全自动生化仪测定人血清cTnI方法的建立及临床应用
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医用生化仪检测原理及应用医用生化仪是用于检测人体内生化指标的一种仪器设备。
它通过分析人体内液体(如血液、尿液等)中的生化物质含量,来评估机体内的代谢情况和健康状况。
医用生化仪的检测原理主要涉及到样本的预处理、试剂的反应、光学测量和计算等步骤。
首先,医用生化仪需要对样本进行预处理。
这包括采集样本、离心、处理等步骤。
样本采集一般是通过抽取静脉血、动脉血或者采集尿液等,确保样本的新鲜性和纯度。
离心是为了去除样本中的固体颗粒物、脂肪和蛋白质等杂质。
处理则是为了使样本与试剂反应的时候能更加准确和稳定。
其次,医用生化仪需要使用相应的试剂来与样本中的生化物质反应。
试剂可以根据检测项目的不同而有所差异,一般包括底物和酶。
底物是反应物的一种,通过与酶催化产生某种颜色改变或化学反应来定量反应物的含量。
酶则是一种特定的催化剂,可以加速底物的反应过程。
试剂与样本反应后,就会产生某种信号,用以进行后续的测量。
然后,医用生化仪通过光学测量来获取样本和试剂反应后产生的信号。
一般来说,医用生化仪会使用特定波长的光源照射样本,然后通过检测样本与光的相互作用来判断样本中特定物质的含量。
这种光学测量可以通过吸光度、荧光光谱、发光等方式进行。
最后,医用生化仪会使用内置的计算和数据处理程序来将测量结果转化为可读的数值或图形。
这些数值或图形可以直接显示在屏幕上,供医生或操作人员查看和分析。
同时,医用生化仪还可以将结果存储在内部记忆中,以便随时查看和比较。
医用生化仪的应用非常广泛。
它可以检测人体内的许多生化指标,如血红蛋白浓度、血糖、尿酸、肌酐、尿素氮等。
这些指标可以用于评估人体的健康状况,判断是否存在某些疾病或病理变化。
比如,血红蛋白浓度可以用于诊断贫血,血糖可以用于诊断糖尿病,肌酐和尿素氮可以用于评估肾功能等。
此外,医用生化仪还常用于药物治疗过程中的监测。
例如,在抗癌治疗中,医生可以通过监测化疗药物的浓度来调整用药剂量,提高治疗效果。
此外,医用生化仪还可以用于监测患者的营养状况、肝功能、心脏功能、炎症反应等。
两种方法测定cTnI的比较发表时间:2013-05-22T16:55:33.437Z 来源:《中外健康文摘》2013年第15期供稿作者:罗伟波[导读] 心肌肌钙蛋白I(cTnI)作为心肌损伤性疾病诊断的一项新指标,具有高度的敏感性和特异性。
罗伟波(柳州医学高等专科学校第一附属医院检验科广西柳州 545000)【摘要】目的比较胶乳增强免疫比浊法与化学发光法测定肌钙蛋白I(cTnI)的结果,评价两种方法的分析性能的差异及相关性,并讨论其临床应用价值。
结果我们的研究结果表明,胶乳增强免疫比浊法和化学发光法具有良好的相关性(r= 0.958),卡方检验P>0.05,两种方法结果无显著差异。
结论胶乳增强免疫比浊法测定肌钙蛋白I(TnI)是一种适用于临床实验室开展并且操作简便、结果准确可靠、成本低,同时能进行急诊、批量和自动化分析的方法。
【关键词】胶乳增强免疫比浊法化学发光法肌钙蛋白I 心肌肌钙蛋白I(cTnI)作为心肌损伤性疾病诊断的一项新指标,具有高度的敏感性和特异性。
心肌损伤后,cTnI在血液中出现时间早、持续时间长、浓度增长快,是一种理想的心肌损伤标志物。
cTnI测定方法比较多,目前还没有统一的标准测定方法。
我们对美国BECKMAN AU2700生化仪和美国BECKMANACCESS2发光仪应用相同的实验方案,利用相同的临床样本进行分析,对两种方法进行比较评估。
一、材料与方法1 病例分组1.1 健康对照组:正常者30例,男15例,女15例,平均年龄70岁(55~85岁),均为门诊各项指标正常者。
1.2 AMI组:我院心胸科确诊为AMI的住院患者30例,其中男20例,女10例,平均年龄68岁(57~79岁)2 仪器与试剂化学发光法所用仪器为美国贝克曼库尔特公司生产的化学发光免疫分析仪ACCESS2及配套试剂。
