非小细胞肺癌中MTA1的表达及临床意义

MTA1基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义李定彪;钱锦贤;洪志鹏【摘要】背景与目的转移相关基因(metastasis-associated gene 1,MTA1)是近年来研究较深入的肿瘤浸润转移基因,在多种肿瘤细胞系中表达,与肿瘤的侵袭和转移密切相关.本研究目的是探MTA1基因的表达与非小细胞肺癌的浸润、转移关系.方法建立测定MTA1 mRNA表达的巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)最适条件,在半定量水平测定42例非小细胞肺癌标本癌组织、癌旁组织、正常组织和淋巴结及20例肺良性疾病组织MTA1 mRNA表达的相对水平,分析其与临床和组织病理学特征的关系.结果 MTA1 mRNA在非小细胞肺癌组织(1.50±0.26)及转移淋巴结(1.88±0.35)中的平均表达水平高于正常组织(1.02±0.17)和良性疾病组织(0.90±0.15)(P<0.01),癌组织中MTA1的表达(1.50±0.26)高于癌旁组织(1.09±0.16)(P<0.01),淋巴结转移组MTA1的表达(1.88±0.35)高于无淋巴结转移组(1.40±0.36)(P<0.01),非小细胞肺组织中MTA1 mRNA高表达率与临床分期、T 分期和N分期呈正相关关系.42例非小细胞肺癌组织中,19例MTA1 mRNA高表达,占45.2%;19例有转移的淋巴结中,16例高表达占84.2%.MTA1在癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤类型无关(P>0.05).结论 MTA1 mRNA过度表达与非小细胞肺癌浸润和转移密切相关.MTA1 mRNA的过度表达可能是评价非小细胞肺癌的恶性程度、转移的潜在指标.【期刊名称】《中国肺癌杂志》【年(卷),期】2008(011)006【总页数】5页(P775-779)【关键词】MTA1基因;肺肿瘤;肿瘤转移【作者】李定彪;钱锦贤;洪志鹏【作者单位】650031,昆明,昆明医学院第一附属医院胸外科;650031,昆明,昆明医学院第一附属医院胸外科;650031,昆明,昆明医学院第一附属医院胸外科【正文语种】中文【中图分类】R734.2在肿瘤细胞的生物学特征中，以侵袭性和转移性最为关键，也是恶性肿瘤的重要标志。

MTA1蛋白在肝癌组织中的表达及意义杨建伟【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)003【摘要】目的研究MTA1蛋白在肝癌组织中的表达及意义.方法用Western Blot 法检测57例肝癌组织及23例肝硬化组织的MTA1蛋白表达水平,并结合相关指标进行分析.结果 MTA1蛋白在有转移肝癌组织中的表达明显高于无转移肝癌组织和肝硬化组织(P＜0.01).MTA1蛋白在肝癌组织中的表达与Edmondson分级不相关(P＞0.01).结论 MTA1蛋白在肝癌组织中的表达与肝癌细胞的转移相关.%Objective To study the expression and significance of MTA 1 protein in liver cancer. Methods The Western Blot was carried out to detect the level of MTAl protein from 57 lever cancer and 23 cirrhosis. The significance was analyzed between such data and related clinical and pathological factors. Results Higher expression of MTAl protein was found in liver cancer tissues of metastasis>compared to that in not metastasis and cirrhosis tissues(P<0.01). The level of MTAl protein expression in different pathological types were not significantly correlated to Edmondson stages of liver cancer(P>0.01). Conclusion The higher expression of MTAl protein may be correlated to the metastasis of liver cancer.【总页数】2页(P264-265)【作者】杨建伟【作者单位】重庆市綦江县人民医院,401421【正文语种】中文【相关文献】1.磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和磷脂酰肌醇蛋白多糖-5在人肝癌组织中的表达及意义[J], 念莹;宋桂先;王琳琳;冯国营;王琨;孙海军;王东2.肝细胞癌患者血清和肝癌组织中T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3表达及其意义[J], 李林株;郭灵敏;杜佩铭;康靖华;吴海彬3.G蛋白信号调节蛋白2在肝癌组织中的表达及临床意义 [J], 刘鹏;李永宁;潘耀振4.凋亡抑制蛋白及β-连环素蛋白在原发性肝癌组织中的表达及临床意义 [J], 曾斌;廖爱军;阳学风5.DNA-PKcs蛋白和MGMT蛋白在肝癌组织中的表达及意义 [J], 王万鹏;宋德霸;赵龙栓因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

