人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书
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人表皮生长因子elisa试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T25pg/ml-480pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本表皮生长因子(EGF)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF)水平。
用纯化的人表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF),再与HRP标记的表皮生长因子(EGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人表皮生长因子(EGF)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人白细胞介素-8(IL-8)试剂盒使用方法检测范围:96T40 ng/L -1200 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-8(IL-8)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-8(IL-8)水平。
用纯化的人白细胞介素-8(IL-8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-8(IL-8),再与HRP标记的白细胞介素-8(IL-8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-8(IL-8)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-8(IL-8)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆樊克生物供应使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本胞浆免疫球蛋白(CIg)含量。
试验原理:CIg试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CIg浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将CIg和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中CIg的浓度呈比例关系。
胞浆免疫球蛋白试剂盒,elisa试剂盒说明书,ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,人elisa试剂盒说明书试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗CIg抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
人结蛋白ELISA试剂盒说明书人结蛋白ELISA试剂盒说明书供应商:上海乔羽生物有限公司ELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2) 规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔人结蛋白ELISA试剂盒说明书Kit composition:Sealing film: 2 (48) / 2 (96)Specifications: 1 copiesSealing bag: 1Standard: 2700ng / L 0.5 * 0.5ml * 1 bottles, 1 bottles are stored in 2-8ELISA package is board: 1 X 48 x 961 2-8 stored inSample dilution: 3ml * 1 ml * 1 bottles of 6 bottles are stored in 2-8Color agent: Liquid 3ml * 1 ml * 6 bottles of 1 bottles in 2-8Color reagent B Liquid 3ml * 1 ml * 1 bottle 6 bottles stored in 2-8 Termination solution: 3ml * 6ml * 1 bottles and 1 bottles are stored in 2-8Concentrated laundry liquid: (2 * 20) * 1 bottles (20ml * 30) * 1 bottles stored in 2-8elisa试剂盒价格,elisa试剂盒说明书,elisa检测试剂盒人结蛋白ELISA试剂盒说明书试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。
实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学实验技术,用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装,包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料:-ELISA检测试剂盒:根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒,确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本:准备需要检测的样本,如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板:根据试剂盒的要求选择合适的微孔板,同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备:如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤:-取出储存在4℃的试剂,确保其达到室温(一般为20-25℃),再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本:根据试剂盒的说明书,进行样本的预处理,包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样:将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中,通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板:使用洗板机或手工操作,将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体:根据试剂盒的说明书,将稀释好的特异性抗体加入各孔中,确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物:根据试剂盒的说明书,将稀释好的酶标记物加入各孔中,确保加入的量准确无误。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物:将稀释好的底物加入各孔中,使其与酶标记物反应,生成可视化的颜色。
-终止反应:根据试剂盒的要求,在一定的反应时间后,加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果:使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化,通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析:-计算样本的结果:根据试剂盒的说明书,根据吸光度或颜色强度测量结果,计算样本中目标物的浓度。
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原理——组成——注意事项——目录1........................................................................................................ 错误!未定义书签。
样品收集、处理及保存——步骤——结果——八聚体转录因子,人ELISA试剂盒说明书人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物供应使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本八聚体转录因子试验原理:OTF2B试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知OTF2B浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将OTF2B和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中OTF2B的浓度呈比例关系。
八聚体转录因子试剂盒,elisa试剂盒说明书,ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,人elisa试剂盒说明书试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
高效液相色谱法测定DNA氧化损伤标志物8-OHdG一、实验目的了解高效液相色谱法(HPLC)测定DNA氧化损伤标志物8-OHdG的原理,掌握尿中8-OHdG的检测方法。
二、实验原理活性氧引起的DNA氧化损伤与衰老和一些疾病(癌症、糖尿病等)有关。
DNA中碱基鸟嘌呤C8位易受羟自由基攻击,形成碱基修饰产物8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-Hydroxy-2’deoxyguanosine, 8-OHdG)。
8-OHdG是DNA氧化损伤的特异产物,是公认的内源性及外源性因素对DNA氧化损伤的生物标志物。
当机体修复机制正常时,8-OHdG可在酶的作用下从DNA链上切除并重新掺入正常的鸟嘌呤碱基,而切下的8-OHdG则经尿液排出体外。
8-OHdG在体内稳定存在,一旦形成不再被机体进一步代谢,尿中8-OHdG含量于细胞内DNA氧化损伤有关,且尿样标本易得,可实现无创伤检测,测定尿中8-OHdG可作为DNA 氧化损伤的标志物。
测定组织细胞DNA中的8-OHdG,要先提取DNA,再用核酸酶P1和碱性磷酸酶将DNA水解为单核苷酸,然后用HPLC分离,电化学检测器(ECD)检测8-OHdG,同时用UV(紫外检测器)检测脱氧鸟苷(dG),DNA氧化损伤程度用8-OHdG于dG的比值表示。
尿中8-OHdG含量较低,尿样中杂志变动较大,使检测尿中8-OHdG难度加大。
尿样须经C18固相萃取前处理,然后用HPLC分离,电化学检测器检测8-OHdG。
三、仪器与试剂1、仪器高效液相色谱仪系统(包含紫外检测器,电化学检测器,自动进样器和色谱工作站)。
低温高速离心机。
Agilent真空固相萃取装置及Varian BondElut®C18(500mg)固相萃取小柱。
2、试剂磷酸二氢钾,乙酸和柠檬酸为优级纯,天津市科密欧化学试剂开发中心产品;氢氧化钠为优级纯,北京益利精细化学品有限公司产品;乙酸钠为色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心产品;Na2EDTA为分析纯,J T Baker公司产品;甲醇为色谱纯,DIKMA公司产品。
