名词解释 cdna文库
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基因文库名词解释基因文库(Gene Library)是指一种储存和维护大量基因序列信息的资源库。
它可以是物理上的储存设施,也可以是数据库或在线平台。
基因文库对基因研究和生物学研究具有重要的作用,可以用于基因克隆、基因功能研究、基因组测序等领域。
基因文库的建立通常是通过基因克隆的方法。
首先,将感兴趣的生物体组织中的所有基因提取出来。
然后,利用限制性内切酶将DNA分割成许多小片段,选择合适的载体(如质粒)将这些小片段连接到上面。
接下来,将这些载体转化到宿主细胞中,使其复制和扩增。
最后,将这些复制和扩增的载体分离并存储,形成一个基因文库。
基因文库通常分为多种类型,根据目的和特点的不同而有所不同。
其中,基因文库中最常见的类型是cDNA文库(Complementary DNA Library)。
cDNA文库由转录本(即mRNA或反义RNA)转录为一链cDNA,然后通过逆转录酶的作用合成双链cDNA,并用合成酶合成第二链。
这种文库可以用于研究某一特定组织或状态下基因的表达情况。
另外,基因文库还可以根据应用范围和目标进行分类。
例如,EST文库(Expressed Sequence Tag Library)主要用于寻找不同组织或细胞中的特定基因的表达情况。
基因组文库(Genomic Library)则可以用于对生物体的整个基因组进行克隆和研究。
基因文库的建立和维护对基因研究起着重要的作用。
它可以提供大量的基因序列信息,帮助科学家们研究基因的结构和功能。
通过基因文库,科学家们可以查找和克隆感兴趣的基因,研究其表达模式和调控机制,甚至开展基因治疗和基因工程等领域的研究。
总的来说,基因文库是储存和维护大量基因序列信息的资源库,通过基因克隆的方法建立,可以用于基因克隆、基因功能研究、基因组测序等领域。
基因文库在基因研究和生物学研究中具有重要的作用,对于我们深入理解基因的结构和功能以及开展相关研究具有重要意义。
1:[论述题]名词解释1、cDNA文库参考答案:指将某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的DNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。
2:[论述题]名词解释2、基因组文库参考答案:指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上形成的文库。
3:[论述题]名词解释3、鉴别寄主参考答案:植物病毒具有有一定的寄主范围,并在某些寄主植物上表现特定的症状,这种能鉴别某种病毒的植物称为鉴别寄主。
4:[论述题]名词解释4、抗体参考答案:指在抗原物质刺激下,免疫动物机体内所产生的可与该抗原物质发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
5:[论述题]名词解释5、愈伤组织参考答案:在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞原生质体:指采用机械或酶解法去掉了细胞壁的裸露的且具有活力的细胞。
6:[论述题]名词解释7、植物组织培养参考答案:指通过无菌操作,把植物体的器官、组织、细胞甚至原生质体,接种于人工配制的培养基上,在人工控制的环境条件下进行培养,使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。
7:[论述题]名词解释6、原生质体融合参考答案:也称体细胞杂交,是指不同种类的原生质体不经过有性阶段,在一定条件下融合创造杂种的过程。
8:[填空题]1、1953年,美国分子生物学家沃森(Watson)和英国分子生物学家克里克(Crick)根据X 射线衍射分析提出了著名的。
参考答案:DNA双螺旋学说9:[填空题]2、DNA测序有两种经典手工测序方法,一是Sanger的酶学法(双脱氧法),另一种是Gilbert 和Maxam的。
参考答案:化学法10:[填空题]3、DNA在生物体内的复制方式是参考答案:半保留复制11:[填空题]4、PCR技术中常用的DNA聚合酶是。
参考答案:Taq DNA聚合酶12:[填空题]5、RNA提取过程中的关键是抑制的活性。
参考答案:RNA酶13:[填空题]6、SSR标记是(显性/共显性)标记。
