外周血循环肿瘤细胞检测

92Internal Medicine,Feb.2021,VoL16,JVb・]•调查与分析•肺癌患者外周血循环肿瘤细胞检测结果分析麦春平唐慧妍林丽湘肇庆市第一人民医院肿瘤科，广东省肇庆市526000【摘要】目的探讨肺癌患者外周血循环肿瘤细胞检测结果与患者临床特征、治疗效果以及预后的关系，为肺癌的临床诊治和患者预后判断提供参考。

方法选取我院肿瘤科2016年7月到2017年12月收治的肺癌患者60例为研究对象，采用免疫磁珠阴性富集法检测患者外周血循环肿瘤细胞(CTC);根据CT检查结果，参照RECIST 标准评定患者治疗效果,对治疗前后肺癌患者CTC数量增减与疗效的关系进行Spearman秩相关分析；比较CTC阳性和阴性患者的1年及2年生存情况。

结果60例肺癌患者中，CTC阳性41例,CTC阳性率为6&33%。

CTC阳性患者和阴性患者的年龄、肿瘤最大直径和临床分期比较差异有统计学意义(P<0.05)o化疗1个月后，CR患者5例、PR患者19例、PD患者28例、SD患者8例；Spearman秩相关分析结果显示，患者的CTC数量变化与其疗效呈负相关(r=-0.412,P<0.05)。

CTC阳性和阴性患者的1年生存率比较差异无统计学意义(P>0.05),但CTC阳性患者的2年生存率显著低于阴性患者，差异有统计学意义(P<0.05)o结论肺癌患者的CTC数量及变化与患者的临床特征、治疗效果以及预后均存在一定的关系，对临床治疗和判断患者预后具有一定的参考价值。

【关键词】肺癌；外周血循环肿瘤细胞;预后【中图分类号】R563；R734.2【文献标识码】DOI：10.16121/45-1347/r.2021.01.28肺癌是临床最为常见的恶性肿瘤,好发于中老年群体,具有发病率高、致死率高的特点,存活者预后较差,是当前影响人类健康的主要恶性肿瘤⑴。

近年来，随着人口老龄化以及生态环境污染加重、吸烟人群的增加,人群肺癌发病率逐年上升,并呈现出一定的年轻化趋势，肺癌防治形势异常严峻，因此加强对肺癌的早期检测，对改善患者预后具有重要的意义⑵。

人外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测技术的研发及临床应用开发美国肿瘤协会于2006 年发表的年度报告指出，目前全世界范围内每3 人中就有1 人在其一生中会患有某种肿瘤，而且肿瘤发病率在发展中国家随着污染程度的增加，患病几率还会高于1/3 的比例。

现今全世界用于肿瘤治疗与防治的费用每年以16.5% 的比例递增。

仅用于乳腺癌，结直肠癌及前列腺癌（还不包括发病率最高的肺癌）的投资，目前世界范围内已达每年92 亿美元。

目前全世界用于肿瘤诊断的方法可归为三大类：病理学（活检切片）；影像学（超声，X光，CT, PET 等）和血清学（血清肿瘤相关蛋白，如CA-125, CA-199, CEA 等），但所有这些方法都有不可避免的缺点，例如灵敏性及特异性差，过于依赖医生判断的主观性等。

因此目前临床急需一种能够为医生及病人提供准确，快速的肿瘤检测手段。

经过长时间的大量研究，美国FDA 认证的人外周血循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell, CTC）检测目前已被公认为最好及最可观的检测手段之一。

目前已有越来越多的国内外医生开始应用此技术作为肿瘤检查的重要辅助手段。

不仅于此，CTC 检测也被公认为是目前国外新近流行的肿瘤治疗方法-即阻断肿瘤细胞入血转移的唯一有效检测指标。

除了上述CTC可作为肿瘤检测手段外，CTC还可成功应用于以下一系列其它方面的用途：(1)个体化治疗的体外肿瘤药物筛选；(2)体内化疗药物药效的快速评估: 相对于每12周一查的CT 诊断，CTC在第1-2周即可显示药效结果，这一点对临床医生和病人尤为重要；(3) 根据CTC数目，判断病人愈后状况及存活时间；（4）肿瘤病人复发的监测与及时诊断；及（5）正常人群体检普查以利于尽可能的肿瘤早期诊断。

