原发性肝癌患者介入治疗前后循环肿瘤细胞(CTC)检测的临床意义

CTC循环肿瘤细胞检测循环肿瘤细胞（CTC）是一种罕见的血液中的癌细胞，可以从原发肿瘤脱落，并通过血液循环传播到其他部位。

CTC的检测对于癌症的早期诊断、治疗选择和预后判断具有重要意义。

CTC循环肿瘤细胞检测是一种非侵入性、无创的方法，可以提供关于肿瘤发展和蔓延的有价值的信息。

本文将介绍CTC循环肿瘤细胞检测的原理、方法和应用。

原理CTC循环肿瘤细胞检测的原理基于CTC的特殊性质。

CTC具有一定的生物特性，如细胞形态学特征、表面标记、核酸和蛋白质表达等，使其能够与正常血液细胞区分开来。

通过对CTC进行特异性标记和分离，可以将其从血液中分离出来，并进行进一步的表征和分析。

目前，CTC的检测方法大致可以分为两类：物理方法和生物学方法。

物理方法包括密度梯度离心、滤膜分离和微流控芯片等，通过差异化的物理性质实现CTC的分离。

生物学方法则利用CTC与正常血液细胞之间的生物学区别，如表面标记的差异、特定蛋白和核酸标记等，通过生物学分子靶向的方式进行CTC的富集和分离。

方法CTC循环肿瘤细胞检测的方法多样，具体的选择取决于实验室的设备和研究目的。

下面将介绍几种常见的CTC检测方法：密度梯度离心法密度梯度离心法是最早用于CTC检测的方法之一。

该方法通过利用瘦脂蛋白或葡聚糖等高分子物质在不同浓度下形成的梯度来分离CTC。

通过对梯度离心后，在不同密度层次上找到CTC，并进行进一步的分析和鉴定。

滤膜分离法滤膜分离法基于滤膜的孔径大小来分离不同大小的细胞。

通过选择合适的滤膜孔径，可以将CTC与正常血液细胞分离开来。

然后，通过对滤膜上沉积的细胞进行进一步的标记和分析，即可获得CTC的信息。

微流控芯片法微流控芯片法是一种新兴的CTC检测方法。

该方法利用微流控技术，在芯片上制造出复杂的细流体网络，并通过微米级别的微通道将CTC富集和分离。

微流控芯片法具有高通量、高灵敏度和高特异性的优点，被广泛应用于CTC的检测。

应用CTC循环肿瘤细胞检测在临床和研究领域具有广泛的应用前景。

检测循环肿瘤细胞(CTC)在临床肿瘤诊断和治疗中的作用周小昀;李龙芸
【期刊名称】《癌症进展》
【年(卷),期】2006(4)3
【摘要】有关循环肿瘤细胞的理论已有很长时间.肿瘤转移及复发的过程均是一个循环肿瘤细胞定植生长的级连放大的瀑布反应.目前肿瘤的发现和诊断仍高度依赖于影像学及肿瘤特异性血清标志物的方法,不能及时发现肿瘤的转移和复发.基于肿瘤细胞播散理论,检测循环肿瘤细胞可更早期有效发现肿瘤的早期转移和复发.本文对文献报道的检测循环肿瘤细胞在临床肿瘤诊断和治疗中的作用进行了总结,并与目前经典的标志物和影像学进行了比较.
【总页数】5页(P240-243,195)
【作者】周小昀;李龙芸
【作者单位】中国医学科学院,中国协和医科大学,北京协和医院呼吸科,北
京,100730;中国医学科学院,中国协和医科大学,北京协和医院呼吸科,北京,100730【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.原发性肝癌患者介入治疗前后循环肿瘤细胞(CTC)检测的临床意义 [J], 张耀伟;杨玉秀
2.外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测对早期发现乳腺癌术后转移的作用分析 [J], 蔡俊
媛;甘洁文;陈启庭;金宇;张莉;田欢;林洪
3.外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测对早期发现乳腺癌术后转移的作用分析 [J], 蔡俊媛;甘洁文;陈启庭;金宇;张莉;田欢;林洪
4.循环肿瘤细胞在妇科恶性肿瘤诊断、治疗指导、预后判断中的应用进展 [J], 梁馨元;谭碧波;梁丁丁;李丽花;莫凌昭
5.探讨循环肿瘤细胞(CTCs)在乳腺癌患者预后判断中的应用价值 [J], 吴慧
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【肿瘤转移】循环肿瘤细胞（CTCs）和循环肿瘤DNA 循环肿瘤细胞（CTCs）：是在肿瘤形成早期，从原发肿瘤脱落进⼊到⾎液循环中⽽成。

