Hepa 1-6小鼠肝癌细胞株使用说明

藤茶复方对肝癌Hepa1-6的实验研究摘要】目的：观察藤茶复方在体内外对肝癌Hepa1-6的影响作用。

方法：采用皮下接种肝癌HEPA1-6实体瘤模型观察藤茶复方体内的抑瘤作用；应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法研究藤茶复方对肝癌HEPA1-6细胞体外增殖的影响。

结果：藤茶复方对肝癌HEPA1-6有较强的体外增殖抑制作用，且剂量依赖性明显，抑制率随着药物浓度增大而增大，72h半数抑制浓度IC50为49.34μg/ml；藤茶复方能抑制肝癌HEPA1-6实体瘤小鼠的肿瘤生长，高、中剂量组抑制率分别为54.3%和48.8%。

与模型对照组相比均有显著差异（P<0.01）。

结论：藤茶复方在体外对肝癌HEPA1-6细胞有明显的抑制作用；在体内对肝癌HEPA1-6肿瘤的生长有明显的抑制作用。

【关键词】藤茶复方；抗肿瘤；HEPA1-6；四甲基偶氮唑蓝【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）26-0195-02藤茶复方主要是由藤茶提取物和肿节风提取物组成，藤茶提取物是从葡萄科蛇葡萄属的显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang)中提取得到，本实验室经超声波提取后其蛇葡萄素含量达80.2%[1]，肿节风提取物是从金粟兰科植物草珊瑚（Sarcandra glabra(Thunb．)Nakai）的干燥全株提取得到，这两种药材均广泛分布于我国长江流域以南的省区，我省有丰富的植物资源[2]。

为了更好的利用和开发我省的药物资源，本研究选用藤茶和肿节风的提取物组成复方，在前期的抗肿瘤研究基础上，我们又进行了藤茶复方在体内外对肝癌HEPA1-6抗肿瘤作用的实验研究。

现报道如下：1.材料与方法1.1 试验药物藤茶复方：由本实验室分别从藤茶和肿节风药材中超声提取得到提取物，藤茶提取物用高效液相色谱法测定其蛇葡萄素含量达80.2%，肿节风提取物用高效液相色谱法测定其迷迭香酸含量为0.0754%[3]，然后按一定比例混合组成。

染料木黄酮对小鼠肝癌高淋巴转移细胞株HepA-H的抑制作用阮姝琴;李继承【期刊名称】《营养学报》【年(卷),期】2006(28)1【摘要】目的:研究染料木黄酮(genistein,Gen)对腹水型小鼠肝癌高淋巴转移细胞株HepA-H的抑制作用及其机制。

方法:MTT法检测Gen对HepA-H的增殖抑制作用。

应用电镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测Gen诱导的HepA-H细胞凋亡。

同时,将HepA-H皮下接种于NIH小鼠的足垫,Gen混悬于2%的卵磷脂中,从细胞接种的D2起,每日以100或200mg/(kgbw.d)腹腔给药,D15取淋巴结观察,并计算转移率。

TUNEL法检测淋巴结内凋亡的HepA-H细胞,并计算凋亡指数。

结果:Gen在体外对HepA-H细胞具有良好的增殖抑制作用,呈量效、时效关系,并能诱导HepA-H细胞凋亡;在体内能减少荷瘤动物肿瘤体积和抑制肿瘤淋巴转移,给药组凋亡指数明显高于对照组(P<0.01)。

结论:Gen能明显抑制HepA-H肝癌细胞增殖和淋巴转移,其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。

【总页数】5页(P66-70)【关键词】染料木黄酮;凋亡;肿瘤;淋巴转移【作者】阮姝琴;李继承【作者单位】浙江大学细胞生物学研究所【正文语种】中文【中图分类】R151.44【相关文献】1.凝溶胶蛋白表达稳定下调的小鼠肝癌高淋巴道转移力Hca-F细胞株的构建 [J], 王绍清;唐建武;孙明忠;刘淑清;王波2.以凝溶胶蛋白为靶点的超声造影剂对小鼠腹水型肝癌高淋巴转移细胞株摄取的影响 [J], 何垚; 杨龙; 袁建军; 朱好辉; 邵黎阳3.高、低淋巴道转移能力小鼠肝癌细胞株抑制性消减杂交文库的构建 [J], 崔晓楠;唐建武;侯力;宋波;班丽英4.金雀异黄素对不同淋巴转移能力的小鼠肝癌细胞株的抑制作用 [J], 阮姝琴;李继承5.染料木黄酮对致敏小鼠引流淋巴结细胞因子的抑制作用 [J], 丛林;曾耀英;蔡小嫦;杨蓉娅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

