脑脊液及尿蛋白定量方法的比较

1.1包装规格
水平1：1mLx1；1mLx10；3mLx1；5mLx1；
水平2：1mLx1；1mLx10；3mLx1；5mLx1；
水平1：1mLx1，水平2：1mLx1；
水平1：3mLx1，水平2：3mLx1；
水平1：5mLx1，水平2：5mLx1。

1.2主要组成成分
2水平，水基质液体质控品
2.1性状
质控品为无色至淡黄色液体。

2.2装量
液体质控品的装量不少于标示值。

2.3可接受区间
质控品测定值应在靶值范围内。

2.4瓶间均匀性
赋值结果的瓶间均匀性变异系数（CV）≤5%。

2.5稳定性
2.5.1效期稳定性
质控品原包装在2℃～8℃避光保存，有效期为18个月，在稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。

2.5.2开瓶稳定性
质控品开瓶后，在2℃～8℃下避光密封保存，可稳定14天，在稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。

蛋白质各种定量方法的优缺点的比较令狐采学1．蛋白质的常规检测方法1.1 凯氏（Kjeldahl）定氮法一种最经典的蛋白质检测方法。

原理：样品中含氮有机化合物与浓硫酸在催化剂作用下共热消化,含氮有机物分解产生氨,氨又与硫酸作用变成硫酸铵。

然后加碱蒸馏放出氨,氨用过量的硼酸溶液吸收,再用盐酸标准溶液滴定求出总氮量换算为蛋白质含量。

优点：范围广泛、测定结果准确、重现性好缺点：操作复杂费时、试剂消耗量大1.2 双缩脲法常用于需要快速但并不需要十分精确的蛋白质检测。

原理：双缩脲（NH3CONHCONH3）是3 分子的脲经180℃左右加热，放出1分子氨后得到的产物。

在强碱性溶液中，双缩脲与硫酸铜形成紫色络合物（肽键中的氮原子和铜离子配价结合），称为双缩脲反应。

紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，因此可用来测定蛋白质含量。

测定范围：1~10mg（有的文献记载为1~20mg）优点：较快速，干扰物质少，不同蛋白质产生的颜色深浅相近缺点：①灵敏度差；②三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA等会干扰该反应。

1.3 Folin-酚试剂法原理：Folin-酚法的原理与双缩脲法大体相同，利用蛋白质中的肽键与铜结合产生双缩脲反应。

同时也由于Folin-酚试剂中的磷钼酸-磷钨酸试剂被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深蓝色的钼蓝和钨蓝的混合物。

在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比，由此可测定蛋白质的含量。

测定范围：20~250ug优点：灵敏度高，对水溶性蛋白质含量的测定很有效缺点：①费时，要精确控制操作时间；②Folin -酚法试剂的配制比较繁琐,且酚类和柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油、还原剂(二硫代苏糖醇、巯基乙醇)、EDTA和脲素均会干扰反应。

1.4 紫外吸收法原理：蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基使其在280nm处具有紫外吸收，其吸光度与蛋白质含量成正比)。

此外，蛋白质溶液在280nm的吸光度值与肽键含量成正比，利用一定波长下蛋白质溶液的吸光度值与蛋白质浓度的正比关系可以测定蛋白质含量。

体液检验尿液、血液和脑脊液等的常见检测项目介绍体液检验是一种常见的临床检验方法，通过检测尿液、血液和脑脊液等体液中的各种成分，可以帮助医生了解患者的健康状况，辅助诊断和治疗各种疾病。

本文将介绍常见的体液检验项目，包括尿液常规检查、血液常规检查和脑脊液检查。

1尿液检测项目介绍1.1尿常规检查尿常规检查是一项最基本的尿液检测项目，通常包括颜色、透明度、比重、pH值、蛋白质、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐、白细胞、红细胞、上皮细胞等指标的检测。

尿常规检查可以初步了解肾功能、泌尿系统疾病、糖尿病、感染等情况。

1.2尿微量白蛋白定量尿微量白蛋白定量是用于检测尿液中微量白蛋白的含量，是评估糖尿病肾病、高血压肾病等肾脏疾病的重要指标。

正常人的尿液中白蛋白含量很低，当肾小球滤过膜损伤或破坏时，尿液中的白蛋白含量会升高。

1.3尿肌酐尿肌酐是用于评估肾脏功能的指标之一，它是肌肉代谢产物，同时也是肌肉质量的重要指标。

尿肌酐的浓度可以反映肾小球滤过功能，对于早期慢性肾脏疾病的诊断和监测具有重要意义。

1.4尿沉渣镜检尿沉渣镜检是将尿液离心沉淀后，通过显微镜观察尿液中的红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、结晶等形态结构，以了解泌尿系统的炎症、感染、肾小球损伤等情况。

