人组织因子(TF)ELISA测定试剂盒

用Elisa试剂盒检测人血清血浆中VEGF血管内皮生长因子的浓度引言VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor，血管内皮生长因子) 是一种重要的血管生成调节因子，在多种生理和病理状态下发挥着重要的作用。

测定血清血浆中VEGF的浓度可以为许多疾病的诊断和治疗提供有价值的参考依据。

本文将介绍如何使用Elisa试剂盒来定量检测人血清血浆中VEGF的浓度。

实验准备材料1.试剂盒：Elisa试剂盒 (VEGF检测)2.样本：人血清血浆样本3.校准曲线标准品：不同浓度的VEGF标准品仪器和设备1.Elisa酶标仪2.微量移液器和相应的移液枪尖3.微量离心机实验步骤1.将试剂盒中的标准品取出并溶解。

2.准备一系列不同浓度的标准品，包括0 pg/mL，10 pg/mL，20pg/mL，50 pg/mL，100 pg/mL，200 pg/mL和400 pg/mL。

标准品的浓度根据试剂盒的说明书进行稀释。

3.将标准品和待测样本加入已涂有VEGF抗体的微孔板中。

4.混合孔板中的标准品和样本，并在37°C的恒温孵育箱中孵育一段时间。

5.将孵育后的孔板倒置，用洗涤缓冲液洗涤孔板，去除未结合的物质。

6.加入带有酶标记的VEGF抗体，并在37°C的恒温孵育箱中孵育一段时间。

7.再次倒置孔板并洗涤，去除未结合的物质。

8.加入底物溶液，并在室温下孵育一段时间。

9.加入停止液，停止反应。

10.使用Elisa酶标仪测量各孔的吸光度。

11.利用标准曲线，根据各孔的吸光度读数来计算出样本中VEGF的浓度。

数据分析根据测得的吸光度读数，通过标准曲线可以计算出待测样本中VEGF的浓度。

将各样本的浓度数据进行统计分析，计算出平均值和标准差，以及样本之间的相关性。

通过使用Elisa试剂盒，我们可以方便、快速地检测人血清血浆中VEGF的浓度。

这对于疾病的诊断和治疗提供了有价值的参考依据，同时也为相关生物学研究提供了重要的数据支持。

TF、TFPI-1在PICC导管相关性血栓预测中的作用杨佳;王梅林;李楠;许红梅;王雁林;梁良;苏鑫阳【摘要】[目的]探讨血浆组织因子（TF）、组织因子途径抑制物-1（TFPI-1）在PICC导管相关性血栓预测中的作用。

[方法]选取2016年7月—2016年12月在某市三级甲等医院接受PICC置管的女性乳腺癌病人作为研究对象,测定其置管前后不同时间点血浆TF、TFPI-1浓度,并在相应时间行彩色多普勒超声检查,评估血栓发生情况。

[结果]不同时间点的血浆TF、TFPI-1浓度差异有统计学意义（P 〈0.05）。

上肢静脉彩色多普勒超声检查发现：血栓发生主要集中在置管后1个月内。

[结论]TF、TFPI-1浓度可作为预测PICC导管相关性血栓发生的参考指标。

【期刊名称】《循证护理》【年(卷),期】2018(004)006【总页数】4页(P521-524)【关键词】组织因子;组织因子途径抑制物;经外周静脉置入中心静脉导管;血栓;预测能力;彩色多普勒超声【作者】杨佳;王梅林;李楠;许红梅;王雁林;梁良;苏鑫阳【作者单位】[1]滨州医学院,256600;;[2]滨州医学院附属医院,256600;;[1]滨州医学院,256600;;[2]滨州医学院附属医院,256600;;[2]滨州医学院附属医院,256600;;[2]滨州医学院附属医院,256600;;[2]滨州医学院附属医院,256600;【正文语种】中文【中图分类】R472随着化疗给药经外周静脉置入中心静脉导管(peripherally inserted central catheters,PICC)的广泛应用，上肢静脉血栓作为PICC置管后常见并发症受到高度重视。

有研究显示：乳腺癌携带PICC多程化疗病人上肢静脉血栓发生率为3.4～3.9%[1-2]，无明显临床症状的PICC相关性血栓发生率为45.6%[3]。

寻求早期微血栓的诊断及预防方法是减少PICC导管相关性血栓发生的重要举措。

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。

储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。

开封后，保存温度详见说明书。

产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。

人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。

由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。

VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。

VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。

VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。

骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。

血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。

VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。

联科生物技术有限公司 全国免费电话：800 8571 184第四章细胞因子ELISA 试剂盒简介：美国Peprotech公司作为知名的重组细胞因子生产商，开发出了50余种细胞因子的ELISA检测试剂盒，试剂盒的检测灵敏度高，检测范围宽，为您的科研提供了又一有力的工具。

试剂盒组分及重悬方法：包被抗体--100ug 经抗原亲和纯化的包被抗体，冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃，保存两个月；-20℃分装冻存可贮存6个月检测抗体--100ug 经抗原亲和纯化的生物素标记的检测抗体，冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃，保存两个月；-20℃分装冻存可贮存6个月标准品--准确计量的重组细胞因子冻干粉，具体含量见说明书重悬--按说明书1ml无菌蒸馏水重悬成适当浓度的贮存液保存--4-8℃，保存1周；-20℃分装冻存可贮存2个月亲合素偶联的过氧化物酶--60ul/瓶，液体分装--分装到10只小瓶中，每瓶6ul保存---20℃分装冻存可贮存2年实验所需的材料：ELISA酶标板：推荐Nunc maxisorp，产品编号：442404Tween-20：推荐Sigma，产品编号：P-7949BSA(牛血清白蛋白)：推荐Sigma，产品编号：A-7030ABTS底物溶液：推荐Sigma，产品编号：A-3219Dulbecco's PBS(10X)：推荐Gibco BRL，产品编号：14200-075相关溶液配制：PBS：用无菌蒸馏水将10X PBS稀释为1X PBS洗涤液：含0.05% Tween-20的PBS封闭液：含1% BSA的PBS，过滤除菌，4℃保存1周稀释液：含0.05% Tween-20和0.1% BSA的PBS，过滤除菌，4℃保存1周注：以上所有试剂在使用前必须复温至室温。

包板：1) 用PBS将包被抗体稀释成1ug/ml，立即加到酶标板中，每孔100ul；2) 密封酶标板，室温孵育过夜；3) 吸除孔中的液体，并用300ul洗涤液洗孔4次；4) 最后一次洗涤后，将酶标板倒置除去残留的液体，并倒扣在吸水纸吸干孔沿上的液体；5) 每孔加300ul封闭液，室温孵育至少1小时；6) 吸除孔中的液体，并洗孔4次。

人组织因子(TF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中组织因子(TF)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组织因子(TF)水平。

用纯化的人组织因子(TF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入组织因子(TF)，再与HRP标记的组织因子(TF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的组织因子(TF)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人组织因子(TF)的浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。

客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 7 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 8 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。

人组织因子（TF）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：78pg/ml-5000pg/ml最低检测限：19.5pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人TF，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中TF含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述TF是一个分子量为47kD，由263个氨基酸残基组成的单链跨膜糖蛋白，其基因定位于染色体1p21～1p22，由6个外显子和5个内含子组成。

TF按细胞表面抗原命名为CD142，属Ⅱ类细胞因子超家族成员，具有信号转导功能。

TF由胞外区、跨膜区和胞浆区三个结构域构成：（1）胞外区由219个氨基酸残基所组成，包括2个二硫键及4个结合FⅦ/FⅦa的关键氨基酸残基，后者是启动外源性凝血级联反应的关键部位。

（2）跨膜区是一个由23个氨基酸残基组成的疏水结构，与磷脂紧密结合，功能尚未明确。

（3）胞内区由21个氨基酸残基组成，其中存在3个与TF功能活性关系密切的丝氨酸残基，能被活化的蛋白激酶C （PKC）磷酸化而激活。

TF又称因子Ⅲ，是丝氨酸蛋白酶凝血因子FⅦ/FⅦa的膜受体，与FⅦ结合促使其转化为FⅦa，并形成TF/Ⅶa复合体。

TF/FⅦa复合体进一步将无活性的FⅩ水解为有活性的FⅩa，FⅩa与FⅤa相结合并在活化血小板磷脂膜表面将凝血酶原酶解为凝血酶而启动外源性凝血过程。

表达TF的单核细胞微粒通过其P选择素糖蛋白配体（PSGL-1）与血小板P选择素（P-selectin）相互作用而与活化血小板结合，在血栓形成过程中起重要作用。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）血管性血友病因子（vWF）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被血管性血友病因子（vWF）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的血管性血友病因子（vWF）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、25、50、100、200、400U/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）γ-分泌酶（γ-Secretase）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被γ-分泌酶（γ-Secretase）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的γ-分泌酶（γ-Secretase）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80U/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

Humanβ-NGF ELISA Kit检测试剂盒（酶联免疫吸附法）Catalog NumberEK1141-48EK1141-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人β神经生长因子(β-NGF)浓度。

