槐角不同部位中芦丁和槐角苷含量的比较研究_勾凌燕

表2
2． 2． 2 供测试品溶液的制备 取槐角样品， “2． 1 ” 按 项分离角皮 ， 80ħ 与种子 干燥恒重后分别研至粉末状并精密称取 0． 5 g， 置索 氏提取器中， 加甲醇 90 ml， 连续提取 10 h， 冷却后， 用甲醇定容至 100 ml， 用 0． 45 μm 滤膜过滤， 作为供测试品溶液。 2． 2． 3 芦丁和槐角苷对照品色谱图绘制 色谱条件， 参考王志玲 ［10 ］ 5 m） ， 等 方法。Diamonsil C18 柱（ 150 mm ˑ 4． 6 mm， 甲醇 － 1% －1 V / V） 为流动相， 冰醋酸 － 乙腈（ 57ʒ 38ʒ 5 ， 流速 1． 0 ml · min ， 检测波长 260 nm。取芦丁和槐角苷对照品溶液 ， 进样 10 μl， 进行 色谱分析， 测定芦丁与槐角苷的保留时间 ， 图略。 2． 2． 4 标准曲线的绘制和线性范围 取芦丁和槐角苷标准贮备 0． 1 ， 0． 125 ， 0． 25 ， 0． 50 ， 液， 配制芦丁和槐角苷浓度均为 0． 08 ， 1． 0 ， 1． 5 ， 2 g·ml － 1 的溶液， 进样 10 μl， 每个浓度重复 3 次， 记录 色谱图。以峰面积对进样浓度做线性回归 ， 得芦丁的回归方程： A = 14 411 ． 84 C + 194 ． 7 ， r = 0． 999 6 ， 芦丁浓度在 0． 08 1． 0 g · ml － 1 范围内线性关系良好； 槐角苷的回归方程： A = 49 964 ． 3 C + －1 r = 0． 999 9 ， 105 ． 2 ， 槐角苷浓度在 0． 125 2． 0 g · ml 范围内线 性关系良好。 2． 2． 5 精密度实验 取含芦丁和槐角苷浓度均为 2 g · ml － 1 的溶 “2． 2． 3 ” 按 项中所述条件， 在同一天内不同时间重复测定 5 液， 次， 或连续 5 d 每天测定 1 次， 分别计算日内和日间误差 （ RSD） 。 结果显示， 日内和日间误差（ RSD） 分别为 0． 65% 和 0． 89% ， 提示 该方法精密度良好。 2． 2． 6 加样回收率实验 精密称取已知含量同一批次槐角的角 皮与种子粉末 0． 5 g， 各 6 份， 分别加入不同质量的芦丁和槐角苷 “2． 2． 2” “2． 2． 3” 按 项方法制备供试品溶液， 按 项色谱条件 对照品， 测定峰面积， 根据峰面积及加入对照品的量计算加样回收率。结 RSD 为 1． 21% ， 槐角苷的 果角皮中芦丁的平均回收率为 95． 7% ， RSD 为 1． 11% ； 种 子 芦 丁 的 平 均 回 收 率 为 回收率 为 96． 2% ， 94． 3% ， RSD 为 1． 24% ， RSD 为1． 19% 。 槐角苷的回收率为 97． 2% ， 2． 2． 7 槐角角皮、 种子中芦丁和槐角苷的含量测定 精密量取供 用甲醇稀释 200 倍， 按“2． 2． 3 ” 项方法， 进样 10 试品溶液适量， μl， 作 HPLC 分析， 重复 3 次， 所得色谱图见图 1 － a 和图 1 － b。 将峰面积代入回归方程分别计算芦丁和槐角苷含量 。 结果见表 2， 并应用 SPSS10． 0 统计软件中独立样本 t 检验 （ Independent － P≤0． 05 为差异显著。 Samples T test） 方法进行统计学处理，
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 7
时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 7 期
ʃ s） 槐角不同部位中芦丁和槐角苷含量的测定结果（ x 珋 % 采摘时间 （ 购入时间） 20061130 20061130 20061130 20061130 20061130 20061215 20061215 20061215 20061215 20061215 槐角皮 芦丁 0． 67 0． 28 0． 41 0． 40 0． 68 0． 44 0． 56 0． 45 0． 25 0． 30 槐角苷 6． 42 6． 87 5． 78 6． 32 7． 14 5． 45 6． 07 5． 31 6． 27 6． 34 槐角种子 芦丁 0． 39 0． 25 0． 26 0． 40 0． 55 0． 28 0． 41 0． 40 0． 29 0． 35 槐角苷 0． 46 0． 48 0． 40 0． 36 0． 51 1． 02 0． 33 0． 53 0． 37 0． 43
关键词：槐角； 槐角皮； 种子； 芦丁； 槐角苷； 高效液相色谱 DOI 标识：doi： 10． 3969 / j． issn． 10080805． 2011． 07． 022 0805 （ 2011 ） 07159802 中图分类号：R284． 2 文献标识码：A 文章编号：1008-
Comparative Study on the Differences in Rutin and Sophoricoside Levels between Pericarps and Seeds of Sophora japonica
溶液。
