猴头菇多糖的提取工艺

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一种猴头菇多糖的提取方法[发明专利]

专利名称：一种猴头菇多糖的提取方法专利类型：发明专利
发明人：邬佑平,陈彪,曾淋民,陈海强申请号：CN201810437795.0
申请日：20180509
公开号：CN108341891A
公开日：
20180731
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种猴头菇多糖的提取方法，将干燥的猴头菇经生物质粉碎机粉碎后过80目筛，再放入蒸汽爆破装置中完成爆破，按固液比1:10~20加入水浸泡1.5h后加热至30~50℃进行超声处理，调节料液温度、pH值、蛋白酶和纤维素酶，酶解结束后升温灭酶活、离心、树脂脱色、脱蛋白、过滤、减压浓缩、真空低温干燥，获得高活性、高纯度的猴头菇多糖固体粉末，提高了多糖提取率和生产效率，且不会破坏多糖的空间结构与降低其生物活性，更适合工业化生产。

申请人：四川岚晟生物科技有限公司
地址：628012 四川省广元市朝天区七盘关工业园区
国籍：CN
代理机构：成都中亚专利代理有限公司
代理人：李文荣
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超声法提取猴头菇多糖的研究

超声法提取猴头菇多糖的研究孙舒玉摘要：在对提取猴头菇多糖的提取方法进行介绍、比较之后，采用单因素分组实验和正交试验方法,结合实际情况分别确定了超声波法和传统热水法提取猴头菇多糖的最佳工艺。

结果表明: 超声波法提取多糖明显优于传统热水法，通过与传统热水提取法相比较，超声波法提取时间缩短4/ 5 ,而多糖提取率提高40 %以上。

关键词：猴头菇超声提取多糖猴头菇(Hericium erinaceus)，又名猴头蘑、熊头菇、刺猬菌,隶属于担子菌门,猴头菇科,是中国著名的药食两用菌[1]。

猴头菇鲜美无比，菌肉鲜嫩，香醇可口，与熊掌、燕窝、香菇齐名为“四大山珍”。

猴头菇是食用菌中名贵的品种，野生于密林深处，生长在栎(俗称柞树)、胡桃等阔叶树种的立木及朽木上，或生长在活立木的受伤处，数量极稀少，我国黑龙江小兴安岭和完达山出产的猴头菇最负盛名。

野生猴头菇得之不易，现在已掌握了人工培养技术，全国各地均有栽培[2]。

《本草纲目》记载，猴头菇性平，味甘，有“利五脏，助消化”之功能，特别是对胃溃疡，十二指肠溃疡和神经衰弱等患者有很好的保健效果。

猴头菇的生物活性成分有多糖、多肽和脂肪族酰类等物质，其中最主要的是多糖[3]。

近年研究证明，猴头菇多糖有增强巨噬细胞吞噬功能、增强体液免疫功能、促进溶血素形成、降血糖、降血脂、抗白细胞下降、抗凝血、抗突变等作用[4,5].而且，可广泛应用于医药、保健品及功能食品, 作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前景。

据相关文献资料表明，食用菌多糖是目前最具发展前途的医疗保健资源之一。

20世纪60年代以来，随着生物物理和化学科学的发展，人们对多糖的研究逐步活跃起来。

近年来，国内外已从高等担子菌中筛选到200余种有生物活性的多糖物质，我国发现有重要价值的食用菌多糖近30种[6]，并且在多糖的提取纯化、分离鉴定及生物活性等方面进行了深入研究，对生命科学、医学科学的研究和发展具有重要意义。