cdna 文库名词解释cDNA 文库是一种生物学研究中常用的技术手段,它通过反转录酶将 mRNA 转录成 cDNA,再进行克隆和扩增,最终得到一个包含所有基因编码的 cDNA 分子的克隆群。
本文将为您详细介绍 cdna 文库的概念、制作方法、优缺点以及在生物学研究中的应用。
一、cdna 文库的概念cdna 文库是指某生物某一发育时期所转录的 mRNA 全部经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合,具有组织或细胞特异性。
cDNA 文库的制作方法通常包括 mRNA 的提取、反转录、克隆和扩增等步骤。
二、cdna 文库的制作方法1.mRNA 的提取:从生物组织或细胞中提取 mRNA,可以使用酚/氯仿法、异硫氰酸胍法等方法进行提取。
2.反转录:将提取到的 mRNA 用反转录酶反转录成 cDNA,反转录酶通常使用 MMLV 或 HIV 反转录酶。
3.克隆:将反转录产生的 cDNA 片段与载体连接,通常使用质粒载体,如 pCDNA3.1 等。
4.扩增:通过 PCR 技术对克隆的 cDNA 片段进行扩增,获得足够的 cDNA 文库。
三、cdna 文库的优缺点cdna 文库的优点是可以从组织或细胞中快速、高效地获取目的基因,并且可以进行高通量测序,获取大量的转录组信息。
此外,由于 cDNA 文库只包含 mRNA 转录的 cDNA 片段,因此可以减少基因组DNA 污染和 rRNA 等非编码 RNA 的干扰。
cdna 文库的缺点是需要进行反转录过程,可能会引起基因突变;同时,由于反转录酶的作用,cDNA 文库中可能会含有一些误差,如插入误差、缺失误差等。
四、cdna 文库在生物学研究中的应用cdna 文库在生物学研究中应用广泛,例如:1.基因表达分析:通过比较不同组织或细胞中的 cDNA 文库,可以了解基因在不同组织或细胞中的表达情况,从而探究基因的功能和调控机制。
2.基因克隆和表达:通过 cDNA 文库可以快速克隆目的基因,并进行表达和功能研究。
cdna基因文库名词解释概述及应用场景1. 引言1.1 概述CDNA基因文库是指利用互补式DNA(complementary DNA)技术构建而成的一类基因文库,其中包含了特定细胞或组织内所表达的mRNA分子的DNA 复制品。
通过将mRNA转录为cDNA,并将其插入到合适的质粒载体中,科学家们可以获取到特定时期或特定条件下细胞中所表达的全部转录本信息。
CDNA基因文库构建技术是基于反转录酶作用原理而来,通过选取合适的引物和核苷酸,在体外将mRNA逆转录合成相应的cDNA。
这些cDNA分子可进一步克隆到质粒载体中,并在宿主细胞内扩增。
最终形成一个包含大量不同cDNA 片段的基因文库,可供后续研究使用。
1.2 文章结构本文首先会对CDNA基因文库进行详细的名词解释,包括其定义、合成过程及特点以及构建方法与步骤。
接着,将进一步讨论CDNA基因文库在不同领域中的应用场景,尤其是在基因表达研究、蛋白质研究以及新药研发方面的应用。
最后,我们将总结已有的研究成果,并展望CDNA基因文库在未来的发展前景和应用潜力。
1.3 目的本文的目的是为读者提供关于CDNA基因文库的详细解释和应用场景的介绍。
通过阅读本文,读者将更全面地了解CDNA基因文库的概念、构建过程以及其在科学研究中的重要性和广泛应用。
同时,本文也旨在展示CDNA基因文库在基因表达、蛋白质研究以及新药研发等领域所起到的关键作用,为读者理解该技术在科学研究中所扮演的角色提供深入了解。
最后,通过总结已有研究成果并展望未来发展前景,让读者对CDNA基因文库技术有一个更加清晰的认识,并认识到其仍然具有巨大的发展潜力。
2. CDNA基因文库名词解释2.1 CDNA基因文库的定义CDNA基因文库,即亦称为互补脱氧核糖核酸(complementary DNA,cDNA)文库,是一种由转录反应合成的DNA序列集合,其中包含了从细胞中提取的mRNA分子逆转录合成的互补DNA。
现代生物技术概论复习题一、名词解释1、生物技术:也称生物工程,是人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计,改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2、基因组DNA文库:将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后,与载体DNA重组,再全部转化宿主细胞,得到含全部基因组DNA的种群,称为基因组DNA文库。
