实验一常用器皿包扎与培养基的配制和灭菌一、实验目的1学会常用器皿包扎方法2学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤3学会实验室灭菌锅的使用方法二、常用器具和仪器试管(testtube)，德汉氏小管(Durhamtube)，玻璃吸管(glasspipette)，吸器，微量加样器(micropipette)，吸嘴(tip)，培养皿(petri dish)，三角瓶(erlenmeyer flask)，接种铲(inoculatingshovel),玻璃涂布器(glassspreade)，接种环(inoculatingloop)，接种钩(inoculating hook)，接种针(inoculating needle)，小塑料离心管(Eppendorf tube)，滴瓶(dropper bottle )，双层瓶(double bottle)，酒精灯⑻ cohol burner)，煤气喷头(coal gas sprinklerhead，试剂瓶，量筒，烧杯，温度计，石棉网，漏斗，烘箱，卧式灭菌锅，手提式灭菌锅，无菌操作台/ 室，过滤除菌设备，厌氧操作设备，小型发酵罐，离心机，培养箱/摇床，冷冻干燥机，蒸馏水器，超声波清洗仪，磁力搅拌器。
三、玻璃器皿的包装1、培养皿的包装方法一：用旧报纸密密包紧，一般以5-8 套培养皿作一包。
包好后用干热或湿热灭菌(见无菌操作技术)。
方法二：将培养皿放入金属(不锈钢)筒内，干热灭菌。
金属筒配有盖子，内部还有一个可以放培养皿的带底框架。
框架可以从筒内提出，以便装取培养皿。
包好的培养皿金属筒和内部的框架塑料培养皿架2、吸管的包装准备好干燥的吸管，在粗头端塞入一小段棉花，以免使用时将杂菌吹入或不慎将微生物吸出。
将吸管尖端斜放在旧报纸的近左端，与报纸成45°角，左端多余的一段覆折在尖头上，再将整根吸管卷入报纸，右端多余的报纸打个小结。
包好的吸管再用一张大报纸包好，干热灭菌。
或一起装入专用吸管筒进行灭菌。
玻璃器皿的清洗包扎干热灭菌及常见培养基配置湿热灭菌玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌一、目的要求掌握玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌的操作方法。
二、实验材料玻璃器皿、烘箱、牛皮纸、纱布、纱绳三、操作步骤(一)清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗涤剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同。
1. 新玻璃器皿的洗涤方法新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液内先浸泡数小时，酸溶液一般用2%的盐酸或洗涤液，浸泡后用自来水冲洗干净。
2. 使用过的玻璃器皿的洗涤方法(1)试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。
但是，洗衣粉和去污粉较难冲洗干净，常在器壁上附有次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗。
一层微小粒子，故要用水多次甚至10若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。
(2) 装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。
带菌的器皿在洗涤前先浸在2%煤酚皂溶液(来苏尔)或0.25%新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上法洗涤 (3)载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次，使油垢溶解，再在肥皂水中煮沸5—10 min，用软布或脱脂棉花擦试，立即用自来水冲洗。
然后在稀洗涤液中浸泡0.5—2 h，自来水冲去洗涤液，最后用蒸馏水换洗数次，待干后浸于95%酒精中保存备用。
3. 洗涤液的配制与使用(1)洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下:浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g自来水 150mL浓硫酸(工业用) 800mL稀溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g自来水 850mL浓硫酸(工业用) 100mL配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可慢慢加温溶解，冷却后徐徐加入浓硫酸，边加边搅动。
实验一玻璃器皿的清洗与包扎，棉塞的制作一、玻璃仪器的清洗：洗涤玻璃器皿日常最方便的方法是用肥皂、洗涤剂等以毛刷进行清洗，然后依次用自来水、蒸馏水淋洗。
清洗干净后的玻璃器皿表面，在用蒸馏水淋洗时应布上一层薄薄的水膜；如果是挂上一个个的小水珠，则表面未清洗干净。
对于不便用毛刷清洗或清洗不干净的器皿，可配制下述清洗液进行化学清洗。
对分析某些痕量金属所使用的器皿，洗涤后还需要在一定浓度的盐酸、硝酸溶液或含络合剂的溶液中浸泡相当时间，除去表面吸附的金属离子，然后再用蒸馏水淋洗干净。
聚乙烯、聚氯乙烯、聚四氟乙烯器皿也可用同样的方式清洗，但要注意塑料制品受热易变形、易被硬物划伤及对许多有机溶剂敏感的特点。
（1）铬酸溶液：称取92g二水重铬酸钠溶于460mL水中，然后注入800mL 硫酸。
另一个配方是把1L硫酸注入35mL饱和重铬酸溶液中。
当洗液使用至变绿色后，就失去洗涤能力。
使用铬酸洗液时，被洗涤的器皿带水量应少，最好是干的，以免洗液被稀释而降低效率。
也可以用重铬酸钾代替重铬酸钠，但前者的溶解度较低。
用铬酸洗液洗涤后的容器要用清水充分冲洗，以除去可能存在的铬离子。
（2）高锰酸钾的碱性溶液：少量高锰酸钾溶于100~200g/L的氢氧化钠溶液中。
适于洗涤带油污的玻璃器皿，但余留的二氧化锰沉淀物需用盐酸或盐酸加过氧化氢洗去。
（3）氢氧化钠（钾）乙醇溶液：把约1L 95%的乙醇加到含120g氢氧化钠（钾）的120mL水溶液中，就成为一种去污力很强的洗涤剂，玻璃磨口长期暴露在这种洗液中易被损坏。
（4）硫酸及发烟硝酸混合物：适用于特别油污、肮脏的玻璃器皿。
（5）磷酸三钠溶液：将57g磷酸三钠、28g油酸钠溶于470mL水中，为除去玻璃器皿上的碳质残渣，可将器皿在此溶液里浸泡几分钟，然后用刷子除去残渣。
100~150g/L的氢氧化钠（钾）溶液也有同样作用。
（6）10g/L EDTA 的20g/L氢氧化钠溶液：用此溶液浸泡洗净的玻璃器皿，能除去容器表面吸附的一些微量金属离子。