食用菌多糖的提取主要根据其溶解性质（水溶、水不溶、酸溶或碱溶性的），并结合食用菌原料的特点而确定相应的提取方法。

响应面优化超声波提取猴头菇多糖工艺的研究

ｕｔａｏｉｔｍｐｒｔｒ０ ℃ ，ｕｔｏｉｉ０ｍｉ．Ｉｅｅｃｎｉｏｓｃｎｍａｅｆｌｕｅｏｔｒｗｍａｅａ，ｌｓｎｃｅｅａｕｅ４ｒｌａｎｃｔｒｓｍｅ２ｎｎｔｓｏｄｔｎ，ａｋｕｌｓｆｉａｔｒｌｈｉｓｉ
Ａｓｃ：Ｈｅｉｉｍｒａｅｓａｈａｍａｅａ，ｂｉｇｅｆｃｏｘｅｍｅｔａａｙｅｅｄｆｒｎｈｈｔｒａｂ￣ａｔｒｕｅｉｃｕｓｔｅｒｗｔｒｃｎｉｌｙｓｎｌａｔｒｅｐｒｎ，ｎｚｓｔｉｅｅｔｔａｔｅｍａｅｌｉｌｈｎｉ
响应面优化超声波提取猴头菇多糖工艺的研究
赵洪梅，孙君，谢春阳
１０）１８３１（吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林长春
摘要：以猴头菇子实体为原料，通过单因素试验，确定液料比、超声温度、超声时间３因素对猴头菇多糖得个率的影响，并进行响应面优化，确定了猴头菇多糖提取工艺的最佳条件为：液料比２１１：，超声温度４０℃ ，超声时间２ｎ０ｍｉ。在此条件下提取猴头菇多糖，可充分利用其原料，大大提高多糖得率，最终猴头菇多糖得率达
ｌｕｄ，ｕｔｓｎｃｔｍｐｒｔｒ，ｕｔａｏｉｉｎｈｒｉｍｏｙａｃａｉｅｙｅｄｏｆｅｃ，ａｄａｐｉｄｔｅｒｓｏｓｉｉｑｌａｏｉｅｅａｕｅｒｌｓｎｃｔｒｍｅｏｅｉｕｐｌｓｅｈｒｄｉｌｆｉｌｎｅｃｎｕｎｐｌｈｅｐｎｅｅｓｒｃ，ｄｔｒｎｄｔｅｂｓｃｎｉｏｓｏｘａｔｎｐｏｅｓｆｒｔｅｈｒｃｕｐｌｓｃｈｒｅｍａｅｉｉｕｄ２１：１ｕｆｅａｅｅｍｉｅｈｅｔｏｄｔｎｆｅｔｃｉｒｃｓｏｈｅｉｉｍｏｙａｃａｉ：ｉｒｏｄｔｒｌｉｌａｑ，

猴头菇多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究

猴头菇多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究作者：贾毓宁朱静来源：《安徽农业科学》2017年第31期摘要[目的]优化猴头菇多糖的提取工艺，并对其抗氧化活性进行研究。

[方法]分别采用单因素试验与正交试验对猴头菇多糖的提取工艺进行优化，并以羟自由基清除力、过氧化氢清除力、还原力等试验对猴头菇多糖的抗氧化活性进行研究。

[结果]猴头菇多糖的最佳提取工艺是提取温度85 ℃、液料比1∶20、提取次数3次、提取时间1.5 h/次；猴头菇多糖具有良好的羟基自由基、过氧化氢能力清除能力和一定程度的还原力。

[结论]通过优化获得的猴头菇多糖水提工艺稳定可靠，糖得率高；猴头菇多糖具有一定的抗氧化活性，提示可能与其发挥其他药理作用相关。

关键词猴头菇；多糖；提取工艺优化；单因素试验；正交试验；抗氧化活性中图分类号S646文献标识码A文章编号0517-6611（2017）31-0148-03Abstract[Objective] The research aimed to optimize the extraction process of Hericium erinaceus polysaccharide（HEP）， and study its antioxidant activity.[Method]Singlefactor test and orthogonal test were used to optimize the extraction process of HEP. The antioxidant activities of HEP were tested by hydroxyl radical scavenging power， hydrogen peroxide scavenging power and reducing power.[Result]The optimum extraction conditions of HEP were extracted at 85 ℃， solidliquid rate 1∶20， for 3 times and 1.5 hours per time. HEP had good hydroxyl radical and hydrogen peroxide scavenging ability and a certain degree of reducing power.[Conclusion]HEP obtained by optimum extraction conditions is stable and reliable， the yield of sugar is high. HEP has a certain antioxidant activity， suggesting that it may be related to other pharmacological effects.Key wordsHericium erinaceus；Polysaccharides；Extraction process optimization；Singlefactor test；Orthogonal test；Antioxidative activity自然界的真菌种类极其繁多，其中担子菌科的一些腐生菌是为人们熟知的食物。

