10×多聚赖氨酸使用说明
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配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸,如是25mg,就需要250ml三蒸水,用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中,然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中,(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml,过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度,近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满,若20ml的瓶子,只装15ml可,若太满,放于-2度有可能会将瓶子弄碎,因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯,小瓶、移液管都要灭菌处理的,泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器,一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室,包括超净台,紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水,经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子,用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中,大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子,用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管,加入三蒸水,冲洗三次,即将每孔内加入三蒸水,没过底,多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管,要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化,需要放小的玻片到孔内,就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍。
我们这里的老师说,多聚赖氨酸不能用紫外线照射。
1.用赖氨酸包被培养板和培养瓶时,应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万) ;2.感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低,我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20-30ug/ml;3.包被时间一般为6-7h,或者过夜也可;4.使用时应该先用灭菌水洗三次+PBS(起平衡盐作用)洗一次,洗液的量应该大于包被液的量;5.“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间,太长了会有影响吗?”,我包被时间最长的经历有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了,但是对细胞生长并无大碍,这是我曾经有过的经历,所以我会负责地告诉你;6.“多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久?”,最好置于-20度保存,放置数月乃至半年都可以。
gibco多聚-d-赖氨酸用法
Gibco多聚D赖氨酸是一种生物化学试剂,用于生命科学研究中的细胞培养和实验。
具体用法如下:1. 培养基中的添加物:可以将Gibco多聚D赖氨酸添加到细胞培养基中,作为细胞的营养物来源之一。
通常的用量是每升培养基添加10-50 mg的多聚D赖氨酸。
2. 包被培养皿表面:可以在培养皿表面预先涂覆Gibco多聚D赖氨酸,从而提供细胞附着的基质。
在培养皿中加入适量的多聚D赖氨酸水溶液,让其在表面均匀涂敷,并在室温下干燥。
3. 组织工程和支架材料:Gibco多聚D赖氨酸也可以用于组织工程和支架材料的制备。
可以将多聚D赖氨酸加入到生物降解材料中,用于细胞生长和组织修复。
需要注意的是,具体的用法可能因研究目的、细胞类型和实验条件而有所不同。
在使用Gibco 多聚D赖氨酸前,最好参考相关的文献或咨询厂家提供的技术手册,以获取更详细的用法指导。
多聚赖氨酸包被方法物理包被利用多聚赖氨酸的聚电解质特性,通过静电作用将其包裹在目标物表面。
这种包被方法具有简单、无毒、环境友好等优势。
常用的物理包被方法包括静电吸附、沉淀共沉淀和纳米胶团包被。
静电吸附法是一种简单有效的物理包被方法,多聚赖氨酸与目标物质通过静电相互作用结合。
多聚赖氨酸具有正电荷,可以与带负电位的目标物质静电吸附。