1.5尿蛋白电泳尿蛋白电泳是一种用于检测尿液中蛋白质成分的方法，可以帮助鉴定肾脏疾病、炎症、肾小球肾炎、膜性肾病等疾病的类型和严重程度。

1.6尿葡萄糖尿葡萄糖是用于检测尿液中葡萄糖含量的指标，可以用于早期筛查糖尿病。

正常情况下，尿液中不应该含有葡萄糖，如果尿液中出现葡萄糖，可能是因为血糖升高或肾小管重吸收葡萄糖能力降低。

1.7尿酮体尿酮体用于检测尿液中酮体的含量，可以了解人体是否处于酮症酸中毒的状态。

酮体是由脂肪代谢产生的产物，如果体内缺乏葡萄糖供能，脂肪将被分解产生酮体。

1.8尿糖化血红蛋白尿糖化血红蛋白是用于评估血糖控制情况的指标，可以反映近期血糖水平的平均程度。

通过检测尿液中糖化血红蛋白的含量，可以了解糖尿病患者的血糖控制情况。

脑脊液常规和生化检测（一）一般性状检查，1.颜色正常脑脊液为无色透明液体。

（1）红色；：常因出血引起，主要见于穿刺损伤、蛛网膜下腔或脑室出血。

（2）黄色：常因脑脊液中含有变性血红蛋白、胆红素或蛋白量异常增高引起，见于蛛网膜下腔出血，血清中胆红素超过256/μmol/L或脑脊液中胆红素超过8.6μmol/L时，可使脑脊液黄染；椎管阻塞（如髓外肿瘤）、多神经炎和脑膜炎时，脑脊液中蛋白质含量升高（>1.5g/L）而呈黄变症。

（3）乳白色；多因白细胞增多所致，常见于各种化脓菌引起的化脓性脑膜炎。

（4）微绿色；见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎等。

（5）褐色或黑色；见于脑膜黑色素瘤等。

2.透明度正常脑脊液清晰透明。

病毒性脑膜炎、流行性乙型脑膜炎、中枢神经系统梅毒等由于脑脊液中细胞数仅轻度增加，脑脊液仍清晰透明或微浊；结核性脑膜炎时细胞数中度增加，呈毛玻璃样混浊；化脓性脑膜炎时，脑脊液中细胞数极度增加，呈乳白色混浊。

3.凝固物正常脑脊液不含有纤维蛋白原，放置24h后不会形成薄膜及凝块。

当有炎症渗出时，因纤维蛋白原及细胞数增加。

可使脑脊液形成薄膜及凝块。

急性化脓性脑膜炎时，脑脊液静置1～2h即可出现凝块或沉淀物；结核性脑膜炎的脑脊液静置12～24h后，可见液面有纤细的薄膜形成。

蛛网膜下腔阻塞时，由于阻塞远端脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，使脑脊液呈黄色胶胨状。

医学教育网搜集整理4.压力正常成人卧位时脑脊液压力为0.78～1.76kPa（80～180mmH20）或40～50滴/min，随呼吸波动在10mmH20之内。

儿童压力为0.4～1.0kPa（40～100mmH2O）。

若压力超过200mmH2O，放出脑脊液量不应该超过2ml，若压力低于正常低限可做动力试验，以了解蛛网膜下腔有无阻塞。

脑脊液压力增高见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎等颅内各种炎症性病变；脑肿瘤、脑出血、脑积水等颅内非炎症性病变；高血压、动脉硬化等颅外因素；还有其他如咳嗽、哭泣，低渗溶液的静脉注射等。

脑脊液蛋白质的临床检测发表时间：2012-12-12T11:22:08.623Z 来源：《中外健康文摘》2012年第33期供稿作者：林丽初桂芝姚红艳李玉香李淑华[导读] 目的讨论脑脊液蛋白质检测。

方法对采集到的样本进行检测。

林丽初桂芝姚红艳李玉香李淑华（黑龙江省鸡西市人民医院 158100）【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2012）33-0207-02【摘要】目的讨论脑脊液蛋白质检测。

