NOX4-NLRP3信号通路在衰老小鼠肾脏纤维化中的激活研究

网络出版时间：２０２２－０６－２７１７：５３　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０６５．Ｒ．２０２２０６２４．１７３３．００３．ｈｔｍｌＮＯＸ４ ＮＬＲＰ３信号通路在衰老小鼠肾脏纤维化中的激活研究韩玉立，董夏男，杨　柳，李学望，李　艳，李卫平，李维祖２０２２－０５－１８接收基金项目：国家自然科学基金（编号：８１６７１３８４、８１９７０６３０）作者单位：安徽医科大学基础医学院药理学教研室，合肥　２３００３２作者简介：韩玉立，男，硕士研究生；李维祖，男，博士，教授，博士生导师，责任作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｌｉ ｗｅｉｚｕ＠１２６．ｃｏｍ摘要　目的　探索ＮＡＤＰＨ氧化酶４（ＮＯＸ４）和核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体蛋白３（ＮＬＲＰ３）炎症小体激活在衰老相关肾损伤中的作用和机制。

方法　以６、１６、２０和２４月龄小鼠为研究对象，试剂盒检测血清肌酐（ＳＣｒ）和尿素氮（ＢＵＮ）水平；肾脏组织冰冻切片检测β 半乳糖苷酶（β Ｇａｌ）及活性氧（ＲＯＳ）的水平。

ＨＥ、ＰＡＳ和Ｍａｓｓｏｎ染色观察肾脏的病理变化；免疫组化检测胶原蛋白Ⅳ（ＣＯＬ４）和ＮＬＲＰ３的表达。

蛋白免疫印迹检测肾脏组织ＮＯＸ４ ＮＬＲＰ３信号通路中相关蛋白的表达。

结果　与６月龄小鼠比较，１６月龄小鼠ＢＵＮ和ＳＣｒ水平、肾脏β Ｇａｌ活性及ＲＯＳ水平轻度升高，肾小球和肾小管损伤较轻，没有明显的肾脏纤维化。

而在２０和２４月龄小鼠中上述指标则增加，肾小球和肾小管的损伤增加，出现了肾脏的纤维化。

此外，介导ＲＯＳ生成的ＮＯＸ４及ＮＬＲＰ３炎症小体相关蛋白的表达在２０和２４月龄小鼠肾脏中上调。

结论　ＮＯＸ４ ＮＬＲＰ３信号通路可能在衰老过程中激活并促进肾脏老化和肾脏纤维化。

关键词　ＮＡＤＰＨ氧化酶４；ＮＬＲＰ３炎症小体；氧化应激；肾脏衰老；肾脏纤维化中图分类号　Ｒ３６４ ３文献标志码Ａ文章编号１０００－１４９２（２０２２）０７－１０２２－０７ｄｏｉ：１０．１９４０５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ１０００－１４９２．２０２２．０７．００３ 衰老是众多疾病的潜在风险因素。

综述NLRP3炎性小体在肾纤维化中的研究进展！袁哲李均(遵义医科大学珠海校区中药应用与基础研究重点实验室，广东省珠海市519100,电子邮箱：605358584@)【提要】肾纤维化是肾脏损伤不断积累的结果，是各种肾脏病进展到终末期肾病的病理学基础。

炎症参与肾纤维化的发生发展，而炎性小体在肾内激活后释放促炎细胞因子可加速促进纤维化的形成。

研究发现，核昔酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在肾纤维化时表达增加。

本文就NLRP3炎性小体在肾纤维化中的作用进行综述#【关键词】肾纤维化;核昔酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3；炎性小体；肾脏损伤；炎症；综述【中图分类号】R392&R692【文献标识码】A【文章编号】0253细304(2020)03-0338-04 DOI：10.11675/j.issn.0253-4304-2020.03.23肾纤维化是肾脏对多种致病因素(如炎症、损伤、局部缺血、免疫应答等)产生的病理性修复反应，包括肾小球硬化和肾间质纤维化,是各种肾脏疾病进展到终末期肾病的共同途径和主要病理学基础，其特征是细胞外基质的异常沉积％肾间质纤维化发生机制涉及炎症、氧化应激、凋亡、多种细胞因子作用等方面。