CpG-ODN对荷瘤鼠的治疗作用朱林波;傅庆国【摘要】目的探讨含CpG序列的寡脱氧核糖核苷酸(CpG-ODN)对小鼠肝癌移植瘤的治疗作用.方法体外培养小鼠肝癌细胞Hepa 1-6,建立小鼠肝癌移植瘤模型,分为生理盐水对照组和CpG-ODN治疗组,瘤旁皮下分别给予0.9%NaCl注射液、CpG-ODN治疗,测量移植瘤的大小,死亡后剥离瘤体称重并解剖观察肿瘤转移情况及生存情况.ELISA法测免疫小鼠血清中的细胞因子IFN-γ、趋化性细胞因子CXCL-9、CXCL-10的水平.结果 8次治疗后,CpG-ODN治疗组瘤重抑制率和体积抑制率分别为69.5%和75.8%,肿瘤重量及体积均显著小于生理盐水对照组(P<0.01).CpG-ODN治疗组小鼠的生存时间显著长于对照组小鼠(P<0.01),其中两只获得长期无瘤生存.CpG-ODN治疗组血清IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10水平均显著高于生理盐水对照组(P<0.01).结论 CpG-ODN对肝癌移植瘤小鼠显示出良好的抑瘤效应,荷瘤小鼠生存期得到显著延长,血清中的细胞因子IFN-γ、趋化性细胞因子CXCL-9、CXCL-10的水平显著升高与其诱导的抗肿瘤免疫相关.【期刊名称】《江西医药》【年(卷),期】2011(046)007【总页数】3页(P602-604)【关键词】CpG-ODN;肿瘤;免疫治疗【作者】朱林波;傅庆国【作者单位】315211,宁波,浙江省宁波大学医学院;浙江省宁波市第二医院肿瘤外科【正文语种】中文【中图分类】R-332CpG-ODN（oligodeoxynucleotide containing CpG motifs），是一类以非甲基化胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸（CpG）为核心的寡聚脱氧核苷酸，能非特异性地激活机体的免疫功能，尤其是细胞免疫功能，其作为免疫调节剂和免疫佐剂正成为当前研究的一大热点[1，2]。

本实验运用对小鼠免疫功能具有刺激作用的CpG-ODN，对接种了小鼠肝癌细胞Hepa 1-6的荷瘤小鼠进行治疗，观察肿瘤的生长情况，以探讨CpG-ODN对小鼠肝癌的免疫治疗效果，检测实验小鼠血清中细胞因子IFN-γ、趋化因子CXCL-9和CXCL-10的水平，进一步证实CpG-ODN发挥作用可能涉及的机制。

REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。

客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ........................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................... - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................... - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................... - 5 -其他实验材料(不提供，但可协助购买) : ............................................................................................. - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................... - 5 -样本收集处理及保存方法 ....................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................... - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................... - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................... - 8 -操作要点提示 ........................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................... - 9 -结果重复性 ............................................................................................................................................. - 10 -灵敏度 ..................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ..................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ................................................................................................................................................. - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。

丹皮酚对HepA荷瘤小鼠免疫调节和抑瘤作用研究孙国平;沈玉先;张玲玲;周爱武;魏伟;徐叔云【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2003(019)002【摘要】目的研究丹皮酚(paeonol)的抗肿瘤作用及其机制.方法建立小鼠移植性肝癌HepA肿瘤模型,观察丹皮酚对肿瘤生长的影响.应用放射免疫法检测小鼠血清中IL-2及TNF-α含量,同时观察丹皮酚对小鼠脾细胞产生IL-2及腹腔巨噬细胞产生TNF-α的影响.结果丹皮酚对小鼠HepA肿瘤的生长有抑制作用,对IL-2及TNF-α的生成有促进作用.结论丹皮酚可能通过促进IL-2及TNF-α的生成而发挥抗肿瘤作用.【总页数】3页(P160-162)【作者】孙国平;沈玉先;张玲玲;周爱武;魏伟;徐叔云【作者单位】现在安徽医科大学第一附属医院肿瘤科,合肥,230032;安徽医科大学临床药理研究所,合肥,230022;安徽医科大学临床药理研究所,合肥,230022;安徽医科大学临床药理研究所,合肥,230022;安徽医科大学临床药理研究所,合肥,230022;安徽医科大学临床药理研究所,合肥,230022【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R392.11;R73-354;R735.705【相关文献】1.半边旗提取物对HepA荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能的影响 [J], 戴滨;崔燎;吴铁;邓亦峰;吴科锋2.补肾化瘀药对S180荷瘤小鼠抑瘤作用及免疫调节作用 [J], 王蓉蓉3.玉屏风散对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠免疫调节的影响 [J], 张露蓉;姚霏;江国荣4.桦褐孔菌醇提物对MFC胃癌荷瘤小鼠抑瘤作用及免疫调节的初步探讨 [J], 宋磊;姜波;周忠光5.双歧杆菌及其WPG对S_(180)荷瘤小鼠免疫调节和抑瘤作用研究 [J], 张宝元;马晓红;刘震;鲁杰;赵小元;郭良娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