MALAT-1、FoxM1和NGF在非小细胞肺癌种表达及临床意义摘要：非小细胞肺癌（NSCLC）是一种高发病率和高死亡率的肺癌。

MALAT-1、FoxM1和NGF等蛋白在NSCLC的发生和发展中发挥着重要的作用。

本研究旨在探讨MALAT-1、FoxM1和NGF在NSCLC中的表达及其临床意义。

实验结果发现，NSCLC患者中这三种蛋白的表达量均显著高于正常人群。

同时，MALAT-1表达水平与NSCLC的临床分期和淋巴结转移呈正相关，FoxM1表达水平与恶性程度相关，NGF表达水平与预后呈负相关。

本研究结果表明MALAT-1、FoxM1和NGF可能作为NSCLC的潜在诊断和治疗靶点，为NSCLC的个性化治疗提供了一定的理论基础。

关键词：非小细胞肺癌，MALAT-1，FoxM1，NGF，表达水平，临床意义Abstract: Non-small cell lung cancer (NSCLC) is ahighly prevalent and lethal cancer. Proteins such as MALAT-1, FoxM1, and NGF play important roles in the occurrence and development of NSCLC. This study aimsto investigate the expression and clinicalsignificance of MALAT-1, FoxM1, and NGF in NSCLC. The experimental results found that the expression levels of these three proteins in NSCLC patients were significantly higher than those in normal individuals.At the same time, the expression level of MALAT-1 was positively correlated with the clinical staging and lymph node metastasis of NSCLC, the expression levelof FoxM1 was related to malignancy, and the expression level of NGF was negatively correlated with prognosis. The results of this study indicate that MALAT-1, FoxM1, and NGF may serve as potential diagnostic and therapeutic targets for NSCLC, providing a theoretical basis for personalized treatment of NSCLC.Keywords: Non-small cell lung cancer, MALAT-1, FoxM1, NGF, Expression levels, Clinical significance。

胃癌组织中MAT1及MCM2表达的临床病理意义王艳华;付华珍;傅爱荣【摘要】目的探讨胃癌组织中相关基因1(MAT1)以及微小染色体维持蛋白2(MCM2)的表达及其临床意义.方法选取95例胃癌患者,采用免疫组化法检测所有患者癌组织以及癌旁组织MAT1、MCM2的表达情况,分析胃癌组织表达中MAT1、MCM2与患者各临床指标的相关性.结果①胃癌组织表达MAT1、MCM2的阳性率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).②MAT1表达与年龄、性别、体质指数、肿瘤分化程度无显著相关性(P＞0.05),与浸润深度、淋巴结转移、远处转移有显著相关性(P＜0.05).③MCM2表达与年龄、性别、体质指数、远处转移无显著相关性(P＞0.05),与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P＜0.05).结论胃癌组织中MAT1、MCM2表达与其临床指标密切相关,从而进一步影响患者的预后.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2016(031)011【总页数】3页(P1770-1772)【关键词】胃癌;转移相关基因1;微小染色体维持蛋白2【作者】王艳华;付华珍;傅爱荣【作者单位】330029 江西省肿瘤医院;336400 上高县中医院;330029 江西省肿瘤医院【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是目前临床上最常见的消化系统恶性肿瘤之一，其发生是1个多阶段、进行性的过程，但是该过程中的具体机制尚未完全明确，因此胃癌发生、发展的分子机制一直以来就是胃癌肿瘤学研究的重要方向[1-2]。

本研究即旨在探讨胃癌组织表达转移相关基因1(MAT1)以及微小染色体维持蛋白2(MCM2)的临床病理意义，现报告如下。

1.1 研究对象选取2012年9月至2015年11月江西省肿瘤医院收治的95例胃癌患者作为研究对象，所有患者均经病理组织学检查确诊，且既往未接受针对胃癌的任何治疗，其中男性63例，女性32例；年龄27～65岁，平均(59.3±14.2)岁；体质指数22.4～29.7 kg/m2，平均(24.6±4.3)kg/m2；分化程度：低分化21例、中分化29例、高分化45例；浸润深度：T1～T2 30例、T3～T4 65例；淋巴结转移：阴性56例、阳性39例；远处转移：阴性77例、阳性18例。

