人雌二醇(E2)ELISA试剂盒说明书

雌二醇测定标准操作规程1.1检验原理：采用延迟一步法免疫检测，运用化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术与灵活的检测模式的结合，测定人血清和血浆中的雌二醇。

1.1将样本、样本稀释液、项目稀释液&雌二醇抗体（兔、单克隆）包被的顺磁微粒子混合。

样本中的雌二醇与雌二醇抗体包被的微粒子结合。

1.2孵育后，将娅咤酯标记的雌二醇结合物加入混合物中。

1.3进一步孵育和冲洗后，向反应混合物中加入预激发液和激发液。

1.4测量产生的化学发光反应，用相对发光单位（RLUs）表示。

样本中的孕酮含量和ARCHITECT!光学系统检测到的RLUS值成反比。

2.试剂主要组成部分：2.1试剂盒微粒子：雌二醇抗体（兔、单克隆）包被的微粒子，储存于含有蛋白（兔）稳定剂的三羟甲基氨基甲烷/双（2-羟乙基）亚氨基三（羟甲基）甲烷（TRIS/BIS-TRIS）缓冲液中。

最低浓度:0.0657%固体物质。

防腐剂:ProClin.结合物：疗咤酯标记的雌二醇抗体结合物，储存于含有表面活性剂柠檬酸盐缓冲液中。

最低浓度：63.36ng∕mL.防腐剂：ProClin.项目稀释液:雌二醇项目稀释液含有表面活性剂,储存于柠檬酸盐缓冲液中。

防腐剂：ProClin样本稀释液：雌二醇样本稀释液中，含有蛋白（牛）稳定剂的三羟基氨基甲烷（TRIS）缓冲液。

防腐剂：叠氮钠。

2.2需要但未提供的试剂预激发液：预激发液含有L32%（W/V）过氧化氢激发液：激发液含有0.35N氢氧化钠浓缩清洗缓冲液：浓缩清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。

防腐剂：抗菌剂。

3.样本要求：血清和血浆样本中应不含纤维蛋白、红细胞或其他颗粒物质。

2-8°C可保存7天；如果不能在七天内检测，应将样本冻存在-20C以下。

样本应避免反复冻融。

4.检验方法：仪器法（详见雅培ilOOO标准操作规程）检验结果的解释雌二醇项目通过四参数LogiStiC曲线拟合数据约简法（4PLC,Y加权）生成一条校准曲线7.检验方法的局限性7.1将检测结果用于诊断时，应与其他数据：如症状、其他检查结果、临床表现等结合使用。

０３００００７９ １００　人份用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中雌二醇ＩＩ的含量。

电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Ｅｌｅｃｓｙｓ１０１０、２０１０和Ｅ１７０（Ｅｌｅｃｓｙｓ模块）免疫测定分析仪。

　概述：生物活性最强的雌激素是１７β－雌二醇。

主要由卵巢产生。

睾丸和肾上腺皮质也产生少量的雌激素。

妇女怀孕期，雌激素主要由胎盘产生。

检测雌二醇可用于解释下丘脑－脑垂体－性腺调节功能紊乱、男子女性型乳房、产生雌激素型的卵巢和睾丸肿瘤和肾上腺皮质增生等。

另外还可用于生育治疗中的疗效监测以及体外受孕中排卵时间的确定。

　原理：采用竞争法原理，整个过程１８分钟完成。

・　第１步：３５ｍｌ标本与生物素化的抗雌二醇抗体混匀，形成复合物，其数量取决于标本中待测物的浓度。

・　第２步：加入链霉亲和素包被的微粒和钌（Ｒｕ）标记的雌二醇衍生物。

游离的、未结合生物素化抗体即与此衍生物结合，并且通过生物素、链酶亲和素之间的球上。

让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

　・　第３步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。

・检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过２点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

　试剂：Ｍ：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），１瓶，６．５ｍｌ。

粒子浓度０．７２ｍｇ／ｍｌ，生物素结合能力：　４７０ｎｇ生物素／ｍｇ粒子。

含防腐剂。

Ｒ１：生物素化的兔抗雌二醇抗体（灰盖），１瓶，８ｍｌ。

浓度４５ｎｇ／ｌ、甲二氢睾酮１３０ｎｇ／ｍｌ；ＭＥＳ缓冲液０．０５ｍｏｌ／ｌ，ｐＨ６．０。

含防腐剂。

Ｒ２：Ｒｕ（ｂｐｙ）３２＋标记的雌二醇－多肽（黑盖），１瓶，８ｍｌ。

浓度２．７５ｎｇ／ｍｌ；ＭＥＳ缓冲液０．０５ｍｏｌ／ｌ，ｐＨ６．０。

含防腐剂。

储存和稳定性：存放在２－８　度，切莫倒置。

未开封，可稳定至标明的保质期。

大鼠雌二醇（E2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T3ng/L -80ng/L使用目的：本试剂盒用于大鼠血清，血浆及相关液体样本中雌二醇（E2）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠雌二醇（E2）水平。

用纯化的大鼠雌二醇（E2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌二醇（E2）再与HRP标记的雌二醇（E2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的雌二醇（E2）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠雌二醇（E2）浓度。

试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

1牛雌二醇酶免试剂盒EDI ™Bovine Estradiol Elisa Test KitEnzyme Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA )for the measurement ofBovine Estradiol Levels in Serum or plasma美国Epitope Diagnostics,Inc.For Research use onlyEB B 1005牛雌二醇酶免试剂盒【预期用途】牛雌二醇（Bovine Estradiol,E2）酶免试剂盒是用来定量检测牛血清、血浆、牛奶、组织提取液中的17ß雌二醇（E2）的浓度。

