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利用RAPD标记鉴定山葡萄种质
王军;贺普;葛玉香;包怡红
【期刊名称】《农业工程学报》
【年(卷),期】2004(020)0z1
【摘要】采用修改后的CTAB法获得了高质量的基因组DNA.利用随机扩增多态性即RAPD标记对山葡萄7份种质进行鉴定,用4个引物(从30个引物中筛选)对试材进行PCR扩增,共扩增出30条谱带,平均每条引物产生7.5条谱带,其中21条谱带为多态性谱带,占总谱带数的70%.不同引物扩增的谱带数不同,范围在6～9条之间.利用4个引物扩增出的多态性谱带可以将7份山葡萄种质区分.
【总页数】3页(P70-72)
【作者】王军;贺普;葛玉香;包怡红
【作者单位】东北林业大学森林资源与环境学院,哈尔滨,150040;西北农林科技大学园艺学院,杨凌,712100;东北林业大学森林资源与环境学院,哈尔滨,150040;东北林业大学森林资源与环境学院,哈尔滨,150040
【正文语种】中文
【中图分类】S663.1;Q78
【相关文献】
1.利用RAPD分子标记对优良玉米种质的遗传分析和鉴定 [J], 陶刚;刘作易;朱英;宋吉轩;陈泽辉
2.利用基于RAPD标记的MCID法快速鉴定72个葡萄品种 [J], 王玉娟;张彦;房经
贵;刘崇怀;宋长年;孙欣
3.利用RAPD标记鉴定草地早熟禾种质资源的遗传多样性 [J], 涂明月;李杰;何亚丽;李醒;李俊;袁晓君
4.利用RAPD标记鉴定大豆种质 [J], 邱丽娟
5.RAPD标记在山葡萄种质鉴定中的应用 [J], 王军;葛玉香;贺普超
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中国野生葡萄遗传多样性的RAPD分析罗素兰;贺普超;郑学勤;周鹏【期刊名称】《植物学报（英文版）》【年(卷),期】2001(043)002【摘要】以起源于中国的18个野生葡萄种（73个株系）、1个欧美杂交种、7个欧洲葡萄品种、1个砧木品种和河岸葡萄（VitisripariaL.）一个品系为试材，利用RAPD技术研究了中国野生葡萄的遗传多样性。
从280个随机引物中筛选出20个多态性好的引物扩增供试材料，产生了191条多态性带。
应用UPGMA聚类方法(类平均法)，获得了83份材料的遗传距离矩阵及聚类分析树系图，且聚为22类12组。
河岸葡萄、欧洲葡萄（V.viniferaL.）及欧美杂种与中国野葡萄亲缘关系较远。
在中国野葡萄中，菱叶葡萄（V.hancockii Hance）与其他种的亲缘关系最远，秦岭葡萄（V.qinlingensis P.C.He）次之。
并可将中国野葡萄资源的18个种、变种和类型分为10组。
种内不同花型株系间的遗传变异较大。
%The use of the RAPD technique was investigated on a set of 73genotypes of 18 wild grape species native to China, and one interspecific hybrid, seven Vitis vinifera L. cultivars, one rootstock cultivar and one strain of V. riparia L. Genetic diversity among these grapes was investigated based on RAPD analysis. The screening of 280 decamer oligonucleotides allowed the selection of 20 primers used for the analysis. A total of 191 RAPD markers were produced from the 20 selected primers. Relationships among the 83 clones or accessions based on their genetic distances were clustered using unweighted pair-group method arithmetic average (UPGMA) analysis in adendrogram. Twenty-two clusters which fortunately adapted to 22 grape species level were clearly resolved on the dendrogram. The 18 wild grape species native to China were grouped into ten subclusters. The largest distance was found between V. riparia L., V. vinifera L., interspecific hybrid (V. vinifera L.