铁氰化钾_三氯化铁光度法测定蔬菜中还原糖含量_黄诚

植物中还原糖含量测定
植物中的还原糖是指一类可以还原铜离子的碳水化合物，主要包括葡萄糖、果糖和蔗糖等。

在植物中，还原糖是一种重要的营养物质，也是植物代谢的重要产物。

测定植物中的还原糖含量对于了解植物的生长发育和代谢状态具有重要意义。

测定植物中的还原糖含量通常采用硫酸酚法或硫酸亚铁法。

硫酸酚法是将植物样品加入酚和硫酸，经过加热后，还原糖与酚反应生成有色产物，然后用比色法测定产物的吸光度，从而计算出还原糖的含量。

硫酸亚铁法是将植物样品加入硫酸亚铁溶液，还原糖与亚铁离子反应生成蓝色络合物，然后用比色法测定产物的吸光度，计算出还原糖的含量。

通过测定植物中的还原糖含量，可以了解植物的生长发育和代谢状态。

在植物生长过程中，还原糖的含量会受到光照、温度、水分等环境因素的影响，因此还原糖含量的变化可以反映植物对环境的适应能力。

此外，还原糖也是植物的能量来源之一，其含量的变化还可以反映植物的养分代谢和能量代谢状态。

总之，测定植物中的还原糖含量对于研究植物生长发育和代谢
具有重要意义，可以为植物生理生态学研究提供重要的数据支持。

同时，还原糖的含量变化也可以为农业生产提供参考，帮助农民更好地管理和调控作物的生长。

因此，加强对植物中还原糖含量的测定研究具有重要的理论和应用价值。

铁氰化钾-三氯化铁光度法测定蔬菜中还原糖含量黄诚;尹红;李地才【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2011(047)010【摘要】于氢氧化钠碱性溶液中，铁氰化钾试剂与样品溶液中的还原糖反应（在沸水浴中加热10min），定量生成亚铁氰化钾，此溶液冷却至室温，并用0．1mol·L^-1盐酸溶液酸化至pH3．5～4．0后随即加入三氯化铁溶液，经5min后生成普鲁士蓝。

在波长680nm处用1cm吸收皿对试剂空白测定其吸光度，还原糖的质量浓度在0．8～4．0mg·L^-1范围内与吸光度呈线性关系，其摩尔吸光率为3．4×10^4L·mol^-1·cm^-1。

应用此方法测定了3种蔬菜样品中的还原糖含量，所得测定值与兰～埃农法测得值相符。

测定值的相对标准偏差（n=5）均小于2．5％，回收试验所测得回收率在99．7％～100．1％之间。

【总页数】3页(P1143-1145)【作者】黄诚;尹红;李地才【作者单位】吉首大学食品科学研究所,吉首416000;吉首大学食品科学研究所,吉首416000;吉首大学食品科学研究所,吉首416000【正文语种】中文【中图分类】O657.32【相关文献】1.铁氰化钾分光光度法测定白砂糖中的还原糖分 [J], 黄伟干;虞建梅2.DNS光度法测定风味鱿鱼中淀粉、还原糖和蔗糖的含量 [J], 郭有辉;周娟;胡露;彭伟3.铁氰化钾法测定药用麦芽糊精中还原糖含量 [J], 陈皓;周冰;黄桂琴4.铁氰化钾-三氯化铁光度法测定药物中青霉胺 [J], 温欣荣;涂常青5.铁氰化钾分光光度法测定药物中维生素B_1含量 [J], 李艳霞;贾华丽;谢建平;张竞争因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

