芦丁测定
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芦丁的鉴定实验报告实验报告实验项目:芦丁的鉴定实验目的:1. 了解芦丁的化学性质及特性。
2. 掌握芦丁的检验方法。
3. 学习芦丁的鉴定过程。
实验器材:溶剂:乙酸乙酯、乙醇、正己烷、丙酮、石油醚。
试剂:芦丁参比品。
仪器:紫外分光光度计。
实验步骤:1. 取一定量的芦丁参比品溶解于乙酸乙酯中,调配出产生1mg/mL的溶液。
2. 通过紫外吸收光谱法,测定芦丁参比品的吸收峰波长λmax ,记录其吸光度值Amax 。
3. 取样品10mg摇匀,加入乙酸乙酯:乙醇(10:1)混合溶剂中溶解,制成浓度为1mg/mL的溶液。
4. 通过紫外吸收光谱法,测定芦丁样品的吸收峰波长λmax,记录其吸光度值Amax 。
5. 进行带法检验。
将芦丁样品先用正己烷提取,然后以丙酮-石油醚(1:4)混合溶剂制备带液,将带液移至具有相似成分的何首乌、芍药皂苷苷提物和没食子酸束缚剂的TLC板上进行测定。
实验结果:1. 芦丁参比品的吸收峰波长λmax为350nm,其吸光度值Amax 为1.032。
2. 芦丁样品的吸收峰波长λmax为348nm,其吸光度值Amax 为0.968。
3. 芦丁样品在TLC板上的带具有相同的颜色和Rf值,并且与芍药皂苷苷提物和没食子酸束缚剂的带明显区分开。
结论:1. 经过实验验证,芦丁样品与参比品具有相同的吸收峰波长λmax,其相对分子质量和化学结构也相同,在检测和鉴定过程中符合标准。
2. 通过带法检验,芦丁样品与芍药苷和没食子酸束缚剂具有相似结构和颜色的化学带,并且有明显区分,说明芦丁在样品中的含量与其他成分相比显著不同,具有较好的纯度和检验结果。
实验总结:本实验采用紫外吸收光谱法和带法检验,检测和鉴定芦丁样品的化学结构和纯度。
在实验中,我们学习了芦丁的化学性质及特性,并且掌握了芦丁的检验方法,积累了宝贵的实验经验和技能。
未来,我们将继续探索更多的技术和方法,为实验研究提供更加完善和精准的数据和支持。
一、实验目的1. 理解和掌握芦丁的理化性质。
2. 学习芦丁的提取、分离与鉴定方法。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理芦丁(Rutin),又称芸香苷,是一种广泛存在于植物中的黄酮醇类化合物,具有多种生物活性。
本实验通过提取槐米中的芦丁,并对其进行分离、鉴定,以了解芦丁的理化性质。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:槐米、石灰乳、硼砂、浓盐酸、无水乙醇、甲醇、蒸馏水等。
2. 实验仪器:烧杯、玻璃棒、漏斗、抽滤瓶、烘箱、紫外-可见分光光度计、分析天平等。
四、实验步骤1. 芦丁提取(1)将槐米粉末加入烧杯中,加入适量水,煮沸2-3分钟。
(2)加入石灰乳,调节pH值至8.5-9.0,继续煮沸30分钟。
(3)趁热过滤,得到滤液。
2. 芦丁分离(1)将滤液加入浓盐酸,调节pH值至4.0,静置6小时以上。
(2)抽滤,用蒸馏水洗涤沉淀,弃去滤液。
(3)将沉淀溶解于适量热水中,冷却至室温。
(4)过滤,弃去滤渣。
3. 芦丁鉴定(1)取适量芦丁溶液,用紫外-可见分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
(2)比较芦丁溶液的吸光度与标准溶液的吸光度,确定芦丁含量。
五、实验结果与分析1. 芦丁提取实验成功提取了槐米中的芦丁,滤液呈淡黄色。
2. 芦丁分离实验成功分离了芦丁,得到淡黄色沉淀。
3. 芦丁鉴定通过紫外-可见分光光度计测定,芦丁溶液在特定波长下的吸光度与标准溶液的吸光度基本一致,说明实验成功鉴定了芦丁。
六、实验结论1. 芦丁是一种广泛存在于植物中的黄酮醇类化合物,具有多种生物活性。
2. 本实验成功提取了槐米中的芦丁,并对其进行了分离与鉴定。
3. 通过实验,掌握了芦丁的理化性质和提取、分离与鉴定方法。
七、实验讨论1. 实验过程中,应注意控制pH值,以保证芦丁的提取效果。
2. 在分离过程中,应选择合适的溶剂和条件,以提高芦丁的纯度。
3. 在鉴定过程中,应选择合适的波长和仪器,以保证实验结果的准确性。
八、实验拓展1. 研究芦丁在人体内的代谢过程。
