狼疮细胞检查
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三种红斑狼疮细胞检验方法的比较和评价发表时间:2018-04-27T13:37:59.157Z 来源:《心理医生》2018年10期作者:齐绍伟[导读] 系统性红斑狼疮(SLE)多见于青壮年女性,是自身免疫结缔组织病,近年来研究较多。
红斑狼疮细胞(LE cell)检查已成为一重要辅助诊断方法[1]。
(哈尔滨市红十字中心医院黑龙江哈尔滨 150076)【摘要】目的:探讨红斑狼疮细胞检验方法的三种检测方法比较与评价。
方法:2016年1月—2017年12月期间收治的系统性红斑狼疮(SLE)患者40例,实验室采用去纤维蛋白法,抗凝血法和血块法检查红斑狼疮细胞,对三种检验方法进行检测结果进行比较。
结果:脱纤维血法阳性34例,阳性百分率85.0%;抗凝血法阳性28例,阳性百分率70.0%;滴血法阳性26例,阳性百分率65.0%。
结论:采用去纤维蛋白法检查红斑狼疮细胞为好。
【关键词】系统性红斑狼疮(SLE);红斑狼疮细胞(LE );检测方法【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2018)10-0080-02 系统性红斑狼疮(SLE)多见于青壮年女性,是自身免疫结缔组织病,近年来研究较多。
红斑狼疮细胞(LE cell)检查已成为一重要辅助诊断方法[1]。
2016年1月—2017年12月期间收治的系统性红斑狼疮(SLE)患者40例为研究对象,以探讨最佳的检验方法。
1.资料与方法1.1 一般资料本组收治的系统性红斑狼疮患者40例,其中男性12例,女性28例,年龄15~55岁,平均年龄34.5±2.5岁。
对40例同时采用以下三种方法进行比较,。
1.2 方法1.2.1去纤维蛋白法静脉采血5ml,置含几颗小玻珠的瓶中,摇动15min,直至纤维蛋白完全绕拌在玻珠上为止。
置37℃孵育箱中2h,再将血标本转入小口径试管中,以1000r/min离心5min,使白细胞适当集中,吸取白细胞层至温氏管内,以2000r/min离心沉淀10min,去白细胞层涂片,Wright染色后镜检。
红斑狼疮血检诊断标准
红斑狼疮的血检诊断标准包括以下几项:
1.铁蛋白值>684 μg/L。
2.血小板≤181×109/L。
3.AST>48 U/L。
4.TG>1560 mg/L。
5.纤维蛋白原≤3600 mg/L。
此外,红斑狼疮的诊断必须经专科医生明确诊断,并须同时满足下列条件:
1.临床表现至少具备下列条件中的四项:蝶形红斑或盘形红斑;光
敏感;口鼻腔黏膜溃疡;非畸形性关节炎或多关节痛;胸膜炎或心包炎;神经系统损伤(癫痫或精神症状);血象异常(白细胞小于4000/μl或血小板小于100000/μl或溶血性贫血)。
2.为必备条件,满足实验室数据异常需排除伴发免疫介导的血小板
减少症、传染性肝炎、内脏利什曼病、家族性高脂血症等疾病。
检验科红斑狼疮检查操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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一、标本采集。
1. 患者准备,告知患者检查前的注意事项,如空腹、避免剧烈运动等。
红斑狼疮细胞检查标准操作规程目的规范红斑狼疮细胞检查标准操作适用范围适用于红斑狼疮细胞检查检测原理红斑狼疮细胞温浴染色法仪器OLYMPUS显微镜37℃水浴箱试剂瑞氏-姬姆萨复合染色液:①I液:取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g,置洁净研钵中,加少量甲醇(分析纯),研磨片刻,吸出上层染液;再加少量甲醇,继续研磨,再吸出上液。
如此连续几次,共用甲醇500ml。
