HPLC法测定双氯芬酸钠滴眼液中苯扎氯铵的含量

收稿日期：2019-03-14作者简介：谷成燕，硕士，从事药品质量检验研究 E-mail: 306288033@吸收，因此采用UV检测器灵敏度并不是很高，两种单糖的检测限分别为20 ppm和2 ppm。

如果将流动相中的不挥发性盐用挥发性盐（如乙酸铵）替代，则可用蒸发光散射检测器来检测单糖含量，提高方法灵敏度。

参考文献[1] 凌沛学. 透明质酸[M]. 北京: 中国轻工业出版社, 2000: 2.[2] 覃仲欣, 卢智泉, 梁豪荣, 等．透明质酸制备方法研究进展[J].轻工科技, 2016, (11): 25-26. [3] 张琳培. 微生物发酵优化透明质酸生产的研究进展[J]. 轻工科技, 2018, (3): 18-20.[4] 甄利凯. 透明质酸的微生物发酵法生产与应用概况的探析[J].食品安全导刊, 2015, (33): 139.[5] 吴祥坤, 王腾飞, 李丕武. 葡萄糖浓度及补料方式对透明质酸发酵的影响[J]. 食品工业科技, 2016, 37(13): 98-201.[6] 凌沛学，王凤山. 生物药物研究进展[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2004: 133-134.[7] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(四部)[S]. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 59-61.[8] 张敏, 黎东. 利用高效液相色谱法测定食品中五种糖的含量[J].现代食品, 2019, (1): 107-109.氯化钠滴眼液中防腐剂苯扎氯铵的含量测定谷成燕，贺艳丽，白若琬，韩保萍（山东博士伦福瑞达制药有限公司，山东济南 250101）摘要：目的建立高效液相色谱法测定氯化钠滴眼液中防腐剂苯扎氯铵含量的方法。

方法用氰基硅烷键合硅胶为填充剂；以醋酸钠溶液（无水醋酸钠8.2 g，加水1000 ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至5.0）-乙腈（55:45）为流动相；流速为1 ml/min；检测波长为262 nm。

HPLC法测定复方双氯芬酸钠注射液的含量李金阳(安徽省滁州市药品检验所,滁州　239000)摘要　目的　建立HPLC同时测定注射液中双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的方法。

方法　以ODS为固定相,醋酸钠溶液-甲醇(40∶60)为流动相。

检测波长为220nm,流速为110ml・min-1,外标法。

结果　双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的浓度线性范围分别为1012～30614mg・L-1和311～9312mg・L-1,回收率分别为10011%和9918%。

结论　方法简便、快速、准确,能同时测定复方双氯芬酸钠注射液中双氯芬酸钠和盐酸利多卡因。

关键词　HPLC;复方双氯芬酸钠;注射液;含量测定Determination of cmpound diclofenac sodium injection by HPLCL I Jin2Yang(Chuz hou Instit ute f or D rug Cont rol,Chuz hou　239000)ABSTRACT　AIM　Diclofenac sodium and Lidocaine Hydrochloride were determined by HPLC in Compound diclofenac sodium injec2 tion1METH ODS　Shim2pack CLC2ODS(150×416nm,5μm)S odium acetate solution2methanol(40∶60)as Mobile phase,folw rate was110ml・min-1,detection wavelength was220nm.RESU LTS　The Linear range was1012～30614mg・L-1for diclifenac sodi2 um and311～9312mg・L-1for lidocaine Hydrochloride1The average recovery were10011%and9918%1CONC L USION　This methed is rapid,simple,and accurate1KEY WORDS　HPLC;compound diclofenac sodium injection;assay 复方双氯芬酸钠注射液是一种由双氯芬酸钠和盐酸利多卡因混合而成的灭菌水溶液注射剂,为消炎镇痛药,国内已有厂家研究开发出该复方制剂,其注射液中双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的原料质量标准〔1〕均采用容量法测定含量,不适合本品的含量测定。