猴头菇多糖提取工艺研究进展ppt

03
免疫调节
徐杭民 [3]等使用猴头菇多糖协同刀豆蛋白进行实验，发现小鼠胸腺细胞显著增殖，且促进作用随浓度上升而增强。
Part 3 猴头菇多糖的提取工艺——热水浸提法
样品粉碎真空干燥
李卫旗[4]等以黄木耳为原料，分别以蒸馏水、0.3NHCl、0.5NNaOH为浸提液提取黄木耳多糖，再用蛋白酶法与Sevage法交替进行脱蛋白，最终得到最优浸提工艺为，浓缩液为原体积的20%，乙醇加入的体积倍数为3，在50℃下浸提1.5小时。
Part 2 猴头菇多糖的生物活性
01 预防慢性胃炎
黄萍 [1] 等采用无水乙醇灌刺法，在使用不同剂量灌给药后发现溃疡面积明显减少，而灌胃给药后采用消炎痛皮下注射致小鼠胃壁感染，同样发现黏膜损伤显著降低，溃疡抑制率上升。
02
抗氧化
贾毓宁[2]等通过羟基自由基、过氧化氢清除力及还原力测定等试验，得出猴头菇多糖具有清除一定活性氧自由基能力，从而维持细胞内氧化环境达到抗氧化目的
叶俊[9]等以猴头菇粉为原料，通过超声波辅助提取法提取其中的猴头菇多糖，在正交试验的优化后，得出最佳提取条件为，料液比1:15，超声波功率300W，提取时间15min，超声两次，在最优条件下得到的多糖提取率为16.9%。
参考文献
[1]黄萍,罗珍,郭重仪,操红缨,吴君.猴头菇多糖胃黏膜保护作用研究[J].中药材,2011,34(10):1588-1590. [2]贾毓宁,朱静.猴头菇多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究[J].安徽农业科学,2017,45(31):148-150. [3]徐杭民,谢志慧,张蔚羽,蒋为荤.猴头菇多糖的免疫调节作用[J].中国中西医结合杂志,1994(07):427-428. [4]李卫旗,陈云龙,皇甫宏.金耳多糖的提取及其性能研究[J].菌物系统,1999(03):330-333. [5]魏华,张娣,陆玲,陈福程.几种食用菌多糖的提取与抗氧化性研究[J].南京师大学报(自然科学版),2017,40(02):72-75+88. [6]屈小玄,郑永清,毛姗,吕远平.响应面法优化复合酶法提取猴头菇多糖的工艺研究[J].食品科技,2015,40(07):182-187. [7]屈小玄,郑永清,毛姗,吕远平.响应面法优化复合酶法提取猴头菇多糖的工艺研究[J].食品科技,2015,40(07):182-187. [8]傅奇,肖玉娟,毛玉婷,林慧霞,周小伟.超声波协同复合酶提取猴头菇多糖的研究[J].农产品加工,2020,(10):34-38+43. [9]傅奇,肖玉娟,毛玉婷,林慧霞,周小伟.超声波协同复合酶提取猴头菇多糖的研究[J].农产品加工,2020,(10):34-38+43.

猴头菇多糖复合酶法提取及重金属去除工艺研究

（９９．４ ± ２．０３）％、（９０．９￣２．６１）％、（８０．３￣１．７６）％和（８９．８￣２．８５）％；当使用量大于０．０６ｇ／１００ｍＬ时，絮凝剂对样品中重金
属无去除作用。
关键词：猴头菇；多糖；复合酶；重金属去除
ＳｔｕｄｙｏｎＣｏｍｐｌｅｘＥｎｚｙｍａｔｉｃＥｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄＨｅａｖｙＭｅｔａｌＲｅｍｏｖａｌＰｒｏｃｅｓｓｏｆＨｅｒｉｃｉｕｍＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔａｎｄｈｅａｖｙｍｅｔａｌｒｅｍｏｖａｌｐｒｏｃｅｓｓｏｆＨｅｒｉｃｉｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．ＡＣｏｍｐｏｓｉｔｅＥｎｚｙｍａｔｉｃｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｈｅＨｅｒｉｃｉｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗａｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｂｙｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｉｍｅｒｎｔ；ｃｈｉｔｏｓａｎ，ａｃｔｉｖａｔｅｄｃａｒｂｏｎａｎｄｄｉａｔｏｍａｃｅｏｕｓｅａｒｔｈｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｏｆｈｅａｖｙｍｅｔａｌｉｏｎｓｒｅｍｏｖａｌｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ．ＴｈｅＨｅｒｉｃｉｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓＷｅｒｅＤＨ５．５．ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ５０ ℃ ，ｅｎｚｙｍｅａｎｄｓｕｂｓｔｒａｔｅｒａｔｉｏ１：１０，ｔｉｍｅ９０ｍｉｎ，ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆ９．５５％：ｔｈｅｃｈｉｔｏｓａｎｌｆｏｃｃｕｌａｔｉｏｎｒｅｍｏｖｉｎｇＨｅｒｉｃｉｕｍｅｒｉｎａｃｅｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｈｅａｖｙｍｅｔａｌｓ

