磁珠分选ppt课件

MACS磁珠系统（附BD IMag介绍）一、免疫磁珠法分离细胞原理免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。

二、免疫磁珠法分为阳性分离法和阴性分离法1、阳性分离法磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞2、阴性分离法磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。

三、磁分离细胞的重要指标纯度和得率，这取决于磁珠所连接单抗的特异性和磁珠大小（磁性），然而太大的磁珠会影响细胞活性，也无法直接上流式。

四、目前市场上有2种磁性细胞分离系统1、Small particles (≈50 nm)－ MACS2、Large particles (1200~4500 nm) －others（如Dynal）五、小磁珠1、优点（1）对细胞温和，不影响分离细胞的后续培养。

（2）可直接上流式检测，不影响散射光。

2、缺点（1）需要很强的磁场来分离细胞。

（2）分离速度很慢，得率不高。

（3）一次性的分离柱，不能在普通试管进行。

（4）成本昂贵。

六、大磁珠1、优点（1）技术简单，分离可在试管中完成。

（2）易于增减细胞用量。

（3）速度快，得率高（4）成本低2、缺点（1）对细胞造成机械压力，影响其生物学活性，不利于分离后培养。

（2）纯度低。

（3）容易阻塞FCM的喷嘴。

七、BD™ Imag磁珠1、大小在0.1－0.45mm。

2、包被了BD Pharmingen生产的高质量单抗。

3、磁珠已为白细胞亚群的阳性和阴性分离法所优化。

4、用于BD™ IMagnet direct magnet。

将包被了特异性单抗的BD IMag磁珠加入细胞悬液，磁珠特异性地与有相应抗原的细胞亚群结合，通过BD™ IMagnet direct magnet分离得到的连有BD IMag磁珠的细胞可直接用于功能试验和用流式细胞仪检测。

磁珠分选t细胞1. 磁珠分选t细胞的原理和方法磁珠分选是一种常见的细胞分选技术，通过利用磁性的珠子特异性地结合到特定的细胞表面标记物上，然后通过磁力的作用将目标细胞分离出来。