白菜中还原糖含量的测定1. 概述白菜是一种常见的蔬菜，在人们的饮食中占有重要位置。

白菜中的糖分含量一直是研究的热点之一，因为糖分不仅影响着白菜的口感，还与其营养价值密切相关。

本文将介绍一种测定白菜中还原糖含量的方法。

2. 实验材料与仪器•实验材料：新鲜白菜样品、去离子水、盐酸、硝酸银溶液。

•仪器设备：电子天平、分析天平、离心机、pH计、加热设备、滤纸、强光源。

3. 实验步骤3.1 样品制备1.将新鲜白菜样品洗净，去除泥沙和外皮，然后切碎成小段。

2.取适量的白菜样品，称重记录质量。

3.将白菜样品加入研磨杯中，加入适量的去离子水，用搅拌器搅拌均匀，制备成白菜汁。

3.2 还原糖含量的测定1.取适量白菜汁样品，用离心机进行离心，离心后的上清液即为待测样品。

2.取一定体积的待测样品，加入10%盐酸中，进行酸水解。

酸水解的条件可根据实际情况进行优化，一般在加热和保温的条件下进行。

3.将酸水解后的样品进行冷却，然后用去离子水稀释至一定体积。

4.取一定体积的稀释液，加入硝酸银溶液中，置于强光源下进行观察，记录溶液颜色的变化或出现的沉淀。

5.重复实验步骤3和4，取不同体积的稀释液进行测定，建立还原糖含量与溶液颜色的关系曲线。

6.根据样品的稀释液的颜色变化，查找曲线，确定还原糖的含量。

4. 实验注意事项1.实验操作过程要严格遵守实验室安全规定，注意个人安全。

2.白菜汁样品的制备过程中，要充分研磨碎片，保证样品均匀。

3.酸水解的过程中要控制好加热温度和时间，避免样品的糖分过度分解。

4.鉴于实验的敏感性和复杂性，建议在实验室老师或专业人员的指导下进行。

5. 结论使用盐酸进行酸水解的方法可以有效地提取白菜中的还原糖。

通过加入硝酸银溶液观察溶液的颜色变化，可以判断白菜样品中还原糖的含量。

这种测定方法简单、快速、准确，适用于白菜等蔬菜中还原糖含量的测定。

参考文献[1] Li, X., et al. (2019). Determination of reducing sugars in Chinese cabbage by high-performance liquid chromatography. Journal of Food Science and Technology, 56(3), 1200–1206.。

课程实验设计计划课程名称：《土壤农化分析与环境监测》实验名称：蔬菜中还原糖、抗坏血酸及总酸度的测定年级专业： 10级农业资源与环境小组成员：指导教师：杨XX2013年5月13日目录一、还原糖测定................................... 错误！未定义书签。

1.目的意义....................................... 错误！未定义书签。

2.测定方法....................................... 错误！未定义书签。

3.试验原理....................................... 错误！未定义书签。

4.仪器试剂....................................... 错误！未定义书签。

5.试剂的配制..................................... 错误！未定义书签。

6.操作步骤....................................... 错误！未定义书签。

7.结果计算....................................... 错误！未定义书签。

8.实验数据记录................................... 错误！未定义书签。

二、抗坏血酸的测定............................... 错误！未定义书签。

1.目的意义....................................... 错误！未定义书签。

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4.仪器试剂....................................... 错误！未定义书签。

植物组织中还原糖含量的测定(3，5–二硝基水杨酸法一、实验目的通过本实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，学习比色定糖法的基本操作。

二、实验原理3，5–二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色物质（即3–氨基–5–硝基水杨酸，该物质在540nm波长处有最大吸收。

在一定浓度范围内，还原糖的量与棕红色物质的光吸收值成正比例关系，利用比色法可定量测定样品中的含糖量。

三、实验仪器、试剂和材料1.仪器：25ml刻度试管、离心管或漏斗、三角瓶、容量瓶、刻度吸管、离心机、分光光度计等。

2.试剂：1mg/ml葡萄糖标准液、3，5–二硝基水杨酸3.材料：食用面粉四、实验操作步骤1、葡萄糖标准曲线的制作取7支干燥洁净的25ml刻度试管或大试管，编号，按下表准确加样：0 1 2 3 4 5 6管号葡萄糖标0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2准液/ml蒸馏水/ml 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.83，5–二1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5硝基水杨酸/mlA540 nm将各管摇匀，在沸水浴中加热5min，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25ml，加塞后颠倒混匀。

在540nm波长下，用0号管为参比管调零，分别读取各管的吸光度(A540nm。

以吸光度为纵坐标，葡萄糖毫克数为横坐标绘制标准曲线。

2、样品中还原糖的提取准确称取1.5g食用面粉，放在小锥形瓶中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加25ml蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水浴中保温20min，然后将锥形瓶中内容物转入一个50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。