3、蛋白质工程是指:利用基因工程的手段,在目标蛋白的氨基酸序列上引入突变,从而改变目标蛋白的空间结构,最终达到改善其功能的目的。
4、基因工程:在体外将外源基因进行切割并与一定的载体连接,构成重组DNA分子并导入相应受体细胞,使外源基因在受体细胞中进行复制、表达,使目的基因大量扩增或得到相应基因的表达产物或进行定向改造生物性状。
简单概括,就是将外源目的基因与载体重组后再进入宿主细胞的过程。
5、发酵工程:是发酵原理与工程学的结合,是研究由生物细胞(包括动植物、微生物)参与的工艺过程的原理和科学,是研究利用生物材料生产有用物质,服务于人类的一门综合性科学技术。
6、基因和基因组DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因(gene)。
一个生物体的全部DNA序列称为基因组(genome)}5、载体:把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。
6、cDNA文库:即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库,构建的文库不包含内含子。
7、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。
8、重叠基因:一个基因序列中,含有另一基因的部分或全部序列。
9、基因组文库:把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。
10、细胞工程:以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。
噬菌体cDNA文库cDNA文库(complementary DNA library)以组织中的mRNA 为模板,反转录合成双链cDNA,各cDNA分子分别插入载体形成重组子,再导入宿主细胞克隆扩增。
这些在重组体内的cDNA的集合即cDNA文库。
代表特定细胞或组织中mRNA的文库。
cDNA文库是在基因组水平上研究某一生物特定器官、特定组织、特定的发育时期基因表达的前提和基础。
传统的筛库方法是将克隆高密度影印到尼龙膜上进行菌落原位杂交筛选。
此方法工作量大,而且必须使用放射性同位素。
现如今,作为大容量文库(≥108克隆)中选择特异的结合肽或蛋白的强大工具,噬菌体展示技术的到来位cDNA克隆基因表达提供了发展的机会。
一.cDNA文库的优点1. 使遗传物质为RNA病毒可建立文库;2. 因克隆数比基因组文库少得多,易于筛选;3. 从分化特异的细胞的cDNA文库中可分离到特异表达的基因。
4. 建库时已排除了其他的RNA,使假阳性率降低。
5. cDNA文库可在细菌中表达,可用多种策略进行筛选。
二.cDNA文库和基因组文库的区别时效性代表某一时期特定细胞或组织中mRNA的转录水平,仅反映某一时期特定组织表达的功能基因,不是全部基因。
包含该生物所有基因序列组成不同无间隔序列和调控区等非编码区可显示基因组的全部结构信息,由于制备DNA片段的切点是随机的,所以每一个克隆内所含的DNA片段既可能是一个或几个基因,也可能是一个基因的一部分或除完整基因外还包含着两侧的临近DNA序列。
如何选择在分离植物RNA、病毒基因、研究植物功能蛋白序列、分离植物特定发育阶段或特异表达的基因时应用cDNA文库研究mRNA不存在的序列及基因组做图时必须构建基因组文库三.用于噬菌体cDNA文库展示的载体1. 丝状噬菌体因为全长cDNA包含在3’末端的翻译终止子,原核表达时缺乏合适的核糖体结合位点(若该cDNA来源于真核细胞),确保cDNA在噬菌体表达的最实际的方法是将5’末端与载体基因融合。
RFLP:个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性。
由于碱基组成的变化而改变了限制性内切酶的酶切位点,从而导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP。
翻译:是指在多种因子辅助下,由tRNA携带并转运相应氨基酸,识别mRNA上的三联体密码子,在核糖体上合成具有特定序列多肽链的过程,称为翻译。
突变: DNA的结构发生永久性改变,即突变.转化:通过自动获取或人为地供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型。