HPLC法测定化妆品中苯扎氯铵含量的不确定度苯扎氯铵（Benzalkonium chloride），此化合物是重要的阳离子季铵盐表面活性剂，具有良好的抗静电，柔顺，防腐作用，也可用于杀菌，印染助剂，织物洗涤等行业。

本文将根据最新化妆品相关标准目录（截至2018年5月发布）测定方法中标准妆品中苯扎氯铵含量的测定方法-高效液相色谱法，参考新版JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》，并结合《化妆品安全技术规范》（2015版）中规定方法讨论苯扎氯铵含量的不确定度。

标签：苯扎氯铵；高效液相色谱法；不确定度；含量测定苯扎氯铵（Benzalkonium chloride），此化合物是各种偶数烷基链烷基芐氯化物的非匀相混合物。

《化妆品安全技术规范》（2015版）中规定了高效液相色谱法测定化妆品中苯扎氯铵含量的方法，所指苯扎氯铵为十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵与十六烷基二甲基苄基氯化铵之和。

而不确定度的含义是指由于测量误差的存在，对被测量值的不能肯定的程度。

所以，附有不确定度的测量结果才是真实有意义的。

1 实验方法1.1 色谱条件Agilent Zorbax CN柱（250mm×4.6mm×5μm）；流动相为乙腈和0.1mol·L-1的醋酸铵缓冲溶液（冰醋酸调pH=5.0）（7：3）的混合溶液；流速为1.0mL·min-1；检测波长为260nm；柱温25℃；进样量20μL。

1.2 样品溶液的配制精密称取试样0.500g（精确至0.001g）于25mL具塞刻度管中，加入20mL 乙腈（色谱纯），涡旋振荡1min，混匀后，400W超声提取30min，取出后冷却至室温，用乙腈定容，上下振荡混匀，后经0.45μm滤膜过滤，所得滤液作为待测液，备用。

1.3 标准品溶液的配制分别称取十二烷基二甲基苄基氯化铵（纯度大于98%）、十四烷基二甲基苄基氯化铵（纯度大于97%）和十六烷基二甲基苄基氯化铵（纯度大于98%）各0.050g（精确到0.001g），置于50mL棕色容量瓶中，用乙腈（色谱纯）溶解并定容至刻度，摇匀，配成浓度为1.0g/L的标准溶液。

高效液相色谱法测定复方混悬滴眼液中苯扎氯铵含量杨龙华;宿洁;陈涛;卢京光【摘要】Objective To establish an HPLC method for the determination of benzalkonium chloride in Loteprednol and Tobramycin Ophthalmic Suspension. Methods After being filtrated,samples were separated by HPLC on a Waters Spherisorb S5 CN column(250 mm × 4. 6 mm,5 μm). The mobile phase was 0. 1% phosphoric acid water solution- acetonitrile- tetrahydrofuran(52 :39 :15). The detec-tion wavelength was 216 nm. The flowing speed was 1. 5 mL/min. The column temperature was 30 ℃. Results The mass concentration of benzalkonium chloride was in good linear relationship with the peak area in the range of 0. 04-0. 20 g/L ( r=0. 999 9,n=5), and the average recovery rate was 100. 22%,RSD=0. 59%( n=9). Conclusion The method is sensitive,accurate and convenient with good resolution,it can be applied to control the quality of Loteprednol and Tobramycin Ophthalmic Suspension.%目的：建立测定氯替泼诺妥布霉素复方混悬滴眼液中防腐剂苯扎氯铵含量的高效液相色谱（HPLC）法。

HPLC法同时测定双氯芬酸钠滴眼液中的含量及有关物质Determination of Diclofenac Sodium eyedrops by HPLC双氯芬酸钠滴眼液（单剂量），其主要成分为：双氯芬酸钠又名双氯灭痛，用于治疗葡萄膜炎、角膜炎、巩膜炎等疾病。

