人钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA试剂盒说明书
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钙卫蛋白测定试剂盒(胶体金免疫层析法)
适用范围:与南京美xx诚生物科技有限公司生产的胶体金免疫层析分析仪配套使用,用于体外定量测定人粪便中钙卫蛋白的含量。
1.1规格:20人份/盒;100人份/盒。
1.2主要组成成分:
2.1外观
2.1.1试剂盒外包装完整无破损,试剂盒内容物齐全,各类标签、标识清晰无误。
检测卡外观干净无污渍,试纸条放置平整无偏移。
2.1.2 试纸条宽度为4mm±0.2mm;
2.1.3 液体移行速度应不低于10mm/min。
2.2 空白限
空白限≤10 μg/g。
2.3线性
2.3.1 在[30,600]μg/g的线性范围内,线性相关系数r≥0.9900;
2.3.2在[30,200]μg/g范围内绝对偏差为±25μg/g,在(200,600]μg/g范围内相对偏差为±15%。
2.4 准确度
回收率为85%~115%。
2.5 精密度
2.5.1批内差:同一批号产品重复测试高低浓度的样本,所得结果的变异系数CV≤10%。
2.5.2批间差:3个不同批号产品分别测试样本,所得结果的批间相对极差R≤10%。
2.6 稳定性
本产品有效期为12个月,取至效期后三个月内的产品,分别检测2.2~2.4、2.5.1项,其结果应符合各项要求。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被钙卫蛋白(Calprotectin)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙卫蛋白(Calprotectin)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、50、100、200、400、800ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
Millipore- 1.00858页码 1 的 9The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the US化学品安全技术说明书按照GB/T 16483、GB/T 17519编制版本6.2修订日期18.09.2022打印日期18.09.2022最初编制日期19.07.2017SDS 编号Millipore - 1.00858产品编号Millipore - 1.00858钙测试预装试剂盒第1部分:化学品及企业标识1.1 产品标识产品名称: 钙测试预装试剂盒Calcium Cell Test Method: photometric 10 -250 mg/l Ca14 - 350 mg/l CaO25 - 624 mg/l CaCO₃ Spectroquant®产品编号: 1.00858产品编号: 100858品牌: Millipore1.2 安全技术说明书提供者的详情制造商或供应商名称: Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.Ltd.509 Renqing RoadZhangjiang High Tech East Park, PudongSHANGHAI201201 SHANGHAICHINA西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司上海市浦东新区仁庆路509号10幢邮政编码:201201默克股份两合公司64271 达姆施塔特德国Millipore - 1.00858 页码 2 的 9The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the USPhone:+49(0)6151 72-2440电话号码 : +86 21 6141-5566 传真: +86 21 6141-55671.3 应急咨询电话紧急联系电话: +86 532 838890901.4 物质或混合物的推荐用途和限制用途已确认的各用途 : 分析用试剂这是此产品概括的物质安全资料表(SDS),如需第16项中所列的每一成分完整的物质安全资料表(SDS),请浏览我们的网站.第2部分:危险性概述2.1 GHS 危险性类别易燃液体 (类别 3), H226 金属腐蚀物 (类别 1), H290严重眼睛损伤/眼睛刺激性 (类别 2A ), H319 生殖毒性 (类别 1B ), H360本部分提及的健康说明(H-)全文请见第16部分。
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中转化生长因子(CRP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的转化生长因子(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子(CRP),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转化生长因子(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C反应蛋白(CRP)浓度。
试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:100ng/ml 1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗OT抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP 1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)试剂盒组成:3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人C反应蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤:1. 使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul 于反应孔、加入待测样品50 ul 于反应孔内。
人结蛋白ELISA试剂盒说明书人结蛋白ELISA试剂盒说明书供应商:上海乔羽生物有限公司ELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2) 规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔人结蛋白ELISA试剂盒说明书Kit composition:Sealing film: 2 (48) / 2 (96)Specifications: 1 copiesSealing bag: 1Standard: 2700ng / L 0.5 * 0.5ml * 1 bottles, 1 bottles are stored in 2-8ELISA package is board: 1 X 48 x 961 2-8 stored inSample dilution: 3ml * 1 ml * 1 bottles of 6 bottles are stored in 2-8Color agent: Liquid 3ml * 1 ml * 6 bottles of 1 bottles in 2-8Color reagent B Liquid 3ml * 1 ml * 1 bottle 6 bottles stored in 2-8 Termination solution: 3ml * 6ml * 1 bottles and 1 bottles are stored in 2-8Concentrated laundry liquid: (2 * 20) * 1 bottles (20ml * 30) * 1 bottles stored in 2-8elisa试剂盒价格,elisa试剂盒说明书,elisa检测试剂盒人结蛋白ELISA试剂盒说明书试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。