研究表明，慢性持续性炎症是慢性肾病进展的重要机制［1］%虽然内外因素导致的肾损伤引起的炎症应答是机体的一种保护性机制，但持续存在的炎症会成为有害因素，促进肾间质纤维化的形成。

近年来,随着对炎性小体研究的不断加深，其在调节炎症反应及肾纤维化中的作用也越来越受到人们的重视。

炎性小体是由Nod样受体家族蛋白与PYHID家族蛋白组成的细胞质多蛋白复合物，能被多种病原相关分子模式"pathogen-associated molecular pdtem,PAMP)或损伤相关分子模式(damage-associated molecular pdtem,DAMP)激活,在先天免疫反应中起重要作用％研究表明,抑制核5酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (nucleotide-binding o/gomeezation domain-lide protWn 3,NLRP3)炎性小体的表达可以减少肾纤维化,对肾脏起到保护作用［2］。

56学术硏讨CHINA RURAL HEALTH贝那普利对肝纤维化小鼠肝组织N0X4及Angll表达的影响程少波’王翠萍2（1.中国重型汽车集团有限公司医院山东济南250031）（2.山东省济宁市泗水县柘沟镇计划生育服务站山东济宁273214）【摘要】目的：为了探究肝病的治疗方式，采取在肝纤维化的小鼠身上进行相关的研究，主要通过研究贝那普利对肝纤维化小鼠肝组织N0X4及Ang II表达方式，进一步探索贝那普利可能的抗纤维化机制。

方法：选择身体状况良好，且不具备其他疾病的小鼠共计22只，通过随机的方法将其分为3组，其中正常对照组有6只小鼠，正常饲养；模型组有8只小鼠，制备16%的四氯化碳进行诱导的小鼠肝纤维化模型；贝那普利治疗组有8只小鼠，在给予四氯化碳诱导的同时还必须要进行贝那普利灌胃。

结果：模型组的小鼠相对于正常对照组的小鼠来说，其NOX4mRNA表达有明显的升高。

治疗组肝匀浆Ang II浓度较模型组有所下降，而且治疗组肝组织NOX4mRNA的表达较模型组也出现了明显的下降（P<0.05）o结论：贝那普利对肝纤维化小鼠具有一定的治疗作用，能够通过Angl I的表达来抑制其他可能会出现的不良反应，对治疗肝纤维等肝部疾病来说具有重要的意义。

【关键词】贝那普利；肝纤维化；四氯化碳由于现代人的生活质量变得越来越好，饮食种类愈加丰富，但是这样造成了很多亚健康疾病的出现，尤其是对于肝脏的损坏是极其重要的。

所谓的肝纤维化主要是由于各种各样的病因才会引起慢性反复肝损伤后的反应，主要的表现形式则是在肝脏细胞外基质（ECM）的弥漫性过度沉积。

通过对相关的临床试验和案例进行研究，能够清楚地发现在肝脏內部存在着完整的局部肾素-血管紧张素系统，也就是常说的RAS系统，由于血管紧张素会转换出大量的经典轴，这些经典轴中最为有效的效应因子就是Ang Do AngH存在于体内长时间将使会有效地刺激肝星状细胞（HSC）进行迅速的增值与活化，使得大量的炎症因子和粗纤维化因子衍生出来，造成了肝部的纤维化程度严重。

