植物,动物,微生物注入载体方法

基因转化的方法基因转化是一种重要的生物技术手段，可以帮助科研人员在植物、动物甚至微生物中引入外源基因，从而改变其遗传特性。

在农业、医学、生物工程等领域都有着广泛的应用。

本文将介绍基因转化的方法，包括常见的转化载体、转化技术和转化效率的影响因素。

一、转化载体。

转化载体是用来携带外源基因并将其导入宿主细胞的工具。

常见的转化载体包括质粒、病毒、质粒病毒等。

质粒是最常见的转化载体，它通常包括选择标记基因和目的基因。

选择标记基因可以帮助科研人员筛选出成功转化的细胞，而目的基因则是需要引入的外源基因。

病毒载体则通过感染宿主细胞将外源基因导入宿主细胞内。

质粒病毒则结合了质粒和病毒的优势，具有更高的转化效率。

二、转化技术。

常见的基因转化技术包括农杆菌介导的转化、基因枪法、原生质体转化等。

农杆菌介导的转化是将外源基因导入植物细胞的常用方法，通过构建适当的农杆菌载体，将目的基因导入植物细胞内。

基因枪法则是通过高速微粒轰击法将外源基因导入植物细胞内。

原生质体转化则是将外源基因导入植物原生质体内，再通过再生植物来筛选成功转化的细胞。

三、转化效率的影响因素。

转化效率受到多种因素的影响，包括转化载体的选择、转化方法的优化、宿主细胞的特性等。

选择合适的转化载体可以提高转化效率，而优化转化方法可以减少对宿主细胞的损伤，从而提高转化效率。

此外，宿主细胞的特性也会影响转化效率，包括细胞壁的特性、再生能力等。

综上所述，基因转化是一种重要的生物技术手段，通过选择合适的转化载体、优化转化方法和提高宿主细胞的特性，可以提高转化效率，为基因工程和生物技术的发展提供有力支持。

希望本文对基因转化的方法有所帮助，谢谢阅读！。

第2节基因工程的基本操作程序（第2课时）◆教学目标1．列举将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的方法。

2．列举检测与鉴定目的基因在受体细胞中是否稳定维持和表达其遗传特性的方法。

3．能够用流程图的形式概括出基因工程的操作程序。

4．针对人类生产或生活中的某一需求，能运用基因工程技术尝试设计并获得某一转基因产品的方案。

◆教学重难点【教学重点】1．将目的基因导入受体细胞的方法。

2．目的基因的监测与鉴定。

【教学难点】农杆菌转化法。

◆教学过程【新课引入】教师展示资料：研究人员将一种海鱼的抗冻蛋白基因afp整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染番茄细胞，获得了抗冻的番茄品种。

【学生活动】阅读上述资料，思考抗冻番茄培育过程中的目的基因和运载体分别是什么？（抗冻蛋白基因afp，Ti质粒）如何构建基因表达载体？（学生复习上一节课的内容）重组Ti质粒侵染番茄细胞属于基因工程中的哪一步操作？（将目的基因导入受体细胞）如何检测才能证明转基因抗冻番茄转化成功呢？【过渡】先来认识什么是转化呢？【新知讲解】一、将目的基因导入受体细胞转化：目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

【教师活动】引导学生思考，根据生物学知识，受体细胞可能有哪些种类？提示：（1）植物细胞——体细胞或受精卵（植物容易诱导全能性表达）（2）动物细胞——受精卵（全能性最高）（3）微生物细胞——大肠杆菌（使用最广泛）（一）将目的基因导入植物细胞【教师活动】教师结合植物花的结构讲授花粉管通道法，并向学生阐述，“花粉管通道法”是我国科学家独创的一种方法，增强学生的民族自信心。

1．花粉管通道法方法一：用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中。

方法二：在植物授粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借花粉管通道进入胚囊。

2．农杆菌转化法【学生活动】学生自主阅读教材81页资料卡中“农杆菌转化法”的内容，思考为什么选择农杆菌？它具有的怎样的优势？“农杆菌转化法”操作流程是怎样的？提示：可侵染植物细胞；具有T-DNA。