实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试剂盒(胶体金法)
性能指标
1物理性状
1.1外观
钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试纸应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染;材料附着牢固。
1.2宽度
钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试纸的宽度应不小于 2.5mm。
1.3移行速度
利用25mm宽度硝酸纤维素膜,加样后液体迁移到质控区出现对照线的时间不超过3min。
2检测限
用钙卫蛋白+乳铁蛋白质控品进行检测,钙卫蛋白应不高于500ng/ml,乳铁蛋白不高于100ng/ml。
3特异性
分别用浓度为1mg/ml猪血红蛋白,1mg/ml牛血红蛋白,500μg/ml人血红蛋白,1mg/ml猪转铁蛋白,1mg/ml牛转铁蛋白,100μg/ml人转铁蛋白及1mg/ml 牛乳铁蛋白进行检测,每份质控品重复检测3次,结果应全部为阴性。
4重复性
取同一批号的钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试纸10支,以浓度为CP1000ng/ml+ LF500ng/ml的钙卫蛋白+乳铁蛋白进行测定,反应结果应一致,显色度均一。
5批间差
取三个批号的钙卫蛋白+乳铁蛋白检测试纸,对重复性进行检测,三个批号检测试纸的结果应符合2.4的要求。
人蛋白C抑制剂 (PCI)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:E-EL-H1201(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。
适用于体外定量检测人血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组PCI浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗人PCI抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的PCI会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗人PCI抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗人PCI抗体与结合在包被抗体上的人PCI结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。
用酶标仪在450nm波长处测OD值,PCI浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中PCI的浓度。
标本收集:1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。
避免使用溶血,高血脂标本。
3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线:400-168-3301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询:*****************碧云天网站微信公众号网址:Human Angiogenin ELISA Kit产品编号产品名称包装PA023 Human Angiogenin ELISA Kit 96次产品简介:碧云天的Human Angiogenin ELISA Kit (Human Angiogenin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人血管生成素酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Angiogenin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为4.75pg/ml,与EGF、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1β、TGF-α、TGF-β1,小鼠 EGF、GM-CSF、MIP-1α等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
人血管生成素(Angiogenin, ANG)是一种分子量为14kDa的单链非糖基化蛋白,属于核糖核酸酶中RISBASE家族。
该家族成员不仅具有核糖核酸酶活性,还具有一些特殊的生物学功能。
ANG氨基酸长度为123,包括3个链内二硫键。
人ANG与小鼠ANG具有75%的氨基酸同源性,且具有一定的种间交叉反应。
能够表达ANG的细胞主要有血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、结肠柱状上皮细胞、淋巴细胞和部分肿瘤细胞。
ANG主要参与血管的形成过程。
基底膜的降解是血管新生过程中内皮细胞发生迁移的先决条件。
ANG首先与肌动蛋白结合,随后肌动蛋白-ANG复合物发生裂解,激活组织血纤维蛋白溶酶原。
这一过程产生的血纤维蛋白溶酶会降解基底膜中的层粘连蛋白和纤连蛋白。
LMK504Mu 96T钙卫蛋白(CALPRO)检测试剂盒(磁性微球Luminex单因子夹心法)适用生物:小鼠使用说明书仅供体外研究使用,不用于临床诊断!第一版[ 预期应用 ]本试剂盒运用双抗体夹心法定量测定小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中CALPRO含量。
[ 试剂盒内容 ][ 需自备的设备及试剂 ]1、Luminex MAGPIX®,Luminex 100™,Luminex200™,或Bio-Rad®,Bio-Plex®分析仪(建议仪器使用前提前预热,并做好自检和校准)2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管.4、蒸馏水或去离子水5、磁力架6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L(或1×)磷酸缓冲盐 (PBS),pH=7.0-7.28、旋涡振荡器9、酶标板振荡器[ 试剂盒的储存及有效期 ]1、 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A 、检测溶液B以及96孔板保存于-20°C,其余试剂请置于4°C保存备用。
2、 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存。
注意:试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
[ 标本的采集与保存 ]血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上清即可,将上清置于-20°C或-80°C保存,避免反复冻融。
