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08～17高考江苏卷生物试题（十六）微生物的培养与利用（13）将江苏某地当年收获的小麦秸秆剪成小段,于7 月20 日开始分别进行露天堆放、水泡和土埋3 种方式的处理,3 次重复,每隔15 天检测一次秸秆腐解残留量,结果见右图。
下列分析合理的是A. 秸秆还田后翻耕土埋应是利用秸秆的合理方法B. 土壤中的空气和水分条件有利于多种微生物对秸秆的分解C. 如果将处理开始时间提早30 天,则 3 条曲线的位置将呈现上移趋势D. 从堆放、水泡2 条曲线可以推测好氧性微生物分解能力高于厌氧性微生物【答案】AB(14)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
下列叙述正确的是A. 培养基分装到培养皿后进行灭菌B. 转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C. 接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D. 培养过程中每隔一周观察一次【答案】B（15）做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是A. 高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B. 倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C. 为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D. 用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上【答案】D（16）漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。
下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是A.生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落，在通过划线进一步纯化D.斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株【答案】BC（14）为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。
请回答下列问题：（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该。
（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是。
第2讲微生物的利用考纲要求全国课标卷五年考频统计2018高考预期1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用3.某种微生物数量的测定2013全国Ⅱ，T39，2014全国Ⅰ，T392014全国Ⅲ，T39,2015全国Ⅰ，T392016全国乙，T39,2016全国丙,T39微生物分离、纯化及鉴定考点1 微生物的分离与培养1．培养基（1)概念:人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其生长繁殖的________。
(2)错误!错误!（3）分类错误!2．无菌技术（1）含义:指在培养微生物的操作中，所有防止________的方法.(2）关键：防止________的入侵。
(3)消毒和灭菌的辨析3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→______→溶化→______→______ 4．纯化微生物的接种方法5.（1）对于频繁使用的菌种，可以采用________的方法。
（2）对于需要长期保存的菌种,可以采用________的方法。
答案：1.（1）营养物质营养物质（2）水、碳源、氮源、无机盐pH 氧气(3）固体培养基2。
(1)杂菌污染（2）外来杂菌 3.称量灭菌倒平板 5.（1）临时保藏（2)甘油管藏［题组精练]1．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。
(1）Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入________作为凝固剂，从用途来看属于选择培养基，应以________作为唯一碳源.（2）配置固体培养基的基本步骤是( ）A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板(3）溶化时，烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。
对培养基灭菌的方法一般为____________________________.(4)①过程是________，②过程所使用的接种方法是__________________法。
【创新设计】2018高考生物一轮复习资料专题一微生物的利用活页限时训练新人教版选修1(时间：45分钟满分：100分)一、选择题(1．(2018·安徽省合肥二模)用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )。
①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①② B．③④ C．①③ D．②④解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。
答案 C2．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( )。
A．植物组织培养常用的是固体培养基B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。
答案 D3．(2018·北京黄冈冲刺卷)下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )。
A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源解析天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验者的双手需进行消毒处理；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。
答案 C4．下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )。
A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
（浙江选考）2018版高考生物总复习专题10 生物技术实践第31讲微生物的利用编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（（浙江选考）2018版高考生物总复习专题10 生物技术实践第31讲微生物的利用）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。