播散肿瘤细胞（DTCs）：循环肿瘤细胞脱离⾎液循环，定居在次级器官。

循环肿瘤DNA：肿瘤发展的早期，原发肿瘤细胞凋亡和坏死，释放DNA进⼊⾎液循环。

循环肿瘤DNA的两个来源：1，原发肿瘤或微转移瘤。

2，循环肿瘤细胞的凋亡。

循环肿瘤细胞形成和转移过程原发肿瘤（乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌）的早期形成和⽣长过程中，⼀些细胞会从原发肿瘤上脱落，进⼊⾎液循环。

这些循环肿瘤细胞各不相同，可以根据它们的物理和⽣物学特性采⽤不同的技术进⾏富集和检测。

对肿瘤患者进⾏循环肿瘤细胞（CTCs）检测被认为是⼀种实时“液体活检”。

肿瘤，即使是⼩的原发肿瘤，也会通过⾎液循环从原发区域传播到远处的器官，如⾻髓、肝脏、肺、或脑，然后这些细胞在新的微环境下⽣长。

播散肿瘤细胞（DTCs）是⼀种微⼩的转移。

在完全切除原发肿瘤后它们仍可以处于休眠状态数年，然后变成⼤的转移。

DTCs可以通过⾎流进⾏流动，在远端器官定居，发展成第⼆转移灶。

有趣的是DTCs还可以转化成原发肿瘤，术语叫做“肿瘤⾃我播种”或“交叉播种”变成具有侵袭性的转移体形式。

这些DTCs可能促使肿瘤局部复发，但这些假设还需要进⼀步验证。

微⼩残留病变（MRD）例如DTCs，通过⾼分辨率的成像技术是检测不到的。

然⽽，通过灵敏的和特异性的检测技术在⾻髓、淋巴结或循环⾎液中可以检测到DTCs。

通过髂⾻使⽤针吸活检技术，很容易就得到⾻髓样本，⽬前这是在远处器官检测微⼩残瘤病变（MRD）的主要⽅法。

⾻髓是其他肿瘤器官源的DTCs的主要宿主部位，储存DTCs，然后转移到远端器官。

对肿瘤患者的随访，需要进⾏持续监测。

因为⾻髓针吸活检术⽐抽取外周⾎更有侵害性。

研究者往往通过检测外周⾎⽽不是⾻髓来评估患者预后和监测系统治疗。

近期，已经研制出了超⾼灵敏性的CTC检测⽅法，包括CTC微芯⽚，过滤装置，定量RT-PCR检测，⾃动成像技术。

循环肿瘤细胞C T C检测及临床应用Prepared on 22 November 2020循环肿瘤细胞检测及临床应用中文摘要：循环肿瘤细胞是从原发肿瘤扩散，进入到血液或淋巴系统的肿瘤细胞。

循环肿瘤细胞在血液中含量稀少，一般先将循环肿瘤细胞富集，然后再进行检测，现在已经开发了多种细胞富集和检测技术。

本文主要对CTCs的富集和检测技术研究进展，以及CTCs在临床分析和研究上的应用进行了综述。

关键词：循环肿瘤细胞富集检测临床Abstract:Circulatingtumorcellscomefromtheprimarytumorproliferation,andprolife ration,癌症转移的过程是循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells，CTCs)从原发肿瘤分离，通过循环系统扩散，进入血液或者淋巴系统，在远处形成新的肿瘤，最终导致大多数的癌症病人死亡。

