果：黄曲霉毒素B1的线性范围为0.0104～0.0520 ng（r=0.999 9）、黄曲霉毒素B2的线性范围为0.0038～0.0190 ng（r=0.999 8）、黄曲霉毒素G1的线性范围为0.0108～0.0540 ng（r=0.999 8）、黄曲霉毒素G2的线性范围为0.0038～0.0190 ng（r=0.9998），线性关系良好，回收率在89.68%～101.44％之间，RSD≤3.5%。

结论：该方法操作简便，灵敏度高、重复性好、结果准确，可用于制马肾中黄曲霉毒素的测定。

【关键词】制马肾；免疫亲和柱；光化学衍生；高效液相色谱-荧光检测器；黄曲霉毒素【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2023）23-0019-04DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.23.zgmzmjyyzz202323005Simultaneous Determination of Content of Four Aflatoxins in EQUI PENIS ET TESTIVULUS by Mmunoaffinity Column Clean-up and HPLC-FLD with Post-column Photochemical DerivatizationSUN Yanjie ZHAO Lei LI Zhenggang WANG Luhong*Siping Institute for Food and Drug Control，Siping 13600，ChinaAbstract：Objective To establish the contamination method of aflatoxin B1，B2，G1 and G2 in EQUI PENIS ET TESTIVULUS by immunoaffinity column clean-up and HPLC-FLD with post-column photochemical derivatization．Methods After extraction with 70% Methanol and purification by immunoaffinity columns，aflatoxin B1，B2，G1 and G2 in samples were anlyzed by HPLC-FLD with post-column photochemical derivatization.Results The linearity of Aflatoxin B1 was at 0.0104-0.0520 ng（r=0.9999）， Aflatoxin B2 was at 0.0038-0.0190 ng（r=0.9998）， Aflatoxin G1 was at 0.0108-0.0540 ng（r=0.9998）， Aflatoxin G2 was at 0.0038～0.0190 ng（r=0.9998）， The average recoveries were within 89.68%-101.44% wi th RSD≤3.5%. Conclusion The above method has demonstrated convenient operation，good repeatability，highsensitity and accuracy.This method is suitable for the determination of AF in Renshenguipi pills.Keywords：Equi Penis Et Testivulus；Immunoaffinity Column；Photochemical Derivation；HPLC-FLD；Aflatoxi马肾药材标准收载在《吉林省中药材标准》第二册2019版［1］，为马科动物成年马Equus caballus Linnaeus雄性的干燥阴茎及睾丸。

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定玉米油中F-2毒素含量的研究罗建光【摘要】建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定玉米油中F-2毒素的方法.样品经前处理后通过免疫亲和柱净化,采用高效液相色谱仪-荧光检测器进行检测.该方法最佳测定条件为:选用IAC-AZ型免疫亲和柱,柱吸附容量4μg;流动相乙腈-甲醇-水(体积比46∶ 46∶8),流速1.0mL/min;提取溶剂乙腈-水(体积比90∶10).F-2毒素的质量浓度在0～ 250 ng/mL的范围内与峰面积呈良好的线性关系,方法检出限为0.06 μg/kg,平均回收率为92.46％,RSD为0.942％～1.758％.该方法操作简便快捷、准确度高、重现性好,适用于玉米油中F-2毒素的测定.%A method for determination of F-2 toxin in corn oil by immune-affinity column purification and HPLC was established.The sample was firstly pretreated,then purified by immune-affinity column and determined by HPLC with fluorescence detector.The optimal determination conditions were obtained as follows:IAC-AZ immune-affinity column,column adsorption capacity 4 μg,acetonitrile-methanol-water (volume ratio 46∶ 46∶ 8) as mobile phase,flow rate 1.0 mL/min,extraction solvent acetonitrile-water (volume ratio 90∶ 10).The results showed that the mass concentration of F-2 toxin had good linear relation ship with peak area in the range of 0-250 ng/mL,the recovery was 92.46％ with RSD 0.942％-1.758％,and the limit of detection was 0.06 μg/kg.The method was simple and easy to operate with high accuracy and good reproducibility,and it was suitable for the determination of F-2 toxin in corn oil.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2018(043)005【总页数】4页(P88-91)【关键词】F-2毒素;玉米油;免疫亲和柱;高效液相色谱法【作者】罗建光【作者单位】江苏食品药品职业技术学院食品学院,江苏淮安223003【正文语种】中文【中图分类】TS225.1;TQ646F-2毒素(ZEN)又称玉米赤霉烯酮，主要由禾谷镰刀菌、三线镰刀菌和雪腐镰刀菌等菌种产生的一种真菌毒素[1-2]。