本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。

一、产品介绍1.背景介绍神经生长因子(NGF)是一种神经肽，主要参与调节某些靶神经元的生长、增殖和存活。

当表达时，NGF最初是以7S、分子量为130kDa的复合物存在，这个复合物由α-NGF、β-NGF和γ-NGF(2:1:2比例)三个蛋白组成。

“神经生长因子”通常指的是2.5S、分子量为26kDa的β亚基蛋白。

β亚基是7S NGF复合物中唯一一个有生物活性的成分(如作为信号分子)。

NGF在先天性和获得性免疫中都起着重要作用。

研究表明NGF通过血浆在机体中循环，对整体的稳态维持很重要。

NGF可促进髓鞘的修复，亦可参与多种精神疾病，如老年痴呆症、抑郁症、精神分裂症、自闭症、雷特综合征、神经性厌食症，神经性贪食症。

NGF信号失调与阿尔茨海默病有关。

同样，NGF在许多心血管疾病中发挥作用，如冠状动脉粥样硬化、肥胖、2型糖尿病、代谢综合征。

NGF也可促进伤口愈合。

2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。

特异性抗人β-NGF抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的β-NGF与固相抗体和检测抗体结合。

洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。

洗涤后，加入显色底物TMB，避光显色。

颜色反应的深浅与样本中β-NGF的浓度成正比。

加入终止液终止反应，在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。

人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书供应商：上海乔羽生物有限公司人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书Elisa Kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人表皮生长因子(EGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF) 水平。

用纯化的人表皮生长因子(EGF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF) ，再与HRP标记的表皮生长因子(EGF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)ELISA试剂盒说明书试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。

人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。

肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)ELISA试剂盒说明书自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。

人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa检测试剂盒使用说明书人转化生长因子β1(TGFβ1)elisa检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被转化生长因子β1（TGFβ1）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1（TGFβ1）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称 96孔配置 48孔配置备注微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条无标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管无样本稀释液 6mL 3mL 无检测抗体HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液 6mL 3mL 无封板膜 2张 2张无说明书 1份 1份无自封袋 1个 1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、3、6、12、24、48 ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

细胞因子检测中常用的试剂盒及其原理细胞因子检测是研究生物体内细胞间相互作用以及免疫和炎症反应的重要工具。

试剂盒是细胞因子检测中常用的实验工具，通过检测细胞因子的表达水平，可以了解细胞因子在机体免疫调节、疾病发展以及治疗效果等方面的作用。

本文将介绍几种常用的细胞因子检测试剂盒及其原理。

1. ELISA试剂盒ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的细胞因子检测方法，其原理是利用酶标记的抗体与待测细胞因子结合，通过底物反应等方法来测定细胞因子的浓度。

ELISA试剂盒一般包括固相酶标板、抗体、酶标记抗体、底物等多个组分。

首先，在固相酶标板上固定特异性的抗体，然后加入待测样品和酶标记抗体，待测样品中的细胞因子与抗体结合形成免疫复合体。

随后，通过底物反应产生荧光或色素等信号，测定底物反应的光强度或吸光度，从而确定细胞因子的浓度。

2. PCR试剂盒PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种用于扩增DNA片段的技术，也常用于细胞因子的检测。

PCR试剂盒包括DNA聚合酶、引物、模板DNA等多个组分。

PCR试剂盒的原理是在适当的温度条件下，利用DNA聚合酶酶活性，引物定向结合至待扩增的DNA片段，然后进行反复的变温扩增，分别进行DNA的变性、引物的结合和DNA片段的合成等步骤，最终扩增得到相应数量的特定DNA片段。

通过测定PCR产物的数量，可以推断细胞因子的表达水平。

3. 流式细胞术试剂盒流式细胞术是一种广泛应用于细胞因子检测的方法，也称为流式细胞仪。

流式细胞术试剂盒包括荧光染色剂、抗体等。

流式细胞术试剂盒的原理是将待测样品进行细胞标记，通常使用荧光染色剂标记细胞表面的某些蛋白，或者使用特异性的抗体标记细胞表面的特定细胞因子。

然后，通过流式细胞仪检测细胞标记的荧光强度或颜色，以及细胞数量，通过对流式细胞仪所得数据的分析，可得出细胞因子的表达水平。

人生长因子（HGH）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中生长因子（HGH）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人生长因子（HGH）水平。

用纯化的人生长因子（HGH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入生长因子（HGH），再与HRP 标记的生长因子（HGH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品的生长因子（HGH）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人生长因子（HGH）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片（48） 2 片（96）密封袋 1 个 1 个酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存标准品：45ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。