NOX4相关信号通路在肝纤维化发病机制中的作用罗方云【摘要】还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)是一种多蛋白质亚基组成的复合体,是活性氧簇(ROS)生成的主要酶类.现已证实NOXs介导的氧化应激与肝纤维化的发生发展密切相关,而其亚基NOX4则起了关键作用,其生成的ROS不仅能直接对引起肝纤维化的主要细胞-肝星状细胞(HSCs)具有显著的活化效应,还可通过介导包括HSCs在内的多种细胞内的信号传导通路参与HSCs的持续激活、细胞外基质的异常增殖、肝细胞的凋亡及肌成纤维细胞的迁移等过程,最终诱导肝纤维化的发生与发展.文章就NOX4相关信号通路在肝纤维化发病机制中的作用进行综述.【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2019(032)003【总页数】5页(P298-302)【关键词】肝纤维化;还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4;活性氧簇;信号通路【作者】罗方云【作者单位】330006南昌,南昌大学第一附属医院消化内科【正文语种】中文【中图分类】R5750 引言肝纤维化是肝对各种慢性损伤发生修复反应的动态过程，其主要以细胞外基质（extracellular ma⁃trix，ECM）过度沉积为特点，肌成纤维细胞（myofi⁃broblasts，MFB）的迁移是ECM的主要来源，且活化的肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSCs）在形态和功能发生一系列改变后将转化为MFB，故HSCs的活化是肝纤维化的中心环节［1-2］。

大量研究证实还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nico⁃tinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）氧化酶（NADPH oxidase，NOX）介导的氧化应激与肝纤维化的发生发展密切相关，而其亚基NOX4产生的活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）及其介导的相关信号通路引起HSCs的持续激活、ECM的形成、肝细胞的凋亡及MFB的迁移等促进肝纤维化的形成起了关键作用［3］。

福建中医药2023 年11 月第54 卷第11 期Fujian Journal of TCM November 2023，54（11）基于NLRP3/Caspase-1和Wnt/β-catenin信号通路探讨桃核承气汤延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的机制朱为坤1，张喜奎2*，宋昱娇1，苏明星1，李灵辉3（1.福建中医药大学中医学院，福建福州 350122；2.福建中医药大学附属第二人民医院，福建福州 350003；3.福建中医药大学图书馆，福建福州 350122）摘要：目的基于NLRP3/Caspase-1和Wnt/β-catenin信号通路探讨桃核承气汤延缓慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾纤维化的机制。

方法将80只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和治疗组，每组20只。

模型组和治疗组行5/6肾切除术，假手术组仅做双肾被膜剥离术，正常组不做处理。

术后4周开始进行干预，治疗组按10 mL/（kg·d）给予42 g/100 mL桃核承气汤药液灌胃，正常组、假手术组和模型组分别给予等体积生理盐水灌胃，连续干预8周。

采用Western blot和qPCR检测肾组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、白细胞介素（IL）-18、IL-1β、Wnt4、β-连环蛋白（β-catenin）、基质金属蛋白酶-7（MMP-7）蛋白表达量和mRNA相对表达水平，检测血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量，光镜、电镜下观察肾组织形态。

结果光镜观察，模型组肾小球结构固缩，肾间质纤维增生严重，治疗组明显减轻。

电镜观察，模型组肾小球内皮细胞、肾小管上皮细胞均水肿，大量炎症细胞浸润，治疗组明显减轻。

与正常组和假手术组比较，模型组肾组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18、Wnt4、β-catenin和MMP-7蛋白表达量和mRNA相对表达水平均明显升高（P＜0.05），血清Scr、BUN均明显升高（P＜0.05）；与模型组比较，治疗组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18、Wnt4、β-catenin和MMP-7蛋白表达量和mRNA相对表达水平均明显降低（P＜0.05），血清Scr、BUN均明显降低（P＜0.05）。

