血型鉴定及交叉配血

ABO血型鉴定与交叉配血

血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表4-3-1-1）

表4-3-1-1 ABO血型中的抗原和抗体

血型红细胞膜上所含的抗原血清中所含的抗体

O 无A和B 抗A和抗B

A A 抗B

B B 抗A

AB A和B 无抗A和抗B

交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。本实验的目的是学习ABO血型鉴定的原理、方法以及交叉配血方法。

1．仪器显微镜，离心机。

2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。

3．药品标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。

（一） ABO血型鉴定

1. 玻片法

（1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。

（2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。

ABO血型鉴定与交配血

ABO血型鉴定与交叉配血

ABO血型鉴定与交叉配血血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表4-3-1-1）表4-3-1-1 ABO血型中的抗原和抗体血型红细胞膜上所含的抗原血清中所含的抗体 O 无A和B 抗A和抗B A A 抗B B B 抗A AB A和B 无抗A和抗B 交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。本实验的目的是学习ABO血型鉴定的原理、方法以及交叉配血方法。 1．仪器显微镜，离心机。 2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。 3．药品标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。

（一） ABO血型鉴定 1. 玻片法（1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。（2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。（3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。（4）竹签两头分别混合，搅匀。（5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。（6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。 2. 试管法（1）取试管2只，分别标明A，B字样，分别加入相应标准血清2滴，各管加入受试者的红细胞悬液1~2滴摇匀。（2）将上述二试管用1000转/分离心1min。（3）取出小试管，轻弹底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集，呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。（二）交叉配血 1. 玻片法（1）用碘酒，75%酒精棉球消毒皮肤后，用消毒干燥注射器抽取受血者及供血者静脉血各2ml，各用一滴制备红细胞悬液，分别标明供血者与受血者。余下血分别注入干净小试管，也标明供血者与受血者，待其凝固后析出血清备用。（2）左两凹玻片左侧标上“主”（即主侧）；右侧标上“次”（即次侧）。主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。分别用竹签混匀。（3） 15～30min后，观察结果。如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程

一、正反定型不一致

1、重复试验（严格正规操作）。

2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。

3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。）

1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。

2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。

3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型：

①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+以上）；

②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。

③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。

4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。）

5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。

6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。

4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。

二、交叉配血不合

（一）主侧端不相合

1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。

2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。

3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。

4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性。

5、试验系统被污染。

（二）次侧端不相合

1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。

2、病人与供血者的ABO血型不相合。

3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。

4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可输血）。