本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为（浙江选考）2018版高考生物总复习专题10 生物技术实践第31讲微生物的利用的全部内容。
专题10 生物技术实践第31讲微生物的利用（时间：30分钟）1.（2015·浙江五校第二次联考）近几年生物技术发展迅猛，和我们的生活关系越来越密切了。
请回答下列问题：错误!错误!错误!错误!错误!―→错误!（1）利用植物组织培养可实现农作物的大规模快速繁殖，植物组培培养基的类型有、发芽培养基.上图中，由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植物,这项技术利用了植物细胞具有全能性的原理。
图中A代表；A→B过程表示。
（2)在植物组织培养中关于消毒和灭菌操作的叙述，正确的是( ）A.操作者的双手可以不消毒B。
外植体可以用酒精消毒C.镊子等器械需用酒精灭菌D。
接种后培养基需用高压蒸汽灭菌(3）通常用来分离菌种的方法有和。
（4）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:第一步：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理.第二步:制备选择培养基。
在基本培养基的基础上，还要添加，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
第三步：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。
第四步:根据是否能在该培养基上生长筛选出突变菌。
（5)土壤中有些细菌含有脲酶，这些细菌能够将分解成氨,从而使培养基中加入的指示剂产生红色透明环。
生物技术实践——微生物的培养与应用21、某同学欲从土壤中筛选能够分解纤维素的细菌，请回答以下问题：（1）在筛选具有分解纤维素能力的细菌时，应将土壤样品用____________________进行稀释，然后接种到以____________为唯一碳源的培养基上。
（2）采用____________法对初步筛选到的菌株进行纯化。
（3）对纯化的菌种再采用____________方法进行鉴定。
（4）若将稀释105倍的上述纤维素分解菌菌液，用直接计数法和稀铎涂布平板法进行计数。
①直接计数法：用吸管吸取0.1ml该菌液，滴于血球计数板上的盖玻片边缘，待该细菌全部沉降到计数室底部，用显微镜直接计数，并计算出每升菌液的细菌数目。
②稀释涂布平板法计数：在五个固体培养基上分别接种O.lmL该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：40、152、154、156，则每升菌液中细菌数量为_________个。
③正常操作情况下，上述两种计数法中，_________统计获得的细菌数量数目目偏多，原因是____________________________________________。
2、某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能髙效降解脂肪的菌株，请回答：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲，该培养基属于___________培养基。
(2)为避兔培养皿污染，需将培养皿呈_______状态放置。
为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行________处理。
为了排除培养基被污染,需设置接种______的培养基作为空白对照。
(3)为了筛选出菌株，可将适童的__________试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围出现透明圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶，纯化菌种时，为了对活菌进行计数，可采用_________法接种于新的培养基平板上。
解密22 生态系统的稳定性、生物多样性及环境保护A组考点专练考向一生态系统的稳定性1．（2019·浙江高二期中）下列生态系统中最稳定的是A．沙漠B．苔原C．草原D．热带雨林2．（2019·安徽淮北市·淮北一中高二月考）2018年2月16日四川雅江爆发森林大火，失火面积超过100公顷。
下列有关叙述正确的是A．此地需经过初生演替才能恢复原来的样子B．火灾过后，森林生态系统的恢复力稳定性减弱C．森林生态系统自我调节能力的基础是负反馈调节D．“山上多栽树，等于修水库”体现了生物多样性的直接价值3．（2020·全国）某山区实施退耕还林之后，经数十年的演替发展为森林，图中甲、乙、丙分别表示群落演替的三个连续阶段中优势植物种群数量变化情况。
下列说法正确的是A．实施退耕还林等措施之后，对野生动植物种群不能进行开发利用B．甲、乙、丙之间为竞争关系，第3阶段群落具有明显的垂直分层现象C．演替中后一阶段优势物种的兴起，一般会造成前一阶段优势物种的消亡D．该过程中，群落的物种丰富度和生态系统的恢复力稳定性会逐渐提高4．（2018·山东高三一模）下列有关群落和生态系统的叙述正确的是A．在生态系统中，N、P等元素在生物群落和无机环境之间进行循环往返B．生态系统的食物链中相邻营养级之间的能量流动方向是可逆的C．生态系统的抵抗力稳定性和恢复力稳定性大小都是呈负相关的D．人为因素和自然环境因素对演替方向的影响是相反的5．（2020·全国高二课时练习）下列有关生态系统稳定性的叙述，正确的是A．生态系统自我调节能力的基础是正反馈调节B．抵抗力稳定性弱的生态系统恢复力稳定性一定强C．“野火烧不尽，春风吹又生”体现了生态系统的抵抗力稳定性D．适当增加草原生态系统的物种丰富度可有效提高其抵抗力稳定性考向二生态环境的保护6．（2021·吉化第一高级中学校高二期末）下列关于生态系统稳定性与生物多样性的叙述，正确的是A．湿地具有较强的抵抗力稳定性和恢复力稳定性B．生物多样性包括物种、种群、生态系统多样性C．生物多样性的间接价值明显大于它的直接价值D．建立自然保护区就是为了保护珍稀濒危动植物7．（2019·吉林省实验高二期中）下列处理方法或政策与对应的目的，正确的是A．实施全面二孩政策，目的是通过提高出生率来改善我国人口的年龄组成B．捕鱼时要控制网眼的大小，目的是维持鱼群正常的性别比例C．退耕还林、还草有助于增高生态系统的恢复力稳定性D．近年来规定禁渔期和禁渔区是禁止对相关资源进行开发和利用8．（2020·全国高二课时练习）下列属于防止大气圈臭氧减少的措施是A．减少氟利昂的使用B．增加化肥的使用C．增加污染物的排放D．增加汽车尾气的排放9．（2018·深圳市耀华实验学校高三期末）最近，人们在广西某地发现了可能是现代栽培水稻祖先的万年野生稻，它们不但抗病、抗虫害能力特别强，一穗可达千粒果实，而且可与现有栽培水稻杂交，其杂交子代在长势、生活力、适应性和产量等性状上优于双亲。