在T细胞分选中，可以利用特殊的抗体来标记T细胞表面上的CD3、CD4、CD8等抗原，然后再使用特定的磁珠将标记物和目标细胞结合。

最后，利用磁力分离，就可以获得高纯度的T细胞。

2. T细胞分选的研究进展随着近年来免疫治疗和细胞治疗的兴起，T细胞分选技术也得到了广泛应用。

特别是在肿瘤免疫治疗中，利用CAR-T细胞和TCR-T细胞等细胞治疗手段，可以得到很好的临床疗效。

因此，T细胞分选技术的研究也变得越来越重要。

目前，针对T细胞的分选技术已经有了很多进展，如流式细胞仪、磁珠分选、微流控芯片、光学分选等。

其中，磁珠分选技术在T细胞体外扩增和临床治疗等领域得到了广泛应用。

3. 磁珠分选在T细胞治疗中的应用磁珠分选技术在T细胞治疗中的应用主要包括两个方面：一是体外扩增中的分选，二是治疗细胞产品的分选。

体外扩增中的分选：在体外扩增T细胞时，需要从淋巴细胞中选择和分离出T细胞，同时排除其他免疫细胞。

磁珠分选技术可以帮助实现高效分选，并获得高纯度的T细胞，从而提高体外扩增的效率和规模。

治疗细胞产品的分选：在CAR-T细胞和TCR-T细胞等治疗细胞产品中，需要分离出目标T细胞并通过磁珠分选获得高纯度的治疗细胞。

此外，治疗细胞产品的分选也可以用于排除其他污染物，如病毒、细菌等。

4. 磁珠分选T细胞的优缺点优点：1.高效、快速：磁珠分选技术可以非常迅速地获得纯度较高的目标细胞，从而节省时间和成本。

2.高纯度：使用磁珠分选技术可以获得高度纯化的细胞，从而提高了治疗效果和安全性。

3.对细胞活性无影响：分选过程中不需要进行细胞培养等处理，从而保证了目标细胞的活性和功能。

缺点：1.标记物有限：目前可以使用的标记物数量有限，不能针对所有细胞进行磁珠分选。

2.影响细胞表面：磁珠分选的过程可能会对细胞表面结构产生不良影响，从而影响细胞的功能。

细胞磁珠分选细胞磁珠分选细胞磁珠分选是一种基于细胞表面标记物的分选技术，利用磁珠的特殊性质实现对目标细胞的精确分离和富集。

该技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。

一、细胞磁珠分选的原理细胞磁珠分选技术的核心是利用磁珠与目标细胞表面特异性标记物的结合，通过磁力的作用将目标细胞与其他非目标细胞分离。

通常，磁珠表面会修饰有与目标细胞表面标记物相互作用的抗体、配体或其他亲和分子。

当这些磁珠与细胞悬液混合时，目标细胞会与磁珠发生特异性结合，形成复合物。

通过外加磁场，可以将带有目标细胞的磁珠复合物分离出来，从而实现对目标细胞的富集和分离。

二、细胞磁珠分选的优势相比传统的细胞分选方法，细胞磁珠分选具有以下几个显著优势：1. 高纯度：由于细胞磁珠分选是基于目标细胞表面标记物的特异性结合，可以实现对目标细胞的高度纯化。

与传统方法相比，磁珠分选可以有效地去除非目标细胞，提高纯度。

2. 高通量：细胞磁珠分选技术可以实现对大量样本的快速处理。

通过自动化设备的使用，可以同时处理多个样本，提高实验效率。

3. 无损伤：细胞磁珠分选技术基于细胞表面标记物的识别，不需要对细胞进行染色或荧光标记，避免了对细胞的损伤。

4. 多样性：细胞磁珠分选技术可以根据不同的研究目的选择不同的磁珠，并与其他技术相结合，实现对不同类型细胞的分选。

三、细胞磁珠分选的应用领域细胞磁珠分选技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。

以下是该技术在不同领域的应用示例：1. 癌症研究：细胞磁珠分选可以用于从癌症组织中富集和分离肿瘤细胞，进一步研究其生物学特性和致病机制，为癌症的诊断和治疗提供依据。

