饲料添加剂对幼犬睾丸功能相关酶活性的影响研究
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注：同列数据肩标相同或不标注表示差异不显著（Ｐ＜０．０５）；同列 数据肩标不同，表示差异显著（Ｐ＞０．０５），下表同。
龄幼犬睾丸组织中ＬＤＨ活性下降，说明睾丸组织细胞能 量代谢作用受到影响，进而影响到精子质量；ＡＣＰ由前列 腺分泌，主要分布于睾丸支持细胞的溶酶体内，它参与精 子代谢并有助于精子活力，其活性受雄激素调控，它在精 液中的含量变化能反应前列腺的分泌功能并有助于前列 腺疾病的诊断。ＡＣＰ在性激素诱导下参与蛋白质的合成， 其活性改变与上皮细胞的变性有关，可作为是否有生精障 碍的指标；笔者的结果同样显示，试验组酸性磷酸酶活性 随精子密度及活动率减低而下降。 该试验结果表明，雄性犬增加食用大鼠鼠肉的剂量， 实验组睾丸组织中ＬＤＨ、ＡＣＰ活性随之下降。睾丸ＬＤＨ 参与能量代谢，该酶受到抑制，将阻碍能量的供给，造
注：｝与对照组相比，Ｐ＜０．０５，女｛与对照组相比，Ｐ＜０．０１。
３讨论 ３．１雄性幼犬食用试验大鼠对其体质量的影响
饲料添加剂引起机体和器官组织的改变，往往在动物 体质量上反映出来。因此动物体质量是机体改变的重要 而敏感的指标之一。该试验结果显示，试验初始幼犬体质 量没有出现显著差异，但试验组雄性幼犬食用大鼠鼠肉 后，试验组幼犬体质量从４月龄开始逐渐增加，试验组 体质量增加速度相比对照组较快。这表明饲料添加剂 的二次蓄积能够促进雄性幼犬的生长。经过试验，饲料 添加剂的残留或蓄积通过食物链显著提高了雄性幼犬
１．２饲料添加剂
市售４％仔猪用复合预混料配方见表１。
１．３试验设计
试验动物均为体质量相近，年龄相近的幼犬１２只。 随机分为试验组及对照组，每组６只，试验组从２月龄开始
表１复合预混料配方
・
３
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２０１６年（第３７卷）第ｌｏ期
喂养大鼠鼠肉。幼犬每日肉类：０．２６２ｘ５７．３％：０．１５ ｋｇ，试
验大鼠平均重量３００．０ ｇ，大约需要０．５只；以后每月增加
步影响幼犬的生殖功能。
关键词：饲料添加剂；犬；睾丸标志酶；蓄积
中图分类号：￥８１６ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００４—５０９０（２０１６）１０受到人们的重 视。随着人民生活水平的提高和经济全球化，人们对畜禽 产品的品质和安全要求越来越高，高质量的畜产品需要有 高效安全的饲料作保障，饲料安全已成为动物食品安全的 重要环节和源头…。饲料添加剂的不当或超量使用会对 动物产生危害作用，而其在动物产品中的残留以及蓄积进 一步对人的健康和环境产生不良影响。随着人民生活水 平的不断提高，人们对于食品的安全问题愈加关注，尤其 是动物性食品安全问题。动物饲料是食品中有毒有害物 质残留的一个重要来源，饲料添加剂通过畜禽产品带给人 类的隐患将是难以估量的［２“。 该试验通过研究食用饲料添加剂的大鼠鼠肉是否对 雄性幼犬的生殖系统及发育产生影响，通过模拟人类食物 链试验，进一步为动物饲料添加剂的蓄积对人类生殖系统 的影响提供初步试验依据，从而推测动物饲料添加剂对生
蒸坷南畜牲兽鏖