充分混合，过滤，滤液即为还原糖待测液。

3、样品含糖量的测定分别取2ml还原糖待测液于两支刻度试管或大试管中，然后各加3，5–二硝基水杨酸1.5ml。

其余操作与制作葡萄糖标准曲线时相同。

测定各管吸光度。

五、实验结果处理以上述还原糖待测液的吸光度平均值，在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。

白菜中还原糖含量的测定白菜是一种常见的蔬菜，它富含营养，尤其是维生素C和纤维素。

除了这些营养成分外，白菜中还含有一定量的还原糖。

还原糖是一种简单的碳水化合物，它在人体内能够迅速被吸收和利用。

测定白菜中的还原糖含量对于了解其营养价值和食用效果具有重要意义。

一、实验目的本实验旨在通过化学方法测定白菜中的还原糖含量。

二、实验原理1. 还原糖还原糖是指能够与费林试剂（如硫酸铜）反应生成红色沉淀的简单碳水化合物。

常见的还原糖有葡萄糖、果糖等。

2. 测定方法本实验采用费林试剂法测定白菜中的还原糖含量。

费林试剂由硫酸铜和胆汁酸组成，它能够与还原糖发生氧化反应生成红色沉淀。

三、实验步骤1. 样品制备将新鲜的白菜洗净后切碎，取适量的白菜样品。

2. 提取还原糖将白菜样品加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀后过滤得到提取液。

3. 进行费林试剂反应取一定量的提取液，加入适量的费林试剂，搅拌均匀后放置一段时间。

4. 观察和记录结果观察反应液的颜色变化，如果出现红色沉淀，则说明还原糖含量较高；如果没有红色沉淀，则说明还原糖含量较低。

5. 计算还原糖含量根据费林试剂法的相关计算公式，可以计算出样品中还原糖的含量。

四、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全，避免接触有毒或刺激性物质。

2. 使用实验仪器和试剂时要按照操作规范进行操作。

3. 实验前要充分准备好所需材料和设备，并保持实验环境整洁。

4. 实验结束后要及时清理实验现场，并正确处理废弃物。

五、实验结果分析通过测定白菜中的还原糖含量，可以了解其营养价值和食用效果。

如果白菜中的还原糖含量较高，说明它具有较高的甜味，适合作为甜味蔬菜食用或加工成甜品。

如果白菜中的还原糖含量较低，说明它更适合作为健康蔬菜食用，可以提供丰富的维生素和纤维素。

六、实验改进方向1. 可以采用其他方法进行测定，如酶法或色谱法。

2. 可以对不同品种的白菜进行比较分析，了解其还原糖含量的差异。

3. 可以进一步研究还原糖在白菜中的分布情况和变化规律。

铁氰化钾法测定还原糖的操作流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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还原糖是一种具有还原性质的糖类物质，在一定条件下能够与铁离子发生还原反应，生成含有亮蓝色络合物的复合物。

HZHJSZ0072 水质铁氰络合物的测定三氯化铁分光光度法HZ-HJ-SZ-0072水质）氰络合物的测定）氰络合物三氯化铁分光光度法）氰络合物的含量的测定铁(测定浓度范围为2~10mg/LÔÚ700nm波长处进行光度测定3试剂本方法所用试剂均为分析纯试剂3.1 硫酸(H2SO4)溶液Ｖ／Ｖ　３．２　碳酸钠(Na2CO3)溶液　３．３　对甲氨基苯酚硫酸盐(C14H18O2N25g/L5g/L7H2O)溶液　３．６　高锰酸钾6g/L6H2O)浓度为c=1.5mol/L 的盐酸溶液中80g/LHCl)溶液　３．１０　硫代硫酸钠(Na2S2O325g/L100g/LCN3.12.1 铁氰化钾标准贮备液烘干2h的铁氰化钾加入5mL氢氧化钠溶液(3.11)ÒÔˮϡÊÍÖÁ±êÏß±£´æÓÚ°µ´¦3.12.2 铁氰化钾标准使用液加水稀释至标线 1.00mL此溶液含50.0ìg铁氰酸根4仪器一般实验室仪器和具有30mm比色皿的分光光度计采集后以氢氧化钠溶液(3.11)调整其pH ＞ 12下冷藏6操作步骤6.1 试料分别量取两份同体积的均匀试样(其体积不大于30mL含铁(6.2 空白试验用同体积的水代替试样进行空白试验取试料200mL烧杯中以硫酸溶液(3.1)调整pH值至6~8后滴加高锰酸钾溶液(3.6)至试液呈现不褪的粉红色后加水至50mL¸ÇÒÔ±íÃæÃó΢·ÐÔ¼15minÈ¡ÏÂ混匀后用水冲洗表现皿洗净烧杯与滤纸　６．３．２　显色于容量瓶中滴加3滴硫酸(3.1)¼ÓÈë2mL对甲氨基苯酚硫酸盐溶液(3.3)2mL三氯化铁溶液(3.7)»ìÔÈ6.3.3 测量以空白试验溶液为参比于700nm波长处测定显色溶液吸光度6.4 干扰的排除6.4.1 当试料含银(I)时预先加入氯化钠溶液(3.8)1mL6.4.2 当试料中汞(II)的含量超过铁(ÔÚÓøßÃÌËá¼Ø°´Æä¼ÓÈëÁ¿氢氧化钠(3.11)溶液消解）水解沉淀再次调其pH值为6~86.4.3 试料如含有铬而在消解后因呈铬(ÔÚ¼ÓÈë¶Ô¼×°±»ù±½·ÓÁòËáÑÎ֮ǰµ«×¢Òâ²»Ò˹ýÁ¿ÊÒÎÂÈç¹ûµÍÓÚ20需适当延长放置时间显色和测量分别量取01.003.00 5.00mL铁氰化钾标准使用液(3.12.2)于200mL 烧杯中以空白试验(零浓度)溶液为参比同时也可以水为参比6.5.2 校准曲线的绘制用测定的吸光度和对应的铁氰酸根的量绘制校准曲线）氰络合物含量c以铁氰酸根计式中水样中铁(mg/L由校准曲线上查得试料中铁氰酸根的量　V mL8.1 精密度相对标准偏差范围为0.8%~3.6%9参考文献GB/T 13899-1992。