940 引言何首乌始载于《开宝本草》，为我国较为常用的中草药材之一，在全国各地均有分布，广东、湖南、河南和广西是其栽培品的主要几大产区。

何首乌中包含有二苯乙烯类、蒽醌类、黄酮类、磷酯类、酚类及鞣质类等131种化合物[1]。

最近的研究表明，二苯乙烯类化合物可以作为抗衰老和抗动脉粥样硬化因子，减少脑病理萎缩，促进学习和记忆[2]；含蒽醌的组分对心肌提供了剂量依赖性的保护缺血-再灌注损伤，并减少脑缺血引起的梗死体积[3]。

早在2010年，何首乌及其制作方法被中国药典收录，何首乌也被广泛用作补药和泻药，以治疗失忆症、高脂血症和便秘[4]。

何首乌经炮制后，极其容易发霉而变质，不仅其药效受到影响，发霉后会产生黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，均是致癌物质，严重影响身体健康。

世界卫生组织已将黄曲霉毒素（Aflatoxin）释质谱（HPLC-IDMS）[15]、高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）[16]、高效液相色谱-高分辨质谱（HPLC-HMRS）[17]和免疫亲和柱-高效液相色谱法（HPLC-IAC）等[18]。

使用酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-荧光分光光度法对其进行检测时，样品中的某些结构类似物也会被抗体吸附而产生荧光，造成假阳性[19]。

Arroyo-Manzanares等[20]提出了一种HPLC-MS/MS方法测定黄曲霉毒素，以水/丙酮/乙腈（30：35：35，v/v/v）为萃取溶剂，萃取后测定干血斑或干血清斑中的黄曲霉毒素，取得了很好的结果，检测限为0.05至0.1 ng/mL。

免疫亲和色谱法（Immunoaffinity Chromatography，IAC）基于抗体-抗原的特异性吸附原理进行选择性分离，方法的准确性和灵敏度都很高[22]，是检测黄曲霉毒素的最佳方法之一。

发展何首乌中的致癌物质黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的高效、准确检测方法至关重要。

由于Afla Bl和Afla Gl荧光强度相对较弱，通常需96公司、吐温-20采购自梯希爱（上海）化成工业发展有限公司（货号T0543）；超纯水（自制）。

采用免疫亲和柱高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1李旭;马力【摘要】采用免疫亲和柱净化高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1(AFB1).稻米样品经甲醇/水(80/20,v/v)粗提取,再经免疫亲和柱净化和三氟乙酸衍生化,最后经高效液相色谱法测定.经检测,AFB1含量在0.01 ～2.50 ng范围内,所得到的AFB1标准曲线呈良好的线性关系,回归方程为Y=60.355x+0.054 3,相关系数为0.999 7.该方法检出限为0.1μg/kg,加标回收率为89.26％～99.45％,SD为2.48％～3.74％.由于该方法操作的选择性高、灵敏度高、检测效果好,因此适于较大批量粮油作物中黄曲霉毒素的检测,便于示范推广.【期刊名称】《西华大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(033)004【总页数】4页(P72-75)【关键词】稻米;黄曲霉毒素B1;免疫亲和柱;高效液相色谱法【作者】李旭;马力【作者单位】西华大学生物工程学院,四川成都610072;西华大学生物工程学院,四川成都610072【正文语种】中文【中图分类】TS252.7黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉等产毒菌株所产生的次生代谢产物[1]，微溶于水，易溶于甲醇、乙腈和氯仿等有机溶剂，具有很强的毒性、致癌性、致突变性和致畸性[2]。