除了应用于临床外，CTC 亦可应用于众多药厂和科研机构的基础研究，包括寻找新的肿瘤标识物以及开发新的抗肿瘤药物等。

目前美国FDA已于2004年认证了美国上市公司Immunicon/Veridex的CTC检测技术及其临床应用。

•论外周血叶酸受体阳性循环肿瘤细胞检测在非小细胞肺癌筛查中的应用价值唐兴.蒋东，赵军苏州大学附属第一医院胸外科，江苏苏州215006摘要：目的观察非小细胞肺癌患者外周血叶酸受体阳性循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, C T C s)水平变化，探讨外周血叶酸受体阳性C T C s在非小细胞肺癌筛查中的应用价值。

方法非小细胞肺癌患者136例为肺癌组，肺部良性病变患者10例为良性病变组，健康志愿者54例为对照组。

3组均采用以叶酸受体为靶点的免疫磁珠阴性富集+实时荧光定量P C R法检测外周血叶酸受体阳性C T C s水平；采用化学发光免疫分析法检测血清癌胚抗原（carcino-embryonic antigen. C E A)、糖链抗原（carbohydrate antigen. C A)125、C A724、细胞角蛋白19 片段（cytokeratin 19 fragment，C Y F R A21-1)、神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，N S E)水平。

比较3组C T C s水平；比较不同临床特征非小细胞肺癌患者C T C s水平;绘制R O C曲线，评价C T C s及血清C E A、C A125、C A724、C Y FR A21-1、NSE 5项指标联合诊断非小细胞肺癌的价值。

结果肺癌组C T C s水平[11. 21 (8. 58,15. 30) F U/3m l j高于良性病变组[7. 55 (5. 23，10•25)F U/3m L]和对照组[4.95(3•55,7•62)F U/3m L](；：)<0•05),良性病变组高于对照组（P<0•05)。

T N M分期I、II、丨H、W期非小细胞肺癌患者CTCs 水平[11. 00(8. 58,13. 30)、13. 25(10. 48,16. 88)、14. 77( 11. 47,16. 55)、17. 89(17.07.19.22)F U/3m L]两两比较差异均有统计学意义（幵=〗6.443./3<0.05);不同年龄、性别、肿瘤最大径、丁分期、分化等级、病理类型非小细胞肺癌患者C T C s水平比较差异均无统计学意义（P>0.05),R O C曲线分析结果显示，C T C s以8. 70 F U/3m L为最佳截断值，诊断非小细胞肺癌的A U C为0. 953(95%t7:0.926〜0. 979,P<0.05),灵敏度为79.40%,特异度为98.10%,诊断效能优于〔[六、(：八125、(：八724乂'丫？1^21-1、>«£联合检测。

循环肿瘤细胞（CTC）检测一、什么是循环肿瘤细胞（CTC）？循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，因自发或诊疗操作从实体瘤病灶（原发灶、转移灶）脱落，进入外周血循环的肿瘤细胞。

CTC非常稀少，每毫升血液中109血细胞只有几个CTC。

大部分CTC在进入外周血后会发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者的死亡风险。

二、肿瘤的发生及检测诊断全国肿瘤登记中心发布的2015年年报显示，2011年我国新增癌症病例约337万例，比2010年增加28万例——这相当于每分钟有6人被诊断为癌症。

然而，令人担忧的是这样的情势似乎仍未到达峰顶，未来可能还会不断增加。

美国约翰-霍普金斯大学Kinmel 癌症中心的Bert-Vogelstein 等专家在2013年3月份的一篇综述文章中写道：在今年将死于癌症的一百万人里，绝大部分是因为他们的癌症没有在发生、发展的前90%的时间内被发现。

因此，我们需要明确一点：癌症是一种慢性病，它只是被突然发现，并非是突然发生的。

我们需要尽可能早的发现它，从而提高治愈率。

伴随肿瘤的发生过程，肿瘤细胞的大小也随之增大。

传统方法诊断出癌症的时候，大部分已经是晚期。

晚期癌症的治愈率极低，其五年生存率也很低。

在肿瘤的发生过程中，早期到中期之间是最佳治疗期，因此，如果在早期就可以发现肿瘤的存在，必然可以提高治愈率。

临床癌症研究（Clinical Cancer Research）杂志上发表的荟萃分析（Meta-analysis）证实CTC在乳腺癌预测中的价值，结果表明早期和转移性乳腺癌患者的循环肿瘤细胞CTC检测是一个稳定的预测和预后工具。