微生物常用的接种方法微生物接种是微生物学实验中的一项重要步骤，它可以使微生物在实验室中进行培养和繁殖，为微生物学研究提供了基础条件。

接种方法的选择对于微生物的培养和实验结果至关重要，下面将介绍微生物常用的接种方法。

一、平板接种法。

平板接种法是微生物学实验中最常用的一种接种方法。

首先将琼脂平板加热至液态状态，然后将所需接种的微生物悬液均匀地倒在琼脂平板表面，用接种棒均匀涂抹，使微生物均匀分布在琼脂平板表面。

接种后将琼脂平板放置在恒温培养箱中进行培养，待微生物形成菌落后进行观察和实验。

二、液体培养基接种法。

液体培养基接种法适用于需要大量培养微生物的实验。

首先将所需的液体培养基倒入培养瓶中，然后将微生物接种悬液加入培养瓶中，用接种棒均匀搅拌使微生物均匀分布在培养基中。

接种后将培养瓶放置在恒温摇床上进行培养，待微生物培养达到所需数量后进行后续实验。

三、斜面接种法。

斜面接种法适用于需要进行纯培养的微生物。

首先将琼脂斜面培养基倾斜放置，等琼脂凝固后将微生物接种在斜面上并均匀涂抹，使微生物均匀分布在斜面上。

接种后将琼脂斜面培养基放置在恒温培养箱中进行培养，待微生物形成菌落后进行观察和纯培养。

四、深层接种法。

深层接种法适用于需要进行微生物氧气需求的实验。

首先将所需的琼脂深层培养基加热至液态状态，然后将微生物接种悬液倒入琼脂深层培养基中并均匀混合，接种后将琼脂深层培养基倒入培养瓶中，待琼脂凝固后放置在恒温培养箱中进行培养，待微生物培养达到所需数量后进行后续实验。

以上就是微生物常用的接种方法，不同的实验需要选择合适的接种方法来保证实验结果的准确性和可靠性。

希望本文所介绍的接种方法能够帮助到需要进行微生物学实验的研究人员，提高实验效率和准确性。

新人教选择性必修3《生物技术与工程》综合检测(A卷)(时间:90分钟满分:100分)一、选择题(本题共20小题,每小题2.5分,共50分。

每小题只有一个选项符合题目要求)1.下列关于制作果酒、果醋的叙述,错误的是()A.生产过程中都需要利用真菌,但种类不同B.可从打开瓶盖的食醋中得到醋酸菌,加入果酒中制果醋C.当糖源等条件充足时,醋酸菌可以直接分解葡萄汁中的糖生成乙酸D.果酒发酵后期放气时间间隔可延长2.下列关于制作果酒和果醋的叙述,正确的是()A.为了提高果酒的产量,果汁应尽量装满发酵瓶B.果醋发酵阶段应封闭充气口,防止杂菌污染C.在果酒和果醋的制作过程中,每天需适时打开瓶盖D.果酒制成后,需将装置移到温度较高的环境中进行乙酸发酵3.下列关于植物组织培养中灭菌操作的叙述,错误的是()A.外植体可以用酒精消毒B.镊子等器械需要用酒精灭菌C.操作者的手需要用酒精消毒D.培养基需要进行高压蒸汽灭菌4.严格控制发酵条件是保证发酵正常进行,得到质量高、产量多的理想产物的关键。

通常所指的发酵条件不包括()A.温度B.溶氧量C.pHD.酶的含量5.下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的有()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A.①②③④⑤B.②③④⑤C.③④⑤D.②③④6.将细菌接种在固体培养基上培养,它会繁殖并形成菌落(如右图)。

