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葡萄糖检验方法化学葡萄糖检验方法是一种常见的临床化验方法，用于检测人体内血糖水平，是评估糖尿病、高血糖和低血糖等疾病的重要手段。
化学方法是其中一种常见的检验方法，本文将介绍葡萄糖的化学检验方法，包括其原理、步骤、常用试剂和设备等内容。
一、葡萄糖检验方法的原理葡萄糖在化学检验中通常采用的方法是酶法测定。
其原理是利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时还原辅酶将还原成辅酶。
还原辅酶与二甲基氨基苯磺酸钠在碱性条件下生成紫色化合物，用分光光度计在546nm波长下测定其吸光值，从而得到葡萄糖的含量。
二、葡萄糖检验方法的步骤1.标准曲线的制备：分别取不同浓度的葡萄糖标样，用蒸馏水稀释成一系列标样液，按步骤加入试管中，然后加入相应的试剂。
2.血浆或尿样的处理：将待测样品离心去蛋白，获得上清液进行检测。
3.反应过程：将标样液与试管中的试剂充分混合后，放入37摄氏度水浴中进行恒温反应。
4.测定吸光值：用分光光度计在546nm波长下测定样品的吸光值，根据标准曲线计算出样品中的葡萄糖含量。
三、葡萄糖检验方法的常用试剂和设备1.试剂：包括葡萄糖标样、葡萄糖氧化酶、辅酶、二甲基氨基苯磺酸钠等。
2.设备：分光光度计、水浴仪、离心机等。
葡萄糖检验方法化学的实验操作中需要严格掌握试剂用量、反应温度和时间等关键因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
实验人员还需要注意操作过程中的安全，避免与试剂接触，确保个人安全。
在临床应用中，葡萄糖检验方法的化学测定为医生提供了重要的实验数据，有助于评估病人的血糖水平和疾病状况，为疾病的诊断和治疗提供参考依据。
对葡萄糖检验方法化学的研究和掌握具有重要意义。
通过本文对葡萄糖检验方法化学的介绍，希望能够使读者对该检验方法有一个清晰的了解，从而为临床实验工作提供帮助和指导。
也希望医学工作者们能够不断深入研究，推动葡萄糖检验方法的不断改进和完善，为临床医学实践提供更加准确、可靠的数据支持。
高效液相色谱测定葡萄糖酸钙片含量和溶出度的方法研究邓映明;张雁;曾玉梅;刘志辉
【期刊名称】《医药前沿》
【年(卷),期】2022(12)27
【摘要】目的:建立高效液相色谱测定葡萄糖酸钙片的含量和溶出度的方法。
方法:采用色谱柱为安捷伦ZORBAXSBAq(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液,磷酸调节pH至2.8,流速0.5 mL·min^(-1),检测波长210nm,柱温30℃,进样量10μL。
采用浆法测定葡萄糖酸钙的溶出度,结果:葡萄糖酸钙在0.1103~2.207 mg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为100.54%(RSD=0.74%,n=9),检测限为3.8 ng。
样品在45 min的累积溶出量均大于90%。
结论:本方法操作简单、准确性与专属性好,可用于测定葡萄糖酸钙片的含量和溶出度。
【总页数】4页(P6-8)
【作者】邓映明;张雁;曾玉梅;刘志辉
【作者单位】梅州市食品药品监督检验所化学室
【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
1.高效液相色谱测定复方呋塞米胶囊中呋塞米的溶出度
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B片中5种组分的溶出度4.基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱法测定复方胃蛋白酶颗粒的溶出度
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多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要：本文综述了多糖含量测定的几种常用方法，主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考，并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词：多糖；含量；测定；方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words：polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides，PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