吡非尼酮下调NOX4减轻由博来霉素诱导的小鼠肺纤维化曾祥富【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)005【摘要】目的观察NOX4在博来霉素诱导的小鼠纤维化肺中的表达及其意义,探讨PFD对NOX4表达的影响.方法 72只C57健康雌性小鼠采用数字表法随机分为PFD干预组(A组)、模型组(B组)、正常对照组(C组)3组,每组各18只.采用气管内注入博来霉素(3.5 mg/kg)的方法构建小鼠肺纤维化模型.小鼠肺组织行病理切片HE和Masson染色,检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组织化学方法检测NOX4在肺组织中的表达.结果Masson染色显示:造模后B组于第7天、第14天、第28天3个时间点肺纤维化评分较C组均增加(P＜0.05);A组肺纤维化评分较B组降低(P＜0.05).造模第7、14、28天3个时间点B组肺组织Hyp含量较C组均增高(P＜0.05);A组肺组织Hyp含量较B组减低(P＜0.05).免疫组化显示造模第7、14、28天3个时间点B组小鼠肺组织均可见在气道平滑肌细胞、上皮细胞、肺泡上皮细胞,以及血管平滑肌细胞、内皮细胞,肺成纤维细胞中NOX4广泛的强表达;C 组NOX4表达较B组弱(P＜0.05);A组NOX4表达较B组减弱(P＜0.05).结论NOX4在肺组织广泛表达,其表达上调可能与博来霉素诱导的肺纤维化形成相关.PFD可下调NOX4表达,提示NOX4有望成为治疗肺纤维化的新靶点.【总页数】6页(P164-169)【作者】曾祥富【作者单位】410006 长沙市第四医院呼吸内科【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.褪黑素减轻博来霉素诱发小鼠肺纤维化早期的内质网应激反应 [J], 曹林峰;赵卉;秦厚应;张程;徐德祥2.吡非尼酮和尼达尼布抑制博来霉素诱导的小鼠肺纤维化药效比较 [J], 吕紫薇; 黄凯; 甘文华; 高劭妍; 杨波; 赫连凯玥; 李霄鹤; 周红刚3.博来霉素诱导肺纤维化小鼠中差异表达的lncRNA筛选及生物信息学分析 [J], 黄明华;程玲芳;胡婷婷;苏建;叶玲玲;曾林祥4.复明汤调控TGF-β1/Smad3通路抑制肺成纤维细胞活化及肺上皮损伤减轻博来霉素诱导的肺纤维化 [J], 余洪刚;付大海;杨利生;宋超;唐俊峰;秦晓娟5.N-乙酰半胱氨酸下调NOX4表达抑制博莱霉素诱导纤维化小鼠的氧化损伤 [J], 胡玉洁;李理;李伟峰;黄文杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Nox4在糖尿病及慢性并发症中的作用研究进展于婷;李雷;许飞;辛青【摘要】随着生活方式的改变和预期寿命的延长,世界范围内糖尿病及其慢性并发症的患病率逐年升高.糖尿病慢性并发症(糖尿病肾病、糖尿病大血管病变、糖尿病心肌病、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变等)是糖尿病患者致死致残的主要原因.还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox4)是催化氧生成活性氧类( ROS)的关键酶,Nox4的活性直接受组织氧分压的调控,由Nox4生成的ROS通过氧化应激在糖尿病及其慢性并发症的发病及进展过程中发挥重要作用.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2019(025)010【总页数】8页(P2016-2022,2028)【关键词】糖尿病;还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4;过氧化氢;活性氧自由基;糖尿病慢性并发症【作者】于婷;李雷;许飞;辛青【作者单位】济宁医学院基础医学院生理学教研室,山东济宁272067;济宁医学院临床学院诊断学教研室,山东济宁 272067;济宁市第一人民医院血管外科,山东济宁272011;济宁医学院基础医学院生理学教研室,山东济宁272067【正文语种】中文【中图分类】R587.1;R363.2糖尿病及其慢性并发症的发病率逐年升高，给患者生活和经济带来很大负担。

氧化应激在糖尿病及其慢性并发症发病及进展过程中具有重要作用。

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidases，Nox)家族是催化氧生成活性氧类(reactive oxygen species，ROS)的关键酶。