某实验小组想检验两种抗生素的杀菌作用,下列实验方案最合适的是()7.“筛选”是生物工程中常用的技术手段。

下列关于筛选的叙述,错误的是()A.基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒B.在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较少的有利变异C.在植物体细胞杂交过程中,需要对融合细胞进行筛选D.在单克隆抗体制备过程中,第一次筛选的目的是获得足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞8.细胞工程中,选择合适的生物材料是成功的关键。

下列叙述错误的是()A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞B.选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率C.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体D.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗9.甲、乙是严重危害某二倍体观赏植物的病害。

实验动物给药途径和方法在动物实验中，为了观察药物对机能功能、代谢及形态引起的变化，常需将药物注入动物体内。

给药的途径和方法是多种多样的，可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。

（一）皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。

皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。

兔在背部或耳根部注射。

蛙可在脊背部淋巴腔注射。

（二）皮内注射皮内注射时需将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连4(1/2)细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。

（三）肌肉注射肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。

注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。

给小白鼠、大白鼠等小动物作肌肉注射时，用左手抓住鼠两耳和头部皮肤，右手取连有5（1/2）针头的注射器，将针头刺入大腿外侧肌肉，将药液注入。

（四）腹腔注射用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推 0.5～1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液（图1），为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。

若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。

图1小鼠腹腔注射方法（五）静脉注射1．兔：兔耳部血管分布清晰。

兔耳中央为动物，耳外缘为静脉。

内缘静脉深不易固定，故不用。

外缘静脉表浅易固定，常用。

先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入（图2），然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。

动物、植物、微生物吸收和迁移污染物的途径和机制的异同植物动物微生物不同点相同点吸收途径与机制1、气孔是叶片吸收污染物的主要途径（蒸腾作用）2、水溶物质进入植物根表面有质体流和扩散3、水溶物进入细胞有流动输送、脂质层受控过程、媒介输送与能动载体输送1、进入细胞有被动运输和特殊转运以及某些与细胞有特殊亲和力的吞噬作用（细胞膜的通透性）2、大气污染的污染物经过呼吸道，机制是动物的肺部（肺细胞）3、经消化道进入，肠道粘膜是吸收污染物的主要部位之一4、经皮肤及其他部位的吸收进入1、细胞吸收机制：随代谢必须物一同吸收进入细胞2、污染物连接到微生物细胞壁上有三种作用机制：离子交换反应、沉淀作用和络合作用植物、动物、微生物体内污染物的吸收、迁移和运输都伴随物质运输（主动运输和被动运输）和吸收迁移途径与机制1、非共质体通道：无机离子和水在根内横向迁移，到达皮层是通过细胞壁和细胞间隙等质外空间2、共质体通道：通过细胞内原生质流动和通过细胞之间相连接的细胞质通道3、污染物可以从根部向上运输，通过叶片吸收的污染物也可以从地上向根部运输1、污染物质的迁移是被动运输，主要有经血液传到肝、脾、肾、甲状腺等脏器的迁移2、动物体内的污染物迁移还包括动物的排出3、食物链和食物网的能量流动是污染物在生物之间的污染物迁移途径4、肾脏—随尿液经肾脏排出体外5、经肝脏随同胆汁排泄6、经肺随同呼出气排泄7、其它排泄途径1、微生物生存时间较短，污染物随微生物死亡而分解排出。