表３试验中各组犬的睾丸组织标志酶指标结果
０．５只；对照组饲喂正常犬日粮和正常大鼠鼠肉，试验组饲 喂高剂量组大鼠鼠肉和正常犬日粮，饲喂期为１０个月。 １．４饲养管理 所有试验犬全部饲养于同一动物舍，单笼饲养，定期 冲洗及消毒。预试期对试验犬驱虫、注射疫苗。采用群饲 方式，每天上午８时和下午４时各饲喂１次。观察犬的生 长发育、排便、采食等健康情况，并记录各组投料量与剩料 量，做好数据统计工作。
坷南畜牲兽鏖｜ｌ｜
２０１６年（第３７卷）第１０期
饲料添加剂对幼犬睾丸功能 相关酶活性的影响研究
王卫杰’，李惠，王乐，徐丹
（开封市医学科学研究所，河南开封４７５０００）
摘要：观察饲料添加剂的蓄积对雄性幼犬生殖发育的影响。选用１２只１月龄土犬，随机分为试验组和对 照组，试验组幼犬饲喂正常剂量日粮和高剂量组大鼠鼠肉，正常对照组幼犬饲喂正常剂量日粮和大鼠鼠肉，喂 至幼犬成熟，检测雄性幼犬食用饲料添加剂高剂量组大鼠鼠肉后对其生长、生殖发育产生影响。检测幼犬睾丸 标志酶活性，结果显示：试验组幼犬睾丸组织中酸性磷酸酶ＡＣＰ和乳酸脱氢酶ＬＤＨ的酶活性下降，碱性磷酸酶 ＡＫＰ活性未发生变化。试验组的酸性磷酸酶和乳酸脱氢酶活性明显下降，差异有统计学意义。推测饲料添加 剂可能通过食物链的蓄积影响雄性幼犬的睾丸标志酶活性，从而影响雄性幼犬睾丸组织的正常生理功能，进一
１．４测定指标
１．４．１生长性能指标 体质量的称量：在２月龄开始每月第１周周一上午测 量１次，连续测１１个月。 １．４．２睾丸组织标志酶指标 试验结束后取双侧睾丸，用冰冷的生理盐水漂洗，制 成１％的组织匀浆，酸性磷酸酶ＡＣＰ、碱性磷酸酶ＡＫＰ和 乳酸脱氢酶ＬＤＨ的活性测定操作按照试剂盒说明进行。
１．５统计学处理
殖发育的影响。
１材料与方法 １．１试验动物
ＳＤ雄性大鼠：河南省试验动物中心购买的２６日龄 ＳＤ雄性大鼠，体质量为（８５．０＋４．５）ｇ。实验室控制温度为 ２２～２４℃，空气相对湿度５０％～６５％，自然采光，自由饮 水，环境安静。试验用犬的选择是３只公犬，１０只母犬，均 通过农村收购，体质量为３．５～４．５ ｋ。３只公犬和１０只母 犬交配，对照组和试验组均为６只，从交配所生的１０窝中 选取６窝，每窝选取２只体质量相近、发育良好的幼犬。
大小密切相关［５‘７ Ｊ。
睾丸碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和乳酸脱 氢酶（ＬＤＨ）是睾丸中的几种标志酶，其活性是睾丸机能正 常与否的标志，也是维持精子发生不可缺少的重要条件。 ＬＤＨ主要存在于生精细胞胞质及精子尾中段线粒体上， 催化丙酮酸转化为乳酸进行无氧代谢，其活性与精子生 成、精子活动、获能及受精有关。笔者在试验中发现１０月
的生长。
用ＳＰＳＳ２１．０作方差、ｘ２检验等统计分析，结果以“平均 值±标准误”表示。
２结果与分析
２．１
犬体质量测定结果（见表２） 表２试验组犬体质量变化结果
３．２雄性幼犬食用试验大鼠对其睾丸标志酶指标的影响 雄性生殖细胞在睾丸组织中的发育依赖于其生存的 稳定内环境、激素以及相关酶类的调节。有研究表明，睾 丸组织标志酶在精子发生与成熟过程中起重要作用，比如 琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酸性磷酸酶 （ＡＣＰ）等。主要分布于生精细胞的线粒体内，是能量代谢 的主要参与酶，精子的发生和成熟与ＳＤＨ和ＬＤＨ的活力