高效液相色谱法测量葡萄糖浓度实验报告实验报告-高效液相色谱法测定VE含量实验四高效液相色谱法测定VE含量1 实验目的1.1 了解高效液相色谱仪的基本操作；1.2 了解高效液相色谱仪测定VE的原理。
2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
VE（维生素E）又名生育酚或产妊酚，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。
有抗氧化作用，能增强皮肤毛细血管抵抗力，并维持正常通透性；有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。
VE通过高效液相色谱柱进行分离，PDA检测器检测，外标法定量。
3实验器材3.1 实验样品VE样品溶液3.2 实验试剂浓度为50μg/ml的VE标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱：C18柱；流动相速度：0.3ml/min；进样量：5μl；柱温：30℃。
5 实验结果与讨论5.1 实验结果本次实验采用的是单点法测定。
实验结果见表1。
表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5μl×50μg/mL×17369/（5μl×42217）=20.57μg/mL5.2 实验讨论本次实验中，测定标样溶液VE含量时，在指定的保留时间内并未出峰。
讨论分析原因：样品溶液在上周实验后，一直置于离心管中，未避光低温保存，导致样品中VE氧化，液相测定时没有在相应的时间出峰。
本次实验时间较短，且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作，以及液相色谱仪测定VE的原理，故结合前组同学对VE含量的测定数据进行讨论与分析。
高效液相色谱法测定葡萄糖光催化氧化产物程明;杨昌军;张全权;张丙广;邓克俭【摘要】建立了一种定量检测葡萄糖及其氧化产物的高效液相色谱法.采用示差折光检测器(RID),Shodex SH1011色谱柱(8.0 mm×300 mm,6μm),流动相为0.24 mmol·L-1硫酸,流速为0.6 mL·min-1,柱温为50℃,进样量为20μL.结果表明,葡萄糖及其氧化产物在线性范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,回收率为96.7％～103.3％,相对标准偏差为0.71％～2.73％.葡萄糖的氧化产物为葡萄糖二酸、葡萄糖酸、阿拉伯糖和甲酸.该方法能够对葡萄糖及其氧化产物进行准确的定量分析.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2019(036)007【总页数】4页(P65-68)【关键词】高效液相色谱;葡萄糖;氧化产物;定量分析【作者】程明;杨昌军;张全权;张丙广;邓克俭【作者单位】中南民族大学化学与材料科学学院催化材料科学湖北省重点实验室,湖北武汉 430074;中南民族大学化学与材料科学学院催化材料科学湖北省重点实验室,湖北武汉 430074;中南民族大学化学与材料科学学院催化材料科学湖北省重点实验室,湖北武汉 430074;中南民族大学化学与材料科学学院催化材料科学湖北省重点实验室,湖北武汉 430074;中南民族大学化学与材料科学学院催化材料科学湖北省重点实验室,湖北武汉 430074【正文语种】中文【中图分类】O657.72葡萄糖是自然界中含量最多且分布最广泛的一种单糖，是生产生物燃料和平台化学品的理想原料[1-3]。
氧化葡萄糖可以得到多种高附加值的化学品，如葡萄糖二酸、葡萄糖酸、阿拉伯糖、乳酸、甘油、草酸、乙酸和甲酸等[4-6]。
其中葡萄糖二酸、葡萄糖酸和乳酸是食品工业和医药领域的重要添加剂和中间体，此外，葡萄糖二酸具有两端均为羧基的特殊结构，被认为是可以替代化石原料合成聚合物的单体；甘油、草酸和甲酸是化工生产中的重要原料和助剂[7-10]。
食品中的葡萄糖含量测定与分析葡萄糖是一种重要的碳水化合物，在食品中广泛存在。