1869年，Ashworth在一例癌症死亡患者的外周血中发现了类似肿瘤的细胞，并首次提出了CTCs的概念。

从此，越来越多的研究表明，CTCs的出现与癌症密切相关。

通过上皮-间质转化(EMT)，实体瘤的上皮细胞进行细胞的变化，使他们通过增加流动性和侵袭性脱离组织，进入到血液中，附着，、发展成远端转移。

由于CTCs能够代表原发肿瘤的表型和遗传组成，并能够作为任何转移性肿瘤的”液体活检”，CTCs的富集分离和特征研究，十分具有吸引力。

CTCs的富集和计数技术已经建立，其中CTCs的计数可以成为预测指标，当其大于已知的阈值时，就预示着病人就患有转移性乳腺癌，、前列腺癌，、结直肠癌等。

基于临床试验，美国FDA批准了一种临床检测CTCs的CellSearch技术，用于上述癌症的CTCs的富集和计数。

CellSearch技术成功的证明了CTCs确实表征了疾病的活跃，CTCs数量的增加预示着病情的恶化，可以通过CTCs了解原发性和转移性肿瘤，以CTCs为基础的分析，可以帮助人们实时诊断和预测，对病情做出决定，并取样检测耐药性。

循环肿瘤细胞（CTC）检测一、什么是循环肿瘤细胞（CTC）？循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，因自发或诊疗操作从实体瘤病灶（原发灶、转移灶）脱落，进入外周血循环的肿瘤细胞。

CTC非常稀少，每毫升血液中109血细胞只有几个CTC。

大部分CTC在进入外周血后会发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者的死亡风险。

二、肿瘤的发生及检测诊断全国肿瘤登记中心发布的2015年年报显示，2011年我国新增癌症病例约337万例，比2010年增加28万例——这相当于每分钟有6人被诊断为癌症。

然而，令人担忧的是这样的情势似乎仍未到达峰顶，未来可能还会不断增加。

美国约翰-霍普金斯大学Kinmel 癌症中心的Bert-Vogelstein 等专家在2013年3月份的一篇综述文章中写道：在今年将死于癌症的一百万人里，绝大部分是因为他们的癌症没有在发生、发展的前90%的时间内被发现。

因此，我们需要明确一点：癌症是一种慢性病，它只是被突然发现，并非是突然发生的。

我们需要尽可能早的发现它，从而提高治愈率。

伴随肿瘤的发生过程，肿瘤细胞的大小也随之增大。

传统方法诊断出癌症的时候，大部分已经是晚期。

晚期癌症的治愈率极低，其五年生存率也很低。

在肿瘤的发生过程中，早期到中期之间是最佳治疗期，因此，如果在早期就可以发现肿瘤的存在，必然可以提高治愈率。

临床癌症研究（Clinical Cancer Research）杂志上发表的荟萃分析（Meta-analysis）证实CTC在乳腺癌预测中的价值，结果表明早期和转移性乳腺癌患者的循环肿瘤细胞CTC检测是一个稳定的预测和预后工具。

如果将肿瘤易感性基因检测和循环肿瘤细胞检测完美结合，那么能够将肿瘤的早期发现率提高数倍。

肿瘤易感性检测是对未来可能患有癌症的一种风险预测。

如果风险等级高，除了改变生活方式外，还可以定期做循环肿瘤细胞检测，即CTC检测，而且检查频率可以适当增加，每2-3个月检查一次，从而达到实时监控的目的。

原发性肝癌新型血清标志物研究进展与应用原发性肝癌是目前我国第4位常见恶性肿瘤及第2位肿瘤致死病因，严重威胁我国人民的生命和健康。

原发性肝癌主要包括肝细胞癌、肝内胆管癌和混合型肝细胞癌-胆管癌三种不同病理学类型，三者在发病机制、生物学行为、病理组织学、治疗方法以及预后等方面差异较大，其中HCC 占75%～85%、ICC 占10%～15%。