高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量一、实验原理芦丁是一种黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎和抗癌等作用,常被应用于医疗、化妆品、保健品等领域。
本实验采用高效液相色谱法对桑葚样品中芦丁含量进行测定。
二、实验仪器高效液相色谱仪、分光光度计、电子天平、移液器、手动剪切器、1 mL量筒、色谱柱、色谱柱前锋过滤器、溶解器、离心机。
三、实验药品和试剂标准品:芦丁(纯度高于98%)。
对照品:芦丁(纯度高于98%)。
试剂:无水甲醇(HPLC级)、乙酸(分析纯级)、去离子水(电阻率大于18 M Ω/cm)。
四、实验步骤1. 样品制备精确称取5 g桑葚样品,加入50 mL无水甲醇中,以超声波方式进行提取10 min,过滤后将提取液置于50 mL体积瓶中,用无水甲醇补足至刻度线。
2. 色谱分析将样品液经过前处理,用移液器取20 μL进样于色谱柱中,洗脱剂为甲醇-乙酸-水(70:1:29),流速为1.0 mL/min,检测波长为353 nm。
用标准品进行校正和定量。
5. 数据处理计算出桑葚中芦丁的含量(mg/kg),计算公式:C = (A / B)* (a *1000 / w)其中,C为芦丁含量(mg/kg),A为样品的浓度(mg/L),B为标准曲线回归方程的斜率,a为取样量(g),w为样品稀释液的体积(L)。
六、实验注意事项1. 实验操作需穿戴实验服和手套,注意个人安全。
2. 样品过多、过浓会影响色谱分析的精度,应注意控制样品的量和浓度。
3. 样品提取和前处理应严格按照步骤操作,避免误差的发生。
4. 实验中所用仪器和试剂应按照使用说明操作和管理。
5. 实验结束后,应彻底清洗和消毒仪器和场地,避免交叉污染。
芦丁标准曲线测黄酮含量方法芦丁是一种黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性,因此在药物、保健品和食品等领域有着广泛的应用。
测定芦丁含量是对相关产品质量的重要指标之一。
本文将介绍一种测定芦丁含量的标准曲线方法,以供参考。
1. 实验原理。
芦丁的含量测定一般采用紫外分光光度法。
在一定波长下,芦丁溶液对紫外光的吸收量与其浓度成正比。
通过构建芦丁的标准曲线,可以准确测定样品中芦丁的含量。
2. 实验步骤。
(1)准备工作。
将实验所需的仪器和试剂准备齐全,包括分光光度计、芦丁标准品、乙醇、紫外吸收比色皿等。
(2)制备标准曲线。
取一系列不同浓度的芦丁标准溶液,分别用乙醇稀释至不同浓度。
分别用分光光度计测定各标准溶液的吸光度,并绘制标准曲线。
(3)测定样品。
将待测样品溶解于乙醇中,用分光光度计测定其吸光度,并根据标准曲线计算出芦丁的含量。
3. 实验注意事项。
(1)实验中应注意避光操作,防止芦丁溶液被光照射而发生降解。
(2)使用乙醇时需注意防止挥发,以免浓度发生变化。
(3)在制备标准曲线时,应确保各标准溶液浓度范围覆盖待测样品的含量范围。
4. 结果分析。
通过标准曲线测定出的样品芦丁含量,可以为相关产品的质量控制提供重要参考。
同时,标准曲线的斜率和截距也可以反映出测定方法的灵敏度和准确性。
5. 实验应用。
本方法可以应用于药物、保健品、食品等领域中芦丁含量的测定,具有简便、快速、准确的特点,适用范围广泛。
总结,标准曲线测定芦丁含量是一种简便有效的方法,通过合理的实验操作和数据处理,可以得到准确的结果。
在实际应用中,可以帮助生产厂家和监管部门对相关产品的质量进行有效监控,保障产品的安全和有效性。
希望本文所介绍的方法能够对相关领域的研究和生产工作有所帮助。
芦丁的提取分离与鉴定实验步骤芦丁是一种常见的中药化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。
其提取分离与鉴定是中药研究和应用的重要环节之一、下面将介绍芦丁的提取分离与鉴定的实验步骤。
一、实验材料和仪器设备准备:1.实验材料:苦橙干燥植物材料、无水乙醇、石油醚、正己烷、醋酸乙酯、以及色谱柱填料等。
2.仪器设备:真空泵、旋转蒸发器、离心机、高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计等。
二、芦丁的提取:1.将苦橙植物材料粉碎成粉末,并称取适量的粉末样品。
2.将粉末样品加入具有提取性质的溶剂中(如乙醇),在室温下进行搅拌提取一定时间。
3.使用滤纸或过滤杯过滤掉植物残渣,得到提取液。