表1 槐角产地 槐角皮 槐角种子 槐角不同部位的重量百分比测定结果 宁夏 58． 6 41． 4 河北 62． 5 37． 5 石家庄 71． 0 29． 0 % 三地平均值 64． 0 36． 0
样品 样品 1 样品 2 样品 3 样品 4 样品 5 样品 6 样品 7 样品 8 样品 9 样品 10 平均值
这对于更加合理有效利用现有槐资源提供理论依 于槐角种子， 据， 具有一定的指导意义。现报道如下。 1 仪器与材料 2487 双 高效液相色谱仪（ 美国 Waters 1525 系统， 高压双泵、 波长紫外检测器和 Breeze 色谱数据系统） 。 5 批冬季采摘石家庄不同地区 ， 5 批购自河北安 试验用槐角， 国中药市场， 经本院药学教研室张书峰博士鉴定均为豆科植物国 槐的果实。 芦丁、 槐角苷对照品均购于中国药品生物制品检定所 （ 批号 分别为 100080 － 200606 和 11695 － 200501 ） ； 甲醇、 乙腈为色谱纯 级， 其它试剂均为分析纯。高纯水由 Millipore 纯水器制备。 2 方法与结果 2． 1 槐角不同部位的重量百分比测定 分别取宁夏产槐角、 河北 用吸水纱布浸润软化 产槐角与石家庄市自采槐角干品各 100 g， 角皮 12 h， 分离槐角角皮与种子， 干燥恒重后分别称重。 结果见 0519 ； 修订日期：20110102 收稿日期：2010表 1。 “十一五” 基金项目：中国人民解放军 全军医药卫生科研基金面上课题 2． 2 槐角皮与槐角种子中芦丁及槐角苷含量测定 （ No． 06MB335 ） 2． 2． 1 对照品溶液的制备 精密称取减压干燥至恒重的芦丁和 ）， 作者简介：勾凌燕（ 1962女（ 汉族） ， 河北秦皇岛人， 现任白求恩军医学 槐角苷对照品各 10 mg， 置于 50 ml 容量瓶中， 加甲醇 40 ml， 超声 院高级实验师， 主要从事仪器分析工作 ． * 5 min ， ， 。 用甲醇稀释至刻度 作为标准贮备液 取上述标 溶解处理 （ 1957） ， （ ） ， ， 通讯作者简介：刘景东 男 汉族 山东巨野人 现任白求恩军 －1 准贮备液， 配成含芦丁和槐角苷各 2 g·ml 的溶液， 作为对照品 医学院高级实验师， 主要从事药物分析工作 ．
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Key words： Fructus Sophorae；
Pericarp；
Seed；
Rutin；
Sophoricoside；
HPLC
槐角 Fructus sophorae 为豆科植物槐 Sophorajaponica L． 的果 实， 其性苦、 寒， 归肝、 大肠经， 有清热泻火、 凉血止血的功效， 是 ［1 ］ 《中国药典》 收载的常用中药材品种 。 文献报道， 槐角中含多 种黄酮和异黄酮成分， 其中芦丁Байду номын сангаас所有槲皮素苷中含量最高的部 ［2 4 ］ 。 黄酮类 分， 槐角苷是其中多种染料木素苷含量最高的部分 冠心病、 骨质疏松及肿瘤等疾病具有一 化合物对动脉粥样硬化 、 ［5 8 ］ 。此外， 定的预防或治疗效果 研究发现在槐角的种子中 ， 除 磷脂、 生物碱、 氨基酸、 多糖和脂 黄酮类化合物外还有一些三萜 、 ［9 ］ 肪酸等化学成分 。 现有文献多以完整槐角为材料进行研究 、 应用， 对槐角不同部位， 如槐角皮及槐角种子分别进行研究及应 用较少。本文考察了槐角皮和种子分别占槐角总重量的百分比 ， 应用 HPLC 法对 10 个批次不同产地槐角的角皮及种子中芦丁及 槐角苷的含量进行了比较研究 ， 发现槐角皮中槐角苷的含量远高
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 7
槐角不同部位中芦丁和槐角苷含量的比较研究
* 勾凌燕， 王志玲， 刘景东 ， 王
憬， 刘惠敏
（ 中国人民解放军第四军医大学白求恩军医学院 ， 河北 石家庄 050081 ） 摘要：目的 考查槐角不同部位， 即角皮和种子占槐角重量的百分比 ， 及各组分中芦丁和槐角苷的含量差异 ， 为科学、 有效
地利用现有槐角资源提供理论依据 。方法 采用高效液相色谱法同时测定角皮或种子提取物中芦丁及槐角苷的含量 。 HPLC 测定条件： Diamonsil C18 柱（ 150 mm ˑ 4． 6 mm， 5 μm） ， V / V） ， 流动相为甲醇 － 1% 冰醋酸 － 乙腈（ 57ʒ 38ʒ 5 ， 流速1． 0 －1 ml·min ， 检测波长 260 nm。结果 槐角角皮和种子占槐角重量的平均百分比分别为 64% 和 36% 。芦丁浓度在 0． 08 －1 1． 0 g·ml － 1 ， 槐角苷浓度在 0． 125 2． 0 g·ml 范围内， 与峰面积呈良好的线性关系 。槐角皮和槐角种子中黄酮类化合 物 HPLC 谱型相似， 但含量差别较大， 槐角皮中芦丁与槐角苷含量分别为 （ 0． 44 ʃ 0． 15 ） % 和 （ 6． 20 ʃ 0． 57 ） % ， 种子中两 P ≤0． 01 ， 者的含量分别为（ 0． 36 ʃ 0． 09 ） % 和（ 0． 49 ʃ 0． 20 ） % 。槐角皮中槐角苷的含量明显高于槐角种子 ， 提示差异显 著。结论 槐角中的槐角苷主要存在于槐角皮中 ， 因此提取这类化合物时可以将槐角皮和种子分开 ， 只以角皮为材料， 种 子可用于其他目的的研究 ， 以达到科学、 有效地利用槐角资源。