本文中的“肝癌”一般指HCC。

原发性肝癌诊断传统的血清标志物血清AFP是当前诊断肝癌和疗效监测常用且重要的指标。

血清AFP≥400μg/L，在排除妊娠、慢性或活动性肝病、生殖腺胚胎源性肿瘤以及消化道肿瘤后，高度提示肝癌；而血清AFP 轻度升高者，应结合影像学检查或进行动态观察，并与肝功能变化对比分析，有助于诊断。

异常凝血酶原（PIVKAⅡ；DCP）、血浆游离微RNA（microRNA，miRNA）和血清甲胎蛋白异质体（AFP-L3）也可以作为肝癌早期诊断标志物，特别是对于血清AFP 阴性人群（证据等级1，推荐A）。

基于性别、年龄、AFP、PIVKAⅡ和AFP-L3 构建的GALAD 模型在诊断早期肝癌的敏感性和特异性分别为85.6%和93.3%，有助于AFP 阴性肝癌的早期诊断（证据等级2，推荐A）。

目前已有基于中国人群大样本数据的优化的类GALAD 模型用于肝癌的早期诊断。

原发性肝癌新型血清标志物miRNA近年来，“液体活检”（Liquid biopsy）包括循环游离微RNA（Circulating cell-free microRNA）、循环肿瘤细胞（ CTC ）、循环肿瘤DNA（ctDNA）等，在肿瘤早期诊断和疗效评价等方面展现出重要价值。

肝癌“液体活检”也取得较多进展，相比于血清AFP 等临床常用血清学分子标志物可能具有更高的灵敏度和特异性。

CTC 检测可以成为一种肝癌预后预测和疗效评价的临床新工具。

有报道，外周血EpCAM+ CTC 具有干细胞样特性，是肝癌切除术后早期复发的独立预测指标；检测CTC对经导管动脉化疗栓塞术治疗后及放射治疗后肝癌复发和进展具有预测作用；不同部位的CTC 能预测不同转移类型；动态检测CTC 可以用于监控肝癌肝移植术后肿瘤复发。