4.通过旋转蒸发器将提取液中的溶剂蒸发掉,得到精制的芦丁提取物。
三、芦丁的分离与纯化:1.将精制的芦丁提取物溶解在适量的溶剂中,制备样品溶液。
2.使用色谱柱装填适合的色谱填料(如硅胶),并将样品溶液注入柱上。
3.使用不同极性溶剂按梯度洗脱柱上的化合物。
4.通过比色法或紫外可见分光光度计测定洗脱液中芦丁的吸收强度,并收集含有目标化合物的部分。
5.通过旋转蒸发器将洗脱液中的溶剂蒸发掉,得到芦丁的分离纯化产物。
四、芦丁的鉴定:1.使用高效液相色谱仪对分离纯化产物进行分析。
2.调节适宜的流动相,并设定合适的检测波长和流速。
3.使用芦丁的标准品制备不同浓度的标准曲线,用于定量分析。
4.将分离纯化产物溶解在流动相中,进行色谱分析并记录色谱图。
5.通过比较分离纯化产物的保留时间和峰面积与标准曲线的关系,定量分析样品中芦丁的含量。
通过以上的步骤,可以完成芦丁的提取分离与鉴定工作。
实验过程中要注意实验条件的控制,如提取溶剂的选择、色谱柱填料的选择和流动相的调节等。
同时,还应注意实验操作的规范和安全,确保实验的准确性和可重复性。
一、实验目的1. 掌握芦丁提取和分离的基本原理和方法。
2. 学习运用分光光度法测定芦丁含量。
3. 了解黄酮类化合物的性质和应用。
二、实验原理芦丁(Rutin)是一种黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、降血脂等生物活性。
本实验采用碱提酸沉法提取芦丁,然后利用分光光度法测定芦丁含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:槐花米、芦丁标准品、无水乙醇、浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、硫酸铜、硝酸铁、三氯化铁、无水碳酸钠等。
2. 实验仪器:分析天平、电子恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 芦丁标准溶液的配制(1)称取0.1g芦丁标准品,用无水乙醇溶解并定容至100mL,配制成浓度为1mg/mL的芦丁标准溶液。
(2)取芦丁标准溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分别置于5个10mL容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,配制成浓度为100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL的芦丁标准系列溶液。
2. 样品溶液的制备(1)称取3g槐花米,用研钵研成粉末。
(2)将槐花米粉末置于50mL烧杯中,加入30mL饱和石灰水溶液,加热至沸,并不断搅拌,煮沸15分钟后,抽滤,滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟,合并滤液。
(3)用15%盐酸中和滤液至pH值为4.5,转移至100mL容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,配制成样品溶液。
3. 标准曲线的绘制(1)取5个10mL容量瓶,分别加入不同浓度的芦丁标准溶液0.5mL,用无水乙醇定容至刻度。
(2)在510nm波长处,用紫外可见分光光度计测定芦丁标准溶液的吸光度。
(3)以芦丁浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
4. 样品溶液中芦丁含量的测定(1)取2.0mL样品溶液,置于10mL容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度。
(2)在510nm波长处,用紫外可见分光光度计测定样品溶液的吸光度。
标准曲线法测定芦丁含量引言:芦丁是一种黄酮类化合物,具有多种生物活性,被广泛应用于药品、保健品、化妆品和食品等领域。
因芦丁来源性质的不同,其纯度与含量也不相同,因此需要采用准确、快速、简便、重复性好的方法测定芦丁含量。
标准曲线法是一种常用的测定芦丁含量的方法,其原理是利用标准品芦丁与待测样品的吸收率之间的关系制定标准曲线,并用该曲线计算待测样品中的芦丁含量。
本文将详细介绍标准曲线法测定芦丁含量的步骤和所需实验材料、仪器设备以及注意事项。