葡萄糖不仅是人体能量的来源之一，它还参与人体多种新陈代谢过程，对人体健康至关重要。
因此，准确测定食品中的葡萄糖含量对于营养、医学、食品科学等领域具有重要意义。
为了测定食品中的葡萄糖含量，常用的方法是化学分析。
其中，酶法是一种常用的测定葡萄糖含量的方法。
酶法利用葡萄糖氧化酶（GOD）的催化作用，将葡萄糖转化为葡萄糖酸，并通过测定产生的葡萄糖酸的量来间接测定葡萄糖含量。
酶法测定葡萄糖含量的步骤如下：首先，将待测食品样品加入适量的试剂中，使葡萄糖与试剂反应生成葡萄糖酸。
然后，利用酶能氧化葡萄糖酸为过氧化氢。
最后，通过酶催化过程生成的过氧化氢的量来测定葡萄糖含量。
这种方法准确、简便，被广泛应用于食品行业。
除了酶法，还有其他一些方法用于测定食品中的葡萄糖含量。
比如，红外分光光度法利用葡萄糖特有的红外光谱吸收峰对葡萄糖进行定量分析。
这种方法无需试剂，操作简单，但需要专业的仪器设备。
离子色谱法也是一种常用的测定葡萄糖含量的方法。
该方法基于离子色谱仪测定葡萄糖样品溶液中离子的峰高度或面积，通过和标准曲线比对来确定葡萄糖含量。
离子色谱法准确度高，适用范围广，但操作复杂，仪器价格较高。
在食品中测定葡萄糖含量时，还需要注意样品的预处理。
由于食品中可能存在其他物质对测定结果产生干扰，必要时需要进行样品处理，如去除其他糖类。
食品中的葡萄糖含量测定主要用于品质控制和营养评估。
对于食品生产商来说，准确测定葡萄糖含量可以控制产品的质量，保证食品口感和品质的稳定性。
对于消费者来说，了解食品中的葡萄糖含量有助于健康饮食的选择。
此外，测定葡萄糖含量还具有辅助医学诊断的意义。
高血糖是糖尿病的主要症状之一，通过测定食物中的葡萄糖含量，可以了解食物对血糖的影响，帮助患者调节饮食，控制血糖水平。
总之，食品中的葡萄糖含量测定与分析是一个涉及营养、医学、食品科学等多个领域的重要课题。
葡萄糖的原理及方法
葡萄糖的原理及方法是指分析测定葡萄糖含量的基本理论和实验方法。
葡萄糖是一种单糖，化学式为C6H12O6，是生物体内能量的
重要来源。
葡萄糖的原理是基于葡萄糖与某些试剂产生特定反应，通过测定反应产物的特性来间接或直接测定葡萄糖的含量。
常见的葡萄糖测定方法有以下几种：
1. 比色法：利用葡萄糖与某些试剂如费林试剂或尿糖试剂产生特定反应生成有色产物，通过测定产物的吸光度或颜色深浅来确定葡萄糖含量。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：通过将葡萄糖样品与色谱柱分离，再利用色谱柱后的检测器检测葡萄糖的浓度。
3. 酶法：利用葡萄糖酸化酶、葡萄糖氧化酶等酶催化反应，将葡萄糖转化成其它产物，通过测定酶催化反应后的变化来确定葡萄糖含量。
4. 荧光法：将葡萄糖与特定荧光试剂反应，产生荧光信号。
通过测定荧光强度来确定葡萄糖含量。
以上只是常见的几种葡萄糖测定方法，具体选择何种方法取决于实验需要和条件。
在实际应用中，根据待测样品的不同，还可以结合其它方法进行葡萄糖测定。
5化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第23卷,第Z1期2014年12月V ol 23,No. Z1Dec. 2014doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2014.Z1.002离子交换色谱法测定葡萄糖氧化反应液中的葡萄糖和葡萄糖酸*王鑫1，2，梁文辉2，3，刘颖慧2，3，赵富华2，法芸2（1.青岛大学化学科学与工程学院，山东青岛 266071；2.中国科学院青岛生物能源与过程研究所，生物基材料重点实验室，山东青岛 266101；3.山东农业大学食品科学与工程学院，山东泰安 271018）摘要 建立了一种利用阴离子交换色谱分离，以积分脉冲安培检测器同时测定葡萄糖氧化反应液中葡萄糖和葡萄糖酸的方法。
采用IonPac AS11–HC 阴离子交换柱，以5.0 mmol ／L KOH 溶液作为淋洗液，等度洗脱，流量为1.0 mL ／min ，柱温为30℃，进样体积为25 μL 。
葡萄糖和葡萄糖酸测定结果的相对标准偏差分别为0.66％，1.32％（n =6），线性相关系数分别为0.989 3，0.992 9，平均加标回收率分别为99.50%，109.0%。
该方法可用于葡萄糖氧化反应液中葡萄糖和葡萄糖酸的同时测定。