㊃论 著㊃ d o i :10.3969/j.i s s n .1671-8348.2021.09.003网络首发 h t t ps ://k n s .c n k i .n e t /k c m s /d e t a i l /50.1097.R.20201210.1314.011.h t m l (2020-12-11)MT A 1通过H I F -1α上调MT D H 基因表达促进肺癌细胞增殖与活力*杨淑慧1,周 琳2,李银珍1,廖罗飞1,谭彩云1,丁 宇1,杜日昌1(汕头大学医学院附属粤北人民医院:1.病理科;2.胸外科,广东韶关512025) [摘要] 目的 探讨异黏蛋白(MT D H )和转移相关蛋白1(MT A 1)在肺癌中的表达相关性及调控机制㊂方法 通过免疫组织化学㊁实时荧光定量P C R ㊁W e s t e r n b l o t 检测50份肺癌标本肿瘤组织与癌旁组织中MT -D H ㊁MT A 1的表达水平并分析二者的相关性㊂构建MT A 1基因过表达及干涉载体,转染A 549㊁S B C -5细胞,检测其对MT D H 表达及细胞活力的影响㊂富集乙酰化蛋白后,检测MT A 1对MT D H 乙酰化水平的影响,进一步分析MT A 1对MT D H 的调控机制㊂结果 肺癌组织中MT A 1㊁MT D H 蛋白及m R N A 表达水平均明显高于癌旁组织,二者表达呈正相关(r 2=0.8093㊁0.7741㊁0.5519)㊂过表达MT A 1上调MT D H ㊁增殖细胞核抗原(P C N A )蛋白的表达(P <0.05),增加肿瘤细胞的活力;而抑制MT A 1则下调MT D H ㊁P C N A 蛋白表达(P <0.05),抑制肿瘤细胞活力㊂MT A 1不通过调控乙酰化修饰上调MT D H 的表达(P >0.05)㊂过表达MT A 1可同时上调MT D H 和缺氧诱导因子-1α(H I F -1α)的表达(P <0.05),给予H I F -1α抑制剂C A Y 10585后,MT D H 的表达水平被抑制㊂结论 MT A 1和MT D H 在肺癌中高表达并呈正相关㊂MT A 1通过上调H I F -1α间接促进MT D H 表达㊂[关键词] 肺肿瘤;异黏蛋白;转移相关蛋白1;乙酰化;缺氧诱导因子-1α[中图法分类号] R 734.2[文献标识码] A [文章编号] 1671-8348(2021)09-1451-05M T A 1p r o m o t e s p r o l i f e r a t i o n a n d v i a b i l i t y i n l u n g ca n c e r c e l l s v i a u p -r e g u l a t i n g M T D H g e n e e x p r e s s i o nb y HI F -1α*Y A N G S h u h u i 1,Z H O U L i n 2,L I Y i n z h e n 1,L I A O L u o f e i 1,T A N C a i y u n 1,D I N G Y u 1,D U R i c h a n g 1(1.D e p a r t m e n t o f P a t h o l o g y ;2.D e p a r t m e n t o f T h o r a c i c S u r g e r y ,A f f i l i a t e d N o r t h G u a n g d o n g P e o p l e 's H o s p i t a l ,M e d i c a l C o l l e g e o f S h a n t o u U n i v e r s i t y ,S h a o g u a n ,G u a n g d o n g 512025,C h i n a ) [A b s t r a c t ] O b je c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e x p r e s s i o n c o r r e l a t i o n a n d r e g u l a t o r y m e c h a n i s m of m a t a d e r i n (MT D H )a n d m e t a s t a s i s a s s o c i a t e d p r o t e i n 1(MT A 1)i n l u ng c a n c e r .M e th o d s T h e e x p r e s si o n l e v e l s o f MT D H a n d MT A 1i n t u m o r t i s s u e s a n d p a r a c a n c e r o u s t i s s u e s o f 50l u n g c a n c e r s a m p l e s w e r e d e t e c t e d b yt h e i mm u m o h i s t o c h e m i s t r y ,r e a l -t i m e f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v e P C R a n d W e s t e r n b l o t .S u b s e q u e n t l y,t h e c o r r e l a -t i o n b e t w e e n MT D H a n d MT A 1e x p r e s s i o n w a s a n a l y z e d .T h e o v e r e x pr e s s i o n a n d i n t e r f e r e n c e v e c t o r s o f MT A 1g e n e w e r e c o n s t r u c t e d a n d t r a n s f e c t e d i n t o A 549a n d S B C -5c e l l s ,t h e i r e f f e c t s o n MT D H e x pr e s s i o n a n d c e l l v i a b