一种从猴头菇孢子粉中提取多糖的方法

一种从猴头菇孢子粉中提取多糖的方法
猴头菇是一种营养丰富的食用菌，在人类饮食和药用方面有很高的价值。

其中的多糖是其主要药用成分之一，有着多种生物活性，如抗肿瘤、抗菌、降血脂等功效。

因此，提取猴头菇孢子粉中的多糖对其药用价值具有重要意义。

现有一种从猴头菇孢子粉中提取多糖的方法：首先将猴头菇孢子粉加入适量的水中，用酶解酶进行预处理，然后进行超声波处理，使其产生剪切和振动的效应，最后进行过滤处理。

这种方法具有操作简单、成本低、提取效率高等优点。

利用这种方法提取的猴头菇多糖可以应用于制药、保健食品等领域，在人体内发挥多种生物学功能，拥有广泛的应用前景。

同时，这种提取方法也为猴头菇的研究和利用提供了有力的技术支持。

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基础研究锅：北京医疗设备厂。
１实验方法．４
昊志明，猴头菇多糖的提取工艺等：
３＝＝７Ｉ
１．标准曲线的建立．１４采用苯酚一硫酸法，以葡萄糖为标准品。分别取标
准溶液００、．、．、．、．、．、．ｍ于比色管中；、．００６０８１１１Ｌ２４０２４加水至２。再各￣２ｍＬＪ５％苯酚溶液，［ｍＬ／摇匀。缓慢加
图２不同提取温度对多糖的影响
Ｆｉ．Ｅｆｅｔｏｘｒｃｉｎｔｍｐｒｔｒｎｙｅｄｆｇ２ｆｃｅｔａｔｏｅｅａｕｅｏｉｌｓｏｆｐｏｙａｃａｉｅｌｓｃｈｒｄ
从图２以看出，可随着温度的升高，多糖的提取率也升高；温度达到８０℃以后提取率开始下降，下降但趋势平缓。这是由于随着温度的升高，分子运动速度加
２１标准曲线．多糖标准液的浓度与吸光度的关系，图１见。从图１出，得多糖在５／～０ｍ／的范围内，Ｌ７ｇｍｇＬ线性
成分近于完全溶出，再增大溶剂用量，得率就不会有明显的变化。所以，提取剂的用量以原料的２０倍为好。
取最佳工艺条件进行提取，最大提取率可达到４．５％。
关键词：头菇；猴多糖；－ｇ取
ＥｘｒｔｏＴｅｈｌｇｆＰｏｙａｃｒｄｏｍｅｉｉｍｉａｅｓｔａｉｎｃｎｏｏｙｏｌｓｃｈａｉｅｆｒＨｒｃｕＥｒｎｃｕＷＵｉｍｉｇ，ＬＩＧｏｇｂｎ，ＸＩＸｉ — ａ，ＬＵｅＺｈ — ｎｎ — ｉＮｕｌｎ ’ ＩＷｉ
水用量的增加而增加，料液比大于１０，增加水的：后再２
每个处理进行３重复，平均值，用ＳＡＳ次取采ＰＳ统计软件进行数据分析。
２结果与分析
用量，提取率明显下降。因可能是因为溶剂的用量越原
大，提取就越充分，但是当达到一定比例的溶剂将有效
快，、渗透扩散、溶解速度加快，多糖更容易从细胞中使转移到溶剂中，从而使多糖的得率提高，但是当温度上升到一定程度时，提取率反而下降，这可能是因为温度过高多糖被氧化破坏，从而使其提取率不再增加甚至下降。所以，温度以８提取０℃为宜。
