血浓度测定与半衰期.pptx

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药物血浆半衰期测定实验PPT资料(正式版)

放入A1号试管，再从A1号试管准确吸【原理】血中药物浓度随时间推移呈规律性（一级动力学消除）下降。
每次取血前应先将动脉插管内残余血放掉！
比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；
取1 ml移入1号离心管，充分摇匀，以 10．显色：各管加入10%三氯化铁（FeCl3）0.
3．分离颈总动脉，头端用线结扎，心端用动脉夹夹闭。 4．动脉插管，备取血用。
1
ln / t 比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；
OD 1．取3支离心管标记1、2、3，加入10％三氯醋酸4ml ；
2
C1,C2,C3备用。
11．比色、测光密度值：以C1号管为对照管，用721分光光度计在520 nm波长下读取C2、C3号管的光密度值。比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；
A1→B1→ C1 A2→B2→ C2 A3→B3→C3
10．显色：各管加入10%三氯化铁（FeCl3）0.5 ml，显色。
比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；清洗比色杯后用卫生纸单向擦拭透光面，
11．比色、测光密度值：以C1号管为对照管，用721分光光度计在520 nm 波长下读取C2、C3号管的光密度值。
6．取血: 开启动脉夹取血约1～1.5 ml， 11．比色、测光密度值：以C1号管为对照管，用721分光光度计在520 nm波长下读取C2、C3号管的光密度值。
1．取3支离心管标记1、2、3，加入10％三氯醋酸4ml ； 5 ml，放入A1号试管，再从A1号试管准确吸取1 ml移入1号离心管，充分摇匀，以沉淀血浆蛋白。
药物血浆半衰期测定实验
【目的】学习药物血浆半衰期测定方法。【药品】 10%水杨酸钠， 10％三氯醋

药物血浆浓度及半衰期测定(94)

机能实验：药物血浆浓度及半衰期测定（此作业得分94分仅供参考）一、实验目的以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物半衰期（t1/2）的基本方法。

二、实验原理半衰期：药物半衰期为血浆药物浓度下降一半所需要的时间。

可反映体内药物消除速度。

大多数药物在体内按一级动力学消除。

可得在 t 时的药物浓度Ct 不初始药物浓度C0 的关系，当Ct =1/2C0时，t对应t1/2。

t1/2 = 0.693/ke。

反应的原理：磺胺类药物为对氨基苯酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。

在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。

采用分光光度测量法，在525nm波长进行比色测定。

三、实验材料器材：72-1型分光光度计、离心机、计算器、兔固定箱、烧杯（50ml)、试管（10ml）、试管架、注射器、吸管、纱布、玻棒药品与试剂：20%磺胺嘧啶钠、肝素-生理盐水、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%麝香草酚、20%氢氧化钠、0.5%亚硝酸钠、蒸馏水四、实验步骤1.兔子称重，用20%乌拉坦进行耳缘静脉注射麻醉，剂量为5ml/kg，并固定。

2.颈动脉插管：切口在甲状软骨-胸骨上缘3.给药及取血给药方法：耳缘静脉注射药物：3%磺胺嘧啶钠剂量：4ml/kg给药后颈动脉取血时间： 5min、10min、20min、40min4.血样处理及显色反应动脉取血约1ml,离心取上清液，准确移液100ul至7.5%三氯醋酸2ml，混匀并1500转/分离心5分钟，准确移上清液1.5ml,加0.5%亚硝酸钠0.5ml，摇匀，加0.5%麝香草酚1ml,可见橙红色偶氮反应。

5.比色将待测样品放入722型分光光度计中进行比色6.计算半衰期计算药物半衰期五、实验数据时间吸光度磺胺药浓度对数浓度5 0.131 49.9667 1.69868066810 0.087 24.2839 1.38531843620 0.092 27.2024 1.43460722240 0.062 9.6914 0.986386519斜率k=-0.023934389 K=0.0551209 半衰期t1/2=12.5723637六、实验讨论1、由于操作失误，本次实验数据参考其他组的结果。