本试剂盒仅供专业人员操作。

【检测原理】牛雌二醇酶免试剂盒以固相酶联免疫吸附测定为基础。

将待测样本、标准品、质控品加入到微孔板中，然后加入已标记的E2抗原。

标记的抗原与未标记抗原和包被在微孔板上的E2抗体竞争性结合。

微孔板洗净后，添加基质溶液，孵育。

用酶标仪测量450nm处的吸光度。

减去空白对照值获得标准品的校正吸光度，绘制标准曲线。

该试剂盒可以直接检测待测样本的雌二醇含量。

样本中标记的抗原数量与未标记抗原的数量成负相关。

通过与标准品绘制的标准曲线进行平行比较，获得未知样本的浓度值。

【试剂盒组成】编号产品名称规格1抗体包被的微孔板96孔2酶标试剂（HRP-E2）12mL3TMB显色剂12mL4终止液（2N HCl）6mL5洗涤液，20倍20mL6样本稀释液20mL7E2标准品x7(0,10,25,100,500,2500,10,000pg/mL)0.5ml/瓶8QC1(~100pg/mL)QC2(~500pg/mL) 9说明书1份【必需材料（未提供）】编号材料名称1半自动移液器：20uL,200uL2一次性移液枪头3振动器4酶标仪5挡板6吸水纸737℃孵育器8封口膜9蒸馏水【注意事项】1.建议所有的标准品、质控品和未知样本均作两管。

PRRSV N蛋白抗体检测间接ELISA方法的建立1 材料：1.1 蛋白、血清、酶标二抗原核表达PRRSV N蛋白；标准阳性血清和阴性血清，待检血清；自制HRP标记兔抗猪IgG；1.2 主要试剂和溶液包被液（50 mmol/L pH9.6的碳酸盐缓冲液）Na2CO3 1.59 gNaHCO3 2.93 g准确称取后，溶于950 mL的蒸馏水中，调pH值为9.6，定容到1 L；PBS-T洗涤液1000 mL 10 mmol/L pH7.4的PBS中加入0.5 mL Tween-20；封闭液和血清稀释液含10%小牛血清的PBS-T缓冲液，10%马血清的PBS-T缓冲液，含5%BSA的PBS-T缓冲液，含10%BSA的PBS-T缓冲液，含5%脱脂奶的PBS-T缓冲液；底物溶液100 mmol/L的柠檬酸溶液（21 g柠檬酸C6H6O7•H2O溶于去离子水，定容至1 L）24.3 mL，200 mmol/L Na2HPO4•12H2O（71.6 g Na2HPO4•12H2O溶于去离子水，定容至1 L）25.7 mL混匀，加入50 mg的四甲基联苯胺（TMB），临用前加入50 μL的30% H2O2；终止液（2 mol/L H2SO4）每200 mL终止液，由蒸馏水177.8 mL和浓硫酸22.2 mL 混和而成。

1.3 主要仪器设备电热恒温培养箱；4℃冰箱；酶标仪。

2 步骤：2.1抗原包被浓度和二抗稀释度的确定将原核表达的N蛋白分别作2.0 μg/mL，1.0 μg/mL，0.5 μg/mL，0.25 μg/mL，0.1μg/mL，0.05 μg/mL连续稀释6个稀释度，每个稀释度重复两孔，100 μL/孔，4℃包被酶标反应板过夜。

将自制HRP标记的兔抗猪二抗分别做1:50、1:100、1:200和1:400一系列倍比稀释，南京金益柏生物技术有限公司Tel:025-********Fax*************每个稀释度重复两孔，100 μL/孔，组成方阵确定重组蛋白的最佳包被浓度和二抗稀释度。

雌二醇含量的测定方法
雌二醇（estradiol-17β，E2）是生物活性最强的一种雌激素，主要由卵巢分泌，具有促进女性生殖上皮、乳腺、子宫、长骨的生长及第二性征的发育，以及参与脂代谢、调节血管平滑肌和内皮细胞的功能等。

其含量测定方法有以下几种：
-酶联免疫吸附法：利用抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用，通过酶标记物的颜色变化或发光强度，对待测样本中雌二醇的含量进行定性或定量分析。

-化学发光免疫分析法：利用化学发光物质标记抗原或抗体，通过抗原抗体反应后产生的化学发光信号，对待测样本中雌二醇的含量进行检测。

-色谱法：利用不同物质在色谱柱上的保留时间和峰面积的差异，对待测样本中雌二醇的含量进行分离和检测。

-荧光免疫分析法：利用荧光物质标记抗原或抗体，通过抗原抗体反应后产生的荧光信号，对待测样本中雌二醇的含量进行检测。

不同的测定方法具有不同的优缺点和适用范围，具体选择哪种方法取决于实验目的、样本类型和实验条件等因素。

人BMP-2ELISA试剂盒Human BMP-2ELISA kitCat#：EHC172尊敬的客户，感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。

本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业体外诊断试剂生产技术制造，仅供科研使用。

本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组人BMP-2浓度，具体适用样本请咨询。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。

如有疑问，请联系欣博盛生物科技有限公司。

Email:**********************，全国服务热线: 4006800892。

QuantiCyto ®EHC172Human BMP-22试剂盒组成：名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品5ng /支×2支5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支（规格见标签）1支（规格见标签）生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支（规格见标签）1支（规格见标签）酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物（TMB ）6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件：未开封完整试剂盒4℃保存，请在保质期内使用。

已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋，封好口。

4℃条件下可储存1个月左右。

标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。

稀释后的标准品使用后请丢弃。

浓缩生物素化抗体浓缩液4℃可储存1个月左右，稀释后即用即弃。

浓缩酶结合物（避光）标准品&标本通用稀释液4℃条件下，可储存1个月左右。