GBT蔬菜中硝酸盐含量的快速测定

实验三：各种蔬菜中硝酸盐的检测1、原理用PH9.6-9.7的氨缓冲液提取样品中的硝酸根离子。

同时加入活性炭除去色素类，加沉淀剂去除蛋白质以及其他干扰物质，利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219纳米处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得的结果是硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总和，鉴于新鲜的蔬菜水果中亚硝盐含量甚微，可忽略不计。

测定结果为硝酸盐的吸光度，可从工作曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。

2、试剂除非另行说明，本方法仅使用确认的分析纯试剂和GB/T6682中规定的至少三级的水。

（1）盐酸（2）氢氧化铵（3）氨缓冲液（PH9.6-9.7）：量取20毫升盐酸（3：1），加入到500毫升水中，混合后加入50毫升的氢氧化铵，用水定容至1000毫升。

用精密PH计调节PH 到9.6-9.7。

（4）活性炭（粉状）（5）正辛醇（6）亚铁氰化钾15%：称取150克亚铁氰化钾溶于水，定容至1000毫升。

（7）硫酸锌溶液：称取300克硫酸锌溶于水，定容至1000毫升。

（8）硝酸盐标准溶液：称取0.2030克经110℃ 5℃烘干至恒重的硝酸钾（优级纯），用水溶解，定容至250毫升。

此溶液硝酸根质量浓度为500毫克/升，与冰箱内保存。

3、仪器和设备（1）紫外分光光度计（2）分析天平：感量0.01克、0.0001克。

（3）组织捣碎机（4）可调式往返振荡机（5）PH计，精度为 0.01，使用前校正。

4、试样制备选取一定数量有代表性的样品，先用自来水冲洗，再用水清洗干净，晾干表面水分，用四分法取样，切碎，充分混匀，于组织捣碎机中匀浆（部分少汁样品可按一定质量比例加入等量水），在匀浆中加1滴正辛醇（3.5）消除泡沫。

5、分析步骤5.1 提取称取匀浆试样10克（准确至0.01克）于100毫升烧杯中，用100毫升水分次将样品转移到250毫升容量瓶中，加入5毫升氨缓冲溶液（3.3），2克粉末状活性炭（3. 4）。

蔬菜中硝酸盐含量的测定摘要 :基于硝酸根在 219 nm处有强烈吸收 , 且干扰少 , 测定提取液的吸光度,从标准曲线上查得相应浓度。

提取液用 pH=9.6-9.7的氨缓冲液,从待测样品中提取硝酸根离子。

此法测定的结果表明回收率在 95.1%-100.9%之间 , 相对标准偏差为1.55%-4.14%。

操作方法简便 , 适用于蔬菜中的硝酸盐含量的测定。

关键词:蔬菜 ; 硝酸盐 ; 紫外分光光度法前言:蔬菜 ( 尤其叶菜类是一种容易累积硝酸盐的作物,硝酸盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。

由于当前我国蔬菜在种植过程中化肥过量施用 , 而且有些蔬菜生产者采用工业废水和生活污水浇地 , 造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高 , 已证明 , 硝酸盐在人体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐 , 它可与人体血红蛋白作用 , 使之失去载氧功能 , 造成高铁血红蛋白症 , 长期摄入硝酸盐会造成智力迟钝等危害 [ 1]。

因此 , 蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚硝酸盐对人体潜在危害的一个指标 [ 2]。

蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多,如镉柱还原分光光度法、离子色谱法。

其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国家标准方法 , 但由于干扰因素多, 操作步骤过于繁琐, 很难满足批量常规分析之需要,而其它几种方法则需要精密仪器, 测定条件较为严格,不适宜作常规监测分析 [3]。

本实验采用操作简单、准确度高的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。

1 实验仪器与材料1.1 主要仪器与试剂1.1.1仪器紫外分光光度计 ; 容量瓶;乳钵1 .1.2试剂①氨缓冲液(pH=9.6~9.7:2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中,混合后再加入 5ml 浓氨水, 最后用蒸馏水稀释至 100ml 。

