(三年模拟精选)2018届高考生物 第十单元 专题二十二 微生物的利用(全国通用)
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第33讲传统发酵技术与微生物的培养和应用A组基础题组考点一传统发酵技术1.(2017安徽六安一中第二次月考,31)运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题:(1)自古酒就与人类生活息息相关。
在图中所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验,若在A 装置的通气口补充无菌空气,那么一段时间后,能获得葡萄酒的是装置。
发酵是否成功可用对发酵产物进行检验确认。
(2)图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图。
点加提取样品的是点,鉴定实验的方法叫做。
(3)微生物培养时,后期进行菌落统计时,一般选择菌落数在的平板进行计数。
2.(2017四川三台中学第二次月考,39)人们的日常生活与传统发酵技术密切相关。
请回答下列相关问题:(1)制作腐乳的过程中所用到的微生物主要是。
(2)在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供氧气的是。
在发酵产物制作过程中都需要培养微生物,为防止杂菌污染,需要对培养液(基)和培养器皿进行(填“消毒”或“灭菌”)。
(3)利用酵母菌酿酒时,一开始持续通入空气,导致酵母菌数量(填“增多”“不变”或“减少”),然后再密封,使酒精(填“增产”“减产”或“不产生”)。
(4)在制作腐乳的过程中加盐的作用是。
(5)在制作泡菜的过程中,要检测亚硝酸盐的含量。
亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成色染料。
先将泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与相应化学物质发生显色反应,再通过颜色的比对,可以估测出泡菜样品中亚硝酸盐的含量。
考点二微生物的利用3.(2016课标全国Ⅰ,39,15分)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
实验步骤如下:①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作无菌平板;③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
第2讲微生物的利用考纲要求全国课标卷五年考频统计2018高考预期1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用3.某种微生物数量的测定2013全国Ⅱ,T39,2014全国Ⅰ,T392014全国Ⅲ,T39,2015全国Ⅰ,T392016全国乙,T39,2016全国丙,T39微生物分离、纯化及鉴定考点1 微生物的分离与培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对________的不同需求,配制出供其生长繁殖的________。
(2)错误!错误!(3)分类错误!2.无菌技术(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止________的方法.(2)关键:防止________的入侵。
(3)消毒和灭菌的辨析3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→______→溶化→______→______ 4.纯化微生物的接种方法5.(1)对于频繁使用的菌种,可以采用________的方法。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用________的方法。
答案:1.(1)营养物质营养物质(2)水、碳源、氮源、无机盐pH 氧气(3)固体培养基2。
(1)杂菌污染(2)外来杂菌 3.称量灭菌倒平板 5.(1)临时保藏(2)甘油管藏[题组精练]1.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看,属于固体培养基,配制时要加入________作为凝固剂,从用途来看属于选择培养基,应以________作为唯一碳源.(2)配置固体培养基的基本步骤是( )A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。
对培养基灭菌的方法一般为____________________________.(4)①过程是________,②过程所使用的接种方法是__________________法。
考点二十三:微生物的利用——五年(2018-2022)高考生物真题专项汇编卷新高考版1.【2022山东卷】青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时,会通过分泌青霉素杀死细菌,以保证自身生存所需的能量供应。
目前已实现青霉素的工业化生产,关于该生产过程,下列说法错误的是( )A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖B.可用深层通气液体发酵技术提高产量C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中D.青霉素具有杀菌作用,因此发酵罐不需严格灭菌2.【2022江苏卷】下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计,不合理的是( )A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌3.【2022湖北卷】灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。
下列叙述正确的是( )A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌4.【2022海南卷】为探究校内植物园土壤中的细菌种类,某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。
下列有关叙述错误的是( )A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本B.培养细菌时,可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基C.土壤溶液稀释倍数越低,越容易得到单菌落D.鉴定细菌种类时,除形态学鉴定外,还可借助生物化学的方法5.【2022辽宁卷】为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险,需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。
下列叙述错误的是( )A.航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物B.细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀C.在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品D.采用平板划线法等分离培养微生物,观察菌落特征6.【2021山东卷】解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。