CTC检测的临床应用原理什么是CTC检测CTC（循环肿瘤细胞）是指从主要肿瘤部位脱离，进入血液循环，并具有能够引起远处转移的潜能的肿瘤细胞。

CTC检测可以通过采集患者的血液样本，并对其中的循环肿瘤细胞进行分离和分析，从而评估肿瘤的侵袭性、转移潜力以及预后。

CTC检测的临床应用CTC检测已经被广泛应用于临床实践中，并且在肿瘤的早期诊断、疾病监测、治疗选择以及预后评估等方面发挥着重要的作用。

下面将介绍CTC检测的临床应用原理。

早期诊断CTC检测可以帮助早期诊断肿瘤，其原理是通过检测血液中循环肿瘤细胞的存在和数量来判断肿瘤的存在。

由于早期肿瘤往往没有症状或症状不明显，因此常常很难进行准确的诊断。

CTC检测可以提供一种非侵入性的检测方法，通过简单的血液采集即可进行，对于高风险人群或疑似肿瘤患者进行筛查，有助于尽早发现肿瘤并进行进一步的诊断。

疾病监测对于已经确诊的肿瘤患者，CTC检测可以用于监测疾病的进展和治疗效果。

肿瘤细胞往往具有高度异质性，肿瘤细胞内的基因组和表达谱会随着疾病的进展而发生变化。

通过定期的CTC检测，可以在治疗前后对比循环肿瘤细胞的数量和特征，评估治疗的效果和预测疾病的进展。

治疗选择CTC检测还可以帮助选择合适的治疗方案。

通过分析循环肿瘤细胞的特征和表达谱，可以评估肿瘤对不同治疗药物的敏感性，并指导临床医师选择最适合的治疗方案。

这种个体化的治疗策略可以提高治疗的效果，减少无效治疗的发生，从而改善患者的生存质量。

预后评估CTC检测在预后评估中也扮演着重要的角色。

研究表明，血液中循环肿瘤细胞的存在和数量与肿瘤的侵袭性、转移能力以及患者的预后密切相关。

通过定期的CTC检测，可以监测循环肿瘤细胞的动态变化，并以此评估肿瘤的进展风险和预测患者的生存期。

CTC检测的原理与方法CTC检测的原理是通过脱落细胞和循环肿瘤细胞的特征来进行区分和鉴定。

目前常用的CTC检测方法主要包括免疫细胞化学染色法、荧光原位杂交法、脱落细胞分选法以及微流控芯片技术等。

ctc检测指标摘要：一、引言二、ctc 检测指标的定义与作用1.ctc 检测的意义2.ctc 检测指标的定义三、ctc 检测指标的计算方法1.计算公式2.影响因素四、ctc 检测指标的应用领域1.临床应用2.研究应用五、ctc 检测指标的局限性与展望1.局限性2.发展前景正文：一、引言随着医学技术的发展，肿瘤的早期发现、早期诊断和早期治疗越来越受到重视。

循环肿瘤细胞（CTC）检测作为一种非侵入性的检测方法，在肿瘤的早期诊断中具有重要的价值。

CTC 检测指标是衡量CTC 检测效果的重要参数，对于评估肿瘤患者的病情和治疗效果具有重要意义。

二、ctc 检测指标的定义与作用1.ctc 检测的意义CTC 是肿瘤细胞通过血液循环进入外周血的细胞，携带了肿瘤的基因信息。

检测CTC 有助于医生了解肿瘤的基因突变、化疗药物敏感性等信息，为患者提供个性化的治疗方案。

2.ctc 检测指标的定义CTC 检测指标是衡量CTC 检测方法性能的一种量化指标，通常包括检测敏感性、检测特异性、检测准确率等。

三、ctc 检测指标的计算方法1.计算公式CTC 检测指标的计算公式一般为：敏感性= 真阳性/ (真阳性+ 假阴性)特异性= 真阴性/ (真阴性+ 假阳性)准确率= (真阳性+ 真阴性) / (真阳性+ 假阳性+ 真阴性+ 假阴性)2.影响因素CTC 检测指标受多种因素影响，如样本处理方法、检测设备、检测方法等。

在实际应用中，需要综合考虑这些因素，以获得更准确的CTC 检测结果。

四、ctc 检测指标的应用领域1.临床应用CTC 检测指标在临床中主要用于评估肿瘤患者的病情和治疗效果。

通过比较不同治疗方案下患者的CTC 检测指标，可以为患者选择更合适的治疗方案。

2.研究应用CTC 检测指标在肿瘤研究领域也具有广泛应用，如研究肿瘤细胞的生物学特性、药物敏感性等。

此外，还可以用于研究肿瘤细胞与免疫系统之间的相互作用，为肿瘤免疫治疗提供理论依据。

循环肿瘤细胞(CTC)循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell; CTC)通常是指因自发或诊疗操作引起的从原发灶或转移灶侵入人体外周血的肿瘤细胞。

此概念是在1869年由Ashworth等首次提出的，2015年研究人员成功培育出第一株由CTC产生的永生细胞株。

CTC一般以单细胞或者细胞团的形式存在于循环系统中，大部分侵入循环系统的肿瘤细胞会在短期内死亡，只有极少数具有高度转移倾向和活力的CTCs才能存活下来，并在一定条件下发展为转移灶。