考点二十三：微生物的利用——五年（2018-2022）高考生物真题专项汇编卷新高考版1.【2022山东卷】青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。
目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是( )A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖B.可用深层通气液体发酵技术提高产量C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中D.青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌2.【2022江苏卷】下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是( )A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌3.【2022湖北卷】灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。
下列叙述正确的是( )A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌4.【2022海南卷】为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。
下列有关叙述错误的是( )A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本B.培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基C.土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落D.鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法5.【2022辽宁卷】为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。
下列叙述错误的是( )A.航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物B.细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀C.在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品D.采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征6.【2021山东卷】解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。
第十单元生物技术实践 10.2 微生物的利用1．(2016·高考全国乙卷)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
实验步骤如下：①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作无菌平板；③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题：(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。
若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。
(2)步骤③中，实验组的操作是________。
(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。
若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法________(填“正确”或“不正确”)。
解析：(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮来源于牛肉膏和蛋白胨。
若要完成步骤②，需要进行倒平板操作，用到的是固体培养基，所以培养基中要有琼脂。
(2)该实验的空白对照组为不进行处理的无菌平板，实验组的操作为将各无菌平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露相同时间。
(3)若空白对照组的平板上出现了菌落，说明实验过程中出现了污染现象。
空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，导致实验变量不唯一，不能确定实验组平板上的菌落是否仅由教室内不同高度空气中的微生物形成，因此不能求出实验组的菌落平均数。
答案：(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间(3)污染不正确2．(2016·高考全国丙卷)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。
分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。
选考加试部分第十二章生物技术实践第30讲微生物的利用1．微生物的实验室培养(1)培养基①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
②成分：一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，还需要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(2)无菌技术方法⎩⎪⎨⎪⎧消毒⎩⎨⎧煮沸消毒法化学药剂消毒法紫外线消毒法灭菌⎩⎨⎧灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌(3)实验操作牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备： 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
2．细菌的分离方法：划线分离法和涂布分离法 (1)划线分离法①方法：用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线，使聚集的菌种分散到培养基的表面。
每个菌落就是一个细菌产生的后代。
②应用：用于基因工程的大肠杆菌的工程菌，可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。
由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因)，如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素，由于非工程菌和其他杂菌都没有抗性基因，所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