i l i t y w e r e d e t e c t e d .A f t e r e n r i c h i n g a c e t y l a t e d p r o t e i n ,t h e e f f e c t o f MT A 1o n t h e a c e t yl a t e d l e v e l o f MT D H w a s d e t e c t e d ,a n d t h e r e g u l a t o r y m e c h a n i s m o f MT A 1o n MT D H w a s f u r t h e r a n a l yz e d .R e s u l t s T h e r e l a t i v e e x p r e s s i o n l e v e l s o f p r o t e i n a n d m R N A o f MT A 1a n d MT D H i n l u n g ca n c e r t i s s u e s w e r e s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h o s e i n p a r a c a n c e r o u s t i s s u e s ,a n d t h e i r e x pr e s s i o n s s h o w e d t h e p o s i t i v e c o r r e -l a t i o n (r 2=0.8093,0.7741,0.5519).T h e MT A 1o v e r e x p r e s s i o n u p -r e g u l a t e d t h e MT D H a n d p r o l i f e r a t i n gn u c l e a r a n t i g e n (P C N A )e x p r e s s i o n (P <0.05)a n d i n c r e a s e d t h e v i a b i l i t y o f t u m o r c e l l s ;w h i l e i n h i b i t i n gMT A 1d o w n -r e g u l a t e d t h e MT D H a n d P C N A e x p r e s s i o n (P <0.05)a n d i n h i b i t e d t h e t u m o r c e l l v i a b i l i t y .MT A 1d i d n o t u p -r e g u l a t e t h e MT D H e x p r e s s i o n b y r e g u l a t i n g t h e a c e t y l a t i o n m o d i f i c a t i o n (P >0.05).T h e MT A 1o v e r e x p r e s s i o n c o u l d s i m u l t a n e o u s l y u p -r e g u l a t e t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f MT D H a n d h y po x i a -i n d u c i b l e f a c t o r 1α(H I F -1α)(P <0.05)a n d a f t e r g i v i n g H I F -1αi n h i b i t o r C A Y 10585,t h e MT D H e x pr e s s i o n l e v e l w a s i n h i b i t e d .C o n c l u s i o n MT A 1a n d MT D H a r e h i g h l y e x p r e s s e d i n l u n g c a n c e r a n d s h o w t h e p o s i t i v e c o r r e l a -t i o n .MT A 1i n d i r e c t l y p r o m o t e s t h e e x p r e s s i o n o f MT D H b y u p -r e g u l a t i n g HI F -1α.[K e y w o r d s ] l u n g n e o p l a s m s ;m a t a d e r i n ;m e t a s t a s i s a s s o c i a t e d p r o t e i n 1;a c e t y l a t i o n ;h y p o x i a -i n d u c i b l e f a c t o r 1α1541重庆医学2021年第50卷第9期*基金项目:2019年广东省韶关市卫生计生科研计划项目(Y 19038);广东省医学科学技术研究基金项目(B 2019221)㊂ 作者简介:杨淑慧(1985-),主治医师,硕士,主要从事肿瘤发病机制及分子靶向治疗方面的研究㊂肿瘤转移相关蛋白1(MT A1)在肿瘤增殖㊁转移和侵袭等方面发挥重要的调控作用,被视为肿瘤发生㊁发展过程中的关键分子,其主要作用机制是通过募集组蛋白去乙酰化酶复合物于靶基因的启动子序列进行转录水平的调控[1]㊂而最早发现于乳腺癌患者的异黏蛋白(MT D H),又名星形胶质细胞上调基因1(A E G-1),也与肿瘤发生㊁侵袭㊁转移关系密切,并在乳腺癌㊁肝癌㊁前列腺癌等肿瘤中呈现高表达,MT D H 表达水平与肿瘤病理分级㊁分期㊁复发呈正相关[2-4]㊂然而,MT A1和MT D H在肺癌中表达水平及二者之间是否存在相关性,目前尚不明确,本研究围绕上述问题展开研究㊂1资料与方法1.1一般资料本研究所采用组织标本来源于2018年1月至2019年12月于本院胸外科确诊肺癌并行手术切除的Ⅰ~Ⅲ期癌组织石蜡包埋固定标本,选取50份肺癌标本肿瘤组织与癌旁组织(距瘤体边缘大于3c m),其中腺癌32例,鳞癌16例,小细胞肺癌2例㊂1.2方法1.2.1细胞株及主要试剂(1)细胞株:肺腺癌细胞系A549购自中科院上海细胞库,小细胞肺癌细胞系S