基因工程作物抗性基因的转移与表达随着现代生物技术的发展，基因工程作物越来越成为农业发展的重要方向。

其中，抗性基因的转移与表达是基因工程作物的关键技术之一。

本文将从基本概念、转移方法、表达机制等方面阐述基因工程作物抗性基因的转移与表达。

一、基因工程作物抗性基因的基本概念抗性是指生物体克服病害、虫害或其他有害环境的能力。

抗性基因是指控制生物体对外界环境反应的基因。

基因工程作物抗性基因的转移就是将能够抗击病害、虫害或其他有害环境的基因引入到作物中，使其获得抗病、抗虫或其他抗性，并在转移后使基因在作物中稳定表达。

二、基因工程作物抗性基因的转移方法目前，基因工程作物抗性基因的转移方法主要有遗传变异法、化学基因转移法、微生物基因转移法和植物基因转移法等。

1. 遗传变异法遗传变异法是人工诱发植物基因变异，以产生抗性基因为目的的一种方法。

通过化学或物理因素诱发植物基因发生变异，筛选出抗性基因突变体，再将其回交到普通植株中，以期达到基因引入的目的。

2. 化学基因转移法化学基因转移法是通过把外源DNA物质注入到植物细胞中，使其表达外源基因。

该方法的优点是操作简单，但转移效率低，且不稳定。

3. 微生物基因转移法微生物基因转移法是采用微生物感染植物细胞的方式，将外源DNA转化存储在植物细胞中，使其表达外源基因。

该方法的优点是转移效率高，但存在微生物对植物细胞的侵染，潜在风险。

4. 植物基因转移法植物基因转移法是将目标基因植入到特定载体中，再将载体注入目标植株细胞。

该方法的优点是对转移的基因及目标植株无副作用，传递效率高，转移后稳定性高。

三、基因工程作物抗性基因的表达机制基因工程作物抗性基因的表达机制主要有以下两种方法。

1. 转录介导转录介导是指转移的外源基因在接受体植物细胞内进行转录和翻译，使目标蛋白表达，从而实现外源基因对接受体植物的基因表达水平的调节。

2. 抗性蛋白直接作用抗性蛋白直接作用是指转移的外源基因通过直接制造抗性蛋白，抗性蛋白与病原体产生直接作用，防止病原体入侵植物，从而实现植物对病害的抵抗性。

微生物接种的方法微生物接种是一种常用的生物技术手段，旨在引入有益微生物到特定环境中，以改善环境的品质和性能。

微生物接种广泛应用于农业、环境工程、工业生产等领域，可以提高土壤质量、降解有害污染物、增强生物酶的产生等。

微生物接种的方法主要包括以下几种：直接接种、间接接种、载体接种和基因工程接种。

直接接种是将活性微生物直接添加到目标环境中。

这种方法通常用于土壤改良和有机废物处理。

在土壤改良中，可以直接将含有有益微生物的培养液、发酵液或固态菌剂施加到土壤中，以改善土壤的理化性质以及营养成分的供应。

在有机废物处理中，可以将适宜的微生物种植物渣、动物粪便等有机废物中，通过发酵降解，将有机物转化为有机肥料。

间接接种是在目标环境中添加一种间接载体，以贮存和释放微生物。

这种方法常用于水体净化和有害废物处理。

在水体净化中，可以将活性微生物固定在多孔性材料或纤维素质材料上，形成生物膜，然后将其悬浮于水中，通过微生物的代谢活动去除水中的有机污染物。

在有害废物处理中，常用废弃物为载体，将适宜的微生物培养、贮存在载体上，然后将包含微生物的载体添加到有害废物中，通过微生物的代谢去除有害物质。

载体接种是将微生物负载在载体上，然后将负载的微生物输送到目标环境中。

这种方法通常应用于土壤改良、植物生长促进和动物生长促进。

在土壤改良中，常用的载体有泥炭、腐殖酸、膨润土等，将适宜的微生物负载在这些载体上，形成微生物肥料，在播种或施肥时与土壤混合。

在植物生长促进和动物生长促进中，可以将含有有益微生物的发酵液、培养液或固态菌剂涂覆在种子、根系或动物饲料上，通过与植物根系或动物肠道的接触，实现微生物的传递。

基因工程接种是通过基因工程技术改造微生物，使其具有特定性状，然后将改良的微生物引入目标环境中。

这种方法常用于微生物菌剂的生产和环境修复。

在微生物菌剂的生产中，可以通过基因工程技术改造微生物的代谢途径或代谢产物的产生，以提高其活性或功能性，然后利用发酵技术大规模生产改良的微生物。