如果将肿瘤易感性基因检测和循环肿瘤细胞检测完美结合，那么能够将肿瘤的早期发现率提高数倍。

肿瘤易感性检测是对未来可能患有癌症的一种风险预测。

如果风险等级高，除了改变生活方式外，还可以定期做循环肿瘤细胞检测，即CTC检测，而且检查频率可以适当增加，每2-3个月检查一次，从而达到实时监控的目的。

基金项目：上海市科委自然基金项目（１５ＺＲ１４３７９００）资助*通讯作者文章编号：１００７－４２８７（２０１５）０７－１２２３－０５循环肿瘤细胞检测技术及临床应用曹雅楠，庄文芳，盛慧明*（上海交通大学医学院附属同仁医院检验科，上海２００３３６）循环肿瘤细胞（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ，ＣＴＣ）计数有助于早期诊断肿瘤转移，反映患者的治疗效果及肿瘤预后。

近年来循环肿瘤细胞检测的广泛应用大力推进了相关技术的发展。

本文对近年来外周血循环肿瘤细胞检测技术的发展，临床及研究领域的应用情况及未来展望做一简要综述。

循环肿瘤细胞（ＣＴＣ）一经发现，就得到了广泛重视，ＣＴＣ被认为是肿瘤播散转移的标志。

研究表明，肿瘤组织每天会释放大量肿瘤细胞入血，但在循环中的存活率极低，大多会发生凋亡，只有少量具有强侵袭力的肿瘤细胞可表达凋亡抑制因子得以存活［１］，这些存活下来的肿瘤细胞即ＣＴＣ。

ＣＴＣ在外周血中含量极少，一般每１０６-１０７个白细胞中仅含有１个。

所以，ＣＴＣ检测首先要进行细胞富集，以提高检测灵敏度，再对富集的细胞进行ＣＴＣ检测。

１ ＣＴＣ富集技术１．１ 以形态学为基础的富集ＣＴＣ细胞体积大，直径超过２５μｍ，胞核形状不规则，核浆比异常。

肿瘤细胞体积分离法和核孔分析技术通过滤网可将直径大于８μｍ的肿瘤细胞分离，但此类方法敏感性较低［２］。

基于密度梯度分离原则的Ｏｎｃｏｑｕｉｃｋ，利用单个核细胞较其它血液成分相比密度低，采用１．０７７ｇ／ｍｌ的密度梯度将单个核细胞和肿瘤细胞与血液其它成分分离，同时增加设置多孔屏障，进而分离得到更加纯化的目的细胞［３］。

１．２ 以免疫学为基础的富集免疫磁珠法将磁性微珠包被单抗形成免疫磁珠，再结合靶细胞上的对应抗原形成抗原-抗体-磁珠复合物，在外加磁场作用下定向移动、吸附，进而与其它细胞分离。

该分离技术的方法有两种：（１）阳性分离法是直接从细胞混合液中分离出靶细胞；（２）阴性分离法则是利用免疫磁珠去除无关细胞，利用抗ＣＤ４５抗体或抗ＣＤ６１抗体去除血液中的巨核细胞和血小板，使靶细胞得以纯化［４］。

目录第一部分循环肿瘤细胞（CTC）及循环肿瘤干细胞（CTSC）的检测与结直肠癌临床资料的相关性分析中文摘要 2 英文摘要 4 前言 6 材料与方法8 结果12 讨论17 结论27 参考文献28 致谢32第二部分综述：胃、肠道肿瘤干细胞的研究进展综述33 参考文献37循环肿瘤细胞（CTC）及循环肿瘤干细胞（CTSC）的检测与结直肠癌临床资料的相关性分析中文摘要目的：通过检测结直肠肿瘤患者外周血中的循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, CTC）以及循环肿瘤干细胞(circulating tumor stem cells, CTSC)，分析其数目与患者临床分期、肿瘤淋巴结转移、肿瘤远端转移等的相关性，验证它们作为患者预后评判指标的可行性，初步探讨CTC及CTSC与肿瘤转移的相关性。

方法：本论文入组首诊初治结直肠癌患者50人，在其手术治疗前，以及治疗后一周各抽取外周血15ml，利用Ficoll淋巴细胞分离液分离出外周血单个核细胞后，平均分成两份：CTC组标记表面标记物--CD45、EpCAM、CK，CTSC组标记表面标记物--CD45、EpCAM、CD44、CD133，并利用超高速流式细胞分选仪MOFLO XDP进行CTC及CTSC的检测分析。