例如,将多聚赖氨酸与负电荷的纳米颗粒混合搅拌,多聚赖氨酸通过静电吸附形成包被层,使纳米颗粒表面带正电荷。
沉淀共沉淀法是一种多聚赖氨酸包被的物理方法,基于多聚赖氨酸的凝胶形成能力。
多聚赖氨酸在适当条件下可以与其他蛋白质形成复合凝胶,从而包被目标物质。
该方法主要通过改变多聚赖氨酸的溶液条件来实现,如调节pH值、离子强度和温度等。
纳米胶团包被法是利用多聚赖氨酸形成纳米胶团,从而实现目标物质的包被。
当多聚赖氨酸在适当条件下形成胶团时,目标物质会被包裹在胶团内部。
这种包被方法可以使目标物质在多聚赖氨酸胶团内部得到保护,并增强其稳定性。
化学包被是一种通过化学反应将多聚赖氨酸与目标物质共价结合的方法。
这种包被方法具有较高的稳定性和持久性。
常用的化学包被方法包括胺基化和交联反应。
胺基化是一种将多聚赖氨酸表面的羧基转化为胺基的化学反应。
通过胺基化反应,多聚赖氨酸表面的胺基可以与目标物质表面的羧基或酸酐结合。
这种包被方法可以增加多聚赖氨酸与目标物质的接触面积,从而提高包被效果。
交联反应是一种将多聚赖氨酸与目标物质共价交联的化学反应。
通过交联反应,可以将多聚赖氨酸与目标物质牢固结合,从而实现包被效果。
常用的交联反应包括胺基化交联反应、醛胺交联反应等。
总的来说,多聚赖氨酸包被方法在药物和食品工业中具有广泛的应用前景。
无论是物理包被还是化学包被,都可以通过适当的方法来实现多聚赖氨酸与目标物质的结合。
这种包被方法不仅可以提高目标物质的稳定性和生物活性,还可以改善其溶解性和缓释性,从而提高其应用性能。
多聚赖氨酸包被方法多聚赖氨酸(polylysine)是一种具有多种应用潜力的天然生物高分子材料。
其在医学、食品及其他领域中有着广泛的应用前景。
然而,多聚赖氨酸的应用受到其在水溶液中聚集和沉淀的限制。
为了克服这一问题,研究人员开发了多种多聚赖氨酸包被方法,用以稳定多聚赖氨酸的分散态,提高其应用效果。
一、电化学沉积法电化学沉积法是一种常用的多聚赖氨酸包被方法,在这种方法中,通过在多聚赖氨酸溶液中施加电压,利用电化学反应将多聚赖氨酸沉积到基体表面。
这种方法具有简单、可控性高的优点,可以调控包被层的厚度和组成,从而实现不同应用需求。
二、化学交联法化学交联法是另一种常见的多聚赖氨酸包被方法。
在这种方法中,利用化学反应将多聚赖氨酸交联到基体表面,形成稳定的包被层。
常用的交联剂包括戊二醛、硫酸氯化钠等。
化学交联法可以使多聚赖氨酸形成致密的包被层,提高其稳定性和抗溶解性,适用于一些需要长时间稳定性的应用。
三、共沉淀法共沉淀法是一种将多聚赖氨酸与其他物质一起沉淀到基体表面的方法。
通过调节多聚赖氨酸和其他物质的配比和沉淀条件,可以实现多聚赖氨酸的包被。
这种方法适用于多聚赖氨酸与其他物质共同发挥应用功能的场景,如药物缓释系统、生物传感器等。
四、物理吸附法物理吸附法是一种简单而有效的多聚赖氨酸包被方法。
将多聚赖氨酸溶液滴在基体表面,使其通过物理相互作用(如静电相互作用)与基体表面相互吸附,形成包被层。
这种方法不需要特殊实验条件,成本低廉,适用于一些对包被层要求不高的应用。
综上所述,多聚赖氨酸包被方法的选择应根据实际应用需求和条件来确定。
不同的包被方法具有各自的特点和适用范围,在多聚赖氨酸的应用中起着重要的作用。
未来随着科技的不断进步和对多聚赖氨酸功能的深入研究,相信会有更多创新的包被方法出现,进一步拓宽多聚赖氨酸的应用领域。
根据《食品添加剂使用标准》,聚赖氨酸被归类为一种新型食品防腐剂,可以用于天然加工食品如生鱼片、寿司,方便食品如方便米饭、方便面、速食汤、速食蔬菜,以及蛋糕、色拉和乳酪中。
其最大使用量为5g/kg。
此外,聚赖氨酸还可以与其它食品添加剂混合使用,如氨基乙酸、醋、乙醇、维他命等,从而大大提高其防腐能力。
请注意,虽然聚赖氨酸是一种有效的食品防腐剂,但是在实际生产中,应该根据食品的种类和用途来确定具体的添加量,以保证食品的安全性和合理性。
同时,聚赖氨酸的添加应该遵循科学原则,不能过量添加。
北京索莱宝科技有限公司
10×多聚赖氨酸使用说明书
货号:P2100
规格:10ml
保存:-20℃保存,有效期2年。
产品简介:
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片粘合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。
适用于组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等实验中玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。
使用说明:
1.用灭菌的双蒸水按照9:1的比例稀释该多聚赖氨酸溶液。
如果用于细胞培养包被培养皿时需要过滤除菌。
2.使用之前将稀释后的多聚赖氨酸溶液放置于室温下,使其温度达到室温18-26℃。
3.将玻片浸在稀释过的多聚赖氨酸溶液中5分钟,增加时间不会提高包被效果。
4.包被后的玻片置于60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
5.处理过的玻片可常温存放一年。
注意事项:
1.每100ml已稀释的多聚赖氨酸溶液可处理90张玻片,超过90张玻片会影响其黏合力。