果蔬中总糖及还原糖含量的测定一、实验目的1、掌握总糖和还原糖含量的测定方法。

2、学习分光光度计的原理和操作方法。

3、了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理。

二、实验原理总糖是指样品中的还原单糖及在本实验条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。

多糖为非还原糖，可用酸将没有还原性的多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖，再利用还原糖的性质进行测定，这样就可分别求出总糖和还原糖的含量。

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。

糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。

三、实验器材1、材料：梨2、仪器：分光光度计、恒温水浴锅、电子分析天平、高速冷冻离心机、容量瓶（100mL×2）、玻璃漏斗、量筒、研钵、锥形瓶、试管、移液管、pH试纸3、试剂：蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于1000mL体积分数为80%的硫酸中，当日配制使用。

标准葡萄糖溶液（0.1mg/mL）：称取100mg葡萄糖，溶于蒸馏水并稀释至1000mL（可加几滴甲苯作防腐剂）。

6mol/L HCl溶液20% NaOH溶液：称取20g NaOH固体，溶于蒸馏水并稀释至100mL。

四、实验操作1、葡萄糖标准曲线的绘制：取6 支大试管，从0 ～ 5 分别编号，按下表加入各试剂以吸光度为纵坐标，各标准液浓度（mg/mL ）为横坐标做图得标准曲线。

2、样品中还原糖的提取和测定称取1g 梨，加蒸馏水约3mL ，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约12mL 蒸馏水冲洗研钵2～3次，洗出液也转入三角烧瓶中。

于50℃水浴中保温约30min （使还原糖浸出），取出置于离心管内，5000r/min 离心10min ，冷却后定容至100mL 。

吸取1mL 滤液置于试管中，浸于冰浴中冷却，再加入4mL 蒽酮试剂，沸水浴中煮沸10min ，取出冷却后比色，其他条件与做标准曲线相同。

GB 5513—85本标准适用于商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定。

其中铁氰化钾法主要适用于小麦粉。

1 还原糖测定1.1 铁氰化钾法1.1.1 仪器和用具1.1.1.1 磨口带塞锥形瓶：100 ml；1.1.1.2 量筒：50 ml、25 ml；1.1.1.3 移液管：5 ml；1.1.1.4 玻璃漏斗；1.1.1.5 试管：直径1.8～2.0 cm，高约18 cm；1.1.1.6 铝锅：作沸水浴用；1.1.1.7 电炉：2000 W；1.1.1.8 铁丝笼：放置试管用；1.1.1.9 试管架；1.1.1.10 锥形瓶：100 ml；1.1.1.11 微量滴定管：5 ml或10 ml（刻度0.02 ml）；1.1.1.12 分析天平：感量0.0001 g。