关键词 阴离子交换色谱；脉冲安培检测；葡萄糖；葡萄糖酸中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2014)Z1–0005–04Determination of Glucose and Gluconate in Oxidation Reaction Aquaby Anion-Exchange ChromatographyWang Xin 1，2，Liang Wenhui 2，3，Liu Yinghui 2，3，Zhao Fuhua 2，Fa Yun 2(1. College of Chemical and Environment Engineering ，Qingdao University ，Qingdao 266071，China ；2. Key Laboratory of Biobased Materials ，Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology ，Chinese Academy of Sciences ，Qingdao 266101，China ；3. College of Food Science and Engineering ，Shandong Agricultural University ，Taian 271018，China ）Abstract Simultaneous analysis of glucose and gluconate in oxidation reaction aqua was presented by using anion-exchange chromatography and pulsed amperometric detection. Separation was performed on an IonPac AS11–HC column with 1.0 mL ／min eluent of 5.0 mmol ／L KOH solution. The injection volume was 25μL and the column temperature was 30℃. The relative standard derivations of glucose and gluconate were 0.66%，1.32% (n =6), and the linear correlation coef ficent were 0.989 3，0.992 9, respectively. The average recoveries were 99.50% and 109.0%, respectively. This method can be applied to determine glucose and gluconate in oxidation reaction aqua with satisfactory results.Keywords anion-exchange chromatography; pulsed amperometric detection; glucose; gluconate葡萄糖酸和葡萄糖酸盐是具有广泛用途的有机酸（盐），它们可直接用作食品、饮料及医药生产中的添加剂，可替代能污染环境的多磷酸盐来制造清洁剂，可成为生物降解的螯合剂，还可作为织物加工和金属加工的助剂，在建筑工业上作为混凝土的塑化剂、减水剂和缓凝剂，及用于电镀、胶卷制造等许多工业领域［1］。
然而目前我国葡萄糖酸盐的年产量不足千吨，因此对葡萄糖氧化制葡萄糖酸（盐）反应的研究具有重要意义。
相关研究需要准确了解不同反应阶段或反应类型的样品中葡萄糖和葡萄糖酸含量［2–5］。
高效液相色谱（HPLC ）法是目前广泛应用的分析手段［6–8］，其中离子色谱法利用离子排斥分离，但反应物葡萄糖与其氧化产物葡萄糖酸钠的出峰位置重合，需要串联紫外检测器和示差检测器检测［9–10］。
该方法的灵敏度相对较低，低浓度的组分不易检测。
含有金属催化剂的反应体系，基体对离子色谱柱的*国家自然科学基金项目（21405166)，科技部重大科学仪器开发专项任务（2012YQ09022908），山东省科学仪器升级改造项目（2012SJGZ12）联系人：法芸；E-mail: fayun@ 收稿日期：2014–12–08化学分析计量2014年，第23卷，第Z1期6影响较大，检测结果不够理想。
高效阴离子交换色谱–积分脉冲安培法已经广泛应用于多种食品和饮料中糖的分析［11–16］，主要利用离子色谱专用糖柱来分离，如Thermo Fisher公司的CarboPac PA20，CarboPac PA10等色谱柱，但该体系用于葡萄糖和葡萄糖酸（盐）的分离仍存在共淋洗的问题。