2.包被之前玻片必须保持清洁,必要时用含1%HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3.稀释过的多聚赖氨酸溶液可放在2-8℃,至少3个月内是稳定的。
4.用过的稀释液再次使用时要过滤,若出现浑浊或染菌应丢弃。
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多聚赖氨酸包被步骤
多聚赖氨酸(PLA)是一种生物可降解材料,可用于包被(coating)应用。
下面是多聚赖氨酸包被的步骤:
1. 准备多聚赖氨酸(PLA)材料:将多聚赖氨酸溶解在适当的溶剂中,使其成为可涂覆的液体。
2. 准备基质表面:将需要包被的基质表面进行预处理,如清洁、去除表面污物和优化表面性质。
3. 涂覆多聚赖氨酸:使用适当的涂覆技术(如喷涂、旋涂、刷涂或浸涂等),将多聚赖氨酸溶液均匀涂覆在基质表面上,形成一层薄膜。
4. 干燥和固化:将涂覆的基质表面在适当的条件下进行干燥和固化,使多聚赖氨酸薄膜固化成为稳定的包被层。
5. 优化和表征:对包被层进行优化处理,如调节其厚度、表面形貌和性质等,并对包被层进行相应的表征和测试,以确保其性能和稳定性。
需要注意的是,多聚赖氨酸包被的具体步骤可能因应用需求和使用的材料而略有不同,上述步骤仅为一般参考。
在实际操作中,还需要根据具体情况进行调整和优化,以达到最佳的包被效果。
天然防腐剂ε-聚赖氨酸对不同微生物的抑菌效果与使用方法常见的天然防腐剂有大豆碱性多肽、壳聚糖、纳他霉素、ε-聚赖氨酸等。
ε-聚赖氨酸作为一种新型的天然抑菌剂已经被广泛应用于食品保藏。
ε-聚赖氨酸又称25~30个赖氨酸残基的阳离子均聚物,分子量约为5000 kDa,由链霉菌好氧发酵产生。
ε-聚赖氨酸为淡黄色粉末,是一种食品添加剂,具有水溶性、食用性、对人体无毒、高温稳定、生物降解性好等特点,可以承受一般食品加工中的热处理,被FDA批准为公认的安全(GRAS)剂。
早在2003年,ε-聚赖氨酸就被FDA批准应用于食品保藏,并逐渐在美国、韩国和日本得到广泛的应用。
我国也于2014年将ε-聚赖氨酸纳入食品添加剂使用范畴,具有广泛的应用前景。
1、ε-聚赖氨酸对不同微生物的抑菌机制和浓度比较白森萌[1]通过对各菌种抑菌情况分析,ε-聚赖氨酸的抑菌效果与自身浓度和目标菌种的结构有关。
在对酿酒酵母作用时,500μg/mL的ε-聚赖氨酸可使酵母细胞死亡;而在对大肠杆菌作用时,150μg/mL的ε-聚赖氨酸即可使大肠杆菌内外膜发生破损,细胞完整性被破坏。
在对革兰氏阳性菌如枯草芽孢杆菌和李斯特菌作用时其效果并不明显。
单独的ε-聚赖氨酸对枯草芽孢杆菌作用仅会使细胞轻微受损,只有在ε-聚赖氨酸与乳酸链球菌素联合使用时才能破坏细胞结构。
相关研究推测,ε-聚赖氨酸对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抑菌作用有明显的差距,原因是阴性菌的膜表面主要是脂多糖和磷脂,无大量的肽聚糖,所以其机械强度较小;并且ε-聚赖氨酸作为聚阳离子抑菌肽可以与阴性菌表面的二价钙镁离子竞争阴离子活性位点,从而破坏细胞膜结构,更容易进入到细胞内部。
革兰氏阳性菌膜表面有较厚的肽聚糖层,细胞的机械强度较高,并且没有较多的阴离子结合位点,使得ε-聚赖氨酸对阳性菌的抑菌效果不够明显。
虽然ε-聚赖氨酸对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌效果有明显的区别,但近年来的研究依然致力于寻找可以使ε-聚赖氨酸对阳性菌及阴性菌均产生抑制作用的方法。
10×多聚赖氨酸使用说明
货号:P2100
规格:10ml
保存:-20℃保存,有效期2年。
产品简介:
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片粘合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。
适用于组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等实验中玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。
使用说明:
1.用灭菌的双蒸水按照9:1的比例稀释该多聚赖氨酸溶液。
2.使用之前将稀释后的多聚赖氨酸溶液放置于室温下,使其温度达到室温18-26℃。
3.将玻片浸在稀释过的多聚赖氨酸溶液中5分钟,增加时间不会提高包被效果。
4.包被后的玻片置于60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
5.处理过的玻片可常温存放一年。
注意事项:
1.每100ml已稀释的多聚赖氨酸溶液可处理90张玻片,超过90张玻片会影响其黏合力。
2.包被之前玻片必须保持清洁,必要时用含1%HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3.稀释过的多聚赖氨酸溶液可放在2-8℃,至少3个月内是稳定的。
4.用过的稀释液再次使用时要过滤,若出现浑浊或染菌应丢弃。
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