②粉末状活性炭(除去待测样品中的色素。

③蛋白质沉淀剂Ⅰ,蛋白质沉淀剂Ⅱ (除去蛋白质及混浊物。

④溶液Ⅰ:15克铁氰化钾 (K3Fe(CN6 溶于 50ml 蒸馏水中, 定容于 100ml 。

蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。

结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。

（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。

关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。

人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。

硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。

亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。

亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。

主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。

外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。

由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。

食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。

硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。

硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。

联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。

分光光度法检测食品中的硝酸盐1.分光光度法：分光光度法主要有三种：可见分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法。

分光光度法设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观，在硝酸盐和亚硝酸盐的测定中一直占据有十分重要的地位。

但在复杂介质中测定时易受样品本身颜色影响，所以样品前处理十分重要。

1.1 可见光分光光度法.1.1.1镉柱法还原法.这是我国食品安全国家标准（GB 500933-2010）[1]中检测硝酸盐的方法，样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,使用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，于波长538nm出测定吸光度，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去不加锌粒测得的亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。

刘烨等【4】研究发现当镉柱高度为5cm，氨缓冲液PH9.15~9.78，水洗脱液是镉柱容积的2~3倍时，活化速度加快，还原效率及回收率都较高。

针对该检测方法的样品预处理过程复杂、耗时长等问题，项锦欣[2]等改用天然高分子絮凝剂W-3 取代原有蛋白质沉淀剂——亚铁氰化钾和乙酸锌，不但节省试剂，且显著缩短处理时间。

陈秋生[3]等人实验比较后发现用超声提取蔬菜中的硝酸盐，具有简单、高效、回收率高的优点。

由于本法所用试剂为毒性很大的强致癌试剂，对环境和分析人员可能会造成危害，因此, 选择新的重氮化试剂和偶联试剂以降低试剂的毒性是许多环境工作者研究的课题。

1.1.2锌粒还原法.用锌粒做还原剂，在银离子催化下将食品中的硝酸盐还原成亚硝酸盐,再按国标格里斯试剂法进行检测。

之所以用锌粒不用锌粉，是因为用锌粉的还原液较浑浊，周峰[4]用20 目~ 30 目的金属锌粒代替锌粉, 还原液不产生混浊且易过滤，同时实验结果几近一致。

肖义夫[5]实验室应用锌粒还原法对各类食品样品(包括乳及乳制品,肉及肉制品等) 中的硝酸盐进行了测定,平均回收率为94.0 % , RSD 低于5 %。

紫外分光光度法快速测定绿叶菜中硝酸盐含量的技术步骤优化包蔚;徐桦;朱晓芸;何锴;余海芬;吴真善;黄明皓;王络绎
【期刊名称】《上海农业科技》
【年(卷),期】2024()1
【摘要】为给绿叶菜中硝酸盐含量的检测提供更为简便快捷的方法,优化测定步骤,采用紫外分光光度法,比较了不同提取方法、不同振荡时间和干扰物质等不同测定条件对绿叶菜中硝酸盐含量测定的影响。

结果表明,在采用紫外分光光度法测定绿叶菜中硝酸盐含量时,选取氨缓冲液作为提取液,采用摇匀的方式,可优化测定步骤。

该方法的加标回收率为92.61%~109.50%,变异系数小于10%,具有较高的精密度和准确度,且操作简单、检测时间短、干扰因素少,可用于绿叶菜中硝酸盐含量的大批量快速检测。

【总页数】3页(P32-34)
【作者】包蔚;徐桦;朱晓芸;何锴;余海芬;吴真善;黄明皓;王络绎
【作者单位】上海市嘉定区农业技术推广服务中心
【正文语种】中文
【中图分类】S-3
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光度法快速测定庆大霉素含量在优化培养基中的应用5.紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量的不确定度评定
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蔬菜中硝酸盐残留测定方法100089　北京市农林科学院蔬菜研究中心　刘玲　王文琪 蔬菜是极易富集硝酸盐的作物。

