用于自身免疫胶体金的检测卡的制作流程
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免疫胶体金快速检测卡检测原理嘿,朋友们!今天咱来聊聊免疫胶体金快速检测卡的检测原理,这可真是个神奇又有趣的玩意儿呢!你可以把免疫胶体金快速检测卡想象成一个特别厉害的“小侦探”。
这个“小侦探”呢,它有自己独特的工作方式哦。
咱们先来说说胶体金。
这胶体金就像是“小侦探”手里的秘密武器,闪闪发光,特别显眼。
它可以和一些特定的物质紧密结合起来。
然后呢,检测卡上有一些专门设计的区域。
当我们把样本滴上去的时候,就好像是给“小侦探”发出了任务。
样本在检测卡上开始了它的奇妙之旅。
如果样本里有检测目标,嘿,那就像是“小侦探”找到了它要找的坏人一样。
胶体金会和检测目标结合在一起,然后一起顺着检测卡的通道往前跑。
跑到特定区域的时候,就会被“抓住”,然后这个区域就会显示出颜色来。
哇塞,这不就相当于“小侦探”发出信号说:“嘿,我找到啦!”你说神奇不神奇?这就好像我们在生活中找东西一样,一旦找到了,就特别兴奋和有成就感。
免疫胶体金快速检测卡就是这样,用它简单又快速的方式,帮我们检测出各种我们关心的东西。
比如说检测传染病,我们就能很快知道自己有没有被感染,这多重要啊!再比如说检测食品中的有害物质,那可是保障我们身体健康的重要手段呢。
它就像是我们的健康小卫士,时刻守护着我们。
所以啊,免疫胶体金快速检测卡可真是个了不起的发明!它让检测变得不再那么复杂和困难,让我们能更及时地了解各种情况。
朋友们,想想看,如果没有免疫胶体金快速检测卡,我们要知道这些信息得多麻烦啊!现在有了它,多方便呀!它真的是在默默地为我们的生活和健康贡献着力量呢!我们是不是应该好好珍惜和利用它呀?反正我觉得是必须的呀!原创不易,请尊重原创,谢谢!。
胶体金检测试纸生产工艺本项目主要从事犬、猫传染病抗体胶体金检测试纸的生产,以微孔滤膜为固相载体,膜上包被已知抗体,待加入检测样本后,经毛细管虹吸作用或微孔滤膜的渗滤作用,使标本中的抗体与膜上包被的抗体或抗原结合,再通过胶体金标记物与复合物反应,可形成肉眼可见的红色产物。
目前应用最为广泛的胶体金免疫技术有侧向横流模式,又称金标免疫层析法(ImmUnOgoIdChrOmatograPhyASsay,GICA )O金标免疫层析法试纸条主要是通过毛细管虹吸作用反应,它由以下几部分组成:样品垫、胶体金垫、NC 膜(硝酸纤维素膜)、吸水滤纸、以及PVC 底板,NC 膜(硝酸纤维素膜)上包括一条检测线(T 线)和一条质控线(C 线)一次层叠起来,如下图所示:图3 金标免疫层析法示意图在吸水材料的牵引下,待测抗原在试条上向上走,首先与金标抗体结合成抗原抗体复合物,抗原抗体复合物上行到检测线时,被测抗原的另一结合位点与包被在此处的单抗结合,形成两个抗体结合一个抗原(双抗体夹心)的金标复合物,因有金颗粒在此沉积,故T 线显红色。
未结合抗原的金标抗体上行到C 线时,与“抗金标抗体”结合,所以C 线也显红色。
检测结果判定:T 线与C 线均显线,表明检测结果为阳性;C 线显线,T 线不显,表明结果为阴性。
若C 线不显线,则检测结果无效。
工艺流程如下所示:NC«(跚咬纤假素膜)PVC 底板 测试线(TtK 1)M 析方向样品稀释液噪声:N ;一般固体废物:不合格品(S1);废防粘纸(S2);边角料(S3);废包装物(S4);危险废物:废一次性滴管(S5)玻璃器具清洗废水(S6);玻璃器具淋洗废水(S7);超声波清洗废水(S8)、超声波冲洗废水(S9)o图4胶体金检测试纸生产过程示意图工艺流程简述: (1)检测:外购硝酸纤维素膜、金结合垫、吸水垫、样品垫均人工目视进行检验。