方法对采集到的样本进行检测。

结论脑脊液中的蛋白质绝大部分来自血浆，由于血脑屏障的存在，脑脊液中的蛋白质含量仅为血浆的0.5%左右，一般认为蛋白质不易通过血脑屏障。

正常的脑脊液的蛋白质含量约为0.15～O.45g/L，脑池液为0.10～0.25g/L，脑室液为0.05～0.15g/L，其含量与年龄成正比。

蛋白质包括白蛋白(清蛋白)和球蛋白，即使是用比较简单的电泳也可见到前白蛋白、白蛋白、α1、α2 、β、γ球蛋白等蛋白条带，而用各种免疫电泳的方法可将脑脊液中的蛋白质分成20～30个条带。

某种蛋白组分的改变对一些疾病的诊断有意义。

【关键词】脑脊液蛋白质检测脑脊液中的蛋白质绝大部分来自血浆，由于血脑屏障的存在，脑脊液中的蛋白质含量仅为血浆的0.5%左右，一般认为蛋白质不易通过血脑屏障。

正常的脑脊液的蛋白质含量约为0.15～0.45g/L，脑池液为0.10～0.25g/L，脑室液为0.05～0.15g/L，其含量与年龄成正比。

蛋白质包括白蛋白(清蛋白)和球蛋白，即使是用比较简单的电泳也可见到前白蛋白、白蛋白、α1、α2 、β、γ球蛋白等蛋白条带，而用各种免疫电泳的方法可将脑脊液中的蛋白质分成20～30个条带。

某种蛋白组分的改变对一些疾病的诊断有意义。

1 蛋白质测定对脑脊液中的蛋白质可进行定性和定量检测。

定性试验又称潘迪(Pandy)试验，原理为脑脊液中的球蛋白与饱和的石炭酸结合生成蛋白盐沉淀。

三种尿蛋白定性检测方法的比较摘要】目的：探讨分析尿蛋白定性检测的干化学法、加热乙酸法及磺基水杨酸法的三种检验方法比较。

方法：选取我院2019年3月~2019年12月期间采集的住院患者尿液标本120例为观察对象，采用干化学法、加热乙酸法及磺基水杨酸法检测尿液标本，对比三种检验方法的检查结果。

结果：三种方法阳性率比较，干化学法阳性率31.67%高于加热乙酸法和磺基水杨酸法，（P<0.05），加热乙酸法和磺基水杨酸法阳性率为22.5%和23.33%,对比差异不明显（P>0.05）。

干化学法灵敏度、误诊率高于加热乙酸法，特异度和漏诊率低于加热乙酸法，有统计学意义（P＜0.05）。

结论：三种尿蛋白检验方法各有优劣，应依据具体情况选择定性检查方法，应综合分析，慎重选择检测方法，提高结果准确性。

【关键词】尿蛋白；干化学法；加热乙酸法；磺基水杨酸法蛋白尿是肾小球疾病常见的临床表现之一，也是导致肾功能进行性减退的重要原因[1]。

尿蛋白检测是肾脏疾病诊断和治疗过程中的常规检测项目。

尿液干化学法、磺基水杨酸法和加热乙酸法作为三种尿蛋白定性方法[2]，在应用中各有所长，合理利用资源，得出最可靠的结果，现对三种尿蛋白定性方法进行对比分析如下。

1 资料与方法1.1一般资料选取我院2019年3月~2019年12月期间采集的住院患者尿液标本120例为观察对象，其中男80例，女40例，年龄16~72岁，平均年龄32.5±2.5岁。

1.2 方法一次性尿杯收集患者清洁中段晨尿，于2 h内检测完毕，应用尿液干化学分析仪及尿干化学十项试纸条和尿液干化学质控品、离心机、10 mL离心试管和玻璃试管、试管夹、酒精灯; 5%醋酸溶液和200 g /L ( 10% )磺基水杨酸试剂。

干化学法：检测过程严格遵循实验室标准操作流程，确保仪器状态良好、质控结果在控后，取新鲜未离心尿样检测并记录结果; 检测完毕后，取10 mL尿样400 g离心力离心5 min。