一般在外周血中大约105~107个单核细胞中才有一个CTCs，因此为获得更好的灵敏度和特异性，对检测技术的要求极高。

由于CTCs检测的对象是血液标本，取材比传统意义上的组织活检更便捷且重复性强，属于“液态活检”的一种。

就概念而言，广义液体活检指从血液、尿液、唾液甚至脑脊液等人体体液中获取相关疾病信息的技术。

临床科研中应用的液体活检，主要是通过检测并分析血液中的循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）、游离肿瘤脱氧核糖核酸片段（Circulating Tumor DNA ，ctDNA）、外泌体(exosomes)、分泌物（secretomes）等组分对患者进行早期筛查、诊断并监测癌症发展演变的技术。

近年来，CTCs在临床应用的研究获得了长足的发展，积累的研究表明CTCs可更有效的反应肿瘤在机体内的发生、发展、转移、复发的情况，对预后判断、疗效检测及转移机制研究有更切实的指导意义。

间变性淋巴瘤激酶(Anaplasticlymphomakinase, ALK)基因是一种致癌驱动基因。

突变、基因扩增或染色体重排均可以导致ALK基因异常激活，从而促进肿瘤生长。

在3-7%的非小细胞肺癌患者中ALK基因重排是一个独特的分子子集，主要是由于该基因发生重排并与其他基因进行了融合。

Vincent Faugeroux等证实在ALK阳性的非小细胞肺癌患者中通过检测CTCs发现了ALK重排，这项研究为ALK阳性的患者在使用ALK抑制剂治疗诊断方面提供了新的观点。

循环肿瘤细胞CTC肿瘤发生转移的早期, 循环肿瘤细胞(CTC)就可以沿循环系统种植于远处器官, 逐渐形成转移灶利用特异性的抗体“捕获”肿瘤细胞。

应用检测单个或小量血中循环肿瘤细胞簇(CTCs)的结果进行分析, 对推测每个独立患者具体预后、评估治疗反应的准确性和有效性都可以有明显改善。

显然, 在单个细胞水平检测血中的循环肿瘤细胞(CTC) 要比影像学分析更为敏感。

这种技术是将抗肿瘤细胞表面标志物的抗体包被在磁性小珠上, 这样不但可以利用抗原抗体结合来识别循环肿瘤细胞(CTC), 还可以用磁性“捕获”患者血样中的循环肿瘤细胞(CTC)。

这种技术的主要限制在于:是否存在针对肿瘤表面抗原的高度特异的抗体, 以及制备这种抗体质量的优劣。

更重要的一个限制因素在于, 由于肿瘤细胞往往处于去分化的状态, 循环中的肿瘤细胞常是高度异质性的, 这时具有组织特异性的表面标志物的表达就会有所下调。

这样的结果就会导致一些变异的肿瘤细胞可以逃脱掉捕获富集的过程。

如何从富集的样本中确认和识别循环肿瘤细胞?即在对含有循环肿瘤细胞(CTC) 样本进行富集处理之后，这些方法包括:①免疫荧光染色显微镜下的图像分析, 可以进行肿瘤细胞计数;②反转录聚合酶链式反应(RT -PCR)技术来检测肿瘤细胞基因标志物的mRNA 水平;③肿瘤相关基因(包括癌基因和抑癌基因)的突变分析;④DNA 甲基化技术; ⑤功能活性技术, 如端粒酶技术等。

据GENYO研究团队介绍，这主要是因为只有少量的上皮标志物可用来鉴定和分离全血中的循环肿瘤细胞，通常是上皮细胞粘附分子（EpCAM）和细胞角蛋白（CK）。

然而，这些上皮细胞也可能来自其他上皮组织，而并非肿瘤。

让事情更加复杂的是，最新数据表明存在一部分CTC，不表达EpCAM或CK。

相反，这些细胞表现出上皮-间质转化（EMT）的特征。

这个过程与肿瘤转移相关，其中上皮细胞呈现出间质特征，促进迁移、入侵和抗凋亡。

新方法：将原位杂交方法以及基于CK表达的免疫磁性选择和免疫细胞化学相结合，利用锁核酸（LNA）探针来检测miRNA。