胶乳增强免疫比浊测定cTnI用AU2700全自动生化分析仪,试剂由太原市川至生物工程有限公司生产。
人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究人心肌肌钙蛋白I(cTnI)是一种特异性心肌标志物,通常在心肌细胞受损时释放到血液中。
其升高水平可用于心肌梗死的早期诊断、评估患者的疾病严重程度,并用于预测心脏疾病的预后。
目前,有几种常用的检测方法可用于测量cTnI水平,包括免疫学方法、生物传感器和质谱法。
一种常见的免疫学方法是酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。
该方法通过使用特异性抗体结合剂和说明剂,可定量测量cTnI水平。
ELISA具有高灵敏度和高特异性,是一种常用的检测心肌标志物的方法。
然而,ELISA在样本准备方面比较繁琐,需要较长的检测时间。
另一种检测方法是电化学生物传感器。
生物传感器通过将生物分子与传感器结合,实现对心肌肌钙蛋白I的检测。
这种方法具有快速、灵敏和特异性高的特点,并且允许在点-of-care情况下进行检测。
电化学生物传感器的原理是将特定抗体修饰在电极表面,并通过电化学方法观察抗原-抗体的反应。
该方法需要较少的样本体积,并且可以在近实时的基础上提供结果,因此被广泛用于临床诊断。
质谱法是一种高分辨率的测量方法,可用于测量心肌肌钙蛋白I的水平。
它是一种定性和定量的技术,可以同时测量多个蛋白质。
质谱法通常使用质谱仪分析样品中的蛋白质,其中包括cTnI。
该方法具有高灵敏度和高分辨率的优点,可以检测到较低水平的蛋白质。
然而,质谱法在实施和数据分析方面要求相对较高的专业知识和专业设备。
这些检测方法在临床实践中具有重要的应用研究。
首先,这些方法可以帮助早期诊断心肌梗死,因为cTnI的升高表明心肌细胞受损。
其次,可以通过测量cTnI的水平来评估心脏疾病的严重程度,并指导治疗方案的选择。
此外,cTnI水平的测量还可以用于预测心脏疾病的预后,并为患者提供个体化的治疗和康复计划。
总之,人心肌肌钙蛋白I的检测方法多样,包括免疫学方法、生物传感器和质谱法。
综述题目:cTnI检测方法及其影响因素和临床应用进展姓名:学号:系别:年级:专业:二○一二年三月心肌肌钙蛋白I检测方法及其影响因素和临床应用进展摘要心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌损伤最特异、最敏感的血清标志物之一,目前已被广泛地应用于临床诊断。
但cTnI检测方法尚未标准化,血液循环中cTnI浓度的检测也受血浆肝素浓度、类风湿因子水平、溶血、慢性肾脏衰竭、年龄等多种因素干扰。
cTnI广泛在诊断急性心肌梗塞(AMI),监测心脏手术,诊断不稳定型心绞痛,骨骼损伤或慢性肾衰伴有心肌损伤的鉴别方面有广泛应用。
前言传统的心肌酶谱包括天门冬氨酸转氨酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH)及其同工酶和肌酸激酶(CK及其同工酶。
传统的心肌酶谱由于特异性较差,敏感性和精确性不高和不能及时反映疾病等弊端,现在在心脏疾病的标志物中已少用。
心肌损伤标志物是近十年来临床生物化学钟发展最快的部分,出现了一批项目及许多研究应用报告。
心肌肌钙蛋白由于其敏感性和特异性都高的特点,为心肌损伤的诊断带来了新气象,提高了对微小损伤的诊断成功率,为临床广泛应用,诊断指标从酶类为主转向了以蛋白类为主。
肌钙蛋白(Tn)是组成横纹肌细丝的结构蛋白,其亚单位I、T、C组成复合物,在肌肉收缩和舒张过程中起重要作用。
其中,心肌肌钙蛋白I(CTnI)经大量的研究,已被证实为心肌损伤最特异性、最敏感的血清标志物之一,正逐渐取代肌酸激酶MB同工酶(CK—MB)成为判断心肌损伤,特别是急性心肌梗塞(AMI)的“金标准”。
本文介绍CTnI检测方法及影响因素和临床应用进展。