(2)涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释到10－7～10－5倍，然后取0.1 mL 稀释度不同的菌液加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。
3．大肠杆菌的培养和分离(1)大肠杆菌特点：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。
(2)细菌的繁殖：以二分裂的方式繁殖，分裂速度很快。
(3)细菌的扩大培养：用LB 液体培养基，划线分离用LB 固体平面培养基。
(4)大肠杆菌的分离操作技术最常用方法是划线分离法，其操作步骤是：①培养基灭菌：将刚配制好的50 mL LB 液体培养基和50 mL LB 固体培养基分别装入两个250 mL 的三角瓶中，加上封口膜，用高压锅进行灭菌。
②倒平板：在酒精灯火焰旁将固体培养基分别倒在4个培养皿中，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。
（浙江选考）2018版高考生物总复习第9单元生物技术实践第33讲微生物的利用编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（（浙江选考）2018版高考生物总复习第9单元生物技术实践第33讲微生物的利用）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
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第33讲微生物的利用考纲要求1。
大肠杆菌的培养和分离(加试）。
2.分离以尿素为氮源的微生物（加试).考点一微生物的培养和分离1．大肠杆菌（1)特性：大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧（代谢类型）的肠道杆菌，在肠道中一般对人无害，但若进入人的泌尿系统，就会对人体产生危害。
（2）用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。
2．细菌的培养和分离（1)细菌的繁殖：以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20 min分裂一次。
（2）培养的方法:需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中,一般用接种环（工具）转移带菌的培养物.(3)细菌分离的方法与特点分离方法特点划线分离法操作简单涂布分离法操作复杂,单菌落更易分开3。
消毒和灭菌的区别项目条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌4.大肠杆菌的培养和分离实验（1）实验内容:将大肠杆菌扩大培养和划线分离，即用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌，培养后再在LB固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上就会形成一个个单独的菌落。
绝密★启用前2018衡水名师原创专题卷生物专题十七《微生物的利用生物试卷考试范围：xxx；考试时间：100分钟；命题人：xxx学校：___________姓名:___________班级：___________考号：___________题号一二总分得分注意事项：1、答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息2、请将答案正确填写在答题卡上第1卷评卷人得分一、填空题1、某些土壤细菌可将尿素分解成和，供植物吸收和利用.回答下列问题：1。
有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生尿素的细菌不能以尿素的分解产物作为碳源,原因是 ,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是（答出两点即可）.2.为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 (填“尿素”“ "或“尿素”)作为氮源,不选择其他两组的原因是 .3。
用来筛选分解尿素细菌的培养基含有和,其作用有（答出两点即可）。
2、氯嘧磺隆是一种常用于除大豆田地阔叶杂草的有机物除草剂,长期使用氯嘧磺隆造成土壤和水体的污染。
某同学将从污染的土壤中筛选出高效降低氯嘧磺隆的分解菌。
用已学知识回答下列问题：1.培养微生物的培养基一般都含有水、和碳源、氮源。
2.在筛选高效分解菌过程中，应将土壤样品稀释液接种到以为唯一碳源的固体培养基上,该培养基从功能上看属于培养基。
3。
培养微生物的培养基常采用方法进行灭菌。
4。
统计样品活菌数目时,常采用的方法是___________。
将10土样进行浓度梯度逐步稀释后,在4个培养基平板上均接种稀释倍数为103的土壤样品液0.1，培养一段时间后，平板长出的菌落数分别为189、210、204和434，由此得出每克土壤样品中的分解菌数量为________个.用该方法统计的活菌数往往比真实值低的原因是________。
3、柑橘是一种经济价值很高的水果,橘皮可用于提取橘皮精油，果肉可用于榨取橘子汁或制橘子罐头。
一种橘皮中精油含量较高的橘子中有核（种子）,在利用橘子果肉榨取果汁的时候，橘子中的核会被挤碎,导致橘子汁带有苦味.科研人员在对这种果树深入调研时发现，一个枝条上的所有果实均无核.请结合题意回答下列有关问题：1.人们可以采用的方法在短时间内大量繁殖无核品种,最好选用该枝条上的作为外植体进行培养。
备战2018年高考生物之高频考点解密解密29 微生物的培养与利用考点1 培养基及微生物的纯化培养技术一、微生物的培养基1．微生物的培养基营养要素来源功能碳源无机碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物①构成细胞物质和一些代谢产物②既是碳源又是能源（有有机碳源糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等2．按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂（如琼脂）微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏半固体培养基观察微生物的运动、分类、鉴定3．按功能分类二、消毒与灭菌三、大肠杆菌的纯化1．原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。
2．纯化微生物的接种方法3．平板划线操作的注意事项（1）操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要对接种环进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的如下表：第一次操作每次划线之间划线结束 目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者（2）灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