结果：判定CD45-/EpCAM+/CK+细胞为CTC，CD45-/EpCAM+/CD44+细胞为CTSC1，CD45-/EpCAM+/CD133+细胞为CTSC2，CD45-/EpCAM+/CD44+/CD133+细胞为CTSC3。

判定手术前（手术后）检测出CTC ≥2个/7.5ml外周血者为阳性结果，CTC<2则为阴性；CTSC1≥1个/7.5ml外周血者为阳性结果，则CTSC1<1为阴性；CTSC2≥1个/7.5ml外周血者为阳性结果，则CTSC2<1为阴性；CTSC3≥1个/7.5ml外周血者为阳性结果，CTSC3<1为阴性。

外周血中循环肿瘤细胞检测在肺部良恶性病变诊断中的价值陈卫琴【摘要】目的:探究外周血中循环肿瘤细胞(CTC)检测在肺部良恶性病变诊断中的应用价值.方法:选取2014年11月～2016年11月期间于某院经X线／CT检查确诊为肺部实性占位性病变患者133例为研究对象,经手术病理证实为良性病变53例(良性病变组),恶性病变80例(恶性病变组),分别检测两组患者CTC和肿瘤标志物表达水平.结果:两组患者CYFRA21-1水平比较无显著差异(P>0.05);恶性病变组CTC和CEA水平显著高于良性病变组,差异具有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,CTC和CEA诊断肺部良恶性病变的ROC曲线下面积分别为0.817(95%CI:0.743～0.891)和0.613(95%CI:0.508～0.718).结论:较之传统肿瘤标志物的检测,外周血CTC检测对肺部良恶性病变的诊断价值更高,能为肿瘤的临床诊断、疗效评估和预后恢复提供极重要依据.【期刊名称】《数理医药学杂志》【年(卷),期】2018(031)003【总页数】3页(P337-339)【关键词】肿瘤细胞;循环;肺部病变;诊断【作者】陈卫琴【作者单位】番禺区中医院检验科微生物室广州511400【正文语种】中文【中图分类】R446.1肺癌是世界范围内发病率和死亡率增长最快、最高，对人类生命健康威胁最大的恶性肿瘤之一，远处转移是造成患者死亡的主要原因[1]。

外周血中的循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell，简称CTC)是指存在于外周血的肿瘤细胞，具有高度活力和高度转移潜能的CTC可以在循环系统中存活，并在合适的环境中增殖，导致肿瘤的复发和转移[2]。

为探究外周血中CTC检测在肺部良恶性病变诊断中的应用价值，本院选取133例经X线/CT检查确诊为肺部实性占位性病变患者为研究对象进行CTC检测和肿瘤标志物检测，现将结果报道如下。

外周血中循环肿瘤细胞标志物的筛查及分析循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）是指在血液循环中存在的、来自原发肿瘤的恶性细胞。

CTCs的检测可以帮助医生评估患者肿瘤治疗的疗效和预后。

因此，外周血中循环肿瘤细胞标志物的筛查及分析技术的研究和应用备受关注。

一、循环肿瘤细胞标志物的种类循环肿瘤细胞标志物是指CTCs的表面分子、代谢产物或DNA/RNA等，在CTCs检测中用于准确鉴定和筛查细胞的指标。

一些常用的循环肿瘤细胞标志物包括：上皮细胞间黏附分子（epithelial cell adhesion molecule，EpCAM）、细胞集落识别分子1（cluster of differentiation 44，CD44）、cytokeratins（CKs）、CD133、糖类抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）、糖类抗原199（carbohydrate antigen 199，CA199）。

这些标志物的检测通常采用免疫分离、荧光原位杂交或聚合酶链式反应等技术手段。

二、CTCs的检测技术目前，CTCs的检测技术主要包括免疫分离、细胞种植、荧光原位杂交、数字化PCR、流式细胞术、微流控芯片等技术。

而免疫分离技术是目前使用最广泛、最常见的一种技术。

免疫分离技术利用免疫磁珠的高度特异性与细胞表面标志物进行结合，以实现对细胞的捕获。

通过激光共聚焦显微镜或荧光显微镜对捕获到的细胞进行检测，可以获取CTCs的数量、形态、表面标志物等信息，进而完成检测和分析。

三、CTCs的临床应用CTCs的检测可以帮助医生评估患者肿瘤治疗的疗效和预后，特别是在术后复发及转移的监测中具有重要意义。

此外，CTCs的检测还可以为肿瘤的个体化治疗提供借鉴和指导。

当前，CTCs的应用呈现多样化态势，如在肝癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的筛查、诊断和监测中逐步得到广泛应用。