药物血浆半衰期, 表观分布容积和清除率的测定ppt课件

3
器材与药品:
分光光度计，离心机试管(5ml，3只草酸钾玻璃试管，3只
干燥塑料试管) 试管架，移液枪，注射器3个 0.6%酚磺酞，10%草酸钾溶液，稀释
液(生理盐水29ml+1mol/L NaOH 1ml)
4
方法与步骤:
家兔，称重，心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中，摇匀
i.v.酚磺酞1.0ml/kg，记录时间，给药后5min， 15min分别心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中，摇匀
以上试管离心10min(转速1500转/分) 离心后，分别从每管中吸出血浆0.2ml转移至另3试
管中，再分别加入稀释液3ml 用给药前管做对照调零，在560nm处用分光光度计
测每管的光密度(D) 根据标准曲线查出C1C2，根据公式计算出各参数值5Fra bibliotek注意事项
操作：心脏取血; 每次取血提前几分; 标本明显溶血，不能用于PSP的含量测定定量试验，加样（血、试剂）准确; T：实际间隔时间; 离心前试管要调平衡; 分光光度计：提前打开，预热，调零。禁
9
思考题
1. 检测血药浓度有何临床意义？ 2. 影响血药浓度的因素有哪些？
10
家兔心脏取血方法
一人稳妥固定家兔，腹面向上采血者一手持采血用注射器，另一手指于家兔前胸部查找心跳最强处（一般位于胸骨左缘4-5肋间），于肋间隙进针，垂直刺入待有突破感即刺入胸腔，垂直向下刺入心脏如刺入心脏，则注射器颤动均匀稳定，与心跳频率一致此时回吸血液，有血液进入则证明进入心脏
止用手触摸比色皿的光面。
6
血浆半衰期(half-life, t1/2) :
t1/2 =T×log2/(logC1-logC2)min

药物血浆半衰期测定精品PPT课件

实验三
血浆药物浓度的测定【半衰期(t1/2)测定】
【目的】了解药物tl／2的简单测定方法药物血浆半衰期的临床意义学习兔采血技术
【原理】
水杨酸钠在酸性环境中可变为水杨酸，后者与三氯化铁生成一种配位化合物。该化合物在520nm波长下比色，其光密度与水杨酸的浓度
成正比。Lambert-Beer定律 (A=KLC)
3．按下表进行操作。
4.水杨酸钠 2ml/kg (iv)
肝素0.3ml/kg (iv)
注意事项：
1.量具的使用（微量取样器、定量溶液瓶）；离心机的使用。
2.药前取血必须！采血后及时处理，吸头等需及时清洗。
3.若未能按时采血，以实际采血时间计算。
4.血样处理严格按步骤进行，切忌试管编号混乱。
开始实验……
小结
实验结果（A值）影响因素实验报告内容及注意事项
测定ｔ1/2的意义:
A、药物分类的依据（短、中、长效） B、确定给药间隔时间 C、预测达到稳态血药浓度的时间 D、预测药物基本消除的时间
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
13
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的，所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End 演讲人：XXXXXX 时间：XX年XX月XX日
-dC/dt=kC n
【计算】
(lgC1-lgC2)= (A= KLC) (lgC只，称重，于兔箱中固定。用(12500u/2ml)肝素0.3ml/kg(iv)进行耳缘静脉注射。 2.准备：