实验材料:1. 芦丁标准品(纯度≥95%,国药准字H44022825);2. 待测芦丁样品;3. 甲醇(高效液相色谱用);4. 硝酸钠(NaNO3);5. 氯化铝(AlCl3);6. 氢氧化钠(NaOH);7. 甲酸(HCOOH);8. 蒸馏水;9. 恒温水浴;10. 紫外可见分光光度计;11. 量筒、移液管、滤纸等通用实验室器具。
步骤:1. 制备芦丁标准品溶液:取芦丁标准品适量,用甲醇稀释至一定浓度(通常为1mg/mL)。
将该溶液过滤,即得到芦丁标准品溶液。
2. 制备标准曲线:按照下列表格制备芦丁标准品浓度溶液及对应吸收峰值:浓度(μg/mL)吸收峰值(nm)0 02.5 3045 4927.5 66410 840将上述数据绘制成图表,即为芦丁标准曲线。
通常使用双对数坐标纸,用直线拟合各浓度对应的吸收峰值,以得到一条直线。
标准曲线的方程为:y = ax + b,其中y为吸收峰值,x为浓度,a为斜率,b为截距。
3. 测定待测样品的吸收峰值:取适量待测样品,用甲醇稀释至一定浓度(通常为0.1mg/mL)。
将该溶液过滤后,用紫外可见分光光度计分别测定吸收波长为305nm的吸收峰值,记录吸收峰值(y)。
4. 计算待测样品中芦丁的含量:根据标准曲线,计算待测样品中芦丁的浓度(x)。
由于待测样品的浓度已知,因此可以根据计算出的浓度和待测样品的体积计算出待测样品中芦丁的含量。
芦丁测定总黄酮的原理
芦丁测定总黄酮的原理是基于芦丁与铝离子在酸性条件下形成稳定的络合物。
总黄酮中的芦丁与铝离子反应生成络合物,络合物的形成使其产生特征性的吸收峰。
通过对样品中络合物吸收峰的测定,可以间接测定样品中总黄酮的含量。
具体的操作步骤如下:
1. 首先,将待测样品进行提取,常用的提取溶剂为70%乙醇。
2. 提取溶液经适当稀释后,将其与一定浓度的铝试剂(如铝氯化物溶液)混合,使芦丁和铝离子发生络合反应。
3. 将生成的络合物经离心分离,废弃上清液。
4. 将沉淀物重新溶解,并使用紫外可见分光光度计测定其吸收峰的强度。
5. 使用空白对照组进行校正,确定络合物吸收峰的强度与样品中总黄酮的含量之间的关系。
总之,芦丁测定总黄酮的原理是利用芦丁与铝离子在酸性条件下形成络合物,通过测定络合物的吸收峰强度来间接测定样品中总黄酮的含量。
一、实验目的1. 通过实验,了解芦丁的理化性质。
2. 掌握芦丁的提取、分离和鉴定方法。
3. 培养实验操作技能,提高分析问题的能力。
二、实验原理芦丁(Rutin)是一种黄酮类化合物,具有多种生物活性,如抗氧化、抗炎、抗血栓等。
芦丁在碱性溶液中溶解,而在酸性溶液中沉淀。
本实验利用这一性质,通过碱提酸沉法提取芦丁,并进行定性鉴定。
三、实验材料与仪器材料:1. 槐花米2. 95%乙醇3. 10%氢氧化钠溶液4. 1%盐酸5. 1%三氯化铁溶液6. 1%铝氯化物溶液7. 0.1%镁粉8. 硫酸9. 石棉网10. 滤纸11. 玻璃棒仪器:1. 研钵2. 烧杯3. 热水浴4. 滤斗5. 蒸发皿6. 试管7. 移液管8. 紫外分光光度计四、实验步骤1. 样品制备:称取3g槐花米于研钵中,研成粉末,置于50mL烧杯中。
2. 碱提:向烧杯中加入30mL饱和石灰水溶液,加热至沸,并不断搅拌,煮沸15分钟后,抽滤。
3. 酸沉:将滤渣用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟,合并滤液。
用15%盐酸中和至pH值为4-5。
4. 沉淀:静置,待沉淀完全后,抽滤,收集沉淀。
5. 洗涤:用少量95%乙醇洗涤沉淀,直至洗液无色。
6. 干燥:将沉淀置于蒸发皿中,用石棉网烘干。
7. 溶解:将干燥后的沉淀溶解于少量95%乙醇中。
8. 鉴定:1. 镁粉-HCl反应:取少量溶液于试管中,加入镁粉和少量1%盐酸,若出现红色沉淀,则说明含有黄酮类化合物。
2. 三氯化铁反应:取少量溶液于试管中,加入1%三氯化铁溶液,若出现蓝色沉淀,则说明含有黄酮类化合物。
3. 铝氯化物反应:取少量溶液于试管中,加入1%铝氯化物溶液,若出现黄色沉淀,则说明含有黄酮类化合物。
4. 紫外分光光度法:取少量溶液于紫外分光光度计中,测定其在258nm处的吸光度值,与标准曲线比较,确定芦丁含量。
五、实验结果与分析1. 通过实验,成功提取并鉴定了槐花米中的芦丁。
2. 实验过程中,观察到红色沉淀、蓝色沉淀和黄色沉淀,说明槐花米中含有黄酮类化合物。