湖南省长望浏宁四市县区2012届高三年级联考理科综合能力试题时量:150分钟总分:300分考试范围：高考范围；本卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。

本试卷共21小题，每小题6分，共126分。

合题目要求的以下数据可供解题时参考：可能用到的相对原子质量： H－1 C－12 N－14 O－16 Zn－65 S－32 Fe－56Ⅰ卷（选择题共126分）一、选择题（本大题共13小题，每小题6分。

在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。

）1．预防传染病的疫苗家族中增加的第三代疫苗——DNA疫苗，它们是由病原微生物中的一段表达抗原的基因制成，这段基因编码的产物仅仅引起机体的免疫反应。

关于DNA疫苗的叙述不正确的是A．DNA疫苗导入人体能够产生特异性免疫B．导入人体的DNA疫苗在体内直接产生抗体，起到免疫作用C．DNA疫苗的接种可以达到预防特定微生物感染的目的D．DNA疫苗接种后引起人体产生的抗体是由浆细胞合成的2．下表是实际测得的某运动员在训练过程中的三项生理指标的数据，下列分析错误的是A．三项生理指标中，实测数据基本正常的有甲、乙、丙B．胰岛素在血糖调节过程中发挥着比较关键的作用C．三项生理指标的调节过程中，下丘脑直接参与的是甲、乙、丙D．缓冲物质NaH2PO4/Na2HPO4对维持血液pH的稳定有重要作用3．下列关于科学实验叙述正确的是：A．通过不同体积的琼脂块模拟实验证明了琼脂块体积的大小与物质运输速率成正比B．用猪血红细胞提取制备细胞膜，采集血液时须加入生理盐水避免血液凝固C．用鸡血细胞提取DNA，加蒸馏水有利于细胞快速破裂，加2mol/L的NaCl溶液有利于DNA溶解D．用人口腔上皮细胞做“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验时，需先对细胞进行盐酸水解，然后用甲基绿、吡罗红染色剂分别给涂片进行染色4．研究不同的光强、温度对植物光合作用和呼吸作用的影响，实验结果如图所示。

下列有关分析正确的是A．光强小于1时，温度是光合作用的主要限制因素B．光强大于7时，35℃条件下有氧呼吸酶的活性最低C．光强大于7时，25℃条件下植物合成有机物的速率最大D．光强小于7时，15℃条件下植物产生氧气的速率最大5．在某岛屿上相互隔绝的甲、乙两个水潭中，都生活着小型淡水鱼——虹鳉。

小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的小鼠肝窦内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

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小鼠肝窦内皮细胞产品简介：产品名称：小鼠肝窦内皮细胞（Mouse liver sinusoidal endothelial cells, LSEC）组织来源：小鼠肝组织产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠肝窦内皮细胞细胞简介：小鼠肝窦内皮细胞细胞分离自正常小鼠肝组织，肝窦内皮细胞是肝非实质细胞的主要细胞群，具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。

肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。

它由多种因素引起，其过程极复杂，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。

两种方法建立小鼠原位肝癌模型的比较摘要】目的比较建立小鼠原位肝癌模型的两种方法的优劣。

方法分别采用肝脏原位注射细胞法和尾静脉高压水流动力学注射法建立小鼠原位肝癌模型，对两组小鼠肝脏的成瘤情况进行比较。

结果两组小鼠均能在短期内成瘤，且成瘤率高。

结论尾静脉高压水流动力学注射法比原位注射细胞法更容易操作，小鼠存活率高，肝脏成瘤更均匀。

【关键词】原位肝癌模型高压水流动力学注射【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）14-0382-02原发性肝细胞肝癌是我国乃至全球范围内的研究热点，而原位肝癌小鼠模型是进行原发性肝细胞肝癌基础研究和临床研究的重要工具。

