农产品快速检测技术W1201-5 速测卡法检测莱克多巴胺的原理及速测卡使用方法介绍-微测试

蔬菜、水果中农药残留速测技术果蔬农残速测卡果蔬农残检测卡农药残留速测卡对蔬菜、水果中农药残留速测技术的发展具有重要意义。

一、蔬菜、水果中农药残留速测原理及特点（一）蔬菜、水果中用于快速检测的农药有两类一是有机磷类农药，有甲拌磷（3911）、对硫磷（1605）、甲胺磷等；二是氨基甲酸脂类农药，有呋喃丹、抗蚜威、西维因等。

有机磷类农药和氨基甲酸脂类农药在我国使用比较广泛，这类农药中有不少为高残留、高毒农药。

有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法，不受时间、地点、场合等条件限制，甚至普通消费者也能够操作使用，有利于及时发现问题、采取措施，控制高残留农药蔬菜的摄入，降低农药中毒发生率，保障消费者食菜安全。

（二）蔬菜、水果中农药残留速测原理有机磷和氨基甲酸酯类农药残留可以和人体内神经传导物质—胆碱脂酶相结合，即抑制酶的生理活性，引起神经传导过程受到阻碍，出现中毒症状，轻则引起慢性头疼、记忆力减退等症状，重则导致呼吸困难，甚至死亡。

蔬菜中农药残留快速检测是基于“在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关”这一原理，提取制备了胆碱脂酶作为检测试剂，根据酶的活性变化程度来测定蔬菜中残留的农药。

正常情况下，胆碱酯酶（酶）催化乙酰胆碱（底物）水解，其水解产物（胆碱）与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

基本的化学反应式：酶(胆碱酯酶）+ 底物（乙酰胆碱） → 中间产物（胆碱）中间产物（胆碱）+显色试剂 → 黄色物质基本检验机理抑制率的概念 抑制率指的是农药对酶抑制程度的指标。

其计算公式为： I=（A0 - At ）/ A0*100% I 为抑制率 A0为3分钟对照溶液吸光度的变化 At 为3分钟样品溶液吸光度的变化 二、速测仪检测原理、结构 前面介绍过，农药残留速测是在412nm 处测定反应产物吸光度随时间的酶+样本+底物大量中间产物 少量中间产物 无中间产物 溶液呈黄色 溶液呈淡黄溶液呈无色 抑制率﹤50%，没有或少部分活抑制率≧50%，大部分活性部抑制率100%，无活性或严显色剂 显色剂 显色剂变化值，因此农残速测仪即是分光光度计的一种新的形式。

《农产品/食品快速检测技术》课程-微测试一、单选题1、速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，取样量通常为（）。

A．0.5g左右B．1g左右C．2g左右D．3~5g参考答案：D难度：低2、速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，装有样品的离心管水浴的温度为（）。

A．37℃B．60℃C．80℃D．沸水浴参考答案：C难度：中3、速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，样品水浴后需经离心机离心以得到澄清样液，离心的转速通常为（）。

A．2000r/minB．3000r/minC．4000r/minD．无转速限制参考答案：C难度：中二、多选题1、目前检测的“瘦肉精”类违禁药品主要是（）A、盐酸克伦特罗；B、莱克多巴胺；C、沙丁胺醇；D、磺胺类药。

参考答案：A；B；C难度：中三、判断题1、莱克多巴胺快速检测卡启封后，若不使用应密封保存至冰箱留待下次再用。

参考答案：F难度：低2、莱克多巴胺快速检测卡应储存在2℃～8℃，需要时取出平衡至室温后方可使用。

参考答案：F难度：中四、填空1、样品从冰箱中取出后，应将样品恢复至，然后进行测定。

参考答案：室温难度：中2、进行莱克多巴胺的快速检测时，样液滴加到检测孔后min可观察检测结果，min 后结果无效。

参考答案：5，10难度：中五、简答题1、请列举常见的快速检测莱克多巴胺的方法。

参考答案：速测卡法、酶联免疫吸附法（ELISA法）。

难度：中五、综合题1、请叙述速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，若没有水浴设备和离心机，应如何处理。

参考答案：（1）如果没有水浴锅这种精确控温设备，可将水煮沸后停止加热3min，然后将离心管放入其中并浸泡10min；（2）如果没有离心设备，可将离心管置于平整台面静置5min，同样能起到分离上清液的效果；难度：高。