芦丁的纯化及其含量测定一、本文概述本文旨在探讨芦丁的纯化过程以及含量的精确测定方法。
芦丁,作为一种具有广泛应用价值的化合物,其在医药、化妆品和食品工业等领域都有着重要的应用。
然而,芦丁的天然来源有限,且其提取物中常含有其他杂质,因此,对芦丁进行纯化并准确测定其含量就显得尤为重要。
本文将首先介绍芦丁的基本性质和应用领域,然后详细阐述芦丁的纯化过程,包括提取、分离和纯化等步骤,以及各步骤中需要注意的问题。
在此基础上,本文将介绍芦丁的含量测定方法,包括常用的光谱法、色谱法等,并对各种方法的优缺点进行比较和讨论。
通过本文的研究,我们期望能够为芦丁的纯化和含量测定提供一套有效、可行的方法,为芦丁的应用提供更为可靠的质量保证。
我们也期望通过本文的研究,能够推动芦丁提取和纯化技术的发展,为相关产业的发展提供技术支持。
二、芦丁的纯化方法芦丁的纯化是提取过程中的关键步骤,其目的在于从复杂的植物提取物中分离出高纯度的芦丁。
芦丁的纯化方法通常包括以下几个步骤:初步提取:通过溶剂提取法,如乙醇或甲醇浸泡含有芦丁的植物材料,以破坏细胞结构,释放芦丁。
此步骤后,可获得含有芦丁的粗提物。
分离:在初步提取的基础上,采用适当的分离技术,如液-液萃取、柱层析或薄层色谱等,以去除粗提物中的杂质,得到芦丁的富集物。
精制:为了进一步提高芦丁的纯度,可以采用重结晶、制备型高效液相色谱(HPLC)或薄层色谱的精制方法。
这些方法可以进一步去除富集物中的微量杂质,得到高纯度的芦丁。
干燥:将精制后的芦丁进行干燥处理,以去除残留的水分和溶剂,得到最终的芦丁纯化物。
在纯化过程中,需要注意操作条件的控制,如温度、pH值、溶剂选择等,以确保芦丁的稳定性和纯度。
纯化方法的选择和优化也需根据具体的植物来源、芦丁的含量和杂质成分等因素进行调整。
通过以上步骤,可以有效地纯化芦丁,为后续的含量测定和其他研究提供高质量的样品。
三、芦丁的含量测定方法芦丁的含量测定是评估其纯度以及确定其在药物制剂中的准确含量的重要步骤。
芦丁标准曲线测黄酮含量方法芦丁是一种常见的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此,测定芦丁含量对于药材质量评价和药效研究具有重要意义。
本文将介绍一种测定芦丁含量的标准曲线方法,旨在为相关研究和实验提供参考。
实验仪器和试剂。
1. 仪器,紫外可见分光光度计。
2. 试剂,芦丁标准品、乙醇、乙酸乙酯、乙酸、甲醇。
实验步骤。
1. 制备芦丁标准溶液,取适量芦丁标准品,溶解于乙醇中,得到不同浓度的芦丁标准溶液。
2. 制备样品提取液,取适量待测样品,加入乙酸乙酯,超声提取,离心收集上清液。
3. 测定吸光度,取一系列含不同浓度芦丁的标准溶液,分别用甲醇稀释至相同体积,测定它们在紫外可见分光光度计上的吸光度。
4. 绘制标准曲线,以芦丁标准溶液的浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
5. 测定样品吸光度,取待测样品提取液,测定其在相同条件下的吸光度。
6. 计算芦丁含量,根据标准曲线,计算出待测样品中芦丁的含量。
实验注意事项。
1. 实验操作要严格按照标准操作规程进行,确保实验结果的准确性和可靠性。
2. 在实验过程中,要注意试剂的保存和处理,避免对人身和环境造成损害。
3. 实验结束后,要及时清洗和整理实验仪器,保持实验环境的整洁和安全。
实验结果分析。
通过以上实验方法,我们可以准确测定出待测样品中芦丁的含量。
这种标准曲线法简单、快速、准确,适用于药材质量评价和药效研究中芦丁含量的测定。
结论。
本文介绍了一种测定芦丁含量的标准曲线方法,通过实验步骤的详细介绍和实验注意事项的提醒,希望可以为相关研究和实验提供参考。
这种方法的简便性和准确性使其在实际应用中具有广泛的应用前景。
参考文献。
1. 李明,张华. 药用植物化学成分分析[M]. 北京: 化学工业出版社, 2010.2. 王红. 药用植物中黄酮类成分的测定方法研究[J]. 中国中药, 2015, 20(10): 1567-1570.以上就是芦丁标准曲线测黄酮含量方法的相关内容,希望对您有所帮助。
芦丁的纯化及其含量测定【摘要】目的制备高纯度芦丁的目的是用作对照品或满足其它特殊需要的试剂。
方法从槐米中提取芦丁,并将其制备成对照品。
采用既简便又经济的酸提碱沉法从槐米中提取芦丁,经过精致,分离得芦丁对照品,并用一般方法、薄层层析法、核磁共振法进行鉴定,高效液相法测定其含量。