B C-5购自A T C C细胞库㊂MT A1干扰序列(s i R N A)㊁MT A1过表达质粒由上海吉玛基因公司设计合成㊂(2)主要试剂:R N A组织保存液㊁组织蛋白抽提试剂盒㊁二喹啉甲酸(B C A)法蛋白浓度测定试剂盒㊁脂质体3000㊁蛋白质免疫沉淀法试剂盒均购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司; R N A i s o试剂㊁P r i m e S c r i p t R T M a s t e r M i x,T B G r e e n P r e m i x E x T a qⅡ购自日本T a K a R a公司;抗-MT D H 抗体购自英国A b c a m公司;抗-MA T1㊁抗-缺氧诱导因子-1α(H I F-1α)㊁抗-增殖细胞核抗原(P C N A)㊁抗-β-a c t i n抗体购自上海帛龙生物科技公司;二抗及二氨基联苯胺(D A B)染色液购自罗氏诊断产品(上海)有限公司;胎牛血清购自美国G i b c o公司;C C K-8试剂购自碧云天生物技术公司;抑制剂C A Y10585购自英国A b c a m公司㊂1.2.2免疫组织化学(I H C)检测利用切片机制成厚度约4μm的石蜡切片备用㊂将石蜡切片进行二甲苯脱蜡㊁梯度乙醇复水处理,采用柠檬酸盐缓冲液微波加热法进行抗原修复㊂3%过氧化氢灭活处理后经羊血清封闭4h后,抗体(MT A1抗体㊁MT D H抗体)稀释后4ħ孵育过夜㊂漂洗后二抗孵育2h,行D A B染色,并复染细胞核,显微镜下拍照㊂I H C染色评分根据染色程度给予0~5分,每张切片由3名人员独立评分,取平均分进行统计学分析㊂1.2.3 R N A提取及实时荧光定量P C R检测所取组织标本置于R N A组织保存液中,避免R N A降解㊂转移至实验室后采用化学试剂法提取总R N A,并采用逆转录试剂盒将R N A逆转录为c D N A,具体操作参见说明书进行㊂采用荧光嵌合P C R法检测目的基因的相对表达水平㊂1.2.4蛋白质提取与蛋白W e s t e r n b l o t实验组织蛋白抽提试剂加入1%的蛋白酶和磷酸酶抑制剂,4ħ下匀浆并离心保留上清液㊂B C A法测定蛋白浓度,并稀释蛋白浓度至2μg/μL㊂蛋白煮沸进行变性处理,然后进行蛋白电泳㊁转膜㊁封闭㊁抗体孵育㊁漂洗后行化学发光显色㊂1.2.5细胞培养与转染A549㊁S B C-5用含10%胎牛血清的D M E M-F12培养基进行培养㊂当细胞密度达到80%~90%时进行细胞转染,s i R N A和过表达质粒转染条件按照脂质体3000说明书进行处理,转染48h后收集细胞进行后续实验㊂1.2.6细胞活力测定收集转染48h后的各组细胞,接种至96孔板,调整细胞浓度约每孔5ˑ103个细胞,每组设4个复孔,将培养板置于37ħ,5%C O2的培养箱培养24h,每孔中加入10μL的C C K-8试剂后孵育2h,用酶标仪记录450n m波长处吸光度㊂1.2.7乙酰化蛋白的富集采用抗乙酰化蛋白的抗体富集样本中所有乙酰化的蛋白,然后采用MT D H抗体进行检测,得到乙酰化的MT D H水平㊂乙酰化蛋白的免疫沉淀采用磁珠法进行,具体操作参考说明书㊂1.3统计学处理实验数据采用G r a p h p a d P r i s m8.0统计软件进行分析,相关性分析采用线性回归分析,两组间差异比较采用t检验,多组间比较采用方差分析加每组间差异分析,以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1两组标本组织中MT A1㊁MT D H表达水平比较I H C染色结果显示,MT A1㊁MT D H在癌旁组织表达水平较低,而在癌组织中高表达,且二者表达水平存在正相关(r2=0.8093),见图1㊂实时荧光定量P C R检测结果显示,癌组织中MT A1㊁MT D H的m R N A表达水平明显增高(P<0.001),且二者的m R N A表达水平存在正相关(r2=0.7741),见图2㊂W e s t e r n b l o t实验显示,MT A1㊁MT D H在癌组织中高表达,且二者的表达水平正相关(r2=0.5519),见图3㊂2.2肺癌细胞系中MT A1对MT D H表达水平的影响W e s t e r n b l o t实验结果显示,在A549和S B C-5中,转染MT A1干扰序列抑制MT A1表达的同时也引起MT D H㊁P C N A蛋白表达下降,见图4㊂C C K-8实验结果显示,转染MT A1干扰序列后的A549细胞活力下降㊂相反,转染过表达MT A1质粒的A549和S B C-5细胞,MT A1表达上调的同时,MT D H和P C-2541重庆医学2021年第50卷第9期N A 的表达均呈现上调,见图5㊂C C K -8实验结果显示,抑制MT A 1表达后A 549细胞活力受抑制,过表达MT A 1时A 549细胞活力增强,见图6㊂图1 两组标本组织中M T A 1㊁M T D H 的表达水平及肺癌组织中M T A 1㊁M T D H表达水平相关性分析a:P <0.001,与癌旁组织比较㊂图2 两组标本组织中M T A 1㊁M T D H m R N A表达水平及肺癌组织中二者表达水平相关性分析a:P <0.05,与癌旁组织比较㊂图3 W e s t e r n b l o t 检测肺癌组织中M T A 1和M T D H 的表达水平及肺癌组织中二者表达水平的相关性2.3 MT A 1通过非直接乙酰化修饰途径上调MT -D H 的表达在A 549细胞系中过表达MT A 1后MT D H 表达上调,但W e s t e r n b l o t 实验分析显示,过表达MT A 1并未影响MT D H 的乙酰化水平,见图7㊂2.4 MT A 1通过H I F -1α上调MT D H 的表达W e s t e r n b l o t 实验结果显示,过表达MT A 1引起A 549细胞的H I F -1α表达上调,而抑制MT A 1引起A 549细胞的H I F -1α表达下调㊂给予H I F -1α通路抑制剂C A Y 10585(5μm o l /L ),结果显示C A Y 10585可以减弱MT A 1对MT D H 表达的促进作用,见图8㊂ a :P <0.05,b:P <0.01,与s