外周血循环肿瘤细胞检测的研究进展1　通讯作者,E 2mail :zhanghel ong@med mail .co 710038　西安　第四军医大学唐都医院肿瘤科　蒋蔚峰　综述,张贺龙1　审校 【摘　要】　转移的发生是癌症患者死亡的主要原因。

循环肿瘤细胞(CTC )存在于肿瘤患者的外周血中,在肿瘤的转移过程中居于重要地位,但因在外周血中CT C 数量稀少,采用常规的细胞学方法难以检测。

本文综述近年来外周血中CTC 检测技术的研究现状,并进一步探讨在这一领域所面临的问题及对未来的展望。

【关键词】　循环肿瘤细胞;　肿瘤标志物;　肿瘤转移;　检测技术中图分类号:R733 文献标识码:A 文章编号:1009-0460(2010)10-0944-04Advance i n the detecti on of c i rcul a ti n g tu m or cells i n per i phera l blood J I AN G W ei 2feng,ZHAN G He 2long .D epart m ent of O ncology,Tangdu Hospital,the Fourth M ilitary M edical U 2niversity,X i ’an 710038,China Corresponding au thor :ZHAN G He 2long,E 2m ail:zhanghelong@m edm a il .co 【Abstract 】　M etastasis is the most common cause of death in cancer patients .Circulating tu mor cells (CTC )are essential f or establishing metastasis and can be detected in the peri pheral bl ood of patients with a variety of s olid cancers .Because of very l ow fre 2quency,these tu mor cells are not easily detected using conventi onal cyt ol ogy methods .This article revie ws the most recent findings on this subject,and discusses the p r oble m s and p r os pects in this research area .【Key W ords 】　Circulating tu mor cells;　Tu mor markers;　Neop las m metastasis;　Detecti on technique 恶性肿瘤严重威胁人类健康,其致死的主要原因是部分肿瘤细胞获得侵袭能力并造成远处转移[1]。

如对您有帮助，可购买打赏，谢谢循环肿瘤细胞检测的优势是什么导语：对于肿瘤的了解，一般人大多是一知半解，只知道它是一种可怕的疾病，在专业层次上并不了解。

肿瘤细胞里有一种英文简称CTC 的，叫做循环肿瘤对于肿瘤的了解，一般人大多是一知半解，只知道它是一种可怕的疾病，在专业层次上并不了解。

肿瘤细胞里有一种英文简称CTC的，叫做循环肿瘤细胞，它是把存在于外周血里的所有肿瘤细胞统称为循环肿瘤细胞。

循环肿瘤细胞检测就是通过技术手段来检测外周血所存在的循环肿瘤细胞，从而进行监测和预设治疗手段，当前循环肿瘤细胞检测的优势是什么呢，下面就来讲一讲。

CTC（循环肿瘤细胞，CirculatingTumorCell）是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称。

CTC检测通过捕捉检测外周血中痕量存在的CTC，监测CTC类型和数量变化的趋势，以便实时监测肿瘤动态、评估治疗效果，实现实时个体治疗。

CTC检测由于只需抽取5-10毫升血液，检测方便、无创、没有副作用，被看作“液体活检”。

CTC检测是一种非侵入性的新型诊断工具，通过对外周血循环系统中的肿瘤细胞进行精确的计数以及分型，为肿瘤患者的预后判断、疗效评价以及个体化治疗提供重要的指导作用。

其中益善生物原创的循环肿瘤细胞分离与分型技术处于国际领先水平，为肿瘤无创实时监测和实时个体化治疗提供了技术保障。

CanpatrolCTC检测技术：CanpatrolCTC检测技术只需采集5-10ml外周血，是益善生物历时六年独立研发的拥有自主知识产权和完全核心技术的CTC检测产品，它结合了纳米技术与多重RNA原位分析技术的优势，无须依赖特定生物标志物，对所有CTC进行分离与分型，是目前国际上唯一能同步实现预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏。