人和肽素(copeptin)ELISA试剂盒使用说明书
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人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理: PC-III试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知PC-III浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将PC-III和生物素标记的抗体同时温育。
人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒说明书洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中PC-III 的浓度呈比例关系。
自备材料蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒说明书操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,人III型前胶原ELISA 检测试剂盒吸取终止液和底物A、B 液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒说明书e lisa试剂盒样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
人饥饿素 (ghrelin)ELISA试剂盒使用说明书我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人饥饿素 (ghrelin)含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人饥饿素 (ghrelin)水平。
用纯化的人饥饿素(ghrelin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入饥饿素(ghrelin),再与HRP标记的饥饿素 (ghrelin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的饥饿素 (ghrelin)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人饥饿素 (ghrelin)浓度。
样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人白细胞介素8(IL-8)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人白细胞介素8(IL-8)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素8(IL-8)的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被人白细胞介素8(IL-8)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人白细胞介素8(IL-8)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人白细胞介素8(IL-8)含量。
【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:120、60、30、15、7.5、3.75pg/mL.【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
人B型脑钠肽(BNP)ELISA试剂盒使用说明本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T2μg/L -80μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中B型脑钠肽(BNP)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人B型脑钠肽(BNP)水平。
用纯化的人B型脑钠肽(BNP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入B型脑钠肽(BNP),再与HRP标记的B型脑钠肽(BNP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的B型脑钠肽(BNP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人B型脑钠肽(BNP)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。
IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。
正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。
IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。
EK165-01Catalog Number EK165-48EK165–96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)浓度。
本产品仅用于科学研究,非诊断试剂,不能用于临床诊断。
一、产品介绍1.背景介绍胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)主要由非造血细胞如成纤维细胞、上皮细胞和不同类型的基质或基质样细胞产生。
它主要影响骨髓细胞、诱导单核细胞释放T 细胞虏获趋化因子和增强髓样(CD11c +)树突状细胞成熟。
研究表明,TSLP 还可激活位于表皮的特定树突状细胞亚群—朗格汉斯细胞的成熟。
胸腺TSLP 激活髓样和浆细胞样(CD123+)树突状细胞会导致调节性T 细胞的产生。
TSLP 通过胸腺基质淋巴细胞受体CRLF2和IL-7Rα链组成的异源二聚体受体复合物产生信号。
结合STAT5后就会诱导其发生磷酸化,进而导致上游转录因子的表达。
TSLP 的表达与许多疾病包括哮喘、炎症性关节炎、特应性皮炎、湿疹及其它过敏状态有关。
2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。
特异性抗人TSLP 抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
酶标板孔中加入标准品和待测样本,经过孵育,样本中存在的TSLP 与固相抗体结合。
洗涤去除未结合的物质后,加入生物素化的检测抗体孵育。
洗涤去除未结合的生物素化的抗体,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。
洗涤后,加入显色底物TMB ,避光显色。
颜色反应的深浅与样本中TSLP 的浓度成正比。
加入终止液终止反应,在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变,都将影响结合反应。
4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素,并非所有可能的影响因素都已经去除。
人降钙素原elisa试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T40ng/L -1200ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。
用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入降钙素原(PCT),再与HRP标记的降钙素原(PCT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的降钙素原(PCT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人降钙素原(PCT)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
Human Perforin ELISA试剂盒说明书Catalog#:DKW12-1830产品描述:Array人Perforin ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的Perforin。
本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物技术有限公司联系,E-mail:RD@.检测范围:灵敏度:40pg/ml重复性:板内、板间变异系数均<10%。
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线来计算标本含量。
试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状,按瓶上说明稀释Standard diluent buffer 1瓶即用型Biotinylated antibody 2/1瓶* 1∶25用Biotinylated antibody diluent稀释Biotinylated antibody diluent 1瓶即用型Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1:100用HRP diluent稀释HRP diluent 1瓶即用型Washing buffer (50×)1瓶1∶50 用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6* 即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*: 96 /48 Tests自备物品:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P10003.蒸馏水或去离子水,全新滤纸4.旋涡振荡器和磁力搅拌器注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30min。
冻干标准品即用即稀释,使用过后应丢弃。
2.HRP和检测抗体使用前请手甩几下或离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
人降钙素原elisa试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T40ng/L -1200ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。
用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入降钙素原(PCT),再与HRP标记的降钙素原(PCT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的降钙素原(PCT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人降钙素原(PCT)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H3640c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人促红细胞生成素(EPO)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human EPO(Erythropoietin) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话技术部电话************电子邮箱(销售)********************电子邮箱(技术)**************************网址:具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中EPO浓度。
人降钙素基因相关肽(CGRP)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T2 ng/L -60 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本降钙素基因相关肽(CGRP)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素基因相关肽(CGRP)水平。
用纯化的人降钙素基因相关肽(CGRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入降钙素基因相关肽(CGRP),再与HRP标记的降钙素基因相关肽(CGRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的降钙素基因相关肽(CGRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人降钙素基因相关肽(CGRP)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人降钙素原elisa试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T40ng/L -1200ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。
用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入降钙素原(PCT),再与HRP标记的降钙素原(PCT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的降钙素原(PCT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人降钙素原(PCT)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人降钙素原(PCT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:0.312ng/ml-20ng/ml最低检测限:0.078ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人PCT,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中PCT含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
概述降钙素原(procalcitonin,PCT)是上世纪九十年代才发现的细菌、真菌性感染的特异性标志物。
PCT是降钙素(calcitonin,CT)的前体物,由116个氨基酸组成的糖蛋白,分子量约为13kD,包括59个氨基酸的N端、32肽的活性CT和21肽的下钙素。
血清PCT的半衰期为25-30小时,在体内外较稳定,不受体内激素水平的影响,在健康小鼠血清中的含量极低,常低于0.1ng/ml。
PCT的表达主要受细菌内毒素、炎性细胞因子,如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-8等调节。
因此,当有细菌、真菌重症感染时,血清中的PCT浓度在2-6小时内迅速升高,一般高于1.0ng/ml,而且持续时间长。
而病毒性感染和免疫等其他非细菌性感染,患者血清中PCT水平不升高或仅有轻度升高。
因此,PCT是鉴别细菌、真菌性感染与病毒感染的良好指标。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗PCT抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗PCT抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的PCT呈正相关。
人内皮素-1(ET-1)ELISA试剂盒操作方法检测范围:96T8pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中内皮素-1(ET-1)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人内皮素-1(ET-1)水平。
用纯化的人内皮素-1(ET-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素-1(ET-1),再与HRP标记的内皮素-1(ET-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的内皮素-1(ET-1)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人内皮素-1(ET-1)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人葡萄糖依赖性胰岛素样肽ELIS分析检测试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:GIP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知GIP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将GIP和生物素标记的抗体同时温育。
人葡萄糖依赖性胰岛素样肽ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中GIP的浓度呈比例关系。
自备材料蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
试剂盒组成:安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
人葡萄糖依赖性胰岛素样肽ELISA检测试剂盒使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
人降钙素原elisa试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T40ng/L -1200ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。
用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入降钙素原(PCT),再与HRP标记的降钙素原(PCT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的降钙素原(PCT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人降钙素原(PCT)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人和肽素(copeptin)ELISA试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人和肽素(copeptin)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人和肽素(copeptin)水平。
用纯化的人和肽素(copeptin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入和肽素(copeptin),再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的和肽素(copeptin)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人和肽素(copeptin)含量。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/
分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备
用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上
进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为6 pmol/L,4 pmol/L ,2 pmol/L,1 pmol/L,0.5 pmol/L)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
0.2pmol/L -8pmol/L
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。