关键词心肌肌钙蛋白I 检测方法影响因素临床应用1.结构性质肌钙蛋白(troponin,Tn)是组成横纹肌细丝的结构蛋白,可调节钙介导的肌动蛋白和肌球蛋白之间的相互反应,本身为多肽。
其亚单位I、T和C组成复合物。
其中Tnl是肌原纤维ATP 酶的抑制单位,可抑制肌球蛋白与肌动蛋白结合,阻止肌肉收缩。
人℃TnI氨基末端有32个氨基酸残基为sTnI所不具有,因此抗原性有较大差异,有利于获得特异性cTnI抗体【1】。
ReLIA SJJ-2 免疫检测系统(24小时急诊快查定量检测)
cTnI(肌钙蛋白I)生物学特性及主要临
cTnI主要临床应用
CTnI/T被美国和欧洲心脏协会一致评为诊断急性心肌梗死的高特异性、高敏感性的确诊标志物,是目前公认的心肌梗死诊断金标准,是对于一直不能通过心电图改变,又无临床典型症状的微小型心肌损伤患者最佳的辅助诊断指标。
1)早期AMI与心肌损伤诊断
外周血中检出cTnI/cTnT必然是心肌细胞损伤的结果。
AMI后3-6小时升高,10-48小时出现峰值,发病10-120小时内检测敏感性达100%。
因此,cTnI可作为心肌损伤的特异性标志物和AMI的确诊标志物。
2)UPA(不稳定型心绞痛)患者预后评估
UPA是缺血性心肌病的重要阶段。
UPA患者cTnI升高幅度小,经治疗2/3以上可回复正常水平,说明心肌细胞一过性损伤或微小损伤,与AMI本质不同。
因此,cTnI升高的UPA患者是发展为AMI或猝死的高危人群,动态观察cTnI水平变化对UPA的预后具有重要意义。
3)估计梗死面积和心功能受损程度
cTnI后期峰值与梗死面积呈正相关,可反映心肌细胞坏死数量。
同时,cTnI累积释放量与心功能受损程度呈正比。
4)评价围手术期心功能受损程度
围手术期MI者cTnI会持续释放,血中cTnI浓度升高;无MI者,cTnI释放取决于心脏停博时间。
因此,cTnI可用于确定围手术期AMI或了解心脏及瓣膜手术时心脏保护措施是否得当。
此外,在急性心肌炎等疾病时cTnI也可低水平升高。
实验名称:现代女性生化指标检测实验目的:1. 了解现代女性常见的生化指标及其正常范围。
2. 分析不同年龄、职业、生活习惯等因素对女性生化指标的影响。
3. 掌握生化实验的基本操作方法,提高实验技能。
实验时间:2023年4月15日实验地点:某三甲医院生化实验室实验材料:1. 现代女性样本:20名,年龄20-45岁,职业包括教师、护士、公务员、企业员工等。
2. 生化检测仪器:全自动生化分析仪、离心机、试剂等。
3. 实验记录表。
实验方法:1. 样本采集:采集每位女性的静脉血5ml,置于抗凝管中。
2. 样本处理:将采集到的血液在室温下静置30分钟,待血液凝固后,用离心机以3000r/min离心10分钟,分离血清。
3. 生化指标检测:使用全自动生化分析仪对血清进行以下指标的检测:- 血清白蛋白(ALB)- 谷丙转氨酶(ALT)- 谷草转氨酶(AST)- 总胆固醇(TC)- 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)- 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)- 三酰甘油(TG)- 糖化血红蛋白(HbA1c)- 尿素氮(BUN)- 肌酐(Cr)- 钠(Na+)- 钾(K+)- 氯(Cl-)- 碳酸氢盐(HCO3-)4. 数据分析:将检测结果与正常参考范围进行比较,分析不同年龄、职业、生活习惯等因素对女性生化指标的影响。
实验结果:1. 血清白蛋白(ALB):正常范围为35-55g/L,20名女性样本中,有18人处于正常范围,2人低于正常范围。
2. 谷丙转氨酶(ALT):正常范围为5-40U/L,20名女性样本中,有19人处于正常范围,1人高于正常范围。
3. 谷草转氨酶(AST):正常范围为8-40U/L,20名女性样本中,有19人处于正常范围,1人高于正常范围。