1993年黄曲霉毒素被国际癌症研究机构定为I类致癌物，其中毒性最强的是黄曲霉毒素B1(AFB1)[3]。

由于黄曲霉毒素对人类和动物危害严重，国际上要求对黄曲霉毒素进行严格监管和防范，检测方法研究进展较快，主要有薄层色谱法(TLC)[4]、酶联免疫吸附法(ELISA)[5]、荧光光度法(FLM)[6]和高效液相色谱法(HPLC)[7-8]等，其中最常见的是HPLC法。

针对稻米中黄曲霉毒素的加标回收率低的问题，本研究采用德国Lctech公司的免疫亲和柱(AflaCleanTM)净化稻米样品，再通过高效液相色谱法检测稻米中AFB1，研究该净化柱对稻米样品的净化处理效果，优化样品提取、净化和检测等条件，建立快速、准确、高效液相色谱检测稻米样品中黄曲霉毒素的方法。

黄曲霉毒素M1检测方案方案一、免疫亲和层析净化高效液相色谱法（GB 5413.37-2010第二法）一、原理：亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上，当试样通过亲和柱时，抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合，形成抗体—抗原复合体。

用水洗柱除去柱内杂质，然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1，收集洗脱液。

用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1含量。

二、所需仪器1、高效液相色谱仪（配荧光检测器—具有365 nm激发波长、435 nm发射波长，在适当的色谱条件下能够测定0.02 ng 的黄曲霉毒素M1(相当于5倍噪音)）2、离心机（转容50ml角转子，转速10000r/min）3、氮吹仪4、固相萃取装置（带真空系统）5、水浴锅（温控30℃±2℃，50℃±2℃；温范25℃~60℃）6、天平：感量为0.01 g7、PH计：精度0.018、旋转蒸发仪（奶油样品制备）9、紫外分光光度计（标液浓度的校正，波长范围为200nm~400nm）三、试剂及耗材1、黄曲霉毒素M1免疫亲和柱2、黄曲霉毒素M1标准品3、反相色谱柱C18 4.6*250 加有反相色谱材料的保护柱5、移液管：1ml, 2ml, 50ml6、烧杯：50ml, 250ml7、分液漏斗：250ml（干酪和奶油样品制备）8、容量瓶：100ml9、一次性注射器：10ml, 50ml10、针式过滤器（水系）0.22um，Φ1311、乙腈(CH3CN)：色谱醇12、甲醇：分析醇13、三氯甲烷：分析醇14、石油醚：分析醇15、带刻度的磨口锥形玻璃试管：5 mL、10 mL、20 mL16、离心管：50ml四、操作方法依据GB 5413.37-2010第二法方案二、酶联免疫吸附法（可定性、定量检测牛乳及其他乳制品等样本中的黄曲霉毒素M1）一、原理标准溶液和样品试液加入各自板孔，游离的黄曲霉毒素M1与微孔中包被的黄曲霉毒素M1抗体结合，没有结合的物质在洗涤中被清除。

黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的探讨赵丽元;郝爱鱼;刘英慧【摘要】目的考察中药材类别和亲和柱处理方法对黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的影响,探讨亲和柱重复利用的可能性.方法通过在不同中药材中加入黄曲霉毒素对照品,经免疫亲和柱净化-HPLC-柱后光衍生分析,考察亲和柱重复利用后的回收率;考察不同的亲和柱处理方法对回收率的影响.结果中药材类别对免疫亲和柱重复利用的影响差异很大,部分种子类中药材使用后亲和柱重复利用3次回收率无明显变化,部分根茎类使用后,亲和柱回收率降低明显,特别是G2更易受影响.亲和柱处理时有机溶剂,空气暴露和复性时间均可影响柱子重复利用.结论中药材类别和处理方法对黄曲霉毒素免疫亲和柱的重复利用均有显著影响.【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2014(008)001【总页数】3页(P31-33)【关键词】黄曲霉毒素;免疫亲和柱;回收率;重复利用【作者】赵丽元;郝爱鱼;刘英慧【作者单位】116021,大连市食品药品检验所;116021,大连市食品药品检验所;116021,大连市食品药品检验所【正文语种】中文免疫亲和柱是20世纪90年代在分析领域得到应用的一种新技术，它是将一定量的单克隆抗体偶联在合适的担体上，制成相应的免疫亲和柱。