×V. larbrusca L.) and the wild grapes native to China. Among the wild grapes native to China, the largest distance was found between V. hancockii Hance and the other wild species. V. qinlingensis P.C.He was the second. Large genetic variation occurred among the different flower-type clones in one species.【总页数】6页(P158-163)【作者】罗素兰;贺普超;郑学勤;周鹏【作者单位】海南大学农学院, 海口 570228;西北农业大学园艺系, 杨凌 712100;西北农业大学园艺系, 杨凌 712100;热带作物生物技术国家重点实验室, 海口571101;热带作物生物技术国家重点实验室, 海口 571101【正文语种】中文【中图分类】Q943因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
文献综述生物技术分子标记技术在葡萄属植物上的研究状况及进展摘要：分子标记技术则从DNA分子水平检测物种的遗传多样性，直接有效，是目前最为普遍采用的方法。
分子标记具有不受发育时期、组织类别、环境条件等因素干扰、多态性高、数量多、不影响目标性状表达连锁遗传现象的特点。
近年来，国内外许多学者利用分子标记技术对葡萄植物遗传多样性开展了不少研究。
本文简单叙述了分子标记分类和特点，以及它在葡萄属植物分子水平上的研究状况。
关键词：分子标记；葡萄属；研究进展葡萄是属于葡萄科（Vitaceae）葡萄属（Vitis.linn）植物，落叶木质藤本，在园艺学分类上属于浆果、多年生落叶木本藤蔓植物[1]。
葡萄浆果的营养成分丰富，含有碳水化合物、配糖类、矿物质、酶、含氮有机物、无氮有机物、维生素、有机盐、生物催化剂等；在医疗保健上葡萄有补肾、降压、开胃的功效，对预防治疗神经衰弱、心血管疾病等疾病都有显著的效果。
葡萄起源于黑海和地中海沿岸，在长期的进化和栽培历史中形成了许多种群和品种。
现在世界上存在的葡萄品种大约有14000种[2]。
葡萄属分为两个亚属：圆叶葡萄亚属（Muscadina Planch）和真葡萄亚属（Euvitis Planch）。
在我国，葡萄属植物从海南岛到大兴安岭，从西藏高原到东海之滨均有分布，其分布之广，产量之大，种类之多，特性之丰富，在全世界各国是少有的[3]。
品种鉴别时葡萄研究和生产实践的重要环节之一，但葡萄是无性繁殖，且品种交流频繁产生一些中间型和过渡性杂种，给葡萄的分类鉴定带来困难[4]。
1分子标记的概述1.1 分子标记的分类作物遗传多样性研究是通过使用一些遗传标记就行作物种质资源的遗传多样性检测。
目前，遗传标记主要有四大类分别是：形态学标记、细胞学标记、生化标记和分子标记。
分子标记(Moleculem arket)是指与特定基因或标记连锁的一段经过扩增并可检测出的DNA序列。
DNA分子标记大多以电泳谱带的形式表现，大致可分为两大类。
利用基于RAPD标记的MCID法快速鉴定72个葡萄品种王玉娟;张彦;房经贵;刘崇怀;宋长年;孙欣【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2012(045)014【摘要】[目的]葡萄种质材料和品种的鉴定是葡萄种质资源研究和新品种保护的基础.本研究应用一种新的基于DNA分子标记的人工绘制品种鉴别示意图方法(manual cultivar identification diagram,MCID)对来源于不同国家和地区的72个葡萄品种进行鉴定.[方法]通过增加引物长度以及严格筛选PCR退火温度优化的RAPD技术体系,从35个长度为11个碱基的引物中筛选出6个条带清晰且多态性高的引物,进一步对72个葡萄品种进行PCR扩增获得DNA指纹,然后利用MCID 法成功将将72个葡萄品种区分开来.[结果]利用这6条引物扩增的多态性谱带构建了72个葡萄品种的MCID.该葡萄MCID很好地提供对其中某些品种进行鉴定所需要的引物以及需要参考的特征性谱带.[结论]到目前为止,MCID方法是实现利用DNA分子标记鉴定果树品种能力最好的有效途径.该研究所获得的MCID具有高操作性和实用参考性,对于葡萄种质资源研究、品种保护和品种纯度早期鉴定具有重要帮助.【总页数】10页(P2913-2922)【作者】王玉娟;张彦;房经贵;刘崇怀;宋长年;孙欣【作者单位】南京农业大学园艺学院/江苏省果树品种改良与种苗繁育工程中心,南京210095;中国农业科学院郑州果树研究所,郑州450009;南京农业大学园艺学院/江苏省果树品种改良与种苗繁育工程中心,南京210095;中国农业科学院郑州果树研究所,郑州450009;南京农业大学园艺学院/江苏省果树品种改良与种苗繁育工程中心,南京210095;南京农业大学园艺学院/江苏省果树品种改良与种苗繁育工程中心,南京210095【正文语种】中文【相关文献】1.基于SSR荧光标记的MCID快速鉴定13个湖北茶树品种 [J], 黄丹娟;马建强;马春雷;王松琳;陈亮;毛迎新;陈勋2.利用基于DNA标记的人工绘制植物品种鉴别图(MCID)法快速鉴定欧亚葡萄品种[J], 张晓莹;张彦;宋长年;刘崇怀;房经贵;上官凌飞3.基于SSR荧光标记的MCID快速鉴定13个湖北茶树品种 [J], 黄丹娟;马建强;马春雷;王松琳;陈亮;毛迎新;陈勋;;;;;;;;4.基于SSR标记的MCID法鉴定72个酿酒葡萄品种 [J], 傅伟红;魏新科;葛孟清;刘崇怀;房经贵5.基于SSR标记的MCID法鉴定中国自主选育的葡萄品种 [J], 魏新科;樊秀彩;王晨;刘崇怀因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葡萄山欧杂交后代果皮颜色的RAPD标记