莱克多巴胺的检测方法
方耀国;张炳财;郑志东;王卓南;林慕群
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】2009(000)005
【摘要】莱克多巴胺又名雷托帕明、舒喘灵、权莱克、金莱多巴、Paylean．化学成分为1-（4-羟基苯基）-2-[1-甲基-3-（4-羟基苯基）-丙氨基]-乙醇。

动物生产中以RCT盐酸盐形式用作饲料添加剂，称之为盐酸莱克多巴胺（RCT·HCI）。

莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）与沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）是苯乙胺类药物，均为中等极性的疏水性物质，呈酸碱两性。

【总页数】2页(P120-121)
【作者】方耀国;张炳财;郑志东;王卓南;林慕群
【作者单位】广州市动物卫生监督所,广州,510440;广州市动物卫生监督所,广州,510440;广州市动物卫生监督所,广州,510440;广州市动物卫生监督所,广
州,510440;广州市动物卫生监督所,广州,510440
【正文语种】中文
【中图分类】S8
【相关文献】
1.莱克多巴胺检测方法研究进展 [J], 朱楠楠;师忠义
2.浅谈畜产品中莱克多巴胺的检测方法 [J], 李政清;聂婉;伍晓红;陈秋玲;王琤韡
3.生物样本中莱克多巴胺检测方法的研究进展 [J], 王文珺;李阳;叶云锋;江海洋
4.莱克多巴胺ELISA间接非竞争检测方法的建立 [J], 周鑫魁;洪霞;钱滢文;高志莹;吴永宝;刘琦
5.浅析莱克多巴胺的危害及检测方法 [J], 董科;刘超;朱慧敏;李慧;孟美辰;张雪涛;何琪
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莱克多巴胺（瘦肉精）快速检测卡——胶体金法(血清)一、简介“瘦肉精”快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜（NC膜）检测线上“瘦肉精”-蛋白偶联物的结合。

如果样本“瘦肉精”含量≥3ppb/ml，检测线不显颜色，结果为阳性。

反之，检测线显红色，结果为阴性。

本产品是检测莱克多巴胺（瘦肉精）的快速筛选试剂，整个检测过程只需5-10分钟，适用于尿液样品的检测。

二、试剂组成1、莱克多巴胺免疫胶体金快速检测卡（50份/盒）；2、一次性塑料吸管（1个/袋）；3、干燥剂（1片/袋）；4、使用说明书（1张/盒）。

三、标本收集用干燥、洁净的离心管或适当容器采集血清。

如果不立即检测，可将血清冷冻保存；血清在2-8℃冷藏可保存24小时，要注意避免腐败造成失效或污染。

如果血清出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测。

四、操作步骤1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。

2、撕开装有莱克多巴胺检测卡的包装袋，小心取出检测卡，水平放置于实验台上。

3、用塑料吸管吸2-3滴血清样本加入样本孔中。

4、5-8分钟内观察结果，10分钟后结果无效。

五、结果判定1、阳性结果：出现一条红色质控线（C）。

2、阴性结果：出现质控线（C）和反应线（T）两条红线。

3、无效结果：无红线出现，表明检测结果无效，需重新实验。

六、注意事项1、检测卡在保质期内一次性使用。

4℃冰箱中保存的检测卡检测前应平衡至室温后再开袋使用，否则会影响检测结果。

2、谨防检测卡受潮，铝箔包装袋受损或检测卡受潮后。

检测卡不能使用。

3、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面，检测时避免阳光直射。

4、塑料吸管不可混用，以免交叉污染；5、出现阳性结果，应用本卡复查并作阳性对照实验，必要时送实验室进一步定量。

6、铝箔包装袋中的小包是干燥剂，不可误服。

7、自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。

莱克多巴胺检测方法1．分析目标化合物莱克多巴胺2、仪器设备高效液相色谱-质谱仪（LC-MS）。

3、试剂除下列试剂外，使用附录2所列试剂。

莱克多巴胺：含莱克多巴胺99％以上，熔点为163.9℃～164.6℃。

4．试验溶液的制备1）肌肉、肝脏、肾脏和其它可食用部分肌肉：尽可能除去脂肪层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。