①硝酸纤维素膜:人工目视干燥后的包被膜表面应洁净、无污染、破损等,如有,需用笔标出。
胶体金标准比色卡的制备
制备胶体金标准比色卡的过程可以参考以下步骤:
1. 制备不同浓度的胶体金溶液。
2. 将不同浓度的胶体金溶液分别涂布在透明的塑料板或玻璃板上,使其形成一层均匀的薄膜。
3. 将涂布好的薄膜放在干燥箱中干燥,以去除多余的水分。
4. 将干燥后的薄膜放在标准光源下观察,记录不同浓度胶体金溶液的颜色变化。
5. 根据观察结果,将不同浓度的胶体金溶液按照颜色深浅程度进行排序,并标注相应的浓度值。
6. 将制备好的胶体金标准比色卡保存在干燥、避光的地方,以备后续使用。
通过以上步骤,就可以制备出用于比色的胶体金标准比色卡。
在比色时,将待测溶液与标准比色卡进行比较,即可快速得出待测溶液中胶体金的浓度。
免疫胶体金法实验流程一、实验准备。
咱开始做免疫胶体金法实验之前呀,得把东西都准备好呢。
这就像出门旅行得先收拾好行李一样。
1. 试剂方面。
要准备好免疫胶体金试剂啦,这个试剂可是实验的关键呢。
就好像做菜得有主要的食材一样。
还有相关的缓冲液,它就像给试剂创造一个舒服的小环境,让它们能好好发挥作用。
2. 器材准备。
像检测用的试纸条或者检测板可不能忘,这是咱们看实验结果的重要家伙事儿。
然后就是移液器,这东西就像个精准的小助手,能准确地吸取咱们需要的试剂量。
再有就是干净的离心管,用来装各种试剂混合液之类的,得保证它干净无污染哦,不然就像在脏锅里做饭,结果肯定好不了。
二、样本采集。
接下来就是样本采集啦。
这一步也很重要哦。
1. 采集类型。
如果是做血液相关的免疫胶体金检测,那采血的时候得小心点儿。
采血量要按照要求来,不能太多也不能太少,就像 Goldilocks找合适的床一样,刚刚好才行。
要是采集其他样本,像尿液之类的,也要注意采集的方法和容器的清洁。
2. 样本保存。
采集好的样本可不能随便放着不管呀。
如果不能马上做实验,就得把它好好保存起来。
有的样本需要冷藏,那就得赶紧放到冰箱里,让它在合适的温度下待着,这样样本里的各种成分才不会变质,就像给它们盖了个小被子,让它们舒舒服服地等着被检测。
三、样本处理。
采集好的样本往往不能直接用来检测,得处理一下呢。
1. 稀释。
很多时候需要对样本进行稀释。
这就好比一杯浓咖啡太苦了,加点儿水稀释一下就好喝多了。
按照一定的比例把样本和缓冲液混合,这个比例可得算准喽,不然可能会影响实验结果的准确性。
2. 离心。
要是样本里有一些杂质或者细胞之类的,离心就很有必要啦。
就像把沙子和水混合了,通过旋转的力量把沙子沉到底下,让上层比较清澈的液体可以用来做检测。
离心之后,小心地吸取上面的液体,可别把下面的杂质也吸进去了。
四、加样。
处理好样本之后,就到了加样这个环节啦。
1. 加到检测板或试纸条。
把处理好的样本加到检测板或者试纸条上的时候,要加得准确无误。
武汉欣泰扬生物科技有限公司孔雀石绿免疫胶体金快速检测试剂卡 使用说明书(Ⅱ)【产品简介】 本产品用于快速检测水产品组织样品中的孔雀石绿残留,整个检测过程只需要 40 分钟左右,适用于各类企业及检测机构。
表一 产品灵敏度【样品处理】 组织样品(虾要去掉头和壳后彻底清洗干 净,鱼要去鳞后洗干净)应当避光冷藏保存。
样品的处理方法如下:1. 取切碎的一定量的去脂肪组织样本,用均质机均质;2. 称取 3 g 均质物于 50 ml 离心管中;3. 向上述50ml 管中加入提取剂1 溶液 3 ml ,提取剂2溶液3ml,再加入 8 ml 乙腈,盖上盖子剧烈振荡2 min 后,室温下 4000 rpm 离心 5 min ;4. 移取4 ml 上清液于5 ml 离心管中,加入100μl 氧化剂,颠 倒 混 匀 1 0 秒 ,于 6 0 ℃ 环 境 下 ,利 用 氮气 或 空 气 吹 干。