聊一聊脑脊液检验的方法及临床意义脑脊液属于一种细胞外液，主要是由人体的各脑室脉络从通过血液透析作用下而生成的，会充满人体的脑室系统以及脑和脊髓的蛛网膜下腔，最终一同进行血液循环，脑脊液的形成始终维护着动态平衡。

正常人的脑脊液量为120-180毫升，伴随着生物化学、免疫学检验技术的飞速发展，特别是分子生物学技术的提升，脑脊液检验开拓出更多的研究领域，为临床研究提供了有效的诊断指标。

今天就与大家聊一聊脑脊液检验方法及其临床意义，希望大家可以仔细阅读文章。

1.标本采集脑脊液检验需要进行腰椎穿刺采集标本，必要时行小脑延髓池和脑室穿刺。

由于脑脊液标本采集有一定的创伤性，临床应用中还必须严格掌握其适应证和禁忌证。

腰椎穿刺成功后应立即测定脑脊液压力。

将标本留取于3个无菌试管中立刻进行送检，化验通常不会超过一小时，容器须始终保持着无菌清洁的状态，容积也不应太大。

进行穿刺采集时，应从根本上避免把血液带入进标本中，为了不对细胞计数造成影响，当遇到高蛋白标本时，可以在其中添加少量的抗凝剂。

2.理学检验标本采集颜色：①无色。

正常的脑脊液颜色为无色透明。

除正常以外，梅毒性神经炎、慢性结核性脑膜炎、脑炎以及脊髓灰白质炎也会呈现出无色。

②红色。

红色脑脊液是由于其中混入血红细胞所造成的，并且因为出血量以及出血时间存在差异，可呈现出多种颜色，比如红色、淡红色、红褐色。

将脑脊液离心，上层溶液呈现出黄色，隐血试验阳性多数为蛛网膜下腔陈旧性出血。

上层液体无色，红细胞会沉入管底，一般为损伤病变所导致的新鲜出血。

③黄色。

黄色也被叫做黄辩证，主要显现在蛛网膜腔陈旧性出血、化脓性脑炎、椎管梗塞、流行性脑炎、重症结核性脑膜炎等。

④绿色。

绿色一般多见于绿脓杆菌、甲型链球菌性脑膜炎以及肺炎双球菌。

（5）白色：白色多见于白细胞增加所致的化脓性脑膜炎。

（6）褐色或黑色：常见于脑膜炎黑色素瘤。

透明度：正常的脑脊液呈现出透明澄清的状态，结合浑浊程度，可以将其分为清晰、微混以及浑浊。

蛋白质定量的方法蛋白质是构成生物体的重要组成部分，对于理解生物体的结构和功能具有重要意义。

因此，准确测定蛋白质的含量是许多生物科学领域研究的基础。

目前，人们已经发展出了多种方法来定量蛋白质的含量。

本文将介绍几种常用的蛋白质定量方法及其原理、优缺点和应用范围。

1. 高效液相色谱法（High-performance liquid chromatography, HPLC）HPLC是一种常用的蛋白质分离和定量方法。

它利用样品中蛋白质与流动相在分离柱中的相互作用来实现分离和定量。

HPLC方法的优点是分离效果好、重复性好、能够同时检测多个样品。

但是，该方法需要相对较高的设备要求和操作技巧，对样品预处理也较为复杂，且比较耗时。

2. 比色法比色法是一种常用的定量蛋白质的方法。

其中，低里氏试剂法和双硫键试剂法是比较常用的比色法。

低里氏试剂法是通过蛋白质与龙氏试剂（碱性铜硫脲）之间的比色反应来定量蛋白质含量。

双硫键试剂法则是通过蛋白质与2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）之间的比色反应来定量蛋白质含量。

比色法具有操作简单、设备要求低等优点，但是对于不同类型的蛋白质，比色反应的敏感度和选择性可能不同。

3. 显微波特光度法（Bradford法）Bradford法是一种常用的蛋白质定量方法，基于酒红素（Coomassie BrilliantBlue G-250）与蛋白质之间的相互作用产生的颜色变化。

蛋白质与酒红素结合后，溶液的吸收光谱发生变化，可测量溶液的吸光度来定量蛋白质含量。

该方法操作简单快捷，而且灵敏度较高，适用于常规蛋白质定量。

4. 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis, SDS-PAGE）SDS-PAGE是一种常用的蛋白质定量方法，可以通过电泳分离蛋白质并定量。