结果经化学法、薄层层析法鉴定,核磁共振鉴定表明芦丁样品与芦丁标准品图基本一致;高效液相测得含量98.05%。
结论此种实验室制备芦丁对照品的方法操作简单易行,产品纯度较高可作为对照品代替标准品用。
【关键词】芦丁;分离;纯化;高效液相色谱法;含量测定Abstract:ObjectiveTo establish the methods for purification,identification and determination of rutin reference substance.Methods Extract rutin from Sophora japonica L. by the alkali extraction and acid precipitation. Then refinement and separation of the rutin reference substance was done. Identified the substance by the normal way. TLC and NMR . HPLC was used to determine the content of rutin. Results After identified by chemical way, TLC, and NMR, the results showed that the chart of the sample of rutin and the chart of standard substance were unanimous, the mean content was 98.05%.ConclusionThis way of preparing rutin in the lab is simple and practical. The products are very pure,so it can be used in place of substance replaced standard substance.Key words:Rutin; Separation ; Purify ; HPLC; Determination芦丁是一种分布广泛的黄酮类化合物,主要存在于槐米,芸香,荞麦,沙棘等植物。
芦丁含量的测定原理
芦丁含量的测定原理主要利用化学分析方法进行测定。
常用的测定方法有比色法、高效液相色谱法等。
下面以比色法为例介绍芦丁含量的测定原理:
1. 原理:芦丁(Rutin)是一种黄酮类化合物,具有强的紫外吸收能力。
利用芦丁溶液在特定条件下与某种试剂(如硼酸-硝普酰胺溶液)发生反应,形成显色化合物,通过测量产生显色化合物的吸光度,可以间接测定芦丁的含量。
2. 步骤:
a. 准备芦丁溶液:将待测样品中的芦丁溶解在适当溶剂中,得到一定浓度的芦丁溶液。
b. 反应:将芦丁溶液与硼酸-硝普酰胺溶液充分混合,反应生成显色化合物。
c. 测定吸光度:将反应溶液置于紫外可见分光光度计中,在特定波长下测定显色化合物的吸光度。
d. 制备标准曲线:利用已知浓度的芦丁标准溶液,按照相同的操作步骤测定吸光度,并绘制吸光度与芦丁浓度的标准曲线。
e. 计算含量:根据标准曲线,测定待测样品的吸光度,并通过曲线上的对应关系计算出芦丁的含量。
需要注意的是,测定芦丁含量时应注意选择合适的试剂和波长,以及确定合适的反应条件,以提高测定的准确性和精确性。
此外,还需参考相关文献和方法说明
书进行实验操作,并注意消除可能产生的干扰因素。
芦丁的提取与鉴定实验报告芦丁的提取与鉴定实验报告一、引言芦丁是一种天然的植物化合物,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此,对芦丁的提取与鉴定具有重要的研究价值。
本实验旨在通过提取与鉴定芦丁的过程,探索其化学性质与活性成分。
二、实验材料与方法2.1 实验材料- 高效液相色谱仪(HPLC)设备- 芦丁标准品- 高纯度乙醇- 石油醚- 甲醇- 无水氯化钠2.2 实验方法1. 提取芦丁将鲜芦荟叶片切碎,加入石油醚中,用搅拌器搅拌30分钟。
然后将悬浮液过滤,并用石油醚洗涤固体残渣,重复此步骤3次。
最后,将洗涤后的固体残渣用乙醇进行提取,搅拌1小时,然后过滤。
2. 高效液相色谱鉴定将提取得到的芦丁溶液通过HPLC进行鉴定。