ｒａｈｄ４５％ｂｅｏｔｍｘｒｃｉｎｔｃｎｌｇａａｔｒ．ｅｃｅ．ｙｔｐｉｈｍｕｅｔａｔｈｏｏｙｐｒｍｅｅｓｏｅ
ＫｅｙｗｏｒｓＨｅｉｉｍｒｎｃｕ；ｏｙａｃａｉｅｅｔａｔｎｄ：ｒｕｅｉａｅｓｐｌｓｃｈｒｄ；ｘｒｃｉｃｏ
２１０１年７月
＿＝３６＝
第３２卷第７期
ＦｏｅｅｒｎｅｅｐｅｔｏｄＲｓｃＡｄｖｌｍｎａｈＤｏ
食品研究与开发
基础研究
猴头菇多糖的提取工艺
吴志明ｔ，李公斌辛秀兰，，刘玮
（．１北京电子科技职业学院，北京１０２；．００９２淄博职业学院，山东淄博２５１）５３４
猴头菇（ｉｉｍｅｉｃｕ）Ｈｅｃｕｒａｅｓ又名猴头菌，ｒｎ在分类
学上隶属担子菌门猴菇目猴菇科猴菇属。它内含丰富
１材料与方法１原料．１
的蛋白质、多种氨基酸、矿物质和维生素，营养价值居菌类之首，是一种著名的药膳两用食用菌。猴头菇多糖是猴头菇中重要的生物活性物质，可作为免疫促进剂，能控制细胞的分裂和细胞分化，调节细胞的生长和衰老网。经检测，猴头菇多糖具有明显的
２５，ｈｎｏｇＣｉ）５３４Ｓａｄｎ，ｈａ１ｎ
Ａｂｔａｔｉｇｅｆｃｏｘｅｉｎｓｎｏｏｏａｅｔｐｃｅｅｈｄｃｍｂｎｄｗｉｅｉａｉｎｗｅｅｓｒｃ：Ｓｎｌａｔｒｅｐｒｍｅｔａｄａｈｇｎｌｔｓａｋｔｍｔｏｏｉｅｔｔｓｔｔｒｈｈｕｏ
称取５ｇ头菇干粉，１０猴按：比例在８２０℃水浴中提取３，０ｒｉ离，０ｉ，４０ｍｎ１１ｎ去滤渣得滤液，ｈ０／￣ｍ分别合并滤液及上清液，取浸提液０１Ｌ加清水至２Ｌ加１．ｍ，，０％ｍ苯酚溶液２，摇匀，ｍＬ用移液管向每支试管中缓慢加入
ＯＯ０Ｏ００ＯＯ
量，并最终求得提取率。
８７６５４３２１０
１．多糖提取的单因素试验．３４
称取５猴头菇干粉，ｇ依次对提取温度、料液比、Ｈｐ
和提取时间进行单因素试验，测定方法同上。
Ｆｇ１Ｓａｎａｄｃｖｆｐｏｙａｃａｉｅｉ．ｔｄｒｕｒｅｏｌｓｃｈｒｄ
１．多糖的测定嗍．２４
关系良好，２０９，Ｒ＝．９回归方程为ｙＯｌｘＯ６（为吸９＝．Ｏ＋．１ｙＯ０
称取５０苯酚，１０Ｌ．ｇ置０ｍ容量瓶中，用水稀释至刻
功能食品，作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前
度摇匀，光，藏。避冷１．标准溶液的配制．３２
景。本文对猴头菇的提取工艺进行研究。
精密称取于１５ｃ干燥至恒重的葡萄糖标准品０ｃ０２。．ｇ将其定容至５Ｌ５０ｍ容量瓶中，１至另一个吸取ｍＬ
基金项目：科研基地一物技术在制药和农产品加工中的应用平台建生设；北京市属市管高等学校人才强教深化计划项目资助；山东省高等学院优秀青年教师国内访问学者项目