笔者采用阴离子柱IonPac AS11–HC，利用积分脉冲安培检测，实现了葡萄糖与葡萄糖酸的完全基线分离，有效解决了基体干扰和灵敏度低的问题。
该方法简单，分析速度快，分析结果准确可靠。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂多功能离子色谱系统：ICS–5000型，双泵模块、电化学检测器／色谱模块、淋洗液自动发生器模块、自动进样器模块，Chromeleon 6.8色谱软件，美国Thermo Scientific公司；超纯水制备仪：Milli-Q®Advantage A10型，美国密理博公司；葡萄糖与葡萄糖酸钠标准品：优级纯，纯度不低于99.5%，阿拉丁试剂(上海)有限公司；样品：镍催化剂，碱性条件下的葡萄糖氧化反应液；实验用水为超纯水(电阻率为18.2 MΩ·cm)。
1.2 色谱条件色谱柱：IonPac AS11–HC型阴离子交换色谱柱（250 mm×4 mm），IonPac AG11–HC型保护柱（50mm×4 mm）；流动相：5 mmol／L KOH溶液，流量为1.0 mL／min，等度洗脱；进样体积：25μL；柱温：30℃；脉冲安培检测；金工作电极；Ag／AgCl 参比电极；检测电位波形见表1。
表1 检测电位波形时间／ms电势／V（vs. pH）0 200 400 410 420 430 440 5000.1 0.1 0.1–2–2 0.6–0.1–0.11.3 标准曲线的绘制配制100 mg／L葡萄糖和葡萄糖酸钠的标准储备液，然后用其配成表2中不同浓度的混合标准溶液，按1.2色谱条件进样分析，以峰面积y为纵坐标，以标准溶液的质量浓度x (mg／L)为横坐标，绘制标准曲线。
表2 系列混合标准溶液的质量浓度 mg／L 编号葡萄糖葡萄糖酸钠1#2#3#4#5#6#7#8#9#0.010.050.100.501.002.005.007.5010.00.010.050.100.501.002.005.007.5010.01.4 样品处理取3.0 mL样品，置于5 mL塑料离心管中，以6 000 r／min速度离心5 min，固体杂质沉淀于离心管底。
取适量上清液经0.22 µm滤膜过滤除去微米级悬浮物，滤液待检测。
2 结果与讨论2.1 色谱条件的选择和优化利用离子排斥原理分离，若采用BioRad Aminex HPX–87H色谱柱，流动相为0.005 mol／L的H2SO4水溶液，葡萄糖与其氧化产物葡萄糖酸钠，出峰位置重合，需要串联紫外检测器和示差检测器检测。
利用阴离子交换原理分离，先选择Thermo Fisher的专用糖柱CarboPac PA20，CarboPac PA10色谱柱对混合标准溶液进行分析，葡萄糖和葡萄糖酸（盐）的分离仍存在共淋洗。
因此选择季铵盐乳胶直径小的IonPac AS11–HC色谱柱分离。
一般来说，无机和有机酸的p K a值大于7的盐均可作IC中的离子淋洗液。
OH–是最合适的淋洗离子，因为只要抑制器的容量足够大，OH–在抑制器全部被转化为水而与其初始及最终浓度无关。
OH–淋洗液是碱性溶液，容易吸收空气中的二氧化碳，因此必须严格控制配制条件［17］。
而用淋洗液在线发生器是一个很好的选择，可以消除人工配制溶液和试剂杂质等引入的误差，色谱重现性良好。
试验了多个淋洗液浓度（1.0，2.0，2.5，5.0，7.5，10.0，15.0 mmol／L），流量为1.0 mL／min进行等度洗脱，结果发现5.0 mmol／L KOH淋洗液可使葡萄糖和葡萄糖酸钠实现了完全的基线分离，而且分析工作在15 min内完成，效率较高。
因此选择KOH 淋洗液的浓度为5.0 mmol／L。
2.2 标准工作曲线按照表2数据配制的系列混合标准溶液依次进样，以峰面积y为纵坐标、标准溶液的质量浓度x(mg／L)为横坐标进行线性回归，线性方程、相关系数和检出限（3倍的噪音／响应值）见表3。
7王鑫，等：离子交换色谱法测定葡萄糖氧化反应液中的葡萄糖和葡萄糖酸表3 线性方程、相关系数及检测限分析物线性范围／(mg ·L –1)线性方程相关系数检出限／(mg ·L –1)葡萄糖0.50～10.0y =2.623 6x +1.555 10.989 30.01葡萄糖酸钠0.50～10.0y =0.791 4x –0.178 50.992 90.052.3 方法精密度选择表2中5#混合标准溶液连续进样6次，测定结果见表4。