血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C 1,000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,避免反复冻融。
人钙调素(CAM)ELISA试剂盒使用说明书产品编号:E0640h操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。
每次检测都应该做标准曲线。
如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。
4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
在加终止液后15分钟以内进行检测。
注:1.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。
测量时先用此孔调OD值至零。
2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
3. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用。
钙卫蛋白检测方法
钙卫蛋白(calprotectin)是一种炎症标志物,在肠道炎症性疾病(如炎症性肠病)的早期诊断和治疗过程中起到重要作用。
钙卫蛋白的检测方法有以下几种:1. 粪便样本检测:采集患者的粪便样本,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)等方法,检测钙卫蛋白的浓度。
这种检测方法简便易行,且对患者无创伤,适用于大多数人群。
2. 肠黏膜活检:对于疑似肠道炎症性疾病的患者,在结肠镜检查或小肠镜检查时,可以进行肠黏膜活检,并通过免疫组织化学染色或免疫荧光染色等方法,检测钙卫蛋白的表达情况。
3. 血清样本检测:采集患者的血清样本,使用ELISA等方法,检测钙卫蛋白的浓度。
这种检测方法可以评估全身炎症反应的程度,但相比于粪便样本检测,对肠道病变的敏感性较低。
需要注意的是,不同实验室可能会有不同的钙卫蛋白检测方法和正常参考范围。
因此,在临床应用中,应根据具体实验室的检测结果及正常范围进行判断和解读。
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书引言:本文是针对人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒的使用说明书,旨在帮助用户正确、便捷地操作该试剂盒,获取准确的检测结果。
请用户在使用前仔细阅读本说明书,并按照所列步骤进行操作。
1. 产品介绍1.1 人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒是一种用于定量分析人体内C反应蛋白的试剂盒。
1.2 试剂盒内含有酶标板、标准品、检测样本预处理液、酶标抗体、酶标底物、洗涤缓冲液等。
2. 前期准备2.1 检测前,确保试剂盒在正确的保存条件下,并检查是否有损坏。
2.2 准备洗涤缓冲液,并按照说明稀释至所需浓度。
2.3 准备一次性使用的微量移液器和吸头。
2.4 样本处理前,确保样本已经充分解冻,并且清晰无杂质。
2.5 标准品的准备:按照说明书中的浓度进行稀释,得到一系列不同浓度的标准品。
3. 检测步骤3.1 样本预处理:取相应数量的样本和标准品,加入与试剂盒提供的检测样本预处理液等体积比例的去蛋白液,混合均匀,放置于室温下孵育一段时间。
3.2 洗涤:将试剂盒提供的洗涤缓冲液加入洗涤槽中,使用洗涤缓冲液洗涤酶标板中的洗涤孔,每孔洗涤3-4次,倾倒废液。
3.3 添加试剂:按照试剂盒中所标示的各组分体积,将样本、标准品和酶标抗体等逐步加入对应的酶标孔中。
3.4 孵育:酶标板封闭后,放置于恒温孵育箱中,按照说明书中所示的温度和时间进行孵育。
3.5 清洗:孵育结束后,将酶标板取出倒置,用洗涤缓冲液洗涤酶标孔,每孔洗涤3-4次,倾倒废液。
3.6 加底物:将试剂盒提供的酶标底物加入酶标孔中,按照说明书中所示的温度和时间进行反应,避免阳光直射。
3.7 反应终止:加入酶标终止液终止反应,避免经久暴露。
3.8 检测:使用酶标仪读取各孔的吸光度,记录相应数值。
4. 数据分析4.1 根据吸光度值,绘制标准曲线,使用标准曲线确定样本中的C 反应蛋白浓度。
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010170312.2(22)申请日 2020.03.12(71)申请人 迪瑞医疗科技股份有限公司地址 130103 吉林省长春市高新区宜居路3333号(72)发明人 高智玲 翟涛 李冬梅 韩美玉 张旭东 高威 孙成艳 何浩会 (74)专利代理机构 长春众邦菁华知识产权代理有限公司 22214代理人 于晓庆(51)Int.Cl.G01N 33/68(2006.01)G01N 33/533(2006.01)(54)发明名称钙卫蛋白化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法(57)摘要钙卫蛋白化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法,属于体外检测领域,解决了现有试剂盒存在的灵敏度低、成本高、准确性差、操作时间长、自动化程度低、不能定量的问题。
本发明包括链霉亲和素磁颗粒、化学发光标记物标记的钙卫蛋白抗体、偶联标记物标记的钙卫蛋白抗体、化学发光底物液和钙卫蛋白校准品。
磁珠浓度为0.02~1%,粒径为1.0~3.0μm。
钙卫蛋白抗体与化学发光标记物的摩尔比为1:3~20。
钙卫蛋白抗体与偶联标记物的摩尔比为1:5~20。
化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。
偶联标记物为生物素。
本发明灵敏度高、准确度高、特异性强、自动化测量程度高、成本低、误差小、测量时间短、适用范围广。
权利要求书1页 说明书7页 附图1页CN 111381046 A 2020.07.07C N 111381046A1.钙卫蛋白化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括:链霉亲和素磁颗粒、化学发光标记物标记的钙卫蛋白抗体、偶联标记物标记的钙卫蛋白抗体、化学发光底物液和钙卫蛋白校准品。
2.根据权利要求1所述的钙卫蛋白化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述链霉亲和素磁颗粒中,磁珠浓度为0.02~1%,磁珠粒径为1.0~3.0μm。
人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T6.0pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨质疏松含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨质疏松水平。
用纯化的人骨质疏松抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨质疏松,再与HRP标记的骨质疏松抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的骨质疏松呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人骨质疏松浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T6.0pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨质疏松含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨质疏松水平。