i -MT A 1比较㊂图4 转染s i -M T A 1后肺癌细胞系A 549㊁S B C -5中M T A 1及P C N A ㊁M T D H 蛋白表达水平3541重庆医学2021年第50卷第9期a :P <0.05,b:P <0.01,与V e c -M T A 1比较㊂图5 肺癌细胞系A 549㊁S B C -5转染V e c -M T A 1后M T A 1㊁M T D H 和P C N A 蛋白表达水平a :P <0.05,b :P <0.01,与s i -MT A 1比较,c :P <0.01,d :P <0.05,与Ve c -MT A 1比较㊂图6 C C K -8方法检测干预A 549细胞中M T A 1基因表达对细胞活力的影响图7 A 549细胞中M T A 1对M T D H乙酰化水平的影响a :P <0.05,与V e c -M T A 1比较;b :P <0.05,与s i -MT A 1比较;c :P <0.01,与C A Y 10585比较;d:P <0.05,与V e c -M T A 1+C A Y 10585比较㊂图8 C A Y 10585及M T A 1对M T D H 表达的影响3 讨 论MT A 1㊁MT D H 作为促癌蛋白 在多种恶性肿瘤,如肺癌㊁结肠癌㊁乳腺癌㊁胶质瘤和头颈鳞状细胞癌中被充分证明㊂肿瘤中MT A 1㊁MT D H 表达水平的异常可能介导了肿瘤的增殖㊁进展和对放化疗的敏感性[5-7]㊂本研究收集了50份手术切除的肺癌组织标本,经I H C 染色㊁实时荧光定量P C R 和W e s t e r n b l o t 实验证实了肺癌组织中MT A 1㊁MT D H 表达上调,且二者的表达呈正相关㊂细胞学实验证实MT A 1正向调控MT D H 在肺癌细胞系中的表达,然而这种调控作用并非通过直接乙酰化调节实现的,而是可能通过增强H I F -1α的表达,间接上调了MT D H 的表达㊂本研究证实了MT A 1㊁MT D H 在肺癌中的调控关系,发现MT A 1通过H I F -1α-MT D H 通路促进肺癌细胞增殖的作用,可为后续肺癌的靶点特异性治疗打下基础㊂4541重庆医学2021年第50卷第9期基因表达调控是通过募集大分子调控复合物到特定的基因位点修饰D N A和组蛋白的表观调控位点,进而影响染色质结构实现㊂MT A1是核小体重构和去乙酰酶复合物(N u R D)的一个重要组成部分[8]㊂MT A1包括4个特征性的结构域㊁一系列相互作用的模体和部分无序的区域㊂E L M2-S A N T域是MT A1的最具特征性的区域之一,招募组蛋白去乙酰酶1 (H D A C1)并磷酸肌醇存在的情况下激活该酶[9]㊂MT A蛋白调节一系列癌症促进过程,包括侵袭㊁上皮间质转化㊁D N A损伤反应㊁血管生成㊁转移和耐药[6]㊂从机制上讲,MT A蛋白在癌细胞中的这些不同作用主要是通过调控靶基因表达和(或)调控MT A相互作用蛋白的活性而实现㊂如MT A1的上调通过刺激转化生长因子β(T G F-β)㊁E r b B2和转录激活因子3 (S T A T3)信号通路,或者作为核内原癌基因(c-M y c)介导转化的下游效应因子及拮抗肿瘤抑制因子p53等途径促进肿瘤发生过程[10-11]㊂本研究结果发现, MT A1在肺癌中高表达,也提示MT A1可能是肺癌发生的关键调控分子,并且体外实验也证实抑制MT A1可明显抑制肺癌细胞的增殖和活力㊂MT D H是肿瘤研究中的热点分子,因为其在多种肿瘤中高表达而在正常组织中表达量很低,提示MT D H参与肿瘤的发生并且具有成为肿瘤生物标志物的潜能[12]㊂另外,有研究对比分析了不同临床分期的肿瘤中MT D H的表达水平,结果提示MT D H的高表达与增殖㊁转移和预后不良密切相关[13]㊂功能分析研究发现,MT D H的表达受多种信号通路调控,其中较为关键的是磷脂酰肌醇3激酶(P I3K)-蛋白激酶β(A k t)和糖原合成酶激酶3β(G S K-3β)通过r a s信号通路激活经典的原癌基因c-M y c,随后导致MT D H 的高表达[14]㊂另有研究发现,MT D H的高表达还与肿瘤的化疗药物耐药有关,人为抑制MT D H的表达能增强肿瘤细胞对顺铂㊁培美曲塞等化疗药物的敏感性[15-16]㊂MT A1与MT D H相关性的研究多集中于下游共有的多个靶基因调控,二者具有相同的下游信号通路,到目前为止,MT A1直接调控MT D H基因表达的证据尚无报道㊂本研究分别通过抑制和过表达肺癌细胞系A549和S B C-5中MT A1的表达,检测MT-D H㊁P C N A表达水平,结果显示MT A1对MT D H㊁P C N A的表达具有正向调控作用㊂本研究进一步验证这种调控作用是否通过直接乙酰化修饰实现,实验结果显示,MT A1对MT D H的乙酰化水平没有影响㊂有研究发现,MT A1可通过H D A C1去乙酰化H I F-1α,从而增强H I F-1α的稳定性和活性[17]㊂本研究在A549细胞内调控MT A1的表达后,发现H I F-1α也出现相应的变化,提示在A549肺癌细胞系中MT A1也能调控H I F-1α的表达㊂有研究证实,MT D H的表达受H I F-1α的调控,MT D H介导了H I F-1α引起的肿瘤对缺氧的适应性改变[18]㊂因此,本研究在A549细胞系中进行验证,结果发现阻断H I F-1α,消除了MT A1对MT D H的上调作用,提示MT A1可能通过H I F-1α间接调控MT D H的表达,解释了在不同肺癌标本中MT A1和MT D H的表达增加且存在正相关性㊂综上所述,MT A1和MT D H在肺癌组织表达上调且存在正相关,而内在的调控通路可能是通过H I F-1α介导的㊂MT A1-H I F-1α-MT D H通路可能在肺癌的发生中起关键的调控作用,可能成为未来肿瘤治疗的靶点㊂参考文献[1]I S H I K AWA M,O S A K I M,Y AMA G I S H I M,e t a l.C o r r e l a t i o n of t w o d i s t i n c t m e t a s t a s i s-a s-s o c i a t e d p r o t e i n s,MT A1a n d S100A4,i n a ng i o-g e n e s i s f o r p r o m o t i n g t u m o r g r o w t h[J].O n c o-g e n e,2019,38(24):4715-4728.