（3）第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
（4）划线时最后一区不要与第一区相连。
（5）划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
调研1甲、乙两同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。
Ⅰ．甲同学为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基进行培养：蛋白胨10 g乳糖 5 g蔗糖 5 gK2HPO4 2 g蒸馏水 1 000 mL将pH调到7.2（1）该培养基所含有的碳源有________，其功能是_________________________________________。
专题训练22 微生物的利用一、选择题1.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是( )A.防止杂菌污染B.接种前菌种要进行灭菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前2.要筛选得到纯净的菌种,通常在固体培养基上划线分离,下列操作正确的是( )A.每次划线时,接种环都需蘸菌液一次B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种C.在超净台中接种时要在酒精灯火焰旁进行D.划线分离后将培养皿正放在恒温培养箱中培养3.分离以尿素为唯一氮源的细菌时,培养基中加入酚红的目的是( )A.筛选出能分解尿素的细菌B.对分离的菌落作进一步鉴定C.培养基中的酚红可作为细菌的营养D.若酚红变蓝就能认定该菌能分解尿素4.分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基,下列叙述正确的是( )A.前者含琼脂,后者不含琼脂和琼脂糖B.两者都含有琼脂C.前者含有琼脂糖,后者不含琼脂糖但含琼脂D.两者都不含琼脂和琼脂糖5.下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述,正确的是()A.倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理B.应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为防止微生物污染,要在酒精灯火焰旁进行操作D.倒好培养基的培养皿,要立即将平板倒过来放置6.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3 d,结果如图所示。
从实验结果分析,下列叙述不正确的是( )A.链霉素可以用作治疗伤寒B.链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效D.链霉素能阻止结核杆菌的生长7.以下操作与获得单个的菌落无关的是( )A.每次划线之前都要灼烧接种环B.第二次及以后的划线总是从上次划线的末端开始C.对菌液进行系列稀释操作D.接种结束,对接种工具灭菌8.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图,下列有关叙述错误的是( )A.在配制步骤②③的培养基时,应先调pH值后髙压蒸汽灭菌B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单菌落C.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力二、非选择题9.下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程,请回答下列问题。
A.配制培养基→B.灭菌→C.培养(液体培养基)→D.划线分离和培养(固体培养基)→E.菌种短期保存(1)A过程配制的是通用细菌培养基,称为培养基。
配制时除了加入特定的营养物质以外,还要加入一定量的氯化钠,以维持。
对培养基pH的调节,应该在B过程的(填“前面”或“后面”)。
(2)E过程所需的温度是。
(3)D过程后,一个菌体便会形成一个,这种分离方法是的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。
10.下列是有关大肠杆菌的培养实验,请回答下列问题。
(1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入蛋白胨和作为营养物质。
(2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在中进行扩大培养,培养液经后,在LB固体培养基上进行,并将培养皿放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。
为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及,应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。
(3)对于获得的纯菌种,通常可以依据的形状、大小等特征进行初步的鉴定。
(4)关于“大肠杆菌培养和分离”的操作中,下列叙述正确的是。
A.高压蒸汽灭菌结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上11.(2017江苏高考)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。
小明同学准备依据图1操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。
请回答下列问题。
图1(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有。
(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐,以达到富集酚降解菌的目的。
若图1平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分离。
制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加。
(3)图2为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落。
(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。
先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为。
管号 1 2 3 4 5 6苯酚浓度(mg/L) 1如果废水为50 mg/L 苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。