迄今为止，Nox家族包括Nox1～Nox5和双功能氧化酶1、双功能氧化酶2七名成员。

各亚型Nox分布在体内不同组织、细胞以及亚细胞结构，生成相应的产物，在生理和病理状态下行使特定功能。

Nox4是Nox家族用于生产过氧化氢(hydrogen peroxide，H2O2)的唯一亚型，肾脏表达水平最高，也广泛表达于其他类型的细胞，相对其他比较局限的Nox家族成员，具有更广泛的生物功能[1]。

NANFANG YIKE DAXUE XUEBAOJournal of Southern Medical UniversityVolume44Number2February2024ContentsBasic Research201Adeno-associated virus-mediated hepatocyte-specific NDUFA13overexpression protects against CCl4-induced liver fibrosis in mice by inhibiting hepatic NLRP3activationXU Xiaohui,FENG Jinmei,LUO Ying,HE Xinyu,ZANG Jinbao,HUANG Daochao210Efficacy of combined treatment with pirfenidone and PD-L1inhibitor in mice bearing ectopic bladder cancer xenograft CHEN Shoufeng,ZHANG Shuchao,FAN Weilin,SUN Wei,LIU Beibei,LIU Jianmin,GUO Yuanyuan226Colchicine alleviates myocardial ischemia-reperfusion injury in mice by activating AMPKCHEN Guodong,LUO Suxin236Rho kinase inhibitor Y27632promotes survival of human induced pluripotent stem cells during differentiation into functional midbrain dopaminergic progenitor cells in vitroLI Yangyang,XU Jiajia,JIANG Chengcheng,CHEN Zilong,CHEN Ying,YING Mengjiao,WANG Ao,MA Caiyun,WANG Chunjing, GUO Yu,LIU Changqing244Total saponins of Panax japonicus alleviates CCl4-induced acute liver injury in rats by regulating the PI3K/AktNF-κB signaling pathwayWU Guangyang,SONG Tianli,TANG Lang,WANG Yiming,LIU Xu,HUANG Sheng252Protective effect of FAK inhibitor PF-562271against human umbilical vein endothelial cell injury induced by aging plateletsBAI Yuting,GANG Baocai,ZHANG Mengjie,WAN Ziyu,LIU Guoquan,GU Wei270Resveratrol protects dopaminergic neurons in a mouse model of Parkinson's disease by regulating the gut-brain axis via inhibiting the TLR4signaling pathwayGUI Jianjun,SUN Xiaodong,WEN Shu,LIU Xin,QIN Bingqing,SANG Ming280Demethylzeylasteral inhibits proliferation,migration and invasion and promotes apoptosis of non-small cell lung cancer cells by inhibiting the AKT/CREB signaling pathwayHAN Qiqi,YE Mengran,JIN Qili298Adiponectin improves endometrial receptivity in rats with polycystic ovary syndrome by upregulating the PPARα/ HOXA10pathwayWANG Juan,YANG Wenqin,LIU Jin,SHI Jinfeng,XIAO Ping,LI Meixiang317Chlorogenic acid alleviates acute kidney injury in septic mice by inhibiting NLRP3inflammasomes and the caspase-1 canonical pyroptosis pathwayFANG Shangping,SUN Renke,SU Hui,ZHAI Kecheng,XIANG Yu,GAO Yangmengna,GUO Wenjun324PCID2is highly expressed in gastric cancer and affects the prognosis by regulating cancer cell cycle and proliferation ZHANG Nuo,ZHANG Zhen,ZHANG Yulu,SONG Xue,ZHANG Xiaofeng,LI Jing,ZUO Lugen,HU Jianguo370A polylactic acid/hydroxyapatite/scholzite composite scaffold for promoting healing of osteoporotic bone defects in ratsLUO Caizhu,CHEN Jinxiang,ZHANG Qun,YU Xuezhao,ZHANG Shuqin381Tea polyphenols ameliorates acute lung injury in septic mice by inhibiting NLRP3inflammasomes LING Xuguang,XU Wenwen,PANG Guanlai,HONG Xuxing,LIU Fengqin,LI Yang405Modulating