第十单元生物技术实践 10.2 微生物的利用1.(2016·高考全国乙卷)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
实验步骤如下:①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作无菌平板;③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。
若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是________。
(2)步骤③中,实验组的操作是________。
(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。
若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法________(填“正确”或“不正确”)。
解析:(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素,因此微生物所需的氮来源于牛肉膏和蛋白胨。
若要完成步骤②,需要进行倒平板操作,用到的是固体培养基,所以培养基中要有琼脂。
(2)该实验的空白对照组为不进行处理的无菌平板,实验组的操作为将各无菌平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露相同时间。
(3)若空白对照组的平板上出现了菌落,说明实验过程中出现了污染现象。
空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,导致实验变量不唯一,不能确定实验组平板上的菌落是否仅由教室内不同高度空气中的微生物形成,因此不能求出实验组的菌落平均数。
答案:(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间(3)污染不正确2.(2016·高考全国丙卷)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。
分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。
专题21 微生物地利用、生物技术在食品加工中地应用微生物地培养和应用1.(2018年重庆理综卷>下列有关细菌培养地叙述,正确地是(>A.在琼脂固体培养基上长出地单个菌落含有多种细菌B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌地生长D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解读:本题考查培养基地用途和微生物地代谢知识.琼脂固体培养基上长出地单个菌落应为种群,是由一个或少数同种细菌繁殖而成地同种个体地总和,A项错误。
培养基中加入青霉素可选择酵母菌、霉菌等真菌而抑制细菌地生长,因为青霉素可抑制细菌细胞壁地合成,B项错误。
破伤风杆菌地代谢类型为严格厌氧型,通入氧气可使培养基中地破伤风杆菌活动受到抑制,C错误。
从用途上讲,半固体培养基可用于观察细菌地运动,D正确.答案:D.2.(2009年安徽理综卷>下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作地叙述,其中错误地是(>A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104、105、106倍地土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上地实验组平板进行计数解读:确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300地实验组平板进行计数,D错。
A是培养基地灭菌方法,B设置了一系列对照实验,C是细菌地培养方法,A、B、C三个选项均是正确地.答案:D.3.(2018年新课标全国理综卷>有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成地土壤污染.某同学欲从受原油污染地土壤中筛选出能高效降解原油地菌株.回答问题:(1>在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源地固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基.(2>纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用地接种方法有两种,即和.(3>为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈地大小,分解圈大说明该菌株地降解能力.(4>通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用地灭菌方法有灼烧灭菌、和.无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物地污染.解读:(1>筛选目地菌株应使用选择培养基,可以在这类培养基中加入某种营养物质,促进所需要地微生物生长,这就是微生物学家常用地“投其所好”地策略.(2>平板划线法和稀释涂布平板法都可以将聚集在一起地细菌分散或稀释成单个细胞,进而得到单菌落.(3>目地菌株可分解石原,从而在培养基上形成以目地菌株为中心地分解圈,分解圈越大表明菌株地降解能力越强.(4>常用地灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,酒精灯火焰附近是一个无菌区,故实验操作在此处进行可防周围环境中微生物地污染.答案:(1>原油选择(2>平板划线法稀释涂布平板法(3>强(4>干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰4.(2018年山东理综卷>研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质>均有抑菌作用,两者地提取及应用如图所示.(1>柚皮易焦糊,宜采用法提取柚皮精油,该过程得到地糊状液体可通过除去其中地固体杂质.(2>筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种.对新配制地培养基灭菌时所用地设备是.实验前需对超净工作台进行处理.(3>培养基中地尿素可为乳酸菌A生长提供.电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同地蛋白质,则其相对分子质量越大,电泳速度.(4>抑菌实验时,在长满致病菌地平板上,会出现以抑菌物质为中心地透明圈.可通过测定透明圈地来比较柚皮精油和乳酸菌素地抑菌效果.解读:本题考查微生物培养及应用知识点.(1>柚皮地特点决定提取柚皮精油时应用压榨法.该过程得到糊状液体再通过过滤除去其中地固体杂质.(2>筛选乳酸菌A时,应使用选择培养基,接种时可用平板划线法或稀释涂布平板法.新配制培养基要先用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,超净工作台应在实验前进行消毒处理.(3>微生物生长都需水、碳源、氮源、无机盐.培养基中尿素可为乳酸菌A提供氮素物质,是氮源.电泳法纯化乳酸菌素时,分离带电荷相同蛋白质,相对分子质量越大,电泳速度越慢.(4>抑菌实验时,抑菌物质周围不会有细菌生存,形成一个以抑菌物质为中心地透明圈,可通过测定透明圈直径(大小>来比较不同抑菌物质地抑菌效果.答案:(1>压榨过滤(2>稀释涂布平板法(或稀释混合平板法> 高压蒸汽灭菌锅消毒(3>氮源越慢(4>直径(或大小>5.