目前原位肝癌模型主要采用化学诱导法（DEN），但是该方法建立模型成瘤的时间比较长，大概需要6-8个月，导致研究的周期很长。

本文尝试了两种比较快速地建立小鼠原位肝癌模型的方法--肝脏原位注射细胞法和尾静脉高压水流动力学注射法，并对这两种方法建立的小鼠模型进行了比较。

1 实验材料及方法1.1 实验动物与试剂C57BL/6小鼠7-8周，雄性，20只,购自上海斯莱克实验动物有限公司。

Hepa1-6细胞株购自中科院上海细胞库。

DMEM高糖培养基，胎牛血清，购自上海英潍捷基公司。

水合氯醛、碘伏购自国药集团。

注射器，手术器械、缝合线、针领自苏州大学材料供应中心。

1.2 方法1.2.1 细胞悬液制备 Hepa 1-6在37℃、5 % CO2 的细胞培养箱中培养，取对数生长期细胞,0.25%胰蛋白酶消化后,收集于15mL离心管中，用PBS调整细胞悬液浓度至5×107/mL用于原位注射细胞法,每只小鼠注射20uL。

用PBS调整细胞悬液浓度至5×105/mL 用于尾静脉高压水流动力学注射法每只小鼠注射2mL。

1.2.2 小鼠分组 20只7-8周龄的C57BL/6雄性小鼠分为2组，第1组10只进行肝脏原位注射细胞建立模型，第2组10只采用尾静脉高压水流动力学注射的方法建立模型。

《Hepal-6肝癌细胞系所致肌肉减少症小鼠动物模型的建立及早期切除肿瘤对肌肉减少症模型的影响》一、引言随着癌症的日益普遍，研究癌症及其并发症的治疗方法已成为当前重要的科学问题。

肝癌是一种常见且危害极大的癌症，而其导致的肌肉减少症（Cachexia）更是对患者的生命质量造成严重影响。

为了更好地研究肝癌及其并发症，建立一种可靠的动物模型显得尤为重要。

本文旨在探讨Hepal-6肝癌细胞系所致肌肉减少症小鼠动物模型的建立方法，并分析早期切除肿瘤对肌肉减少症模型的影响。

二、Hepal-6肝癌细胞系所致肌肉减少症小鼠动物模型的建立1. 实验材料与方法（1）实验材料：Hepal-6肝癌细胞系、小鼠、实验所需试剂等。

（2）模型建立方法：通过注射Hepal-6肝癌细胞至小鼠体内，诱导小鼠发生肝癌，进而观察小鼠体重、肌肉质量等指标的变化，以建立肌肉减少症小鼠模型。

2. 实验结果（1）Hepal-6肝癌细胞系在小鼠体内成功种植，形成肝癌。

（2）随着肝癌的发展，小鼠体重和肌肉质量逐渐下降，符合肌肉减少症的特征。

（3）成功建立了Hepal-6肝癌细胞系所致肌肉减少症小鼠动物模型。

三、早期切除肿瘤对肌肉减少症模型的影响1. 实验设计（1）分组：将小鼠分为两组，一组为肝癌发展组（对照组），另一组为早期切除肿瘤组（实验组）。

（2）实验方法：对照组小鼠任其肝癌自然发展，实验组小鼠在肝癌早期进行肿瘤切除手术。

（3）观察指标：比较两组小鼠的生存期、体重、肌肉质量等指标的变化。

2. 实验结果与分析（1）早期切除肿瘤的小鼠在生存期上明显优于对照组，表明早期干预可有效延长小鼠生存期。

（2）实验组小鼠的体重和肌肉质量在术后逐渐恢复，而对照组小鼠的体重和肌肉质量持续下降。

这表明早期切除肿瘤可有效改善肌肉减少症的症状。

（3）通过对两组小鼠的病理学检查，发现实验组小鼠的肝癌细胞增殖速度减缓，肿瘤复发率降低。

这进一步证实了早期切除肿瘤对改善肌肉减少症模型的重要性。