半衰期PPT

半衰期（Half life, t1/2）H lf lif1/2）•描述消除过程的参数•血浆药物浓度下降半的时间血浆药物浓度下降一半的时间H lf lif1/2）半衰期（Half life, t1/2）•某药在体内按一级动力学消除，在其吸收达高峰后取两次血样，测其血浆浓度分别为180ug/ml及后取两次血样测其血浆浓度分别为/l22.5ug/ml，两次取样间隔9h，该药的半衰期是•A 1 h B 1.5 h C 2 h D 3 h E 4 h按零级动力学消除的药物的按零级动力学消除的药物的t 1/2因：C t = －k 0t ＋C 0t 1/2时的C t = 故：t 1/2 =0.5C 0C 0零级动力学的血浆消除半衰期和血浆药物初始浓度成正比即给药剂量越大2k 0成正比，即给药剂量越大，t 1/2越长/t 1/2意义：确定给药间隔时间通常给药间隔时间为个通常给药间隔时间为一个t 1/2/t 1/2意义：•某药口服给药，一日三次，应如何给药？小时一次•A 每隔8小时次•B 按一日三餐的时间，饭前或饭后服/t 1/2意义：不同给药时间口服氨茶碱(0.2 g/次，3次/日)后的血药浓度和疗效给药时间血药浓度(ug/ml)疗效不等间隔2.0~9.7哮喘控制不好6287等间隔 6.2~8.7哮喘控制好不等间隔给药时间分别为8:00、11:00、16:00等间隔给药时间分别为6:00、14:00、22:00意义t 1/2意义：•预计体内药物轨迹•一次给药后约经过次给药后约经过5 个t 1/2药物可从体内基本消除•多次给药时约经过5 个t 1/2药物可基本达到稳态血药浓度下次按一级动力学消除的药物的t 1/2t 1/2给药给药前单次给药1100%50%50%2150%75%25%3175%87.5%12.5%41875%9375%625%4187.5%93.75% 6.25%5193.75%96.875% 3.125%6196.875%98.438% 1.26%总结半衰期•半衰期（t 1/2）•血浆药物浓度下降一半的时间•确定给药间隔；预计体内药物轨迹药物代谢•药物作为一种异物进入体内后，机体要动员各种机制使药物发生化学结构改变，称药物的转化，称药物的转化或称生物转化，又称药物代谢。

2017年课件药物血浆半衰期的测定

5/13/2017
15
磺胺类药物半衰期的测定
药理学教研室
实验目的
1.测定磺胺噻唑钠半衰期（t1/2）等药动学参数的基本方法。 2.理解常用药动学参数的临床意义。
5/13/2017
2
实验原理
药物在机体内由于代谢、排泄等原因，血液中药物浓度逐渐下降。多
数药物的血液浓度变化呈一级反应，
即药物血液浓度的对数与相应时间呈直线关系。
管号
给药时间光密度值磺胺噻唑钠浓度
磺胺噻唑钠对数浓度
０
１
２
标准管
5/13/2017
10
计算

5/13/2017
11
计算

第1次取血的药物浓度
第2次取血的药物浓度
给药后两次取血的时间间隔
5/13/2017
12
计算
体内药物总量/kg
5/13/2017
13
注意事项
1. 注射器、EP管全用肝素溶液过一遍，所有管子牢记要做好标记。
5/13/2017 5
方法与步骤
1.取试管4只，依次用A０、A标、A1、A2标记，各加入
8.1%三氯醋酸2.6ml备用。 2.取EP管3只，依次用B0, B1, B2标记。 3.取试管4只，依次用Ｃ０、Ｃ标、Ｃ1、Ｃ2标记，注射器、针头及EP管经肝素处理,以抗凝。 4.取家兔，称重，计算给药剂量: 10%磺胺噻唑钠溶液1ml/kg（100mg/kg）。 5.食指轻弹兔耳根部,使耳缘静脉充盈。 6.以酒精棉球消毒后进行静脉穿刺,耳缘静脉注入10% 磺胺噻唑钠溶液，记录注完时间（准确到秒）。
6
７.给药前(0 min)、给药后5min、35min，分别从耳缘静脉采血0.5～1ml （给药前采血量要求达到1ml ），分别置于EP(B0, B1, B2 )管，记录取血标本的准确时间（准确到秒）。８.从EP管中吸取400μl加入相应的各A管（ A０和A标管均取自从B0管）, 各管以3000转/分离心10min （注意配平）；分别取离心后的上清液1.5ml至标记Ｃ管（取上清1.4ml至Ｃ标管），加0.5%亚硝酸钠溶液0.5 ml，摇匀，再加0.5%麝香草酚1ml，可见橙红色反应。以给药前血样作空白对照，分光光度计于525nm波长下测OD值。９.标准管的准备：在Ｃ标管中加入0.1ml磺胺噻唑钠溶液（0. 2mg/ml），其它反应步骤同上。