[2]WA N L,L U X,Y U A N S,e t a l.MT D 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荧光定量PCR检测非小细胞肺癌中MTA1和E-cadherin的表达及意义梁祥森;陈铭伍;冼磊【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2012(052)040【摘要】目的探讨肿瘤转移相关蛋白家族1(MTA1)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义.方法采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)联合检测40例NSCLC组织、12例癌旁组织、12例良性病变肺组织中MTA1和E-cadherin mRNA表达的相对水平,分析他们的表达与临床组织病理学特征的关系.结果 MTA1 mRNA在NSCLC中平均表达水平高于癌旁和良性疾病组织(P＜0.05)；E-cadherin mRNA在NSCLC中平均表达水平低于癌旁和良性疾病组织(P＜0.05)；在NSCLC中MTA1和E-cadhefin的表达呈负相关(r=-0.561,P＜0.05)；在癌旁组织和良性疾病组织中MTA1和E-cadhefin的表达无统计学差异(P＞0.05)；MTA1和E-cadhefin mRNA表达水平与淋巴结转移及临床分期有关(P＜0.05).结论 MTA1过度表达及E-cadhefin表达的下调或缺失与NSCLC浸润和转移呈正相关,联合检测NSCLC中MTA1和E-cadhefin的表达,可用于预后评估.%Objective To explore the expression of MTA1 and E-cadherin genes and their significance in human non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods Employ the real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Q-PCR) to examine the expression of MTA1 and E-cadherin mRNA in 40 samples of NSCLC tissues, 12 samples of paracarci-noma tissues and 12 samples of benign lung tissues, and to evaluate the relativity of MTA1 , E-cadherin expression and NSCLC clinical pathologic features. Results The average expression level of MTA1 mRNA in NSCLC was higher than that in the paracarcinoma tissues and the benign lesions tissue (P < 0. 05). The average expression level of E-cadherin in NSCLC was lower than that in the paracarcinoma tissue and the benign lesions tissue (P < 0. 05). In NSCLC tissues the expression of MTA1 and E-cadherin was negatively correlated (r=-0.561, P < 0. 05). There was no statistical difference in the MTA1 and E-cadherin expression between the cancer and benign disease tissue. The expression of MTA1 and E-cadherin mRNA was closely relevant to lymph node metastasis and the clinical stages (P <0. 05). Conclusions The overex-pression of the MTA1 gene and the loss or lack expression of the E-cadherin were correlated with invasion and metastasis of NSCLC. Both of the expression of MTA1 and E-cadherin could work together for prognosis assessment.【总页数】4页(P4-7)【作者】梁祥森;陈铭伍;冼磊【作者单位】广西医科大学第一附属医院,南宁530021;广西医科大学第一附属医院,南宁530021;广西医科大学第一附属医院,南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.MTA1与E-cadherin在乳腺癌中的表达及临床意义 [J], 马晓艳;张蕾;高冬玲;赵阿红;陶识博;陈妍琼2.非小细胞肺癌中MTA1的表达及临床意义 [J], 范垂锋;毛晓韵;王恩华3.MTA1基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义 [J], 李定彪;钱锦贤;洪志鹏4.实时荧光定量PCR检测非小细胞肺癌组织中SP70及MTA1的表达及意义 [J], 梁祥森;陈波;胡应学;冯震;梁运宁5.MTA1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 [J], 刘晨旭; 周斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