该柱具有高选择性吸附和抗干扰的特性，净化效果好，检测灵敏度高，是目前国际上较为常用的检测真菌毒素样品前处理方法之一[1]。

《中国药典》2010年版一部[2]、《欧洲药典》7.0[3]、GB/T 18979-2003[4]中均采用该方法进行黄曲霉毒素的测定。

随着《中国药典》中收载需检测黄曲霉毒素的中药材和制剂的品种的增加，以及中药中黄曲霉毒素残留研究的深入[5-9]，免疫亲和柱的使用将会越来越广泛。

但从文献报道来看，免疫亲和柱的使用条件和回收处理条件研究并不是很多。

仅有王莹等[1]人对M1免疫亲和柱的制备及使用条件进行了优化；李佩暖等[10]人对黄曲霉毒素前处理方法进行了优化；李卫岗等[11]人重复使用了3次无明显影响。

总黄曲霉毒素免疫亲和柱总黄曲霉毒素（Aflatoxin B1，AFB1）是一种由黄曲霉菌（Aspergillus flavus）和黄曲霉素菌（Aspergillus parasiticus）产生的一种强烈致癌的化合物。

该化合物在人类和动物体内会引起多种癌症，如肝癌、食管癌、胃癌等。

因此，检测和去除环境和食品中的总黄曲霉毒素对于保障人类健康至关重要。

为了检测和去除总黄曲霉毒素，研究人员开发了多种方法，其中之一就是使用总黄曲霉毒素免疫亲和柱。

这种免疫亲和柱是通过利用特异性抗体对总黄曲霉毒素进行捕捉，从而实现检测和去除的目的。

总黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备过程通常包括以下步骤：首先，需要获得针对总黄曲霉毒素的特异性抗体。

这可以通过免疫小鼠（如小鼠、兔子等）或体外合成的方法获得。

然后，将抗体与固相材料（如琼脂糖、硅胶等）结合，形成免疫亲和柱。

接下来，将待测样品加入免疫亲和柱中，允许总黄曲霉毒素与抗体结合。

最后，用适当的缓冲液洗脱并收集样品，得到含有总黄曲霉毒素的纯净溶液。

总黄曲霉毒素免疫亲和柱的检测原理是基于特异性抗体与总黄曲霉毒素的亲和作用。

一旦待测样品中存在总黄曲霉毒素，它们会与免疫亲和柱中的抗体结合。

通过洗脱的步骤，可以将结合的总黄曲霉毒素从样品中分离出来，从而完成检测过程。

除了检测相关，总黄曲霉毒素免疫亲和柱还可以用于去除总黄曲霉毒素。

已经结合总黄曲霉毒素的免疫亲和柱可以用于净化食品和饲料，去除其中的毒素。

这是因为抗体与毒素之间的结合力较强，可以有效地捕捉和去除总黄曲霉毒素。

总的来说，总黄曲霉毒素免疫亲和柱是一种有效的工具，可以用于检测和去除环境和食品中的总黄曲霉毒素。

通过结合特异性抗体和固相材料，免疫亲和柱可以捕捉和去除总黄曲霉毒素。

然而，需要注意的是，免疫亲和柱的制备过程较为繁琐且耗时，因此需要进行全面的实验准备和操作。

对于总黄曲霉毒素的免疫亲和柱的研究和应用仍在不断发展中。

随着技术的不断进步，相信将有更多的改进和创新，提高总黄曲霉毒素的检测和去除效果，进一步保障人类的健康安全。

免疫亲和柱柱容量 afb1免疫亲和柱（Immunaffinity Column）是一种常用的柱层析技术，用于富集和纯化特定的分子或化合物。

本文将以AFB1（黄曲霉毒素B1）为例，介绍免疫亲和柱的原理、应用和优势。

AFB1是一种由黄曲霉菌产生的黄曲霉毒素，对人和动物具有较高的毒性。

由于其对人体健康的潜在危害，监测和分析AFB1在食品和环境样品中的含量变得尤为重要。

传统的分析方法包括高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC），但这些方法需要复杂的前处理步骤和昂贵的设备，且分离效果有限。