王军;葛玉香;贺普超
【期刊名称】《东北林业大学学报》
【年(卷),期】2003(031)005
【摘要】以葡萄种间BC1杂交组合79-33、83-15[(山葡萄×红亚历山大)×白香蕉]子代为试材,运用RAPD技术进行葡萄山欧杂交后代果皮颜色的分子标记研究发现,OPY02的扩增片段OPY02-750与白色果皮性状有一定的连锁关系,以OPY02扩增亲本、F1、BC1、F2及2个栽培葡萄品种发现,所有的白色果皮单株都扩增出OPY02-750,但在6个BC1、F2黑色果皮单株中也具有该片段.
【总页数】4页(P48-51)
【作者】王军;葛玉香;贺普超
【作者单位】东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;西北农林科技大学
【正文语种】中文
【中图分类】S663.1
【相关文献】
1.百合杂交后代的苗期形态及RAPD分子标记鉴定 [J], 程千钉;杨利平;李蕊
2.RAPD分子标记在鉴定狼尾草属杂交后代上的应用 [J], 杨清辉;Smith,RL;等
3.RAPD 标记鉴定银白杨×新疆杨杂交后代 [J], 张玉平;鲁绍伟;李少宁;陈波;潘青华
4.RAPD标记与波尔山羊杂交后代肉用性能的相关性研究 [J], 巩元芳;李祥龙;刘铮
铸;王峰;牛红岩
5.基于SSR分子标记的73份山葡萄及杂交后代的遗传
多样性分析 [J], 王衍莉;杨义明;范书田;赵滢;许培磊;路文鹏;李昌禹
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RAPD技术及在甲壳动物遗传多样性中的应用周宝洪;范樟荣;周海东【摘要】介绍了RAPD技术的特点、原理及在甲壳动物遗传多样性研究中的优点,并综述了近几年RAPD技术在甲壳动物遗传多样性研究中的进展.【期刊名称】《河北渔业》【年(卷),期】2010(000)007【总页数】3页(P37-38,61)【关键词】甲壳动物;RAPD技术;遗传多样性【作者】周宝洪;范樟荣;周海东【作者单位】遂昌县水利局,浙江,丽水,323000;遂昌县水利局,浙江,丽水,323000;遂昌县水利局,浙江,丽水,323000【正文语种】中文根据现代遗传学的观点，物种的遗传性状是由基因决定的，外部形态的变异及体内蛋白质分子的变化其本质是基因中DNA碱基序列发生了改变，因此，从DNA着手，物种的遗传和变异及与此相关的一系列问题均能得到有效解决。
近年来，在DNA聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction，PCR)基础上发展起来的随机扩增多态性DNA技术(Random Amplified Polymorphic DNA，RAPD)具有操作简便，实验周期短，对DNA纯度要求不高，检测过程中不需要同位素，也不需要进行克隆和测序, 并能克服同工酶电泳位点偏少等特点，已成功地应用于动物、植物遗传多样性的检测、基因定位、品系鉴定、遗传图谱的构建和系统学研究等诸多领域[1]，本文就RAPD的特点及其在甲壳动物遗传多样性中的研究应用作一介绍。
1 RAPD技术的基本原理RAPD技术建立在PCR技术基础上，利用一系列随机排列的碱基序列作引物，对基因组DNA进行PCR扩增，扩增产物通过聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳分离，经溴化乙锭(EB)染色或通过放射自显影检测扩增产物DNA片段的多态性。
虽然RAPD所用的引物DNA序列各不相同，但对于特定引物，与基因组DNA有特定的结合位点，如果这些结合位点在基因区域分布符合PCR扩增反应条件，就可扩增出DNA片段，因此，若基因组在这些区域发生DNA片段插入、缺少或碱基突变就可能导致这些特定结合位点分布发生相应变化，而使PCR产物增加、缺少或分子量改变，通过PCR产物的检测即可测出基因组DNA在这些区域的多态性。
RAPD技术在葡萄种质鉴定上的应用
高爱农;韩振海;张开春;许雪峰
【期刊名称】《农业生物技术学报》
【年(卷),期】2002(010)002
【摘要】为建立一种简单、快捷的方法以鉴定葡萄(Vitis)种质资源,对CTAB、SDS 和高盐法3种DNA提取方法进行了比较.结果表明,改良的CTAB法较为适合葡萄基因组DNA的提取.通过对TaqE, Mg2+,dNTP,模板DNA,Primer不同浓度的优化实验以及对PCR反应程序的筛选,建立了适合葡萄基因组RAPD分析的技术体系.运用该体系对部分葡萄品种进行RAPD分析.结果表明,采用适合的引物在该体系条件下能够达到鉴定葡萄种质资源的目的,并可应用到葡萄的遗传图谱、指纹图谱及分子标记等分子生物学的研究中.