1.1.2 试剂1.1.2.1 95％乙醇；1.1.2.2 乙酸缓冲液：3 ml冰乙酸、6.8 g乙酸钠和比重1.84的硫酸4.5 ml，混合后用水稀释至1000 ml；1.1.2.3 12％钨酸钠溶液：12 g钨酸钠Na2WO4·2H2O溶于100 ml水中；1.1.2.4 0.1 N铁氰化钾溶液：32.9 g干燥纯净的铁氰化钾与44.0 g碳酸钠溶于1000 ml水中；1.1.2.5 乙酸盐溶液：70 g纯氯化钾和40 g硫酸锌溶于水中，再加入200 ml 冰乙酸，再用水稀释至1000 ml，混匀；1.1.2.6 10％碘化钾溶液：10 g纯碘化钾溶于100 ml水中，再加一滴饱和氢氧化钠溶液；1.1.2.7 1％淀粉溶液：1 g可溶性淀粉，用少量水润湿调和后，倒入沸水100 ml，继续煮沸，搅拌直至溶液清晰；1.1.2.8 0.1 N硫代硫酸钠溶液（按GB 5490—85《粮食、油料和植物油脂检验一般规则》附录B进行配制和标定）。

1.1.3 操作方法1.1.3.1 提取样品液：精确称取粉样5.675 g于100 ml磨口锥形瓶中，用5 ml 乙醇浸湿全部试样，再加入50 ml乙酸缓冲液，摇匀后再加入2 ml钨酸钠溶液，在振荡器上混合振摇5 min，取出过滤，弃去最初几滴滤液，收集滤液于干净锥形瓶中，此滤液即为样品测定液。

还原糖和总糖的测定3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

二、原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

三、实验材料、主要仪器和试剂1. 实验材料小麦面粉；精密pH 试纸。

2. 主要仪器（1）具塞玻璃刻度试管：20mL×11（2）大离心管：50mL×2（3）烧杯：100mL×1（4）三角瓶：100mL×1（5）容量瓶：100mL×3（6）刻度吸管：1mL×1；2mL×2；10mL×1（7）恒温水浴锅（8）沸水浴（9）离心机（10）扭力天平（11）分光光度计3. 试剂（1）1mg/mL 葡萄糖标准液准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。

（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂将6.3gDNS 和262mL 2M NaOH 溶液，加到500mL含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。

还原糖的测定方法还原糖是一种重要的碳水化合物，在食品工业以及生物化学领域具有广泛的应用。

测定还原糖的含量对于食品质量的控制以及生物化学实验的进行具有重要意义。

本文将介绍几种常用的还原糖测定方法，希望能够为相关领域的研究工作提供一些参考。

一、费林法测定法。

费林法是一种经典的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与铜离子在碱性条件下发生氧化还原反应，生成红色沉淀。

通过测定沉淀的重量或者颜色深浅来确定还原糖的含量。

这种方法操作简单，结果准确，被广泛应用于食品工业中。

二、硫氰化铁法测定法。

硫氰化铁法是一种比较快速的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与硫氰化铁在酸性条件下反应生成蓝色络合物，通过测定络合物的吸光度来确定还原糖的含量。

这种方法具有操作简便、结果快速的特点，适用于实验室中大批量样品的测定。

三、酶法测定法。

酶法是一种高灵敏度、高特异性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖酶将还原糖催化转化成葡萄糖，再利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化生成过氧化物，通过测定过氧化物的吸光度来确定还原糖的含量。

这种方法适用于对还原糖含量要求较高的实验，如生物化学实验和医学检测。

四、色谱法测定法。

色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的还原糖测定方法，其原理是利用色谱柱将混合物中的还原糖分离出来，再通过检测器检测还原糖的峰值面积或者浓度来确定其含量。

这种方法操作复杂，但具有高分辨率、高灵敏度的特点，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。

五、红外光谱法测定法。

红外光谱法是一种非破坏性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖分子的振动和转动引起的红外吸收来确定其含量。

这种方法操作简单，无需样品的处理，适用于对还原糖含量要求不是很严格的实验。

六、电化学法测定法。

电化学法是一种高灵敏度、高精度的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖在电极上的氧化还原反应来确定其含量。

这种方法操作简单，结果准确，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。

总结。

以上介绍了几种常用的还原糖测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。

实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。

二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂(氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。

非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。

斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色.根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量.三、试剂与材料1、斐林试剂甲：69。

3g CuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、0。

2%标准葡萄糖,2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿。

四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入0。

2%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。

（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0。

5－1。

0ml）。

电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0。

2％标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。

记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。

（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。

）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂,加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1％次甲基蓝，用0。

2%葡萄糖滴定至蓝色消失。

记录耗用的葡萄糖量为V1。

3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释）,补加（V0—V1)ml水，并从滴定管中预先加入（V1—1）ml 0.2％葡萄糖,摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸,加入2滴1％次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。