而免疫亲和柱作为一种快速、高效的富集和纯化技术，被广泛应用于黄曲霉毒素的检测和分析。

免疫亲和柱的原理是利用特定的抗体与目标分子之间的高度选择性结合。

在免疫亲和柱中，固定化的抗体通过特异性结合与目标分子相互作用，从而将目标分子从复杂的样品基质中富集出来。

免疫亲和柱的填料通常是以高纯度的抗体固定在固定相上，形成高效的亲和层析柱。

使用免疫亲和柱进行AFB1的富集和纯化，通常包括以下步骤：首先，将样品与免疫亲和柱进行接触，使目标分子与柱上的抗体结合。

随后，通过洗脱步骤将非目标分子洗去，使得目标分子得以富集。

最后，从柱上洗脱目标分子，用于进一步的分析和检测。

免疫亲和柱在AFB1的分析中具有许多优势。

首先，免疫亲和柱具有高度的选择性和特异性，可以有效地富集和纯化目标分子，减少样品基质的干扰。

其次，免疫亲和柱具有较高的富集效率和灵敏度，可以在短时间内获得较低浓度的目标分子。

此外，免疫亲和柱操作简便，无需复杂的前处理步骤，适用于不同类型的样品。

然而，免疫亲和柱也存在一些局限性。

首先，柱容量是免疫亲和柱的重要参数之一，它决定了柱富集目标分子的能力。

较低的柱容量可能导致目标分子无法完全富集，影响后续的分析结果。

其次，免疫亲和柱的使用寿命有限，经过多次使用后，抗体的活性和选择性可能会下降，影响分析结果的准确性。

总结而言，免疫亲和柱是一种重要的分离和纯化技术，在AFB1等目标分子的富集和纯化中具有广泛的应用前景。

黄曲霉毒素b1免疫亲和柱黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1, AFB1）是由黄曲霉（Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus）等霉菌产生的一种有毒物质，其分子式为C17H12O6，分子量为312.3 g/mol，结构中有两个羟基、一个醛基和一个延伸的侧链结构。

黄曲霉毒素B1在高温高湿的环境下容易形成，常存在于生长于土壤和植物表面的黄曲霉菌中，例如腰果、棉花、稻谷、花生、大豆、玉米等植物中。

其毒性非常强，对人、动物和某些禽鸟都有毒害作用。

长期摄入或接触黄曲霉毒素B1的人和动物将会导致慢性中毒，并可能引发肝癌等重疾。

目前，对黄曲霉毒素B1的检测和分析已成为食品安全和动物养殖领域的一个热点问题。

传统的检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、荧光分析法、酶联免疫法等，但这些方法需要昂贵的设备、复杂的试剂和专业的技术，且需要耗费较长的时间。

因此，研究发展一种简单、快速、高效的检测方法势在必行。

近年来，利用免疫亲和柱检测黄曲霉毒素B1的方法受到了广泛关注，该方法利用特异性抗体对黄曲霉毒素B1进行识别和分离，具有灵敏度高、重复性好、操作简便等优点。

其中，黄曲霉毒素B1免疫亲和柱是一种基于免疫亲和技术的检测手段，专门用于检测食品、饲料中的黄曲霉毒素B1。

黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的工作原理是利用免疫亲和作用：将黄曲霉毒素B1与特异性抗体固定在免疫柱上，样品中的黄曲霉毒素B1与抗体发生特异性结合，其他物质则被快速洗脱，最终通过洗脱产物的吸收值或荧光强度等定量分析黄曲霉毒素B1的含量。

黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的制备工艺和方法具有一定的技术难度，主要分为固相法和液相法两种。

固相法是将黄曲霉毒素B1固定在固相载体（如聚丙烯、硅胶等）上，再通过共价键或物理吸附的方式将抗体与固相载体结合，最终形成具有特定抗体亲和性的黄曲霉毒素B1免疫亲和柱。

液相法是将黄曲霉毒素B1修饰为衍生物（如半胱氨酸衍生物等），然后将抗体固定在固相载体上，最后通过液相方式将修饰后的黄曲霉毒素B1与抗体进行结合，形成黄曲霉毒素B1免疫亲和柱。

免疫亲和柱结合液相色谱串联质谱法测定蜂花粉中黄曲霉毒素郭伟华;李熠
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2014(040)011
【摘要】建立了一种测定蜂花粉中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2)的液相色谱串联质谱方法.样品经V(乙腈):V(水)=60∶ 40提取,通过低温脂肪沉淀,免疫亲和柱净化,之后用甲醇洗脱4种毒素,氮吹后复溶,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量分析.方法在3个浓度添加水平的回收率为74.3％～ 96.5％,精密度低于10.0％.相关系数(r2)均大干0.997.B1、B2、G1、G2的定量限分别为
0.05,0.1,0.013,0.025μg/kg.测定30个实际样品,未检出4种毒素.
【总页数】5页(P222-226)
【作者】郭伟华;李熠
【作者单位】中国农业科学院蜜蜂研究所农业部蜂产品质量安全风险评估实验室,北京,100093;中国农业科学院蜜蜂研究所农业部蜂产品质量安全风险评估实验室,北京,100093
【正文语种】中文
【相关文献】
1.酶联免疫吸附结合免疫亲和柱－高效液相色谱法检测大米中黄曲霉毒素B1的研究 [J], 陈旭明;李婷
2.免疫亲和柱净化-HPLC-FLD法测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量 [J], 张玉莲;宋嬿;郑希望
3.免疫亲和柱净化液相色谱柱后光化学衍生法测定调味品中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1 [J], 徐小存; 胡银燕
4.免疫亲和柱净化液相色谱柱后光化学衍生法测定调味品中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1 [J], 徐小存; 胡银燕
5.免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生法测定玉米中黄曲霉毒素B_(1)的含量[J], 尹安胤
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专利名称：一种黄曲霉毒素免疫亲和柱及其制备方法和用途专利类型：发明专利
发明人：王莹
申请号：CN201310153243.4
申请日：20130428
公开号：CN104117229A
公开日：
20141029
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱及其制备方法和用途。

该免疫亲和纯化柱利用蛋白G 偶联到琼脂糖凝胶载体上，然后用抗黄曲霉毒素的抗体与琼脂糖上的蛋白G偶联。

然后再利用交联剂对黄曲霉毒素抗体-蛋白G-琼脂糖凝胶载体进行交联后装填亲和柱。

该免疫亲和柱主要用于对于食品、饲料、牛奶、血样以及其他多种样本中的黄曲霉毒素的纯化，以便于后期对样本中黄曲霉毒素的高效液相色谱(HPLC)检测和荧光检测。

申请人：北京华安麦科生物技术有限公司
地址：102200 北京市昌平区科技园区超前路6号
国籍：CN
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黄曲毒毒素免疫亲和柱性能评价方法及应用
徐文远1,倪新「崔淑华2 ”朱万燕1
［摘要］探索建立一种简便可靠的黄曲霉毒素免疫亲和柱性能评价方法并利用该方法对国内市场上5个主流品牌产品进行对比评价。

依据评价结果进行产品采购使用，经3年多实用经验证明了方法的可靠性。

该性能评价方法不仅能够
从确保检测质量和降低检测成本两方面指导亲和柱的采购还能够协助倒逼生产
商不断提升产品质量。

【期刊名称】食品研究与开发
【年(卷)，期】2017(038)014
【总页数】4
【关键词】黄曲霉毒素；免疫亲和柱；性能评价；对比评价
黄曲霉毒素(aflatoxins , AFT )是一类结构和理化性质相似的真菌次级代谢物，具有强致癌性和免疫抑制性［1-3］。