转导:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(受体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用。
受体:是细胞膜上或细胞内能识别外源化学信号并与之结合的成分,其化学本质是蛋白质,个别糖脂。
粘粒:又称柯斯质粒,是一类由人工构建的含有λDNA 粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。
它是为克隆和增殖真核基因组DNA的大区段而设计的,是组建真核生物基因文库及从多种生物中分离基因的有效手段。
质粒:是存在于细菌染色体外的、具有自主复制能力的环状双链DNA分子。
端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。
该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在。
端粒DNA由重复序列组成,人类端粒一端是TTAGGG另一端是AATCCC.克隆:通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。
探针:用放射性核素、生物素或荧光染料标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为“探针”。
转录:以DNA为模版,由DNA依赖的RNA聚合酶(RNApol)催化4中NTP聚合,生成RNA 的过程。
增强子:其含有多个作用原件,可以特异性地与转录因子结合,增强基因的转录活性的段短DNA序列。
启动子:能被RNA聚合酶特异性识别并与其结合,启动转录的DNA序列。
操纵子:由功能相关的一组基因在染色体上串联,共同构成的一个转录单位。
现代生物技术概论复习题一、名词解释1、生物技术:也称生物工程,是人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计,改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2、基因组DNA文库:将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后,与载体DNA重组,再全部转化宿主细胞,得到含全部基因组DNA的种群,称为基因组DNA文库。
3、蛋白质工程是指:利用基因工程的手段,在目标蛋白的氨基酸序列上引入突变,从而改变目标蛋白的空间结构,最终达到改善其功能的目的。
4、基因工程:在体外将外源基因进行切割并与一定的载体连接,构成重组DNA分子并导入相应受体细胞,使外源基因在受体细胞中进行复制、表达,使目的基因大量扩增或得到相应基因的表达产物或进行定向改造生物性状。
简单概括,就是将外源目的基因与载体重组后再进入宿主细胞的过程。
5、发酵工程:是发酵原理与工程学的结合,是研究由生物细胞(包括动植物、微生物)参与的工艺过程的原理和科学,是研究利用生物材料生产有用物质,服务于人类的一门综合性科学技术。
6、基因和基因组DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因(gene)。
一个生物体的全部DNA序列称为基因组(genome)5、载体:把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。
6、cDNA文库:即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库,构建的文库不包含内含子。
7、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。
8、重叠基因:一个基因序列中,含有另一基因的部分或全部序列。
9、基因组文库:把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。
10、细胞工程:以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。
α-互补:人工突变使大肠杆菌的β-半乳糖苷酶基因(lacZ)缺失N-端的第11-41位氨基酸,而载体则携带有lacZ基因的N-端140个氨基酸和编码区段(lacZ’),二者单独存在时均无功能,但共存于一个大肠杆菌细胞时则发生功能互补,形成具有完整活性的lacZ酶。
报告基因:是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