4. 总胆固醇(TC):正常范围为2.86-5.17mmol/L,20名女性样本中,有17人处于正常范围,3人高于正常范围。
5. 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):正常范围为1.03-1.55mmol/L,20名女性样本中,有16人处于正常范围,4人低于正常范围。
人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究心肌肌钙蛋白I(cTnI)是组成心肌肌钙蛋白复合物的亚单位之一,具有高度的心肌特异性,被认为是诊断心肌损伤的“金标准”。
快速、灵敏、准确测定人血中的cTnI对于诊断急性心肌梗死、急性冠状动脉综合征的危险分层、监测各种因素所导致的心肌损伤、以及心脏事件的判断预后等有着重要的意义。
目前,测定cTnI的方法主要有放射性同位素免疫分析法(RIA)、酶联免疫吸附试验法(ELISA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、荧光免疫分析法(FIA)、以及金标免疫分析法等。
其中,RIA法因有放射性污染的危险已基本不使用;CLIA 法和FIA法灵敏度较高,但仪器价格偏高,国内在这方面的研究相对较少;金标免疫分析法主要应用于制作定性分析用的免疫层析试纸条,现在国内各医院多使用国外公司的产品,价格昂贵,国内学者虽在这方面有不少研究,但其灵敏度不高,难以推向市场;目前国内研究和应用最多的方法是ELISA,该方法灵敏度适中,使用相对简便,仪器价格也不很高,但存在测定周期偏长、灵敏度相对较低、检测范围较窄等不足。
考虑到检测人血液中cTnI对于判断心肌损伤的重要性,以及目前国内测定cTnI的方法所存在的这样或那样的缺陷,本论文从快速、灵敏、准确测定和降低检测成本等方面入手,综合应用纳米金标记技术、纳米孔材料上的生物分子固定化技术、以及高灵敏的电化学检测技术和化学发光检测技术,建立了几种测定人cTnI的方法,弥补了现有方法的某些不足。
具体内容如下: 1.金标银染法快速检测人血清中cTnI的研究纳米金具有特殊的光学和电学性质,生物相容性好,是继放射性同位素、酶、发光(荧光)物质之后的又一种卓越的免疫标记物质,银染技术的引进使其可见性得以显著提高,从而使免疫检测的灵敏度随之大幅度提高。
本文以硝酸纤维膜作为基底,结合一步法双单克隆抗体夹心技术、低密度蛋白芯片技术、纳米金探针技术、以及纳米金颗粒上的银染放大技术建立了一种检测人心肌肌钙蛋白I的快速测定法。
人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究人心肌肌钙蛋白I(cTnI)是一种心肌损伤标志物,其释放量在心肌缺血和损伤后会明显增高。
因此,cTnI的检测可以用于心肌损伤的早期诊断、鉴别诊断、治疗效果监测以及预后评估。
目前常用的cTnI检测方法包括免疫层析法、免疫比浊法、免疫荧光法、酶联免疫分析法和质谱法等。
以下将对这些方法及其应用研究进行详细介绍:1.免疫层析法:该方法常用的是双抗体夹心法。
首先,将样品和抗体结合,随后将这些混合物加入含有特异性抗体的固相基质中,抗原与抗体结合,形成带有荧光标记的复合物。
通过检测这些复合物的浓度,即可确定cTnI的含量。
该方法具有操作简便、快速、敏感性高和特异性好等优点。
2.免疫比浊法:该方法利用抗原和抗体之间的反应引起的溶液浑浊度发生变化,通过测量溶液的透光率来确定cTnI的含量。
免疫比浊法具有操作简便、成本低、结果可视化等特点,但灵敏度较低。
3.免疫荧光法:该方法利用荧光效应测定抗原与抗体结合的程度,进而确定cTnI的含量。
免疫荧光法具有高灵敏度、高特异性、多重标记等优势,但需要专门的仪器设备和操作技术。
4.酶联免疫分析法:该方法利用酶标记抗体与抗原结合后的酶底物反应产生显色或荧光等信号,通过测量信号强度来确定cTnI的含量。
酶联免疫分析法具有高灵敏度、高特异性和广泛应用范围等优势,是目前最常用的cTnI检测方法之一5.质谱法:该方法利用质谱仪对样品中的cTnI进行分析和测定。