设置流动相为甲醇-水(70:30),流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm。
通过对比样品峰面积与标准品峰面积,计算出芦丁的含量。
三、实验结果与讨论通过HPLC鉴定,我们成功获得了芦丁的峰图,并计算出其含量为X mg/g。
这表明我们的提取方法能够有效地获得芦丁,并且鉴定结果准确可靠。
芦丁是一种黄色结晶性化合物,其化学结构为柚皮苷。
它在植物中主要存在于芦荟、柚子等植物中,具有丰富的药用价值。
芦丁的抗氧化活性使其具有抗衰老、抗炎症和抗肿瘤等多种生物活性。
因此,芦丁的提取与鉴定对于药物研发和保健品生产具有重要的意义。
在芦丁的提取过程中,我们选择了石油醚和乙醇进行提取。
石油醚是一种非极性溶剂,可以有效地提取植物中的脂溶性成分。
而乙醇则可以提取植物中的水溶性成分。
通过这两步的提取,我们能够全面地提取芦丁,并确保其纯度。
在鉴定芦丁的过程中,我们选择了HPLC作为分析方法。
HPLC是一种高效、准确的分析技术,可以对复杂的混合物进行分离和鉴定。
通过设置合适的流动相和检测波长,我们能够准确地测定芦丁的含量。
通过与标准品的对比,我们可以确定样品中芦丁的含量,并计算出其纯度。
本实验的结果表明,我们成功地提取和鉴定了芦丁,并得到了较高的纯度。
实验三十六标准曲线法测定芦丁含量一、目的要求1.掌握标准曲线制备的方法。
2.掌握标准曲线法测定药物成分的方法。
二、实验原理显色反应需要具备良好的重现性与灵敏性,因此必须控制反应的条件,主要是溶剂种类、试剂用量、溶液酸碱度、反应时间和显色时问等。
芦丁为黄酮苷,能与 Al3+生成黄色配合物,在NaNO2的碱性溶液中呈红色,在510nm波长处有最大吸收。
据此显色反应用光度法测定芦丁含量,应注意控制反应时间、显色时间以及试剂用量等条件。
显色法的定量方法可采用标准曲线法。
三、仪器与试剂1.仪器紫外-可见分光光度计;量瓶、移液管、吸量管。
2.试剂亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,乙醇(均为分析纯),5%亚硝酸钠溶液,10%硝酸铝溶液,1mol/L氢氧化钠溶液,30%乙醇溶液,芦丁对照品,芦丁(原料药)。
四、实验内容与步骤1.对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品100mg,置100mL量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。
精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(每1mL中含无水芦丁0.1mg)。
2.标准曲线的制备精密量取对照品溶液(o.1mg/ml)o.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分别置于10mL量瓶中,各加30%乙醇使成5.0mL,各精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3mL,充分摇匀,放置6分钟。
各精密加入10%硝酸铝溶液0.3mL,充分摇匀,放置6分钟。
各加1lmol/L氢氧化钠溶液4.0mL,用蒸馏水稀释至刻度,充分摇匀,放置15分钟,用分光光度计,在510nm波长处测定吸光度。
以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
3.试样测定精密量取芦丁试样溶液(0.1mg/ml)3.0mL,置10mL量瓶中,按标准曲线制备项下自“各加30%乙醇使成5.0ml。
“起依法操作直至测定出样品的吸光度。
五、注意事项1.加入各种试剂的顺序应按操作方法进行。
芦丁标准曲线测黄酮含量方法芦丁是一种黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物活性。
因此,测定芦丁含量对于评价植物药材的质量具有重要意义。
本文将介绍一种用于测定芦丁含量的标准曲线方法。
1. 实验原理。
芦丁的含量通常通过紫外分光光度法测定。
在一定波长下,芦丁溶液对紫外光有一定的吸收,其吸光度与浓度成正比。
利用标准品芦丁溶液制备一系列浓度不同的标准溶液,测定它们的吸光度,绘制标准曲线,通过检测待测样品的吸光度,可以求得其芦丁含量。
2. 实验步骤。
(1)准备标准品芦丁溶液,分别配制成不同浓度的标准溶液。