有文献报道了双氯酚酸钠滴眼液中分别测定含量及有关物质方法[1-3]，其他剂型的含量及有关物质检查方法也有报道[4-6]。

但是同时测定双氯芬酸钠中的含量及有关物质的方法则未见报道，本文采用高效液相色谱法测定双氯芬酸钠滴眼液的含量及有关物质，具有灵敏度高，专属性强、准确可靠等优点。

1 仪器与试药Waters2695/2489高效液相色谱仪（紫外检测器）。

甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

双氯芬酸钠对照品（批号AN3337，100%）；为中国药品生物制品检定研究院提供，双氯芬酸钠滴眼液（规格为5mg：5ml，批号A20140822沈阳市兴齐制药有限责任公司）。

2，6-二氯二苯胺对照品，纯度：99.9%，由企业提供。

2 方法与结果2.1 色谱条件及系统适用性2.1.1 色谱条件高效液相色谱柱为Grom-Sil 100 ODS-0 AB，5μ，250*4.6mm不锈钢柱，流动相：甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（65.7：34.3，用磷酸调pH值至4.0±0.05）；检测波长： 242nm。

流速：1.0mL. min-1 ；柱温：40℃。

进样量：20μL。

2.1.2 系统适用性试验精密称取2，6-二氯双苯胺10.05mg及双氯芬酸钠对照品10.37mg，置100mL量瓶中，加氢氧化钠甲醇溶液溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液。

双氯芬酸钠峰的保留时间约为10分钟，双氯芬酸钠与2，6-二氯双苯胺峰的分离度大于1.7，理论板数按双氯芬酸钠计大于8000。

2.2 线性关系考察精密称取双氯芬酸钠对照品10.12mg，置100mL量瓶中，加甲醇70mL 振摇使溶解，用氢氧化钠甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为双氯芬酸钠对照品贮备溶液；分别精密量取此贮备溶液0.5、0.8、1.0、1.2及1.5mL，置50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度摇匀，进样20μL，以浓度X为横坐标，峰面积Y 为纵坐标，计算线性回归方程：Y=22683X-3554 r=0.9998 。

双氯芬酸钠滴眼液有关物质检测方法研究胡奕军;胡奕勤【摘要】目的：建立双氯芬酸钠滴眼液有关物质高效液相色谱检查法.方法：以十八硅烷键合硅胶为填充剂;以0.03 mol/L磷酸溶液-0.2％醋酸（V/V）甲醇溶液（33∶67）为流动相;流速：1.0mL/min;柱温：室温;检测波长：222 nm;进样量：20μL.结果：该方法中有关物质之间及有关物质与主峰分离良好;检测限为0.1996ng;应在2h内完成测定.结论：该法操作简便、专属,能有效快速地控制产品质量.【期刊名称】《江西中医药大学学报》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】4页(P65-68)【关键词】双氯芬酸钠滴眼液;稳定性;有关物质;高效液相色谱【作者】胡奕军;胡奕勤【作者单位】;;【正文语种】中文【中图分类】R927.1双氯芬酸钠滴眼液临床用于治疗葡萄膜炎、角膜炎、巩膜炎，抑制角膜新生血管的形成，治疗眼内手术后、激光滤帘成形术后或各种眼部损伤的炎症反应，抑制白内障手术中缩瞳反应；用于准分子激光角膜切削术后止痛及消炎；治疗春季结膜炎、季节过敏性结膜炎等过敏性眼病，预防和治疗白内障及人工晶体术后炎症及黄斑囊样水肿，以及青光眼滤过术后促进滤过泡形成等。

双氯芬酸钠滴眼液作为一种经典非甾体抗炎制剂，其抗炎作用与地塞米松相同，无激素类副作用，并且还能有效缓解疼痛，在国内该品种一直按新药转正标准[1]控制产品质量。

但该质量标准未对有关物质进行直接控制。

为了进一步控制该产品的质量，我们建立了双氯芬酸钠滴眼液有关物质的检测方法。

在该色谱系统中双氯芬酸钠滴眼液的有关物质二氯苯基吲哚酮、双氯芬醇、双氯芬醛和其他杂质均能较好分离，通过在溶剂峰后扣除抑菌剂色谱峰，并控制完成检测的时间，即能有效控制产品质量。

1 仪器与试药1.1 仪器 Agilent1100高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)，AEG-45SM半微量电子分析天平(SHIMADZU)。