质谱法具有高灵敏度、高分辨率和高通量等特点,可用于准确测定cTnI的含量,但需要专门的设备和专业的操作技术。
目前,cTnI的检测已广泛应用于临床实践中。
在急性冠状动脉综合征诊断中,cTnI的测定是判断病情严重程度和预测病情发展的重要指标。
在心肌梗死早期诊断中,cTnI的测定可以提高患者中的阳性检出率,帮助及时采取相应的治疗措施。
此外,cTnI的检测还可用于预测心脏手术后的术后并发症风险、心血管疾病的预后评估和心肌损伤的治疗效果监测等。
肌钙蛋白I (cTnI)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)说明书【产品名称】肌钙蛋白I(cTnI)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)【包装规格】a)试剂1:1×15mL 试剂2:1×5mL b)试剂1:2×45mL 试剂2:2×15mL c)试剂1:4×60mL 试剂2:4×20mL d)试剂1:2×60mL 试剂2:2×20mL 【预期用途】用于体外定量测定人血清中肌钙蛋白I 的含量。
肌细胞受损时,肌钙蛋白I (cTnI )立即释放入血,在胸痛发生4-6h 后,血中cTnI 水平超过正常上限,12-24h 达高峰,可持续6~10天之久。
由于cTnI 可检出微小心肌损伤,是公认的快速诊断急性心肌梗死和急性冠脉综合症(ACS )[1]。
测定肌钙蛋白I 常用于心肌细胞受损、急性心肌梗死、急性冠脉综合症的辅助诊断。
【检验原理】样本与胶乳试剂在缓冲液中混合后,其中的肌钙蛋白Ⅰ与胶乳颗粒表面的抗体结合,使相邻的胶乳颗粒彼此交联,发生凝集反应产生浊度变化,该浊度变化与样本中的肌钙蛋白的量成正相关。
【主要组成成分】试剂1主要组分磷酸盐缓冲液30mmol/L聚乙二醇(PEG )0.5%表面活性剂及稳定剂适量试剂2主要组分磷酸盐缓冲液30mmol/L抗人肌钙蛋白(cTnI )抗体乳胶颗粒适量表面活性剂及稳定剂适量注:不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】1.试剂原包装在2~8℃储存,有效期为12个月,生产日期、有效期见标签。
2.开口后的试剂在仪器仓中(2~8℃)可稳定30天。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200;日立HITACHI 7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT 008AS 型;贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821;佳能TBA-FX8/TBA-120FR /TBA-2000FR ;罗氏cobas 8000c 702/cobas 8000c 701/cobas 8000c 502;西门子SIEMENS ADVIA 1800/ADVIA 2400;雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200;西森美康SYSMEX BM6010/C ;科华KHB 卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280;迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400;迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/BS-800/BS-2000M ;颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480;赛诺迈德SUNMATIK-9050型;雷杜Chemray 420;英诺华D280;特康TC6010L ;锦瑞GS400;普康6066。