(2018年天津理综卷>絮凝性细菌分泌地具有絮凝活性地高分子化合物,能与石油污水中地悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀,起到净化污水地作用.为进一步提高对石油污水地净化效果,将絮凝性细菌和石油降解菌融合,构建目地菌株.其流程图如下.据图回答:(1>溶菌酶地作用是.(2>PEG地作用是.(3>经处理后,在再生培养基上,未融合地A、B难以生长.图中AB融合菌能生长和繁殖地原因是.(4>目地菌株地筛选:筛选既能分泌具有絮凝活性地化合物,又能在含有地培养基上生长地AB融合菌,选择效果最好地作为目地菌株.(5>为探究目地菌株不同发酵时间发酵液地絮凝效果,将目地菌株进行发酵培养,定时取发酵液,加入石油污水中,同时设置为对照组.经搅拌、静置各3分钟后,分别测定上层水样地石油浓度和COD值(COD值越高表示有机物污染程度越高>,计算石油去除率和COD去除率,结果如下图.(6>目地菌地种群增长曲线呈型.在40~44小时,发酵液对石油污水地净化效果最好,其原因是. 解读:本题考查了微生物地培养、应用以及细胞项目地相关知识.(1>因为细菌有细胞壁,在融合前要去掉细胞壁所以用溶菌酶处理.(2>PEG用于诱导原生质体融合.(3>AB融合菌具有A、B两种菌地活性部位,正好形成互补,所以能在再生培养基上生长.(4>因为要培养对石油污水净化效果强地菌株,所以培养基中必须有石油.(5>因为探究发酵液地絮凝效果,应设置对照组和实验组.对照组:不加发酵液地石油污水。
选考加试部分第十二章生物技术实践第30讲微生物的利用1.微生物的实验室培养(1)培养基①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
②成分:一般都含有碳源、氮源、水和无机盐,还需要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(2)无菌技术方法⎩⎪⎨⎪⎧消毒⎩⎨⎧煮沸消毒法化学药剂消毒法紫外线消毒法灭菌⎩⎨⎧灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌(3)实验操作牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备: 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
2.细菌的分离方法:划线分离法和涂布分离法 (1)划线分离法①方法:用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,使聚集的菌种分散到培养基的表面。
每个菌落就是一个细菌产生的后代。
②应用:用于基因工程的大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。
由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素,由于非工程菌和其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
(2)涂布分离法:先将培养的菌液稀释,通常稀释到10-7~10-5倍,然后取0.1 mL 稀释度不同的菌液加在培养皿的固体培养基上,用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落。
3.大肠杆菌的培养和分离(1)大肠杆菌特点:革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。
(2)细菌的繁殖:以二分裂的方式繁殖,分裂速度很快。
(3)细菌的扩大培养:用LB 液体培养基,划线分离用LB 固体平面培养基。
(4)大肠杆菌的分离操作技术最常用方法是划线分离法,其操作步骤是:①培养基灭菌:将刚配制好的50 mL LB 液体培养基和50 mL LB 固体培养基分别装入两个250 mL 的三角瓶中,加上封口膜,用高压锅进行灭菌。
②倒平板:在酒精灯火焰旁将固体培养基分别倒在4个培养皿中,使培养基铺满平皿底部,待凝,使之形成平面。
【大高考】(三年模拟精选)2016届高考生物第十单元专题二十二微生物的利用(全国通用)
A组基础巩固
1.(2015·四川遂宁零诊考试)下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方,据此回答下列问题:
(1)从作用上看,该培养基属于________培养基,提供氮源的物质是
________,细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入
________指示剂,若指示剂变________,说明有目的菌株存在。
(3)为了测定微生物的数量,接种时应采用________法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________,测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”“基本一致”)。
解析(1)题干指出下表是分离土壤中微生物的培养基的配方,其中尿素
是作为唯一氮源,能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源,所以该培养基从用途上属于选择培养基。
细菌能利用该氮源是由于体内能合成脲酶。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,说明有目的菌株存在。
(3)纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法,其中稀释涂布法能用于微生物的计数。
1毫升原土壤样液中上述微生物数量=(180+155+176+129)÷4×106×10=1.6×109个;用稀释涂布平板法进行微生物的计数,但统计的数量比实际数量会偏少,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
答案(1)选择尿素脲(催化尿素分解的) (2)酚红红(3)稀释涂布平板 1.6×109低
2.(2015·北京海淀模拟)为获得果胶酶高产菌株,科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。
(1)为分离果胶酶产生菌,科研人员配制了下表所示成分的培养基,该表空白处的两种成分是
______________________________________________________。
制备的培养基常用________法进行灭菌。
(2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中,震荡混匀,制成悬液。
为获得较均匀分布的单菌落,还需要将悬液进行________,用________法接种于固体培养基上。
接种后的培养基________状态放入培养箱。
(3)选择单菌落数目适宜的培养基,加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色),一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液,观察并比较菌落和________直径的比值,筛选果胶酶高产菌株。
(4)将获得的菌株进行液体培养后,从培养液的________(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。
将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混。