12.(2017浙江绿色联盟联考)已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同,但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B,细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。
现有这两种类型细菌的混合液样品,要将其分离,有人设计了一种方案,部分操作步骤如图。
步骤一:从混合样品中取样接种到多个平板培养基中,在适宜温度下培养若干天。
步骤二:从平板培养基中蛇形线末端的单个菌落中取菌种接种到含A、B有机物的培养液中(A、B有机物的起始浓度已知),在适宜温度下培养若干天。
步骤三:测定各瓶中A、B两种有机物的含量,再根据测试结果采取不同措施。
(1)步骤一使用的是培养基,其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质,此外还必须加入,以利于对不同菌种进行分离操作。
(2)步骤一采用方法接种,此接种法可使接种细菌逐渐稀释,经适宜条件培养,可形成单个、独立的,最终可能得到纯种的细菌;要进行上述接种操作,必须在及酒精灯火焰附近进行,以避免杂菌污染。
(3)步骤三中,若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物的含量进行测定,当培养液中检测出如下的实验结果,其中能说明培养液中只有细菌Ⅰ的是。
A.有机物A与B含量都明显下降B.有机物A含量明显下降,B含量基本不变C.有机物A含量基本不变,B含量明显下降D.有机物A、B含量都基本不变专题训练22微生物的利用1.B 解析发酵工程中,灭菌的目的是防止实验室的培养物被其他外来微生物污染,避免操作者自身被微生物感染,是成功培养微生物的关键,实验所用器具,如培养基和发酵设备都必须灭菌,A、C项正确;菌种是培养对象,不可被灭菌,B项错误;灭菌过程应在实验操作之前,D项正确。
2.C 解析采用划线分离,菌种只蘸取一次,A项错误;划线分离,接种环在培养基表面进行划线操作,B项错误;微生物培养的关键是无菌操作,因此,在超净台上接种时,需要在酒精灯火焰旁进行,以防止空气中微生物的污染,C项正确;划线分离结束后,培养皿倒置于恒温培养箱中,D项错误。
3.A 解析在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,若尿素被分解,会产生氨气,使培养基的pH升高,酚红指示剂的颜色变红,这样就能初步筛选出能够分解尿素的细菌。
4.C 解析分离微生物所使用的均是LB固体培养基,分离以尿素为氮源的细菌,培养基凝固剂为琼脂糖,分离大肠杆菌,培养基凝固剂为琼脂,C项符合题意。
5.C 解析培养基应该在倒平板之前进行高压蒸汽灭菌,A项错误;倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,不能打开皿盖,B项错误;为防止微生物污染,要在酒精灯火焰旁进行操作,C项正确;倒好培养基的培养皿等培养基凝固后要倒过来放置,D项错误。
6.A 解析抗生素是真菌(另外还有放线菌)产生的可杀死某些致病菌的物质,可以用来治疗相应的疾病。
链霉菌产生的链霉素是一种抗生素类物质,它可以抑制某些细菌的繁殖。
从实验结果可以看出:链霉素对结核杆菌的抑制作用最强,对霍乱菌的抑制作用较弱,对伤寒菌几乎无抑制作用。
7.D 解析每次划线之前都要灼烧接种环,杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线的菌种来自来上次划线的末端;第二次及以后的划线总是从上次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落;对菌液进行系列稀释操作,这样易于获得单个菌落;接种结束,对接种工具灭菌,其目的是杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染或感染操作者。
8.C 解析在配制步骤②③的培养基时,应先调pH值后髙压蒸汽灭菌,A项正确;步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单菌落,B项正确;要筛选出能高效分解尿素细菌,所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有尿素,因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨,C项错误;步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D项正确。
9.(1)LB 渗透压前面(2)4 ℃(3)单菌落消除杂菌污染解析(1)培养微生物的培养基为LB培养基,培养基中加入一定浓度氯化钠用于维持培养液的渗透压,培养基应调节好pH后再进行灭菌。
(2)短时间内保存菌种,将菌种接种于斜面上,置于4℃冰箱进行保存。
(3)经过分离,一个菌体形成一个单菌落,单菌落是消除杂菌污染的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。
10.(1)酵母提取物(2)LB液体培养基稀释分离倒置无菌操作是否规范(3)菌落(4)D解析(1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入蛋白胨和酵母提取物作为营养物质。
(2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在LB液体培养基中进行扩大培养,培养液经稀释后,在LB固体培养基上进行分离,并将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。
为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及无菌操作是否规范,应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。
(3)对于获得的纯菌种,通常可以依据菌落的形状、大小等特征进行初步的鉴定。
(4)高压蒸汽灭菌结束,等待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开排气阀使压力表指针回到零,A项错误;倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖,B项错误;接种环在火焰上灼烧后,待冷却后才可以快速挑取菌落,C项错误;用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,D项正确。
11.(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 ③解析(1)蛋白胨、苯酚中含有碳元素,均可以作为碳源。
(2)分析实验可知,实验目的是筛选酚降解菌,因此将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加,以达到富集酚降解菌的目的。
若图1平板中菌落过于密集,应进一步稀释涂布,以便于菌落计数与分离。