该类毒素广泛存在于花生及其制品、玉米及其制品、乳与乳制品、动物饲料、棉花籽、杏仁、开心果等食品中，黄曲霉毒素不仅直接对人体及动物造成毒害，还可以通过食物链从动物体转内移到人体内造成二次危害［4-5］。

从环节上控制黄曲霉毒素污染有一定的难度，从源头上消除目前技术尚未成熟，提高检测技术水平加强对该类产品的监测监管是当务之急。

黄曲霉毒素的检测方法有多种，主要有薄层层析法、快速微柱法、酶联免疫法、电化学免疫传感器法、高效液相色谱法和液相色谱串联质谱法等。

薄层层析法
灵敏度、精密度和重现性较差，微柱法定量差，酶联免疫法假阳性率较高［6］。

免疫亲和净化液相色谱法及液相色谱串联质谱法是当前黄曲霉毒素的
主要检测。

不同免疫亲和柱对饲料中黄曲霉毒素检测结果的影响研究司慧民;穆伟峰;吴志明
【期刊名称】《饲料工业》
【年(卷),期】2017(38)14
【摘要】免疫亲和柱是饲料中黄曲霉毒素检测常用的净化产品,试验选取两家公司的黄曲霉毒素免疫亲和柱,研究其对检测结果的影响。

结果表明,免疫亲和柱的不同对阳性添加样品和阳性检出样品的检测结果均有较大影响,故建议饲料检测机构务必考察免疫亲和柱的各种性能后再决定是否购买使用,保证检测结果的科学公正。

【总页数】3页(P59-61)
【关键词】饲料;黄曲霉毒素;免疫亲和柱;检测结果
【作者】司慧民;穆伟峰;吴志明
【作者单位】河南省兽药饲料监察所;新乡市畜产品质量监测检验中心
【正文语种】中文
【中图分类】S816.3
【相关文献】
1.酶联免疫吸附结合免疫亲和柱－高效液相色谱法检测大米中黄曲霉毒素B1的研究 [J], 陈旭明;李婷
2.免疫亲和柱净化-高效液相色谱柱后光化学衍生-荧光检测器检测食品中黄曲霉毒素 [J], 薛昆鹏;郭会琴;余冲;汪超;蓝凯;赵岳星
3.乳及乳制品中黄曲霉毒素M1检测方法的比较--固相萃取柱法和免疫亲和柱法
[J], 张林祥;刘静;张敏莉;李光玮;杨恩岐
4.免疫亲和柱荧光光度法和高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素 [J], 陈新;饶正华;马东霞;王雄;王莲
5.免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素 [J], 姜兆兴;刘振伟;曹旭;王智亮;李智瑾
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免疫亲和柱法测定果仁中黄曲霉毒素
林海丹;林峰
【期刊名称】《检验检疫学刊》
【年(卷),期】2002(012)001
【摘要】研究了果仁中黄曲霉毒素B1、B2、B1和G2的净化、富集的免疫亲和柱法,并建立了正相高效液相色谱法同时测定这4种黄曲霉毒素的方法,该方法最低检测浓度为01μg/kg,添加回收率为51%～95%.
【总页数】2页(P24-25)
【作者】林海丹;林峰
【作者单位】广州检验检疫局;广州检验检疫局
【正文语种】中文
【中图分类】R1
【相关文献】
1.免疫亲和柱净化-HPLC-FLD法测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量 [J], 张玉莲;宋嬿;郑希望
2.免疫亲和柱净化液相色谱柱后光化学衍生法测定调味品中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1 [J], 徐小存; 胡银燕
3.免疫亲和柱净化液相色谱柱后光化学衍生法测定调味品中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1 [J], 徐小存; 胡银燕
4.免疫亲和柱净化-HPLC-FLD法测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量 [J], 张玉莲;宋嬿;郑希望
5.免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生法测定玉米中黄曲霉毒素B_(1)的含量[J], 尹安胤
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