人ELISA试剂盒,第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书人ELISA试剂盒,第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书产品规格:96T/48T供应商:上海樊克生物有限公司本产品只用于科研实验人ELISA试剂盒,第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书,(LR/Ob-R)ELISA试剂盒,苗条素受体elisakit elisa试剂盒上海樊克生物供应!人ELISA试剂盒,第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书Reagent preparationThe kit is removed from the cold storage environment and can be used at room temperature.1 standard solution: the kit provides 6 tube standard, each tube has been calibrated concentration, and freeze dry. Before the experiment in each standard tube added 0.5ml sample dilution and cover after standing for 10 minutes or more, then repeatedly reversed / rubbing its dissolution, restore the complex for each standard tube body labeling concentration.2.20 * washing buffer dilution: distilled water diluted by 1:20, that is, 20 copies of 1 x wash buffer plus 19 copies of distilled water.Kit performance:1 sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is above 0.990.The 2 batch and the batch should be less than 9% and 11% respectively.人ELISA试剂盒,第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书ELIAS试剂盒的实验条件:1. 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。
人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆樊克生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量。
试验原理:8-OHdG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知8-OHdG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将8-OHdG和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中8-OHdG的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗8-OHdG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。
1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
稀释比例按下表中进行:80 ng/ml (6号标准原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
品)40 ng/ml (5号标准100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液品)20 ng/ml (4号标准100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液品)10 ng/ml (3号标准100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液品)5.0 ng/ml (2号标准100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液品)2.5 ng/ml (1号标准100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液品)0 ng/ml (空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。
避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A 80 80 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B 40 40 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C 20 20 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D 10 10 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E 5.0 5.0 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F 2.5 2.5 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G 0 0 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒性能1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的8-OHdG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的8-OHdG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1 ng/ml上海樊克专业生产供应的试剂盒类产品有:双抗夹心ELISA检测、ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、酶联检测试剂盒、国产进口试剂、代测elisa试剂盒、ELISA 检测试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、凋亡相关因子试剂盒、白介素ELISA试剂盒、VIP ELISA kit等实验室产品,产品品质,质量保证。
The performance of kit:1 sensitivity: minimum detection concentration is less than 1 standard. Linearity of dilution. Sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is 0.990.2: no specific reaction with other cytokines.3 repeatability: plate, plate between the coefficients of variation were less than 10%.Human type III procollagen amino terminal peptide ELISA kit steps:1 before use, all reagents and mixing. Do not allow liquid to produce a large number of bubbles, so as to avoid adding a large number of bubbles, resulting in the addition of the error.2 according to determine the number of sample number plus standard strip number. Each standard and blank hole is recommended to do the hole. Each sample can be made according to its own quantity, and can be used as a hole in the hole.3 diluted after standard 50ul in reaction hole, added to the sample 50 UL in reaction hole to be measured. Immediately joined the 50 UL antibody biotin. Cover the membrane plate, gently oscillating mixing, 37 degrees Celsius for 45 minutes.4 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.5 per hole adding chain affinity enzyme -HRP 100ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 30 minutes incubation.6 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.7 per hole adding substrate A, B 50ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 5 minutes incubation. Avoid light.8 remove ELISA plate, quickly add 50ul terminated liquid, adding the stop solution immediately after the determination results.9 od determination of each hole at the wavelength of 450nm.The result of judgment and analysis:1, instrument value: Yu Bo 450nm ELISA od read the hole on the instrument2, to the OD value as a vertical coordinate (y), corresponding ot standard concentrations as a horizontal coordinate (x), do have corresponding curve, sample ot content can be according to the OD value by standard curve conversion out corresponding concentration, multiplied by the dilution multiple; or with the standard concentration and the OD value calculated the regression equation of the standard curve, the sample OD value in the equation to calculate the sample concentration, multiplied by the dilution factor is the actual concentration of the sample.3, detection range: 0-100ng/ml4, sensitivity: 0.39ng/ml。