水杨酸钠血浆半衰期的测定ppt课件

16
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
6.比色
以A管为对照管，用分光光度计测定
光密度。
V1100型可见光分光光度计
17
分光光度计的使用
1.接通电源，开机预热30分钟。 2.通过波长旋钮选择实验需要波长510nm. 3.打开比色皿暗箱盖，将黑体、参比液、待测液依次放入比色皿暗箱滑槽中，合上盖。 4.拉动滑杆，让黑体进入光路中按下键切换到T档。 5.按键校零。 6.再按键切换到A档，将参比液放入光路中，按键调零。 7.再将待测液放入光路中，即可得出待测液的吸光度。
家兔称重
耳缘静脉取血 2ml,加入A管。
12
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps 3. 注射药物
由耳缘缓慢注射10％水杨酸钠1.5ml/Kg。
13
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
4.取血2次
给药后10分钟和 40分钟时，分别从心脏取血2ml放入B及C管，记录取血时间
Experimental purpose
1.用比色法测定水杨酸钠浓度并计算半衰期。
2.学习心脏取血操作。
3
二、实验对象及器材
1.Experimental subjects
家兔
2.Experimental Materials
分光光度计，离心管，离心机，移液管，注射器。10％的三氯醋酸，
10％水杨酸钠，10％三氯化铁
4
三、实验原理
Experimental principle （一）半衰期的概念
1.生物半衰期：药物效应下降1/2的时间。 2.药物半衰期：药物消除（浓度）下降1/2 的时间。

磺胺血药浓度测定ppt课件

磺胺血药浓度测定
药物浓度－时间曲线图(C-T curve)，也称时量曲线是以时间为横坐标，药物浓度(或logC)为纵坐标绘制的图形
血浆药物浓度 (mg/ml)
静脉注射一次给药口服
时间(min)
实验目的

1.掌握药物血药浓度的测定方法 2. 通过用药后血药浓度的变化，研究药物从血浆中消除的速率；学会制作药物时量曲线

以开始采血时间作为血样本时间，若未能按时采血，则以实际采血时间参加计算。
药物时-量曲线图（是以时间T为横坐标，药物浓度C或logC为纵坐标绘制的图形）
C
一次静脉注射 log C C-t data Semi-log plot
t
t
药物消除动力学与时-量曲线
C logC
零级
零级
1.计算各采血点的血药浓度：
SD-Na标准曲线已制作，回归方程如下 Y=9.872X+0.0208 (Y为OD值，X为浓度） SD-Na血浓度:C≈10× OD测定管/10 (mg/ml)
2.作图：药-时曲线。
3.计算药动学参数：参照129-130页或用BL-420 的数据处理。
软件计算（一级动力学药动学参数）
上清1.5 ml
0.5%亚硝酸钠0.5ml
充分摇匀
0.5%麝香草酚1ml
充分摇匀，比色
全血磺胺嘧啶钠浓度测定——各管加液
给药前 5min 10min 15min 30min 50min 蒸馏水全血 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1
20%三氯醋酸
耳缘i.v. 20％ SD-Na 2ml/kg。
给药后的第5、10、15、30、50分钟分别从动脉采0.3ml。（先弃1ml 血）