α-catenin、CTNNAL1在非小细胞肺癌中的表达及
意义的开题报告
一、研究背景
非小细胞肺癌是最常见的肺癌类型之一，许多基因在其发病机制中起着重要作用。

其中，α-catenin和CTNNAL1作为细胞黏附蛋白，对细胞粘着和信号转导起着重要作用。

先前的研究表明，它们在许多肿瘤中具有失活或过度表达的特点。

然而，它们在非小细胞肺癌中的表达和功能仍需进一步研究。

二、研究目的
探究α-catenin和CTNNAL1在非小细胞肺癌中的表达情况及其对该疾病的影响，为非小细胞肺癌的诊断和治疗提供理论依据。

三、研究内容
1.研究对象：非小细胞肺癌患者及相应正常人群。

2.样本收集：手术切除的癌组织和正常组织样本。

3.实验方法：
（1）免疫组化法检测α-catenin和CTNNAL1的表达情况；
（2）Western blot检测α-catenin和CTNNAL1在肺癌和正常组织中的蛋白表达水平；
（3）统计学分析α-catenin和CTNNAL1在非小细胞肺癌中的表达情况及其与临床病理特征的相关性。

四、研究意义
α-catenin和CTNNAL1是细胞黏附蛋白，在许多肿瘤中具有不同的表达和作用，但在非小细胞肺癌中的表达和功能仍不清楚。

本研究旨在
探究其在肺癌中的表达和相关影响，有助于深入了解该疾病的发病机制，为非小细胞肺癌的治疗和预后评估提供新的靶点和诊断标志物。