该方法通过将样品中的蛋白质在电场中进行分离，然后通过比色或者近红外成像等方法来定量。

脑脊液细胞、蛋白不会分析？这里总结好了01脑脊液压力侧卧位成人正常压力：80～180 mmH2O。

颅内压升高：> 200 mmH2O，多见于脑水肿、颅内占位性病变、脑外伤、颅内感染、脑卒中、静脉窦血栓形成、良性颅内压增高，以及心衰、肝性脑病等。

颅内压降低：< 70 mmH2O，多见于低颅压、脱水、脊髓蛛网膜下腔梗阻、脑脊液漏等。

02脑脊液常规1）颜色正常无色透明。

血性或粉红色：三管试验法- 均匀一致血色：蛛网膜下腔出血；- 依次变淡：穿刺损伤出血；- 离心后变无色：新鲜出血或副损伤；- 变黄色：陈旧性出血。

黄色：椎管梗阻（脑脊液蛋白含量过高所致）；微绿色：绿脓假单胞菌性脑膜炎、甲型链球菌性脑膜炎；乳白色：米汤样，见于化脓性脑膜炎；褐色或黑色：脑膜黑色素瘤。

2）透明度正常为清澈透明，静止不出现凝块或薄膜。

微混：乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑脓肿未破裂者；混浊：化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎；毛玻璃状：结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎；凝块：化脓性脑膜炎、脊髓灰质炎、神经梅毒；薄膜：结核性脑膜炎。

3）细胞数正常白细胞数为（0～5）x 10^6/L，主要为单个核细胞。

- 白细胞增加：见于脑脊髓膜和脑实质的炎性病变；- 白细胞轻中度增加，且以淋巴细胞为主：病毒性脑炎；- 白细胞明显增加，且以中性粒核细胞为主：急性化脓性脑膜炎；混合性细胞反应：结核性脑膜炎；大量淋巴细胞或单核细胞增加为主：亚急性或慢性感染；以嗜酸性粒细胞增加为主：脑寄生虫感染。

03脑脊液生化1）蛋白质正常值为 0.15～0.45 g/L。

脑脊液蛋白明显升高：中枢神经系统感染、格林-巴利综合征、脑肿瘤、脑出血、蛛网膜下腔出血、椎管内梗阻、脊髓压迫症、听神经瘤、糖尿病性神经根神经病、黏液性水肿、全身性感染。

脑脊液蛋白降低：腰穿或硬膜损伤引起脑脊液丢失、身体极度虚弱和营养不良者。

2）糖正常值为血糖的1/2～2/3，为 2.5～4.4 mmol/L（45～60 mg/dL），< 2.25 mmol/L 为异常。

脑脊液蛋白定性试验（潘氏法）1.实验原理脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。

2. 标本采集：2.1 标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。

2.2 标本要求：将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。

每管收集1-2毫升。

2.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。

3. 标本储存：立即送检。

4.标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：污染，久置标本。

6 试剂：5%苯酚溶液：取纯苯酚25ml,加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1-2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。

7. 操作步骤：取潘氏试剂2-3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴，衬以黑背景，立即观察结果。

8.结果判断阴性：清晰透明，不显雾状极弱阳性（±）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到弱阳性（+）：灰白色云雾状阳性（+）：白色浑浊强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀最强阳性（4+）：白色凝块9.质量控制10.临床意义10.1 脑脊液蛋白质含量增加，提示患者血脑屏障受破坏，常见于脑、脊髓及脑膜的炎症、肿瘤、出血等以及脑软化、脑退化性疾病、神经根病变和引起脑脊液循环梗阻的疾病等，当脑脊液中蛋白质在10g/L以上时，流出后呈黄色胶冻状凝固，而且还有蛋白-细胞分离现象，临床上称为Froin综合征，是蛛网膜下腔梗阻性脑脊液的特征。

10.2 含血的脑脊液可使蛋白质含量增加，为鉴别原来有无蛋白质增加，可用每微升1万个红细胞的相当增加蛋白质80mg/L来推算，最后用含血的脑脊液中实测的蛋白质量减去出血时从血中带入的蛋白质量由含红细胞数推算成的蛋白质量，即为原来脑脊液的蛋白质含量。

常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点11. 方法学评价：潘氏试验所需标本量少，灵敏度高，试剂易得，操作简便，结果易于观察，其沉淀多少与蛋白质含量成正经比，部分正常脑脊液亦可出现极弱阳性结果。