收集于棕色玻璃瓶中,每天早、晚各震荡3min,共5天,之后存放一周即可使用。
②Ⅱ液:pH6.4-6.8磷酸盐缓冲液称取如下比例的试剂:磷酸二氢钾(无水) 6.64g磷酸氢二钠(无水) 2.56g加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐调整pH,加水至1000ml。
样本采集抽取静脉血3ml于洁净试管中,及时送检。
6.1 患者准备6.1.1 检验人员必须对患者讲清楚检验目的,安慰患者,努力减轻患者的疑虑和恐惧心理。
6.1.2 标本采集前,应避免跑步、骑自行车、爬楼等剧烈的运动,要求患者休息15分钟后进行。
尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行。
操作步骤7.1 抽取患者血液2-3ml,注于干燥洁净试管内,于室温待凝。
7.2 于凝固刚形成时,用竹签将凝块搅碎,并将残余凝块除去。
7.3 以2000rpm/min离心沉淀使白细胞聚集在同一层面,以利于狼疮细胞形成。
7.4 置于37摄氏度温箱内温育2h。
7.5 取出白细胞层及其上下各少许,置红细胞比积管内,以2000r/min离心,沉淀10min。
7.6 吸去上层液,轻轻吸取白细胞层,制成薄片3-4张。
7.7 以瑞氏染液染色、镜检。
生物参考区间阴性变异潜在来源9.1 整个操作时间不能超过3h,时间过短,狼疮细胞形成不佳;时间过长,细胞溶解过多,影响检出。
9.2 注意与果馅细胞鉴别,果馅细胞多为单核细胞吞噬淋巴细胞的核所形成,其核仍保持着染色质结构和染色特性(着紫红色)。
红斑狼疮该做什么检查1.抗核抗体抗核抗体(ANA)是能与细胞核或者其组成成分反应的自身抗体,主要出现在自身免疫性疾病,是诊断SLE的主要依据之一。
抗核抗体偶尔也可以在老年人体内和使用某些药物后出现,但是其效价很低。
目前主要以Hep-2细胞作为基质,用间接免疫荧光法来测定抗核抗体。
因为这种细胞的核大,结构松散,而且分裂、生长快,抗原易于暴露,很容易与病人血清中的自身抗体结合而显色,所以灵敏度很高,达95%。
抗核抗体检测已在有条件的医疗单位中开展。
一般来说,抗核抗体阴性可以排除SLE,而高滴度的抗核抗体阳性则说明病人可能患有SLE。
抗核抗体的荧光图像主要可分为五种,表示不同的病因。
(1)周边型:可能反映抗双链DNA抗体,多见于SLE。
(2)均质型:多见于活动期SLE、药物性狼疮等。
(3)颗粒型:多种自身免疫性疾病,如SLE、干燥综合征等。
(4)核仁型:多见于硬皮病、皮肌炎和类风湿关节炎等。
(5)着丝点型:见于硬皮病。
2.抗双链DNA抗体抗双链DNA抗体(抗dsDNA)又称为“抗天然DNA抗体”,是抗核抗体的一种类型,几乎所有SLE病人都有该抗体的增高。
目前认为,它在SLE的发病中起一定的作用。
在一些病人中,DNA的大分子可存在于循环血液中或者戮附于多种器官的微血管上,如肾脏、肺和脑组织,与血液中的自身抗体结合,形成循环免疫复合物,导致组织损伤。
目前抗双链DNA抗体多见于狼疮性肾炎中,约50肠以上的狼疮性肾炎病人循环血液中的DNA浓度较正常人高。
但为什么会增高,如何增高,目前还不得而知,相信随着科学的发展,这些难题可逐步得到解决。
一般认为,抗双链DNA的效价与病情相平行,即病情活动时,效价升高;病情缓解时,效价降低。
由于各地测定的方法不同,所以正常值也不,一般来说,结合率要大于20写以上才有临床意义。
3.抗Sm抗体Sm是一位病人名字的缩写,在这位诊断为SLE的病人血清中,首次找到了这种抗体,因此而命名。
红斑狼疮检查项目有哪些1、血常规:白细胞减少(<4000/mm3)或淋巴细胞减少(<1500/mm3)或血小板减少(<100000/mm3)。
2、血沉:增快。
3、血清蛋白:白蛋白降低,α2和γ球蛋白增高,纤维蛋白原增高,冷球蛋白和冷凝集素可增高。