肝脏、肾脏和其它可食用部分：搅碎混合均匀后，称取其5.00g。

加入20mL乙酸乙酯和1mL4mol／L碳酸钾溶液，均质后，以每分钟3000转离心分离10分钟，收集乙酸乙酯层。

离心管内残留物中加入20mL乙酸乙酯，振荡5分钟后，按上述同样条件离心分离，合并所得的乙酸乙酯层，40℃以下浓缩，除去乙酸乙酯。

残留物中加入30mL乙腈溶解，移入分液漏斗中。

加入30mL乙腈饱和正己烷，振荡，弃去正己烷层，重复操作2次。

乙腈层在40℃以下浓缩，除去乙腈。

残留物中加入1.0mL 甲醇溶解，此为试验溶液。

2）脂肪尽可能除去肌肉层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。

加入30mL乙腈和30mL乙腈饱和正己烷，均质后，以每分钟3000转离心分离10分钟，乙腈层移入分液漏斗中。

离心管内的正己烷层和残留物中加入30mL乙腈，振荡5分钟，按上述同样条件离心分离。

合并所得的乙腈层于前面的分液漏斗中，加入30mL 乙腈饱和正己烷。

激烈振荡5分钟后，静置，收集乙腈层， 40℃以下浓缩，除去乙腈。

残留物中加入1.0mL甲醇溶解，此为试验溶液。

5．标准曲线的制作将盐酸莱克多巴胺标准品配制成0.025～0.5mg（以莱克多巴胺计）/L的甲醇溶液数点，分别注入GC-MS中，用峰高法或面积法绘制成标准曲线。

6．定量试验注入试验溶液于GC-MS中，根据5的标准曲线求出莱克多巴胺的含量。

7．测定条件LC-MS柱：十八烷基甲硅烷基化硅胶（粒径2～5μm），内径2.0～6.0mm、100～250 mm的不锈钢管。

柱温：40℃。

流动相：乙腈：0.05%三氟乙酸（1：4）混合溶液。

瘦肉精〔莱克多巴胺〕试纸卡使用说明书
1 适用范围：本产品适用于猪的肌肉组织中莱克多巴胺的快速筛查。

对猪的肝脏、肺脏、肾脏组织，以及尿液中莱克多巴胺的快速筛查具有一定的参考价值。

2 检测原理：莱克多巴胺快速检测卡是基于竞争法胶体金免疫层析技术，将检测液参加速测卡上的样品孔，检测液中的莱克多巴胺与试纸卡上的抗体结合形成复合物，假设浓度低于灵敏度值，逐渐凝集成一条可见的T线；假设浓度高于灵敏度值，那么不会再形成可见T线而形成可见的C线。

3 灵敏度：5L盐酸克伦特罗、群勃龙醋酸酯、氯霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类和四环素类等药物，结果均呈阴性。

使用本品检测1μg/mL沙丁胺醇，结果显示均呈阴性。

7 包装：试纸卡、离心管和3mL吸管各5个。

15mL离心管1个〔清洗后可反复使用〕。

8 保存和稳定性：4~30℃阴凉枯燥处保存，不可冷冻，防止阳光直晒，生产日期起18个月内有效。

农药残留速测卡法原理
农药残留速测卡法是一种用于检测农产品中农药残留量的方法，
通过简单的操作，可以快速、准确地判断农产品是否含有过量的农药，以保障人们的食品安全。

下面，我将分步骤地来阐述一下这种方法的
原理。

第一步：准备样品
在进行农药残留速测卡法之前，首先需要准备好样品。

样品是指
从农产品中取出的检测样本，可以是果蔬、肉类等。

在取样的过程中，需要注意不要污染样品，避免使用未清洗的容器或工具。

第二步：制备荧光标记试剂
农药残留速测卡法的核心是一种荧光标记试剂，该试剂通常由一
种寡核苷酸和荧光染料组成。

在制备荧光标记试剂的过程中，需要对
试剂成分进行精细调控，以确保试剂的稳定和灵敏度。

第三步：与样品混合
制备好荧光标记试剂后，可以将其与样品混合。

在此过程中，荧
光标记试剂会与农药残留物相互作用，产生荧光物质。

当农药残留量
较低时，荧光物质的浓度较低，难以被检测出来；而当农药残留量较
高时，荧光物质的浓度较高，可被明显检测出来。

第四步：读取荧光信号
将混合好的荧光标记试剂和样品置于检测卡单元中，等待一段时
间后，可通过读取荧光信号来判断农产品中的农药残留量。

当荧光信
号较弱时，表示该样品中农药残留量较低，符合国家食品安全标准；
而当荧光信号较强时，则表示该样品中农药残留量较高，不符合安全
标准。

总之，农药残留速测卡法是一种快速、准确的农药残留量检测方法。

通过精细的荧光标记试剂制备、样品准备和荧光信号读取等步骤，可以实现对农产品中农药残留量的快速而准确地检测，以确保人们的
食品安全。

蔬菜农药残留快速检测河南省安阳市455000摘要：蔬菜是人民日常生活中不可或缺的食品，随着人民生活水平日益提高，蔬菜消费量已超过口粮成为第一大消费食物，蔬菜质量安全水平成为全社会关注的焦点。