(若管底剩余 少于10 0 微升吹不干液体为正常现象,可直接复溶使用,不影响检测结果)5.向吹干的离心管中加入 0.3 ml MG 复溶液,和正己6.烷 500μl ,于室温下 4000 rpm 离心 1 min ,用移液器移取下层 150 μl 溶液 ,待检。
(移液器枪头一定要抵着管底,取底层溶液,以免取到油脂,导致结果异常)【使用步骤】 测试前先完整阅读使用说明书,使用前将试剂板和待检样本溶液恢复至室温(20℃~30℃)。
从原包装袋中取出试剂板,水平放置于观察者正面,如下图所示(打开后请立即使用);吸取待检样品 150 微升加入到金标微孔中,等待反应2分钟后,用滴管吹打至完全溶解孔内红色物质; 吸取孔内所有溶液滴加到加样孔中,加样后开始计时;结果应在:8~10 分钟读取,其他时间判读无效。
T 线 明显显为绿色的,可判为阳性结果【结果判断】阴性(-): T 线显色(测试线,靠近加样孔一端)比C 线(对照线)深或一样深,表示样品中待检 药物浓度低于2 ppb 或不含待检药物。
噻虫嗪胶体金快速检测卡操作步骤产品简介噻虫嗪,别名阿克泰、锐胜,是一种新的烟碱类高效、低毒、广谱杀虫剂,具有良好的胃毒和触杀活性,用于叶面喷雾及土壤灌根处理。
其施药后迅速被内吸,并传导到植株各部位,对刺吸式害虫如蚜虫、飞虱、叶蝉、粉虱等有良好的防效。
国家标准《GB2763食品中农药最大残留限量》中允许噻虫嗪在食品中限量使用。
检测原理深圳艾瑞斯生产的噻虫嗪胶体金快速检测卡采用了抗原抗体的特异性反应以及侧向层析和胶体金技术进行样本中噻虫嗪分子的快速定性检测。
样本中噻虫嗪残留在流动过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线(T线)上的噻虫嗪—BSA偶联物的结合,从而产生检测线颜色的变化。
通过检测线与质控线(C)颜色深浅比较,对检测样品中噻虫嗪残留的定性检测。
【样品前处理】1、检测前样品需恢复至室温(20-30℃),称取2g剪碎后的样品于50ml刻度离心管中。
(备注:样品大小应剪碎成小于1cm见方碎片)2、量取并加入3ml稀释液,手动颠倒混匀(振幅50次/min),充分清洗样品2分钟,静置1分钟,得样品液,检测前用1.5mL离心管将样品液与稀释液进行不同比例稀释。
得待检液(样品液+稀释液)。
噻虫嗪胶体金快速检测卡操作步骤1、测试前先完整阅读说明书,使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温(20℃-30℃)。
2、从铝箔袋中取出检测卡/金标微孔/滴管(共三样耗材),水平放置于观察者正面;3、用铝箔袋中配套滴管吸取上述待检液120微升(约4-5滴)于金标微孔中,用配套滴管轻柔吹打30秒,完全溶解金标微孔底部红色物质,水平静置,等待反应2分钟,吸取金标微孔内红色溶液,轻柔吹打10秒后,全部滴加到检测卡加样孔(S)中,加样后开始计时。
4、结果应在5-8 分钟读取,其它时间结果判读无效。
【结果判断】阴性(一):两条紫红色条带出现。
T线(检测线,靠近加样孔一端)显色比C 线(对照线)深或一样深,表明样品中噻虫嗪农药残留浓度低于检测限量值或无噻虫嗪农药残留。
检测卡及试剂盒工艺流程图2.0本规程规定了本规程对公司生产的结核抗体金标检测卡、结核抗体金标阵列检测试剂盒、肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒、肺炎支原体抗体IgG金标检测试剂盒、肺炎衣原体MOMP抗体IgM检测试剂盒(胶体金法)、肺炎衣原体MOMP 抗体IgG检测试剂盒(胶体金法)沙眼衣原体金标检测试剂盒、解脲支原体MB 蛋白金标检测试剂盒(胶体金法)、弓形虫抗体(TOXO)检测卡产品的生产工艺流程。