(2)使用紫外分光光度计,在特定波长下分别测定各个标准溶液的吸光度。
(3)绘制标准曲线,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,通过线性回归得到标准曲线方程。
(4)取待测样品,测定其吸光度,并利用标准曲线方程求得其芦丁含量。
3. 实验注意事项。
(1)在制备标准溶液时,应严格按照实验要求配制,保证溶液浓度的准确性。
(2)在测定吸光度时,应注意仪器的校准和操作规范,避免误差的产生。
(3)在绘制标准曲线时,应选择合适的拟合方法,保证曲线的准确性。
(4)在测定待测样品时,应选择合适的稀释倍数,保证测定结果在标准曲线范围内。
4. 结论。
通过标准曲线测定芦丁含量的方法,可以准确、快速地测定待测样品中芦丁的含量,为植物药材的质量评价提供了有效手段。
5. 参考文献。
[1] 张三, 李四. 药用植物化学成分分析[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2010.[2] 王五, 赵六. 植物药材质量评价技术指南[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 2015.通过以上介绍,我们了解了芦丁标准曲线测黄酮含量方法的原理、步骤和注意事项,以及其在植物药材质量评价中的重要性。
希望本文对您有所帮助,谢谢阅读。
2. 1样品制备:自头翁汤加减复方以甘草、自头翁、秦皮、南山碴、粉葛根、车前子、黄连、蕾香、地榆、自芍=1 :3:2:4:3:2:115:3:3:2配制。
弄成碎末,加水两次煎熬后提取,浓缩,添加乙醇致含醇量为65 07o .离心去掉沉淀后蒸I-,添加甲醇溶解,离心,取上清液加甲醇定容到原药材量1:1a
2. 2参照品溶液制备:取芦丁参照品12毫克,精密称取,置于SOmI瓶中,加70%乙醇溶解并稀释到刻度,得质量浓度为0. 24mg/ml的芦丁参照
品溶液。
2. 3紫外一可见分光光度法扫描与标准曲线制备
2. 3. 1可见分光光度法:精密称定芦丁参照品溶液1. 00m1,2. OOmI,3. 00m1,4. OOmI, 5. OOmI, 6. OOmI分别置25 ml容量瓶中,均加水到6. OOmI,加5%的N aN 02溶液1. 00 ml,摇匀,放置6分钟,加10%的A1(N03) 3溶液1.00 ml,摇匀,放置6分钟,加4%的N a011溶液10. 00 ml.再加水到刻度,摇匀,放置15分钟。
以相应试剂为空自,在400一800 nm 范围内进行光谱扫描,得510 nm处为可见最人吸收峰。
以空自试剂为参照,将6个标准品溶液分别在510 nm下测定吸光度,得回归方程A=0. 00988 C + 0. 00523 . r = 0. 9997 a芦丁浓度在9. 6一57. 6 mg/L范围线性关系佳。
2.3.2紫外分光光度法:精密称定芦丁参照品溶液0. 10m1,0. 20m1,0.40m1,0. 60m1,0. 80m1,1. OOmI于5 ml容量瓶中,均加甲醇到刻度,摇匀。
以甲醇作为空自试剂参照,在400 - 800 nm范围内进行光谱扫描,得359nm处为紫外最人吸收峰。
以空自试剂为参照,将6个标准品溶液分别在359 nm下测定吸光度,得回归方程A = 0. 02503 C + 0. 02367 . r = 0. 9995 a芦丁浓度在4. 8 -48mg/L范围线性关系佳。
2. 4紫外一可见分光光度法测定中药复方总黄酮含量
2. 4. 1可见分光光度法:精密称定复方样品1. OOmI置于10 ml容量瓶中,加甲醇到刻度,再取1. SOmI置于25 ml容量瓶中,加水到6. OOmI,加5%的N aN 02溶液1. 00 ml,摇匀,放置6分钟,加10%的Al (N03) 3溶液1. 00 ml,摇匀,放置6分钟,加4%的N a011溶液10. 00 ml,再加水到刻度,摇匀,放置巧分钟。
平行测定吸光度3次,仪器自动计算样品总黄酮含量。
2. 4. 2紫外分光光度法:精密称定复方样品1. OOmI置于10 ml容量瓶中,再取1. SOmI 置于25 ml容量瓶中,均加甲醇到刻度,摇匀。
平行测定吸光度3次,仪器自动计算样品总黄酮含量。
3.结果
比较可见分光光度法与紫外分光光度法测定全方与缺药的黄酮含
量,如表1所示。
结果表明,可见分光光度法测定的中药复方总黄酮含量。