2. 免疫学研究：细胞磁珠分选可用于分离和纯化免疫细胞亚群，如淋巴细胞、单核细胞等，进一步研究其功能和相互作用机制。

3. 干细胞研究：细胞磁珠分选可以用于从组织中富集和分离干细胞，进一步研究其分化潜能和应用前景。

4. 微生物学研究：细胞磁珠分选可用于富集和分离微生物，如细菌、病毒等，研究其生物学特性和致病机制。

磁珠分选柱式
磁珠分选柱式是一种常用的实验仪器，它在生物医学领域中扮演着重要的角色。

该装置通过利用磁珠的磁性特性，将样品中的目标物分离出来，实现对样品的快速分选。

磁珠分选柱式由磁珠分选柱和磁性材料组成。

磁珠分选柱内部填充有磁性材料，通常是强磁性材料。

当样品通过磁珠分选柱时，目标物会与磁珠结合，而非目标物则会被排除。

通过控制磁珠分选柱的磁性，可以实现对不同目标物的分离。

磁珠分选柱式的使用非常简便。

首先，将待分选的样品加入到磁珠分选柱中，然后利用外部磁场的作用，使磁珠与目标物结合。

接下来，将磁珠分选柱放置在磁性材料上，通过磁性材料的吸引力，将磁珠与目标物一起分离出来。

最后，将磁珠从磁珠分选柱上取下，即可得到纯净的目标物。

磁珠分选柱式在生物医学研究中具有广泛的应用。

例如，在肿瘤检测中，磁珠分选柱可以用于分离和富集肿瘤细胞，从而实现早期诊断和治疗。

此外，在基因测序中，磁珠分选柱可以用于从样品中分离和富集目标DNA，以便进一步分析。

磁珠分选柱式还可以应用于蛋白质纯化、细胞分离等领域。

磁珠分选柱式是一种重要的生物医学实验仪器，它通过利用磁性特性，实现对样品中目标物的快速分选。

该装置简便易用，广泛应用
于肿瘤检测、基因测序、蛋白质纯化等领域。

磁珠分选柱式的使用为科研人员提供了方便快捷的实验手段，对于推动生物医学研究具有重要的意义。

磁珠分选原理及应用磁珠分选是一种利用磁性微珠与目标分子的相互作用来实现分离和富集的方法。

磁珠是一种具有高度磁响应性的微珠，通常由磁性材料（如硅酸铁）和聚合物（如聚丙烯酸）复合而成。

通过磁性微珠与目标分子之间的特异性结合，可以实现目标分子的高效分离和富集。

磁珠分选的原理基于磁性微珠的特异性结合。

磁性微珠可以通过特异性抗体、寡核苷酸、亲和配体等多种方式与目标分子结合。

当磁性微珠与目标分子结合后，可以通过外加磁场将磁性微珠与非结合物质分离开来。

通过控制磁场的力度和方向，可以调控磁性微珠与目标分子的相互作用，实现目标分子的分离和富集。

磁珠分选的应用领域非常广泛。

其中，生物医学领域是磁珠分选的主要应用之一、通过将磁性微珠与特异性抗体结合，可以实现对生物样品中特定目标分子的高效分离和富集。

例如，在肿瘤标志物的检测中，可以通过磁珠分选技术快速富集肿瘤标志物，提高检测敏感性。

此外，磁珠分选还可以应用于基因诊断、药物筛选、蛋白质纯化等领域。

另外，环境监测和食品安全领域也是磁珠分选的重要应用领域。

通过将磁性微珠与污染物或有害物质的特异性结合，可以实现对环境水样、土壤样品以及食品样品中有害物质的高效分离和富集。

例如，通过将磁性微珠与重金属离子结合，可以实现对水样中重金属的高效富集和分离。

此外，磁珠分选还可以应用于工业领域。

在化学合成中，可以利用磁珠分选技术对产物进行分离和富集，提高产物纯度和产率。

在纳米材料合成中，可以通过磁珠分选技术实现纳米颗粒的分离和富集，提高纳米材料的制备效率和品质。

总之，磁珠分选是一种利用磁性微珠与目标分子的特异性结合来实现分离和富集的方法。

它具有高效、快速、灵活等特点，广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。

随着技术的不断发展和完善，磁珠分选在各个领域的应用前景将会更加广阔。

免疫磁珠分选步骤
准备工作
1：用pH=7.2的P-8读BS配置0.5%的BSA和2mMEDTA,用以稀释分选缓冲液（1:20）
2：准备碎冰，让所有操作均在4-8℃完成
样本制备
1：制备单细胞悬液（用30um的尼龙网过滤，避免堵塞柱子）（过滤前先用缓冲液湿化过滤器）
2：加入缓冲液清洗细胞，并离心(300g,10min)( 4-8℃)
3:加入缓冲液重选细胞单细胞悬液，
4：再次用30um的尼龙网过滤，避免堵塞柱子）（过滤前先用缓冲液湿化过滤器）
5：细胞计数
6：离心(300g,10min)( 4-8℃)后去掉上清
9：加入80ul/107个细胞的缓冲液
10：加入20ul/107个细胞的CD117
11：4-8℃混匀放置15分钟
12：加入1ml/107个细胞的缓冲液清洗细胞并离心(300g,10min，4-8℃)
13：重选细胞加入500ul/108个细胞的缓冲液
14：准备好分离柱，并用缓冲液清洗MS用500ul.
15:把细胞悬液倒入柱子中
16：用500ul的缓冲液冲洗柱子，（每次液体无残留时再加入新的液体）共三次
17：将柱子移开磁场到一合适的容器中，用1mL缓冲液稍用力冲洗，。