龄幼犬睾丸组织中ＬＤＨ活性下降，说明睾丸组织细胞能 量代谢作用受到影响，进而影响到精子质量；ＡＣＰ由前列 腺分泌，主要分布于睾丸支持细胞的溶酶体内，它参与精 子代谢并有助于精子活力，其活性受雄激素调控，它在精 液中的含量变化能反应前列腺的分泌功能并有助于前列 腺疾病的诊断。ＡＣＰ在性激素诱导下参与蛋白质的合成， 其活性改变与上皮细胞的变性有关，可作为是否有生精障 碍的指标；笔者的结果同样显示，试验组酸性磷酸酶活性 随精子密度及活动率减低而下降。 该试验结果表明，雄性犬增加食用大鼠鼠肉的剂量， 实验组睾丸组织中ＬＤＨ、ＡＣＰ活性随之下降。睾丸ＬＤＨ 参与能量代谢，该酶受到抑制，将阻碍能量的供给，造
注：｝与对照组相比，Ｐ＜０．０５，女｛与对照组相比，Ｐ＜０．０１。
３讨论 ３．１雄性幼犬食用试验大鼠对其体质量的影响
饲料添加剂引起机体和器官组织的改变，往往在动物 体质量上反映出来。因此动物体质量是机体改变的重要 而敏感的指标之一。该试验结果显示，试验初始幼犬体质 量没有出现显著差异，但试验组雄性幼犬食用大鼠鼠肉 后，试验组幼犬体质量从４月龄开始逐渐增加，试验组 体质量增加速度相比对照组较快。这表明饲料添加剂 的二次蓄积能够促进雄性幼犬的生长。经过试验，饲料 添加剂的残留或蓄积通过食物链显著提高了雄性幼犬
１．２饲料添加剂
市售４％仔猪用复合预混料配方见表１。
１．３试验设计
试验动物均为体质量相近，年龄相近的幼犬１２只。 随机分为试验组及对照组，每组６只，试验组从２月龄开始
表１复合预混料配方
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３
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２０１６年（第３７卷）第ｌｏ期
喂养大鼠鼠肉。幼犬每日肉类：０．２６２ｘ５７．３％：０．１５ ｋｇ，试
验大鼠平均重量３００．０ ｇ，大约需要０．５只；以后每月增加
步影响幼犬的生殖功能。
关键词：饲料添加剂；犬；睾丸标志酶；蓄积
中图分类号：￥８１６ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００４—５０９０（２０１６）１０受到人们的重 视。随着人民生活水平的提高和经济全球化，人们对畜禽 产品的品质和安全要求越来越高，高质量的畜产品需要有 高效安全的饲料作保障，饲料安全已成为动物食品安全的 重要环节和源头…。饲料添加剂的不当或超量使用会对 动物产生危害作用，而其在动物产品中的残留以及蓄积进 一步对人的健康和环境产生不良影响。随着人民生活水 平的不断提高，人们对于食品的安全问题愈加关注，尤其 是动物性食品安全问题。动物饲料是食品中有毒有害物 质残留的一个重要来源，饲料添加剂通过畜禽产品带给人 类的隐患将是难以估量的［２“。 该试验通过研究食用饲料添加剂的大鼠鼠肉是否对 雄性幼犬的生殖系统及发育产生影响，通过模拟人类食物 链试验，进一步为动物饲料添加剂的蓄积对人类生殖系统 的影响提供初步试验依据，从而推测动物饲料添加剂对生
蒸坷南畜牲兽鏖
表３试验中各组犬的睾丸组织标志酶指标结果