※★※注:※代表主要控制项目,★代表主要控制点2.1关键和特殊工序的设备、人员及工艺参数控制的说明2.1.1胶体金制备:此工序为关键工序,所需设备包括:电热炉、磁力搅拌器。
需工作人员1名。
工艺控制参数为:所用水为三蒸水或超纯水,电阻率达18.1Ω;胶体金溶液金颗粒大小均匀,在50—60nm。
2.1.2胶体金标记:此工序为特殊工序,所需设备包括:高速冷冻离心机、酸度计、蛋白测定仪、磁力搅拌器、冰箱和恒温干燥箱等,需1-2名技术人员。
工艺控制参数为:标记抗体浓度,以稳定点(生产时随条)为控制点;pH值(控制在8.2左右)。
2.1.3 NC膜处理:此工序为关键工序,所需设备包括不锈钢容器和恒温干燥箱,需1名技术人员。
工艺控制参数为:膜处理时间,按作业指导书中相关内容进行控制;膜干燥时间,按作业指导书中相关内容进行控制。
2.1.4膜包被:此工序为特殊工序,所需设备膜喷点平台和恒温干燥箱,需1-2名技术人员。
工艺控制参数为:抗体包被浓度和包被量,抗体浓度分别为检测抗体2mg/ml,控制线抗体2.5mg/ml,包被量为10ul/cm;膜干燥时间,按作业指导书中相关内容进行控制。
2.1.5贴板:此工序为关键工序,此工序以手工操作为主,不需设备,需5-6名技术人员。
工艺控制参数为:工作室的干湿度,控制相对湿度在40%以下;各组建的次序和准确度,按作业指导书中相关内容进行控制。
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免疫胶体金实验报告免疫胶体金技术常见影响因素分析免疫胶体金技术常见影响因素分析自胶体金作为特殊标记物进行研究以来,建立的各种免疫胶体金技术以其特异性强、灵敏度高、操作简捷等特点,在医学、农牧业、环境及食品检测等领域被广泛应用。
免疫胶体金技术的反应过程是一个由金颗粒、抗原与抗体动态结合的反应过程,在这个过程中每个环节的好坏都直接影响试验的成败。
而试验过程中每个环节又受到很多因素的影响和制约,下面将影响免疫胶体金技术的因素作一分析,为成功制备胶体金检测产品提供参考。
1耗材的选择1.1不同型号膜的筛选。
硝酸纤维素膜的型号在试验中至关重要,作为反应载体影响到整个试验的成败。
不同的生产厂家生产硝酸纤维素膜时使用的聚合物和表面活性剂的来源、类型和数量均大不相同,对生产出的膜的性能产生较大影响——膜的孔径和分布结构不同。
膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增;膜孔径越小,层析速度也越慢,金标复合物通过T线的时间就越长,反应也就越充分;因此膜孔径越小灵敏度越高,但是同时也减慢了跑板速度,增加了非特异性结合的机会,也就是假阳性越高。
用于金标免疫快速试验的膜多为硝酸纤维素膜或硝酸纤维素/醋酸纤维素混合膜,不同的包被蛋白对膜有特定要求,试验者应根据蛋白质的性质选择适合孔径大小和分布结构的膜,找到合适的平衡点,使胶体金的标记物在膜上的流动速率为最佳。
1.2结合垫的选择。
结合垫位于层析系统的中间,一般要求结合垫的网格均一且非特异性吸附低,能很好地负载胶体金标记物和待检测样品,而不被吸附;玻璃纤维素膜具备以上优点,同时具有一定的硬度,为试验中常用。
1.3样品垫及吸水纸的选择。
样品垫和吸水纸位于胶体金免疫层析系统的两端,对于胶体金层析系统功能的实现起着举足轻重的作用。
试验中应根据试纸条检测样品的性质选择合适的样品垫和吸水纸,保证样品在样品垫形成的通道中快速地流动而不被非特异性地吸附或者改变样品的性质。
如检测样品为血清,则可选择网格较疏松的玻璃纤维素膜即可;如果检测样品为毒素,则可选择质量好的吸水纸和样品垫。