苯扎氯铵（精校版本）苯扎氯铵běn zhā lǜ ǎnBenzalkonium Chloride本品为氯化二甲基苄基烃铵的混合物。

按无水物计算，含烃铵盐（C22H40CIN）应为95.0％～105.0％。

This product is the mixture of dimethyl benzyl ammonium chloride. Calculation by anhydrous, the C22H40CIN content shall be 95.0％～105.0％.【性状】本品为白色蜡状固体或黄色胶状体；水溶液显中性或弱碱性反应，振摇时产生多量泡沫。

本品在水或乙醇中极易溶解，在乙醚中微溶。

Shape and properties:This product is a white waxy solid or yellow jelly; water solution is neutral or weak alkaline reaction, when shaking, a lot of foam will produce.This product is easy to dissolve in water or ethanol, slightly soluble in ether.【鉴别】(1) 取本品约0.2g，加硫酸1ml 使溶解，加硝酸钠0.1g，置水浴上加热5 分钟，放冷，加水10ml与锌粉0.5g，置水浴上温热5 分钟，取上清液2ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml ，置冰水中冷却，再加碱性β－萘酚试液3ml ，即显猩红色。

(2)取本品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在257nm，262nm及269nm 的波长处有最大吸收。

(3)(3) 取本品1 ％水溶液10ml，加稀硝酸0.5ml ，即发生白色沉淀，滤过，沉淀能在乙醇中溶解，滤液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。

溴芬酸钠滴眼液抑菌效力研究目的对溴芬酸钠滴眼液中所添加的抑菌剂抑菌效力进行确认。

方法将金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉作为挑战菌株，分别加入到抑菌剂含量为处方浓度0、80%、100%和120%的4组溴芬酸钠滴眼液中，在不同时间段检测样品中微生物的存活情况。

结果不含抑菌剂的溴芬酸钠滴眼液不具有充分的抗菌活性，抑菌剂含量为处方浓度80%、100%和120%的溴芬酸钠滴眼液，均可有效抑制微生物的生长繁殖。

结论可选择浓度为0.05mg/mL的苯扎氯铵，作为溴芬酸钠滴眼液的抑菌剂。

[Abstract] Objective To demonstrate the effectiveness of antimicrobial preservatives for Bromfenac Sodium Eye Drops. Methods Staphylococcus aureus，Escherichia coli，Pseudomonas aeruginosa，Candida albicans and aspergillus niger were used as challenging strains and added into four sets of Bromfenac Sodium Eye Drops with concentrations of Antimicrobial preservatives at 0，80%，100% and 120% respectively.Survival rates of microbes were then examined at different points in time. Results Bromine Finn acid sodium eye drops except for the Bacteriostatic agent sample were no antimicrobial preservatives.The Bromfenac Sodium Eye Drops with concentrations of Antimicrobial preservatives at 80%，100% and 120% could inhibit the growth of microorganisms sufficiently，Conclusion Benzalkonium chloride can be used as antimicrobial preservative for Bromfenac Sodium Eye Drops.[Key words] Bromfenac Sodium Eye Drops；Antimicrobial preservatives；Antimicrobial effectiveness；Benzalkonium chloride本品为滴眼液，主要活性成分为溴酚酸钠，用于外眼部和前眼部的炎症性疾病的对症疗法（结膜炎、巩膜炎、术后炎症）。

HPLC法测定双氯芬酸钠注射液含量
万芳友;尹红
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2005(024)012
【摘要】目的应用HPLC法测定双氯芬酸钠注射液含量.方法本品采用Hypersil ODS2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.025mol·L-1磷酸二氢钾溶液(70:30)为流动相,流速为1.0ml·min-1,检测波长278nm,柱温40℃.结果双氯芬酸钠在
0.168～0.840μg范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,RSD=0.36%(n=5).【总页数】2页(P727-728)
【作者】万芳友;尹红
【作者单位】日照市药品检验所,日照,276800;山东长富洁晶药业有限公司,日
照,276800
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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