０．５只；对照组饲喂正常犬日粮和正常大鼠鼠肉，试验组饲 喂高剂量组大鼠鼠肉和正常犬日粮，饲喂期为１０个月。 １．４饲养管理 所有试验犬全部饲养于同一动物舍，单笼饲养，定期 冲洗及消毒。预试期对试验犬驱虫、注射疫苗。采用群饲 方式，每天上午８时和下午４时各饲喂１次。观察犬的生 长发育、排便、采食等健康情况，并记录各组投料量与剩料 量，做好数据统计工作。
坷南畜牲兽鏖｜ｌ｜
２０１６年（第３７卷）第１０期
饲料添加剂对幼犬睾丸功能 相关酶活性的影响研究
王卫杰’，李惠，王乐，徐丹
（开封市医学科学研究所，河南开封４７５０００）
摘要：观察饲料添加剂的蓄积对雄性幼犬生殖发育的影响。选用１２只１月龄土犬，随机分为试验组和对 照组，试验组幼犬饲喂正常剂量日粮和高剂量组大鼠鼠肉，正常对照组幼犬饲喂正常剂量日粮和大鼠鼠肉，喂 至幼犬成熟，检测雄性幼犬食用饲料添加剂高剂量组大鼠鼠肉后对其生长、生殖发育产生影响。检测幼犬睾丸 标志酶活性，结果显示：试验组幼犬睾丸组织中酸性磷酸酶ＡＣＰ和乳酸脱氢酶ＬＤＨ的酶活性下降，碱性磷酸酶 ＡＫＰ活性未发生变化。试验组的酸性磷酸酶和乳酸脱氢酶活性明显下降，差异有统计学意义。推测饲料添加 剂可能通过食物链的蓄积影响雄性幼犬的睾丸标志酶活性，从而影响雄性幼犬睾丸组织的正常生理功能，进一
１．４测定指标
１．４．１生长性能指标 体质量的称量：在２月龄开始每月第１周周一上午测 量１次，连续测１１个月。 １．４．２睾丸组织标志酶指标 试验结束后取双侧睾丸，用冰冷的生理盐水漂洗，制 成１％的组织匀浆，酸性磷酸酶ＡＣＰ、碱性磷酸酶ＡＫＰ和 乳酸脱氢酶ＬＤＨ的活性测定操作按照试剂盒说明进行。
１．５统计学处理
殖发育的影响。
１材料与方法 １．１试验动物
ＳＤ雄性大鼠：河南省试验动物中心购买的２６日龄 ＳＤ雄性大鼠，体质量为（８５．０＋４．５）ｇ。实验室控制温度为 ２２～２４℃，空气相对湿度５０％～６５％，自然采光，自由饮 水，环境安静。试验用犬的选择是３只公犬，１０只母犬，均 通过农村收购，体质量为３．５～４．５ ｋ。３只公犬和１０只母 犬交配，对照组和试验组均为６只，从交配所生的１０窝中 选取６窝，每窝选取２只体质量相近、发育良好的幼犬。
大小密切相关［５‘７ Ｊ。
睾丸碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和乳酸脱 氢酶（ＬＤＨ）是睾丸中的几种标志酶，其活性是睾丸机能正 常与否的标志，也是维持精子发生不可缺少的重要条件。 ＬＤＨ主要存在于生精细胞胞质及精子尾中段线粒体上， 催化丙酮酸转化为乳酸进行无氧代谢，其活性与精子生 成、精子活动、获能及受精有关。笔者在试验中发现１０月
的生长。
用ＳＰＳＳ２１．０作方差、ｘ２检验等统计分析，结果以“平均 值±标准误”表示。
２结果与分析
２．１
犬体质量测定结果（见表２） 表２试验组犬体质量变化结果
３．２雄性幼犬食用试验大鼠对其睾丸标志酶指标的影响 雄性生殖细胞在睾丸组织中的发育依赖于其生存的 稳定内环境、激素以及相关酶类的调节。有研究表明，睾 丸组织标志酶在精子发生与成熟过程中起重要作用，比如 琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酸性磷酸酶 （ＡＣＰ）等。主要分布于生精细胞的线粒体内，是能量代谢 的主要参与酶，精子的发生和成熟与ＳＤＨ和ＬＤＨ的活力