控制蔬菜中硝酸盐的富集,是减少其对人体造成危害的基本保障。

迅速检测监控采后和上市流通蔬菜硝酸盐残留状况,是杜绝危害并提供给广大消费者安全优异品质蔬菜的最后保护屏障。

联合国世界卫生组织(WT O)和粮农组织(FAO)早在1973年即制定了食品中硝酸盐食限量标准。

在此基础上,德国、美国等都制定了鲜菜硝酸盐的限量标准。

到目前为止,我国还没有这方面的国家标准,多是采用地方标准和沈明珠等根据ADI值为基础划分的标准。

一、分析方法植物中硝酸盐的含量,是作为了解作物氮营养的重要指标,也因此成为正确施肥和补充施肥的指导参数。

目前应用于蔬菜样品硝酸盐的测定方法,根据检测原理不同主要分为三大类:光谱法、色谱法、离子选择电极法;除此之外,还有毛细管电泳间接测定法和快速测定法。

1.蔬菜样品应用于硝酸盐残留分析的蔬菜样品类型很广,包括有鲜菜及鲜菜品、膳食加工后的样品、储存和冷冻干燥样品等。

涉及的主要品种几乎涵盖了所有日常膳食蔬菜和一些稀有品种蔬菜。

如:生菜、甘蓝、菠菜、大白菜、日本萝卜、胡萝卜、大头菜、洋菜、黄瓜、大蒜、菊苣、甜菜根、欧洲防风等。

2.样品提取与净化对于以游离形式存在于蔬菜样品中的NO3-和NO2-,通常采用水或碱性缓冲液作为提溶剂,选取可食部分经匀浆捣碎,加沉淀剂离心或过滤去除沉淀,得到待测样品的上清提取液。

经过这样的处理后,样品提取液即可进行色谱分离定量测定。

但对离子选择电极法和其他的定量测定方法,除要经过上述简单的处理外,还需再经过离子交换预柱,去除阳离子和色素的干扰。

而对于以结合形式存在于样品内部的无机干扰离子,还需要将样品预先进行消解除法。

有报道用甲醇-水作为蔬菜中NO3-的提取剂,可以使NO3-根离子更稳定,有利于延长提取液的储存时间。

3.定量测定无论是色谱法、离子选择电极法或是其他方法的定量测定,都要求被测样品的NO3-离子纯度高,干扰低,否则影响测定结果的判定。

蔬菜中硝酸盐残留测定方法
刘玲;王文琪
【期刊名称】《农业新技术》
【年(卷),期】2001(019)002
【摘要】@@蔬菜是极易富集硝酸盐的作物。

控制蔬菜中硝酸盐的富集，是减少
其对人体造成危害的基本保障。

迅速检测监控采后和上市流通蔬菜硝酸盐残留状况，是杜绝危害并提供给广大消费者安全优异品质蔬菜的最后保护屏障。

rn 联合国世
界卫生组织(WTO)和粮农组织(FAO)早在1973年即制定了食品中硝酸盐食限量标准。

在此基础上，德国、美国等都制定了鲜菜硝酸盐的限量标准。

到目前为止，我国还没有这方面的国家标准，多是采用地方标准和沈明珠等根据ADI值为基础划
分的标准。

rn 一、分析方法rn 植物中硝酸盐的含量，是作为了解作物氮营养的重要指标，也因此成为正确施肥和补充施肥的指导参数。

目前应用于蔬菜样品硝酸盐的测定方法，根据检测原理不同主要分为三大类：光谱法、色谱法、离子选择电极法；除此之外，还有毛细管电泳间接测定法和快速测定法。

【总页数】3页(P35-37)
【作者】刘玲;王文琪
【作者单位】北京市农林科学院蔬菜研究中心;北京市农林科学院蔬菜研究中心【正文语种】中文
【中图分类】S1
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3.蔬菜中硝酸盐、亚硝酸盐测定方法
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蔬菜中硝酸盐含量的测定摘要 :基于硝酸根在 219 nm处有强烈吸收 , 且干扰少 , 测定提取液的吸光度,从标准曲线上查得相应浓度。