【总页数】5页(P133-137)
【作者】高爱农;韩振海;张开春;许雪峰
【作者单位】中国农业大学园艺学院园艺植物研究所,北京,100094;中国农业大学园艺学院园艺植物研究所,北京,100094;北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093;中国农业大学园艺学院园艺植物研究所,北京,100094
【正文语种】中文
【中图分类】S663
【相关文献】
1.应用RAPD技术对6种玻璃鳗的种质鉴定和遗传多样性分析 [J], 张新艳;樊海平;范斯敏;卓玉琛;林煜;钟全福
2.应用RAPD技术研究金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌DNA的多态性 [J], 高大威;宋翠萍
3.RAPD技术及其在葡萄属植物研究上的应用 [J], 徐炎;扈惠灵
4.用RAPD技术研究3种鳗鱼的种质鉴定 [J], 杨弘;王希道;吴婷婷;夏德全
5.RAPD标记在山葡萄种质鉴定中的应用 [J], 王军;葛玉香;贺普超
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利用RAPD技术分析兰属(Cymbidium)品种间的亲缘关系文李;叶庆生;王小菁;潘瑞炽
【期刊名称】《应用与环境生物学报》
【年(卷),期】2001(7)1
【摘要】本文利用RAPD技术来检测兰属 13个品种间的亲缘关系 .通过对 5 5种10个碱基随机引物的筛选 ,其中 4种引物能得到重复性、稳定性较高扩增产物 ,四种引物共扩增出 93条多态性带 ,多态率为 10 0 % .根据RAPD标记进行邻体聚类分析 ,表明兰属各种间的亲缘关系与形态学分类结果不完全一致 .实验结果认为RAPD技术可用于兰属植物的系统学研究 .图 2表 3参
【总页数】4页(P29-32)
【关键词】兰属;RAPD;聚类分析;品种;亲缘关系
【作者】文李;叶庆生;王小菁;潘瑞炽
【作者单位】华南师范大学生物系
【正文语种】中文
【中图分类】Q949.718.4
【相关文献】
1.兰属品种的RAPD鉴定和亲缘关系分析 [J], 谢伟;乐超银;林直;程凡;何正权;姚伟
2.利用RAPD推测宝山香柚与其他柑橘属品种间的亲缘关系 [J], 明凤;任志军;王敬文;梁斌;郭滨;沈大棱
3.利用RAPD标记技术对刺槐属(Robinia)种间亲缘关系的分析 [J], 柳晨意;黄勇
4.利用同工酶和SDS-PAGE技术对一些兰属(Cymbidium)品种的分析(简报) [J], 叶庆生
5.中国兰属植物种间及品种间亲缘关系的RAPD分析 [J], 孙彩云;张明永;叶秀粦;梁承邺;夏快飞
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文章编号:1001-4829(2004)01-0061-04 收稿日期:2003-10-12 基金项目:广西自然科学基金项目(桂科目022901,桂科基0009012);广西农科院科技发展基金项目(编号:2002012)资助作者简介:曹辉庆(1975-),女,广西全州人,助理研究员,硕士,主要从事植物生理与分子生物学研究。
利用RAPD 分子标记对南方湿热地区葡萄资源的亲缘关系及分类研究曹辉庆1,李杨瑞2,彭宏祥1(11广西农科院园艺研究所,广西南宁 530007;21广西农业科学院,广西南宁 530007)摘 要:以来源于日本的6个葡萄品种(或品系),4个毛葡萄与欧亚种的杂交种,以及东亚野生种毛葡萄为试材,利用RAPD 技术研究葡萄的亲缘关系。
从26个随机引物中筛选出13个多态性好的引物扩增材料,产生176条多态带。
应用Nei &Li 聚类法,获得11份试材的遗传距离矩阵及聚类分析树系图。
关键词:葡萄;RAPD 标记;亲缘关系中图分类号:S323 文献标识码:AStudies on thg application of RAPD molecular markers to the classif icationof grape resources in the marsh and heated areas in the South ChinaCAO Hui 2qing 1,L I Y iang 2rui 2,PEN G Hong 2xiang 1(11Institute of Horticulture of Guangxi Academy of Agricultural Sciences ,Nanning 530007,China ;21Guangxi Academy of Agricultural Sciences ,Nanning 530007,China )Abstract :The use of the RAPD techniques was investigated