５容量瓶中，０ｍＬ再稀释到刻度，到浓度为１０ｍ／得０ｇＬ
的标准溶液。
光值，为多糖浓度）。
２提取温度对多糖提取率的影响．２
提取温度对多糖提取率的影响，见图２。
浓ＨＳｍＬ并放人冷水中冷却，ｚＯ６，摇匀，置２ｉ，静０ｍｎ
在４０ａ下比色测定吸光度，将测定的吸光度代人标９ｍ准曲线，求被测液多糖浓度，进而求得浸提液多糖含
（．ｅｉｌｃｏｉＳｉｃｄｅｈｏｇｏａｏａＣｌｇ，ｅｉｇ０９Ｃｉ；．ｉｏａｏａＣｌｇ，ｉｏ１ＢｉｎＥｅｔｎｃｃｎｅｎｃｎｌｙｃｔｎｏｅｅＢｉ０２，ｈａ２ＺｂＶｃｔｎｌｏｅｅＺｂｊｇｒｅａＴｏＶｉｌｌｊ１０ｎｎｏｉｌ
ｍａｅｉｌｔｉｕｄ１ｇ２ｔｒａｏｌｑｉ：５ｍＬ，ｐｖｌｅａ．，ｅｔａｔｏｉｏｒ．ｔａｔｏｆｃｅｃｏｙａｃａｉｅＨａｕ５５ｘｒｃｉｎｔｔｍｅ３ｈｕｓＥｘｒｃｉｎｅｆｉｎｙｏｐｌｓｃｈｒｄｉｆ
以提取液中提取液中多糖的百分含量为考察指标，多糖含量以吸光度值表示。
１．数据分析．５４
２３料液比对多糖提取率的影响．
料液比对多糖提取率的影响，图３见。
从图３以看出，比在１ — ：之间，随着可料液：１５５２多糖
抗补体活性和促进淋巴细胞增殖作用，对提高肌体免疫力具有重要的作用。可广泛应用于医药、保健品及
干猴头菇：买于农贸市场。购
１试剂与溶液的配制．２
１．主要试剂．１２
葡萄糖标准品由北京化工厂提供；酚、２Ｏ、苯浓Ｈｓ无水乙醇、盐酸等试剂：均为国产分析纯。１．．２２２％苯酚溶液的配制啕
作者简介：志明（９４）（）实验师，吴１７一，汉，男本科，方向：研究食品生
产与加工。
１主要仪器和设备．３紫外可见分光光度计Ｕ９０：Ｖ１０岛津公司；电子分
通信作者
析天平：奥豪斯国际贸易（上海）限公司；温水浴有恒
摘要：采用单因素分组实验和正交试验的方法，对猴头菇中的多糖提取工艺进行研究，考察了提取温度、料液比、
ｐＨ和提取时间对多糖的影响，确定最佳的工艺参数为提取温度为８０℃、料液比１５咖Ｌ、Ｈ．、：（２）ｐ５５提取时间为３。采ｈ
ｐｒｏｍｅｏｄｔｒｎｅｂｓｏｄｔｎｓｆｒｐｌｓｃｈｒｄｒｒｃｕｅｉａｅｓｆｅｔｆｅｔａｔｏｅｆｒｄｔｅｅｍｉｅｔｅｔｃｎｉｉｏｏｙａｃａｉｅｆｍＨｅｉｉｍｒｎｃｕ．Ｅｆｃｓｏｘｒｃｉｎｈｏｏｔｍｐｒｔｒ，ｒｔｆｍａｅｉｌｔｉｕｄＨａｕｅｎｘｒｃｉｎｔｏｏｙａｃａｉｅｗｅｅｎｅｔａｅ．ｅｅａｕｅａｉｏｔｒａｏｌｉ，ｐｖｌａｄｅｔａｔｏｉｏｑｍｅｎｐｌｓｃｈｒｄｒｉｖｓｉｔｄｇＯｐｉｍｘｒｃｉｎｐｏｅｓｎａａｔｒｗａｅｅｉｅｓｆｌｗｓｘｒｃｉｎｔｍｐｒｔｒｔ８ ℃ ．ｒｔｆｔｍｕｅｔａｔｒｃｓｉｇｐｒｍｅｅｓｄｔｒｎｄａｏｌ：ｅｔａｔｅｅａｕｅａ０ｏｍｏｏａｉｏｏ