用纯化的人骨质疏松抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨质疏松,再与HRP标记的骨质疏松抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的骨质疏松呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人骨质疏松浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒使用说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml X 1瓶酶标试剂:3 ml X 1 瓶(48) /6 ml X 1 瓶(96)【人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算以标准物的浓度为横坐标,0D值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的0D值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48) /2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml X 1 瓶0.5ml X 1 瓶2-8C保存酶标包被:1X 481X 962-8 C保存样品稀释液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂A液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂B液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存终止液:3ml X 1 瓶6ml X 1 瓶2-8 C保存浓缩洗涤液:(20ml X 20倍)X 1瓶 (20ml X 30倍)X 1瓶2-8C保存实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)水平。
用纯化的人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1),再与HRP标记的人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1) 浓度。
人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T6.0pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨质疏松含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨质疏松水平。
用纯化的人骨质疏松抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨质疏松,再与HRP标记的骨质疏松抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的骨质疏松呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人骨质疏松浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被钙卫蛋白(Calprotectin)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙卫蛋白(Calprotectin)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、50、100、200、400、800ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
上海笃玛生物科技有限公司上海笃玛生物科技有限公司试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:最低检测浓度小于5.0ng/mL 。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Human Calprotectinherin ELISA Kit instruction Intended useThis Calprotectin ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of Calprotectin in the sample,this Calprotectin ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus Calprotectin concentration.The concentration of Calprotectin in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum-Use a serum separator tube and allow samples to clot for30minutes before centrifugation for10minutes at approximately3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles Plasma-Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge samples for30minutes at3000×g at2-8℃within30minutes of collection.Store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.上海笃玛生物科技有限公司Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature (20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A 6.0ml 3.0mlChromogen Solution B 6.0ml 3.0mlStop Solution 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note:Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,50,100,200,400,800 ng/mLReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.上海笃玛生物科技有限公司The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on theY-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time ortemperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is5.0ng/mL6.StandardcurveStorage:2-8℃.validity:six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC ORDIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGHENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!上海笃玛生物科技有限公司。