on a set of 11genotypes ,including 6grape species from Japan ,4interspecific hybrids ,and one strain of V itis am urensis 1Relationships among these grapes was investigated based on RAPD analysis 1The screening of the 26random primers allowed the selection of 13polymorphic primers used for the analysis 1A total of 176polymorphic bands were pro 2duced from the 13selected primers 1Relationships among the 11clones or accessions based on their genetic distances were clustered using Nei &Li analysis in a dendrogram 1K ey w ords :grapes ;RAPD (Randomly amplified polymorphic DNA )marker ;relationship 葡萄是世界上水果生产中栽培面积最大,产量最多的果树。
我国南方气温高,雨量多(年降雨量达1200～1700mm )且集中在4～6月,此时葡萄极易感病,给葡萄生产造成很大的损失[1]。
利用我国现在野生葡萄资源与其它优质葡萄品种杂交可选育出适应我国南方气候特点的丰产、优质的鲜食或酿酒葡萄品种。
本研究用RAPD 标记技术分析上述11个葡萄品种(或品系)的亲缘关系,以期为进一步杂交育种提供理论依据。
1 材料与方法111 材料本研究在广西农业科学院作物改良与遗传育种开放重点实验室完成。
试材有:①东亚野生种毛葡萄1个,抗病性强;②毛葡萄与欧亚种的杂交种4个,丰产、抗病性好,果实小,适于酿酒;③从日本引进的葡萄品种6个,丰产、优质、抗病。
依次编号为1～11。
112 方法11211 DNA 的提取 采用SDS 方法提取葡萄基因组DNA :取葡萄去主脉幼叶015g ,加入液氮,研磨成细粉状,解冻前转入65℃预热的7mL SDS 提取缓冲液中[100mmol ・L -1Tris 2Cl (p H810)、50mmol ・L -1ED TA (p H810)、500mmol ・L -1NaC1、4%巯基乙醇],混匀,加入1mL 20%SDS ,充分混匀,于65℃水浴中保温15～30min ;冷却至室温,加入已预冷的20%PVP ,轻轻混匀,于0～4℃冰箱中静置10min ;加入1185mL 5mmol ・L -1KAc ,充分混匀,于0～4℃冰箱中放置30min ;4℃、12000r/min 离心15min ;取上清液于25mL 离心管中,加入等体积氯仿/异戊醇,混匀后放置片刻,于4℃162004年17卷1期Vol 117 No 11 西 南 农 业 学 报Southwest China Journal of Agricultural Sciences8000r/min离心10min;上清液转入另一离心管中,加入2/3倍体积-20℃预冷的异丙醇,混匀,于-20℃放置30～60min,观察DNA沉淀生成;于4℃、8000r/min离心5min,去上清液,将离心管倒置于吸水纸上、控干;将沉淀转入115mL离心管中,以80%乙醇洗涤沉淀物2次,于通风橱中吹干10～15min;加入700μl TE缓冲液充分溶解沉淀物;加入1/100体积的RNase A酶液,于37℃保温1h;加入等体积酚/氯仿/异戊醇,混匀,室温放置10min;4℃8000r/min离心5min;取上清液,加入等体积的氯仿/异戊醇混匀,8000r/min离心10min (重复抽提一次);取上清液,加入1/10体积的3 mmol・L-1NaAc混匀,加入2/3倍体积的-20℃预冷的异丙醇,轻摇混匀,放置数分钟;8000r/min离心3min,去尽上清液;用80%乙醇沉淀3次,吹干;加入50μl1/10TE溶液[10mmol・L-1Tris2HCl (p H810)1mmol・L-1ED TA(p H810)]中备用。
采用016%琼脂糖凝胶电泳法估测DNA浓度以及紫外分光光度法检测DNA样品的浓度和纯度(表1)。
11212 引物筛选 购自上海Sangon,每个引物为10个随机排列的单核苷酸;在26个引物中筛选出13个扩增多态性好的引物(表2)。