药物血浆浓度的测定及半衰期的计算

药物血浆浓度的测定及半衰期的计算姓名: 学号: 班级：一、实验目的1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物血浆浓度、药物血浆半衰期(ｔ1/2) 及表观分布容积(Ｖｄ)等药动学参数的基本方法。

2.理解常用药动学参数的临床意义。

二、实验材料1.实验动物：家兔1只2.器材:试管24支，移液吸管(10mｌ1支，１mｌ2支,2ml ７支），移液器1支,吸头若干,试管夹,试管架，离心机，72２型分光光度计，手术剪，眼科剪,止血钳,动脉夹，眼科镊,缝线，药棉,纱布，捆扎绳,注射器(10ml １支,5mｌ1支)。

3.药品:５％磺胶略啶钠溶液,7.５%三氯醋酸溶液,０.5%亚硝酸钠溶液,0。

５％麝香草酚钠溶液（溶于2０％氢氧化钠浓度内)，草酸钾结晶，２0％乌拉坦容液，肝索注射液，生理盐水。

三、实验方法和步骤1.取试管6支,依次用A1、A2、Ａ3……A６标记，各加入７.５%三氯醋酸2mｌ备用。

2.取试管6支，依次用Ｂ１、Ｂ2、Ｂ3……B6标记,各加人草酸钾结晶几粒。

3.取家兔1只，称重，以20% 乌拉坦溶液1g/kg (5 ｍl/kｇ) 耳缘静脉注射麻醉，背位固定于手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心端,并在近心端夹上动脉夹,以阻断血流,再将放血导管向心脏方向插人颈总动脉内,用线打活结固定。

4.松开动脉夹,放血约１ml，置于B 管，迅速摇匀抗凝,然后耳缘静脉注人5% 磺胺嘧啶钠１5０mg／kg （3 mｌ/ｋｇ)，记录注完时间（准确到分钟）。

5.给药后５、1０、2０、３０、40 mｉn，用同样方法放血约1ml,分别置于B2、Ｂ３、B4、Ｂ5、Ｂ６管，迅速摇匀，记录取血标本的准确时间,然后B1~ B6管以1５００转/min 离心5 min,准确吸取上层血浆5０μl加人相应的各A 管，各管以15０0转1分离心5 ｍｉn,分别取离心后的上清液1．5 mｌ,加０。

5％亚硝酸钠溶液0.５ｍl,摇勾，再加０.５％麝香草酚1ｍl,可见橙红色反应。

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①各管搅拌1min； ②加蒸馏水2.5ml，搅拌1min； ③离心10 min， ④上清比色
注意事项
采血、混合液和离心
采血前须放血1毫升放血0.5毫升，移液管吸取0.3毫升和混合液搅拌后应立即离心测量一般可采血2次后再分别混合、离心采血时间间隔可增加或缩小
6
分光度计测量
已制作好空白管，已用空白管调零分别测量各采血点和标准管的药物
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全血水杨酸钠浓度测定步骤（ml0分标准空白
混合液 2 全血 0.3 0.04%水杨酸 0 蒸馏水 0
22 2 2 2 2 2 2 2 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0 0
0 0 0 0 0 0 0 0.3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.3
血药浓度测定及药动学参数的计算
1
实验原理
水杨酸钠可与氯化高铁产生显色反应，其光密度与水杨酸钠浓度成正比。
水杨酸钠浓度（Dn/D标）×标准管浓度
2
实验目的
1.测定血药浓度 2.制作时量曲线，计算半衰期
3
实验步骤
1.家兔称重，麻醉，固定 2.颈总动脉插管供采血 3.耳缘i.v. 肝素1ml/kg全身肝素化 4.耳缘i.v. 10％水杨酸钠溶液2ml／kg 5.颈总动脉采血0.3ml
吸光度值不要触碰比色皿的光面
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实验结果
1.计算各采血点的血药浓度 2.制作时量曲线 3.计算半衰期
8