4、免疫球蛋白:活动期血IgG,IgA和IgM均增高,尤以IgG为著,非活动期病例增多不明显或不增高,有大量蛋白尿且期长的患者,血Ig可降低,尿中可阳性。
5、类风湿因子:约20%~40%病例阳性。
6、梅毒生物学假阳性反应:2%~15%阳性。
7、抗心磷脂抗体:IgG型的阳性率为64%,IgM型为56%,与患者血栓形成,皮肤血管炎,血小板减少,心肌梗塞,中枢神经病变和习惯性流产或宫内死胎关系密切。
8、LE细胞:Hargraves(1948)首先在骨髓中发现,Haserick(1949)从外周血中找到LE细胞,miecher(1954)证明红斑狼疮细胞因子为一种抗核因子,是一种γ球蛋白,现已明确形成LE细胞需要4个因素:①LE细胞因子,是一种抗核蛋白抗体,存在于外周血,骨髓,心包,胸腔和腹腔积液,疱液和脑脊液中,其相应抗原为脱氧核糖核酸一组蛋白复合物,此抗原存在于细胞核内。
②受损伤或死亡的细胞核,无种属和+器官特异性,即人或动物的各种器官的细胞核均可与LE细胞因子起作用。
③活跃的吞噬细胞,一般为中性粒细胞。
④补体:在吞噬时需要补体的参与,LE细胞形成的过程首先为LE细胞因子与受损伤或死亡的细胞核起作用,使细胞核胀大,失去其染色质结构,核膜溶解,变成均匀无结构物质,所谓“匀圆体”细胞膜破裂,匀圆体堕入血液,许多吞噬细胞聚合来吞噬此变性的核,形态花瓣形细胞簇,随后此变性核被一个吞噬细胞所吞噬,就形成所谓LE细胞,补体参与起促进吞噬作用。
约90%~70%活动性SLE患者,LE细胞检查阳性,其他疾病如硬皮病,类风湿性关节炎等中约10%病例可查见该细胞,此外,慢性活动性肝炎,药疹如普鲁卡因酰胺及肼酞嗪(肼苯哒嗪)等引起也可阳性。
红斑狼疮应该做哪些检查?*导读:本文向您详细介红斑狼疮应该做哪些检查,常用的红斑狼疮检查项目有哪些。
以及红斑狼疮如何诊断鉴别,红斑狼疮易混淆疾病等方面内容。
*红斑狼疮常见检查:常见检查:血流变学检查、抗核抗体(ANA)、狼疮带试验、皮肤试验、红斑狼疮细胞(LEC)、抗中性粒细胞胞质抗体、血清触珠蛋白(Hp)、抗血小板抗体(APA)、循环免疫复合物(CIC)、白细胞计数(WBC)、淋巴细胞转换试验(LTT)、快速血浆反应素环状卡片试验、红细胞表面电荷、抗组蛋白抗体、滑膜液肉眼检查、活化部分凝血活酶时间(APTT)、积液β2-微球蛋白、抗脱氧核糖核酸(DNA)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)、血清甘氨酰脯氨酰-二肽氨基肽酶(GPDA)*一、检查一、血常规白细胞减少(4000/mm3)或淋巴细胞减少(1500/mm3)或血小板减少(100000/mm3)。
*二、血沉增快。
三、血清蛋白白蛋白降低, 2和球蛋白增高,纤维蛋白原增高,冷球蛋白和冷凝集素可增高。
四、免疫球蛋白活动期血IgG、IgA和IgM均增高,尤以IgG为著,非活动期病例增多不明显或不增高。
有大量蛋白尿且期长的患者,血Ig可降低,尿中可阳性。
五、类风湿因子约20%~40%病例阳性。
六、梅毒生物学假阳性反应 2%~15%阳性。
七、抗心磷脂抗体 IgG型的阳性率为64%,IgM型为56%,与患者血栓形成,皮肤血管炎,血小板减少,心肌梗塞、中枢神经病变和习惯性流产或宫内死胎关系密切。
八、LE细胞 Hargraves(1948)首先在骨髓中发现,Haserick(1949)从外周血中找到LE细胞。
miecher(1954)证明红斑狼疮细胞因子为一种抗核因子,是一种球蛋白,现已明确形成LE细胞需要4个因素:①LE细胞因子,是一种抗核蛋白抗体,存在于外周血、骨髓、心包、胸腔和腹腔积液、疱液和脑脊液中,其相应抗原为脱氧核糖核酸一组蛋白复合物,此抗原存在于细胞核内;②受损伤或死亡的细胞核,无种属和+器官特异性,即人或动物的各种器官的细胞核均可与LE细胞因子起作用;③活跃的吞噬细胞,一般为中性粒细胞;④补体:在吞噬时需要补体的参与。