标记基因:是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。
选择标记基因用于鉴别目的DNA的存在,将成功转化了载体的宿主挑选出来;筛选标记基因:将携带了外源DNA片段的重组子挑选出来。
cDNA文库:将生物某一组织细胞中的总的mRNA分离出来作为模板,在体外用反转录酶合成互补的双链cDNA,然后连接到合适的载体上,并转入宿主细胞。
这种方法所形成的所有克隆的集合体叫cDNA文库。
侧翼序列:一条核酸单链上位于某一特定位置的5’或3’方向的序列。
Ct值:荧光信号达到阈值所对应的PCR循环数,它具有极好的重复性。
插入失活:当一段足够长的外源DNA片段插入到一个功能基因的编码区后,导致ORF移码或提前终止,严重破坏原基因的编码能力而使该基因失活。
插入型λ载体:通过特定的酶切位点允许外源DNA片段插入的载体。
穿梭载体:能够在两类不同宿主中复制、增殖和选择的载体。
主要是质粒载体,至少有2套复制单元和2套选择标记,相当于两个载体的联合。
DNA聚合酶:是指以脱氧核苷三磷酸作为底物催化合成DNA的一类酶,它的主要活性是在具备模板、引物、dNTPs等情况下催化DNA的合成及其相辅的活性。
DNA连接酶:DNA连接酶能催化双链DNA切口处的5′-磷酸根和3′-羟基生成磷酸二酯键。
这种反应需要供给能量,大肠杆菌和其他细菌的DNA 连接酶以NAD作为能量来源,动物细胞和噬菌体的连接酶则以ATP作为能量来源。
多重PCR:在一个反应体系中使用一对以上引物的PCR称为多重PCR。
变性:在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基之间的氢键断裂,使DNA分子双螺旋结构松散,变成单链。
复性:高温变性的DNA逐渐冷却后,分开的两条单链重新结合成双链DNA退火:热变性的DNA经缓慢的冷却后,复性的过程PCR聚合酶链反应,是模仿体内细胞DNA复制的过程的体外DNA快速扩增方法。
以DNA互补链聚合反应为基础,通过DNA变性,引物与模板一侧的互补序列复性杂交,耐热DNA聚合酶催化引物延伸等过程的多次循环,获得待扩增的特异性DNA片段。
模板:一条单链DNA片段,其3'上具有与引物杂交的序列引物:与待扩增的靶DNA区段两端序列互补的人工合成的寡核苷酸片段,其3'端必须具有游离的-0H基团。
限制核酸内切酶:能专一性的识别双链DNA上的特殊核苷酸序列,并使每一条链的一个磷酸二酯键断开。
DNA连接酶:催化DNA链的相邻3'羟基和5'-磷酸基团发生缩合反应,形成磷酸二酯键,分为ATP依赖型和NAD依赖型。
Klenow片段:是大肠杆菌DNA聚合酶I的羧基端片段,长度为全酶的70 %。
具有5' 3'聚合酶活性及3 ' t 5 '外切酶活性。
限制性图谱:DNA分子上的限制性内切核酸酶的识别序列的分布图同裂酶:即从不同的原核生物中分离出来,具有相同识别序列的限制性核酸内切酶。
切割的位点可以相同,也可以不相同。
同尾酶:来源不同,识别序列也不同,但切割DNA分子所得到的DNA片段具有相同的黏性末端,这样一组限制性核酸内切酶称为同尾酶。
黏性末端:大多数断裂的结果形成的DNA片段,具有互补碱基的单链延伸末端.这种末端叫黏性末端。
酶活性单位:某种限制性核酸内切酶在最适反应条件下,60min内完全切割lug入DNA所需要的酶活性定为1酶活性单位(unit 或U)容积活性:1ul 酶液中具有的酶活性单位,即U/ul缺口:在双链DNA的某一条链上两个相邻核苷酸之间失去一个磷酸二酯键所出现的单链断裂。
名词解释:cdna文库
cdna文库是指通过反转录将转录本(mRNA)转化为相应的DNA序列,并将其进行克隆、放大保存起来的一种DNA库。
cdna文库包含了特定生物体(如人、动物、植物等)在特定条件下的大部分mRNA序列,可以用于研究基因表达、寻找新基因以及研究基因功能。
在构建cdna文库时,首先需从目标生物组织中提取总RNA。
然后,利用酶逆转录将mRNA转录成相应的cDNA,并添加适配器序列。
接下来,通过PCR反应进行扩增,得到了包含全部mRNA序列的cDNA文库。
这些cDNA可以被克隆入载体中,形成cdna文库。
cdna文库的构建对于研究基因表达具有重要意义。
通过cdna文库,研究人员可以分离出感兴趣的基因,并进一步探索其在不同组织、不同发育阶段或不同环境条件下的表达情况。
此外,cdna文库还可以用于筛选新的基因、研究基因功能以及进行基因工程等领域的研究。