提取液用 pH=9.6-9.7的氨缓冲液,从待测样品中提取硝酸根离子。

此法测定的结果表明回收率在 95.1%-100.9%之间 , 相对标准偏差为1.55%-4.14%。

操作方法简便 , 适用于蔬菜中的硝酸盐含量的测定。

关键词:蔬菜 ; 硝酸盐 ; 紫外分光光度法前言:蔬菜 ( 尤其叶菜类是一种容易累积硝酸盐的作物,硝酸盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。

由于当前我国蔬菜在种植过程中化肥过量施用 , 而且有些蔬菜生产者采用工业废水和生活污水浇地 , 造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高 , 已证明 , 硝酸盐在人体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐 , 它可与人体血红蛋白作用 , 使之失去载氧功能 , 造成高铁血红蛋白症 , 长期摄入硝酸盐会造成智力迟钝等危害 [ 1]。

因此 , 蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚硝酸盐对人体潜在危害的一个指标 [ 2]。

蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多,如镉柱还原分光光度法、离子色谱法。

其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国家标准方法 , 但由于干扰因素多, 操作步骤过于繁琐, 很难满足批量常规分析之需要,而其它几种方法则需要精密仪器, 测定条件较为严格,不适宜作常规监测分析 [3]。

本实验采用操作简单、准确度高的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。

1 实验仪器与材料1.1 主要仪器与试剂1.1.1仪器紫外分光光度计 ; 容量瓶;乳钵1 .1.2试剂①氨缓冲液(pH=9.6~9.7:2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中,混合后再加入 5ml 浓氨水, 最后用蒸馏水稀释至 100ml 。

②粉末状活性炭(除去待测样品中的色素。

③蛋白质沉淀剂Ⅰ,蛋白质沉淀剂Ⅱ (除去蛋白质及混浊物。

④溶液Ⅰ:15克铁氰化钾 (K3Fe(CN6 溶于 50ml 蒸馏水中, 定容于 100ml 。

商品名称：硝酸盐快速检测试剂
规格：120批次/盒
包装：检测液A 1瓶，检测液B 1瓶，锌粒1瓶（200粒）
参考标准： GB2760-2007、GB19338-2003、GB 18406.1—2001
检测项目：
蔬菜、水果等
产品简介：
本产品为硝酸盐快速检测试剂，通过与色卡的比色对照，能半定量的测定食品中硝酸盐的含量，整个检测过程中需要15-20分钟左右。

使用方法：
1. 样品处理：将样品尽可能剪成小碎片，用天平称取2克于样品杯中，加入
蒸馏水或纯净水20毫升，浸泡10-15分钟；
2. 吸取样品提取液上清液于检测管中，至1.0毫升刻度线。

3. 向检测管中加入2粒锌粒，滴加检测液A 2滴和检测液B 2滴，盖上盖子
用力振荡2分钟。

4. 5-10分钟后观察显色情况，不变色或呈紫红色以外的其他颜色为阴性反应。

与标准比色卡对照，知其浓度。

注意事项：
1. 样品处理必须使用蒸馏水或纯净水。

2. 本方法用于现场快速测定，对于测定结果不符合国家标准规定值的样品应
重复三次测定。

对于测定结果为阳性的样品应慎重处置，建议送样品至实验室或法定检测机构做精确定量。

3. 检测管冲洗、晾干后可重复使用。

品牌：天迈生物
产地：杭州。