然而，作为现代农业主要安全隐患之一的农药残留问题，决定着蔬菜等农产品质量安全水平，更影响着现代蔬菜产业健康持续发展。

关键词：蔬菜；农药残留；快速检测引言该年来，蔬菜中农药残留问题已成为人们生活中的一个中心问题，引起了各国政府、公众和媒体的高度关注。

我国最常见的农药检测方法主要是气相色谱、液相色谱、气相色谱-质谱联用以及液相色谱-质谱联用等检测手段。

这些检测方法均需使用高端设备，且仪器设备操作人员必须为专业的检验人员，需要经授权持证上岗。

同时，仪器设备的后期维护和保养成本也较高。

速测卡法能在较短的时间内快速、准确地检测蔬菜中的农药残留含量。

1快速检测方法及原理方法:GB/ T5009. 199-2003酶发酵率。

在某些情况下有机磷和氨物质可以降低与农药浓度有关的加仑的正常功能。

通常，酶会释放神经递质物质(乙酰胆碱)，其水溶性证明和染料反应产生黄色物质。

透过使用光度测定计测量一段时间内的吸收量来计算抑制率。

采用抑制率可以确定样品中是否含有磷或氨物质。

2蔬菜样品中农药残留检测标准中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、中华人民共和国农业部和国家食品药品监督管理总局3个部门联合发布的《食品安全国家标准水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB23200.8—2016）、《食品安全国家标准蔬菜中非草隆等15种取代脲类除草剂残留量的测定液相色谱法》（GB23200.18—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中噻菌灵残留量的测定液相色谱法》（GB23200.17—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定液相色谱法》（GB23200.19—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中唑螨酯残留量的测定液相色谱法》（GB23200.29—2016）等。

莱克多巴胺的检测方法及注意事项时冉冉;姜波;王涛【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2013(000)004【总页数】2页(P36-36,56)【作者】时冉冉;姜波;王涛【作者单位】山东省济南市畜产品质量安全监测中心山东济南 250000;山东省济南市畜产品质量安全监测中心山东济南 250000;山东省济南市动物卫生监督所，山东济南 250002【正文语种】中文莱克多巴胺属于β-兴奋剂，可行使营养重新分配，是一类结构和功能类似于肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物，它可以加快畜禽生长速度，降低胴体脂肪含量，提高瘦肉率。

在欧盟β-兴奋剂已被禁止用于家禽的生长促进剂，我国在《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》中也有明文规定，但由于莱克多巴胺属于非处方药，且价格远低于克伦特罗，因此，其非法应用者不断增多。

酶联免疫吸附法是目前β-兴奋剂类最佳的检测方法。

ELISA检测方法有双抗体夹心法测抗原、间接法测抗体、竞争法测抗体等。

利用竞争酶联免疫吸附法检测瘦肉精，具有速度快，灵敏度高的特点，是保证肉品卫生安全的较好监控方法，对以后瘦肉精检测工作的发展具有指导作用。

1 试验原理其原理是利用多克隆抗体既能与莱克多巴胺结合，也能与包被抗原结合。

这些包被抗原被固定在酶标板孔壁上，当样品中含有莱克多巴胺时，它与包被抗原竞争结合抗体中有限量的结合位点。

由于每一个孔中抗体的结合位点数相同，当样品中莱克多巴胺浓度低时，就有更多抗体的位点与包被抗原结合，更多的抗体被固定在酶标板壁上，就会与更多的酶标二抗结合，所以结果就呈现深蓝色。

相反，样品的莱克多巴胺浓度高，结果就呈现浅蓝色。

加入终止液后，蓝色相应变成黄色，然后用酶标仪进行测定。

这种方法可定性、定量检测尿液、饲料、组织样本中莱克多巴胺的残留量。

2 实验材料与方法2.1 试剂和材料莱克多巴胺-酶联免疫试剂盒，去离子水，猪肉样本。

2.2 仪器酶标仪、天平、均质器、氮气吹干装置、离心机、振荡器、微量移液器等。