11213 PCR反应 反应混合物总体积为25μl,内含1×扩增缓冲液,dA TP、dCTP、dN GP、d TTP各200μmol・L-1,115mmol・L-1MgCl2,012μmol・L-1的引物,25～30ng的模板DNA,115U Taq DNA聚合酶(宝生物工程大连在限公司),用双蒸水将体积补到25μl,加盖,DNA扩增用PCR仪(型号Biome2 tra Tl Thermocycler)进行40个循环。
首先于94℃表1 SDS法提取的葡萄基因组DNA紫外分析结果Table1 UV scan results of grape genomic DNA extracted by SDS method品种号species No1OD260OD280OD260/OD280产量(μg・g-1)Output101118010721164590 201125010761164625 301092010551167460 401102010621165510 501155010971160775 601098010581169490 701142010891160710 801150010921162750 901085010511168425 1001108010651166540 1101151010951159755预变性4min,然后每个循环包括94℃变性1min, 35℃退火2min,72℃延伸2min,最后一个循环在72℃下延伸8min,整个过程需要4h14min4s。
每个PCR反应重复3次。
反应结束后,PCR产物置4℃冰箱中保存备用,或直接用115%的琼脂糖凝胶电泳分离。
电极缓冲液为1×TAE缓冲液,以G eneRuler Tm DNA Ladder Mix为标准分子量进行电泳。
电泳起始电压为70V,待样品走出加样孔,升高电压至100V,电泳时间约1h30min。
电泳完毕,在溴化乙锭染色液中染色约10～20min,然后用水冲洗,用凝胶成像仪观察、拍照。
11214 数据分析 采用电脑识别条带与人工记录带相结合的办法,进行扩增谱带的记录。
对13个引物的扩增结果用RAPDistance(version1104)软件中的Nei&Li计算方法计算出遗传距离D,根据遗传距离指数采用同一软件中的NJ法构建品种之间的系统聚类图。
2 结 果211 葡萄基因组DNA本研究采用SDS法(不同于以往葡萄研究上多采用CTAB法[2,3～5])提取葡萄基因组DNA,获得分子量为21000bp以上的DNA片段,OD260/OD280值在116～117之间,DNA样品浓度为719～1118μg・μl-1,说明DNA样品较纯,样品所含的酚、蛋白质等很少,完全适合PCR分析(葡萄基因组DNA电泳图谱示图1)。
表2 用于RAPD反应引物的DNA序列Table2 Nucleotide sequences of random primers used for RAPD 引物Primer碱基序列5π—3πNucleotide Sequence5π—3πS1006GTAA GCCCCTS1004CTCCCCA GACS1003GGTTACTGCCS123CCTGATCACCS137AACCCGGGAAS1008TTCCCGTGCCS121ACGGATCCTGS161ACCTGGACACS134TGCTGCA GGTS1148ACTGGCTCTCS1140GA GTCCTCACS1143A GTCGGCCCAS1010GGGATGACCA26西 南 农 业 学 报 17卷表3 13条RAPD 引物对11份葡萄材料基因组DNA 的扩增带数Table 3 The number of amplified fragments of 13primers on 11V itis materials引物Primer 品种号Species No.1234567891011多态性带数Number ofpolymorphic bands扩增总带数Total bands多态带百分率Percent of polymorphic bands S 100658788776663131492186S 100477676654277111291167S 1003567758532541414100S 1231012109991010879161888189S 137548699791097121485171S 1008710995977785121485171S 121859998811101217151788124S 16112368777651014141687150S 1349879999991212121866167S 11487591045667613131681125S 11406961096681097182090100S 11431010119910121111101071546167S 101088848777666192095100212 多态性引物的筛选与DNA 扩增选择两份有代表性的DNA 样品(日本葡萄品种和毛葡萄与欧亚种的杂交种)作模板,进行随机引物的筛选。
