高考生物 一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用

第十二单元 生物技术与工程

课前自主预习案2 微生物的培养技术及应用

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基础梳理——系统化

知识点一 微生物的基本培养技术

1．培养基

2．无菌技术

3．微生物的纯培养

（1）概念：由 繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得

的过程就是纯培养。

（2）过程：包括 、灭菌、接种、分离和培养等步骤。

（3）常用方法： 法和 法。

（4）实例——酵母菌的纯培养

知识点二 微生物的选择培养和计数

一、微生物的选择培养

1．实验室中微生物筛选的原理

人为提供有利于 生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时

其他微生物的生长。

2．稀释涂布平板法

将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。

（1）系列稀释操作

移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm处。操作过程如下：

（2）涂布平板操作

序号

图示

操作

①

取0.1 mL菌液，滴加到

②

将涂布器浸在盛有 的烧杯中

③

将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10 s

④

用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布

（3）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板 ，放入30～37 ℃的 中培养1～2 d。

二、微生物的数量测定

1．稀释涂布平板法

（1）计数原理：当样品的 时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（2）计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为 的平板进行计数。

（3）计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为 、适于计数的平板。在 下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出 。

（4）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计结果一般用

1 第十二单元 生物技术实践

B卷 滚动提升检测

一、选择题：本大题共18个小题。第1-13题只有一个选项符合题目要求，每题2分，第14-18题有多项符合题目要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。

1.下列有关果酒、果醋、腐乳制作的叙述，正确的是

A. 制作果酒、果醋的菌种属于真核生物，制作腐乳的菌种属于原核生物

B. 制作果酒、腐乳在无氧条件下进行，制作果醋需在有氧条件下进行

C. 制作果酒、果醋主要利用的是胞内酶，制作腐乳主要利用的胞外酶

D. 制作果酒、果醋的菌种需进行有氧呼吸，制作腐乳的菌种需进行无氧呼吸

2.我国国标GBT20712-2006规定，火腿肠中亚硝酸盐最高允许为30mg/kg，取市售火腿10g，经适当处理后并定容至500mL，取10mL样品溶液，用光程为1cm的比色杯在波长为550nm处，测定光密度值，测得样品的光密度值为0.24（如图所示）。下列说法错误的是（ ）

A．制作标准曲线时，需要配制一系列不同浓度的亚硝酸钠溶液

B．测得图中样品中亚硝酸盐含量为10mg/kg，符合国家质量标准

C．测定火腿中亚硝酸盐前，需要发生重氮化反应，产生对氨基苯磺酸

D．试验中产生的白色沉淀为氢氧化铝，主要作用是吸附杂质，使待测液更加清澈

3.下列是一些关于微生物的培养和应用的基本理论和基础知识，其中都正确的一组是

①接种环、玻璃器皿（如培养皿等）可以通过灼烧灭菌和干热灭菌

②人工配制的培养基常需要调PH，其应在分装灭菌前进行

③超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒

④菌种的长期保存通常接种在试管的固体斜面培养基上，-4℃下进行

⑤用涂布稀释平板法统计菌落数的缺点是不能观察到微生物的的形态、大小、结构

⑥实验室测定土壤中细菌的数量时，选取的稀释度的要求通常分别是：103、104、105， 2 A. ①②③ B. ①②④ C. ②③⑤ D. ②③⑥

- 1 - 三十三 微生物的培养技术及应用

(30分钟 100分)

说明:标★为中档题,标★★为较难题

一、选择题:本题共10小题,每小题5分,共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。

1.下列有关微生物的培养技术的叙述,正确的是( )

A.加入链霉素或者伊红美蓝的培养基属于选择培养基

B.在以尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚酞指示剂培养分解尿素的细菌

C.对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记

D.利用平板划线法可对微生物进行接种纯化、分离和计数

【解析】选C。加入链霉素的培养基为选择培养基,加入伊红美蓝的培养基属于鉴别培养基,A项错误。在以尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,如果pH升高,指示剂将变红,说明该细菌能够分解尿素,B项错误。对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,为了便于观察,应使用记号笔在皿底标记,C项正确。利用平板划线法可对微生物进行接种纯化、分离,但不能计数,稀释涂布平板法可对微生物进行接种纯化、分离和计数,D项错误。

2.“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段,下列有关技术中不能筛选成功的是( )

A.在牛肉膏蛋白胨培养基中,筛选大肠杆菌

B.在以尿素为唯一氮源的固体培养基中,筛选能够分解尿素的微生物

C.用纤维素为唯一碳源的培养基,筛选能分解纤维素的微生物

D.在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体植物

【解析】选A。在牛肉膏蛋白胨培养基中,几乎所有细菌都能生长,不能筛选大肠杆菌,A符合题意;在以尿素为唯一氮源的固体培养基中,只有能分解尿素的微生物才能生长,B不符合题意;用纤维素为唯一碳源的培养基,只有能分解纤维素的微生物才能生长,C不符合题意;在培养基中加入不同浓度的氯化钠,能够筛选出抗盐突变体植物,D不符合题意。

【方法技巧】微生物的筛选方法

单菌落

挑取法 利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面,直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物

练案[35] 选择性必修3 第十单元 生物技术与工程

第2讲 微生物的培养技术及应用

A组

一、选择题

1．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列关于消毒和灭菌的叙述，错误的是( B )

A．牛奶的消毒常用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法

B．水厂供应的自来水通常是经过高锰酸钾消毒的

C．用紫外灯对密闭教室消毒前，适量喷洒消毒液可强化消毒效果

D．培养基不能放入干热灭菌箱中进行干热灭菌

解析：高锰酸钾是强氧化剂，不宜用于自来水消毒，B项错误。

2．(2023·山东烟台模拟)下列与微生物培养相关的说法错误的是( B )

A．平板上的一个菌落一般是由一个细胞繁殖而来的

B．稀释涂布平板法对微生物计数时，欲将1 mL样品稀释10倍，应加入10

mL无菌水

C．平板划线法接种微生物后，将平板倒置放入培养箱中，防止冷凝水倒流污染培养基

D．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时，应将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯中再加水去纸

解析：稀释涂布平板法对微生物计数时，欲将1 mL样品稀释10倍，只需加入9 mL无菌水，B错误。

3．某同学将1 mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是( D )

A．可得出土壤样液中活菌数大约为5.7×107个/L

B．此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低

C．一般选择菌落数在30～300的平板进行计数

D．显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数 解析：根据分析可知，每升样品中的活菌数为(56＋58＋57)÷3÷0.1×1

000×100＝5.7×107(个)，A项正确；当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，B项正确；显微镜直接计数法统计的是稀释液中所有个体的数目，包括活菌和死菌，D项错误。