gut microbiota improves neurological function and depressive symptoms in rats with post-stroke depressionLI Xinyi,LIU Yujie,DENG Kechong,HU YikuiClinical Research217Efficacy of navel application of Jianpiwenyang Gel for chronic diarrhea of spleen and stomach weakness type:a randomized controlled trial and analysis of the mechanismCUI Yixin,WANG Decai,XIE Dongqing,WANG Haiming,XU Ruixin,TANG Xiaoran,ZHANG Yin260Prediction of microvascular invasion in hepatocellular carcinoma based on multi-phase dynamic enhanced CT radiomics feature and multi-classifier hierarchical fusion modelZHONG Weixiong,LIANG Fangrong,YANG Ruimeng,ZHEN Xin289High expression of COX6B2in gastric cancer is associated with poor long-term prognosis and promotes cell proliferation and cell cycle progression by inhibiting p53signalingSHEN Mengdi,ZHAO Na,DENG Xiaojing,DENG Min308Correlation of serum ferredoxin1and lipoic acid levels with severity of coronary artery disease WEI Ting,DING Yangyang,ZHANG Jiajia,LI Jinlong,ZHANG Heng,KANG Pinfang,ZHANG Ningru354Overexpression of BZW1promotes invasion and metastasis of gastric cancer cells by regulating Wnt/β-catenin signaling and promoting epithelial-mesenchymal transitionZHANG Wenjing,ZHANG Nuo,YANG Zi,ZHANG Xiaofeng,SUN Aofei,WANG Lian,SONG Xue,GENG Zhijun,LI Jing, HU Jianguo363Parecoxib sodium down-regulates CXCL8-CXCR1/2to improve inflammatory microenvironment and promote patient recovery following laparoscopic radical resection of rectal cancerWU Ruojie,LIU Rui,ZHANG Yisu,LI Xiaohong397A clinical-radiomics nomogram for differentiating focal organizing pneumonia and lung adenocarcinoma LIU Yunze,LI Chengrun,GUO Juntang,LIU YangTechniques and Methods333A low-dose CT reconstruction algorithm across different scanners based on federated feature learning CHEN Shixuan,ZENG Dong,BIAN Zhaoying,MAJianhua344A digital droplet PCR detection technique based on filter faster R-CNNZHANG Yipeng,CHEN Bo,LI Jiaqi,LIANG Yedong,ZHANG Huajian,WU Wenming,ZHANG Yu387A multiscale carotid plaque detection method based on two-stage analysisXIAO Hui,FANG Weiyang,LIN Mingjun,ZHOU Zhenzhong,FEI Hongwen,CHEN ChaominCover image:Pirfenidone combined with PD-L1inhibitor was found to inhibit the growth of bladder cancer cells,enhance T cell infiltration and reduce the expression of MDSCs in tumor tissues,suggesting a regulatory effect of pirfenidone on immune microenvironment to enhance the anti-tumor effect of PD-L1inhibitor.Provided by CHEN Shoufeng(Department of Urology,First Affiliated Hospital,Bengbu Medical University).See full-text article on Page210-216in this issue.Editor-in-Chief:LI MengfengEditorial Director:SUN ChangpengExecutive Editor:YU ShishiEnglish Editor:SONG JianwuExecutive Technical Editor:LIN LihuaExecutive Proofreaders:WU Jinya JING Yuan LIN Ping LANG LangPhoto Editor:LIU HongyanPublication Date:2024-02-20肝纤维化是由遗传因素、病毒感染、毒物暴露等引起肝损伤后组织的自我修复反应，主要表现为肝内结缔组织增生和细胞外基质沉积，是各种慢性或急性肝病的共同病理过程［1-3］。