药物血浆半衰期测定精品PPT课件

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器材与药品:
分光光度计，离心机 试管(5ml，3只草酸钾玻璃试管，3只
干燥塑料试管) 试管架，移液枪，注射器3个 0.6%酚磺酞，10%草酸钾溶液，稀释
液(生理盐水29ml+1mol/L NaOH 1ml)
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方法与步骤:
家兔，称重，心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
i.v.酚磺酞1.0ml/kg，记录时间，给药后5min， 15min分别心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
以上试管离心10min(转速1500转/分) 离心后，分别从每管中吸出血浆0.2ml转移至另3试
管中，再分别加入稀释液3ml 用给药前管做对照调零，在560nm处用分光光度计
测每管的光密度(D) 根据标准曲线查出C1C2，根据公式计算出各参数值5Fra bibliotek注意事项
操作：心脏取血; 每次取血提前几分; 标本明显溶血，不能用于PSP的含量测定 定量试验，加样（血、试剂）准确; T：实际间隔时间; 离心前试管要调平衡; 分光光度计：提前打开，预热，调零。禁
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思考题
1. 检测血药浓度有何临床意义？ 2. 影响血药浓度的因素有哪些？
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家兔心脏取血方法
一人稳妥固定家兔，腹面向上 采血者一手持采血用注射器，另一手指于家兔 前胸部查找心跳最强处（一般位于胸骨左缘4-5肋 间），于肋间隙进针，垂直刺入 待有突破感即刺入胸腔，垂直向下刺入心脏 如刺入心脏，则注射器颤动均匀稳定，与心跳 频率一致 此时回吸血液，有血液进入则证明进入心脏
止用手触摸比色皿的光面。
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血浆半衰期(half-life, t1/2) :
t1/2 =T×log2/(logC1-logC2)min

为药前管，用作“调零”），在另一侧耳缘静脉注射
10％水杨酸钠2ml/kg（缓慢）（药前管：未给水杨酸 钠前）
4、于给予水杨酸钠后5min、35min耳缘静脉采血
2ml，分别置于2、3号小塑料管。
5、分别精确取1、2、3号塑料管中的血液1ml（取血
时：小吸管要插到小塑料管的底部，否则吸入空
气，血量不正确）加入对应编号有混合液的玻璃 离心管（第一步骤的离心管），每管再分别加入
铁混合液、肝素、蒸馏水。
器材：试管架、试管6支、移液器、枪头、注射
器、722分光光度计、离心机。
【方法】
1．取家兔1只，称重，于兔箱中固定。用(12500u/2ml)
肝素0.3ml/kg进行耳缘静脉注射。
2、编号1、2、3三支玻璃离心管，分别加入三氯化铁及 三氯醋酸的混合液2ml。 3、给予肝素后5min后耳缘静脉（用针头刺入血管后拔 出，让血自然流出）采血2ml（置于1号小塑料管，作
【原理】 水杨酸钠（在人只能外用，乙酰水杨 酸钠可以内服）中小剂量按一级消除动力 学消除，其在酸性环境中可变为水杨酸， 后者与三氯化铁生成一种配位化合物。该 化合物在520nm波长下比色，其光密度与 水杨酸的浓度成正比。
【材料】
动物：家兔，体重2～3kg，雌雄均可
药品： 10％水杨酸钠、
三氯醋酸、 三氯化
【计算】
t1/2 =
0.301 ×Δt
Lg(A1/A2)
此公式从一级消除动力学的公式推导出 来。单位：如Δt是分钟，则t1/2为分钟， 如Δt是小时，则t1/2为小时，
注意事项：
1.量具的使用（微量取样器、定量溶液瓶）； 离心机的使用。 2.药前取血必须！采血后及时处理，吸头等需 及时清洗。 3.若未能按时采血，以实际采血时间计算。

lgC1 lgC2
= =
－ket1
2.303
+ lgC0
－ket2 + lgC0 2.303
t1/2 =
T×lg1/2 lgRT
(T=t2-t1 RT=x2/x1)
实验步骤： 1. 取离心管三支，分别标以ABC，各加入10%三氯乙 酸3.5ml。 2. 家兔称重后，用25%乌拉坦麻醉（4ml/kg ）。 3. 颈V取血1ml置A管中。 4. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠1.5ml/kg,并记 录完毕时间。 5. 给药后10分钟、30分钟分别取血1ml，置于B、C 管中。 6. 将3 支管摇匀，以2000r/min离心5分钟，准确吸 取上清液3ml，分别放入3个试管。每管加入三氯 化铁0.3ml,摇匀，显色。 7. 以给药前为对照，510nm波长测光密度值X1、X2 8. 计算t1/2= (t 2 t1) * lg1 / 2
血浆半衰期的测定
药理教研室
药物消除半衰期
定义：血浆药物浓度下降一半所需
要的时间。其长短可反映 体内药物消除速度。
意义：确定给药间隔时间。
给药间隔约为一个半衰期。
实验目的：学习测定药物血浆半衰期的 方法及结果处理
实验动物：家兔 实验器材:离心机、离心管、试管、移液 器、722s分光光度计、哺乳动 物手术器械 药物：10%水杨酸钠 10%三氯醋酸 10%氯化铁
X2 lg X1
阿司匹林 水杨酸类： 解 热 镇 痛 抗 炎 药 非选择性环加 氧酶抑制药
苯胺类
水杨酸钠
吲哚基和茚基乙酸类 ……
选择性环氧 酶-2抑制药
塞来昔布 罗非昔布 尼美舒利
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C
三氯化铁
上清液
Ct=C0

Vd =D0/C0 (L) D0:静脉进入体内的药量(mg) C0:预期零时浓度(mg/L) C0 =C1×log-1(0.301×t1/t1/2) t1：第一次取血时间
.
清除率(clearence, CL):
CL = Vd ×K (L/min, L/h) K :消除速率常数 K =0.693/t1/2
以上试管离心10min(转速1500转/分) 离心后，分别从每管中吸出血浆0.2ml转移至另3试
管中，再分别加入稀释液3ml 用给药前管做对照调零，在560nm处用分光光度计
测每管的光密度(D) 根据标准曲线查出C1C2，根据公式计算出各参数值
.
注意事项
操作：心脏取血; 每次取血提前几分; 标本明显溶血，不能用于PSP的含量测定 定量试验，加样（血、试剂）准确; T：实际间隔时间; 离心前试管要调平衡; 分光光度计：提前打开，预热，调零。禁
表观分布容积(apparent distribution, Vd)
清除率(clearence, CL)
volum意估还51意药一是L0e意 药给预度是计~c物肝义 义 个2o期药物的组药血义0自、重::fL达间分时织物浆:c体肾要到隔类间中分全内等指稳时布身消清标态间在体血除除血.液浓浆率的
大的预于总测4和0一Lc次组给织药器后官, 药
.
思考题
1. 检测血药浓度有何临床意义？ 2. 影响血药浓度的因素有哪些？
.
家兔心脏取血方法
一人稳妥固定家兔，腹面向上 采血者一手持采血用注射器，另一手指于家兔 前胸部查找心跳最强处（一般位于胸骨左缘4-5肋 间），于肋间隙进针，垂直刺入 待有突破感即刺入胸腔，垂直向下刺入心脏 如刺入心脏，则注射器颤动均匀稳定，与心跳 频率一致 此时回吸血液，有血液进入则证明进入心脏

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四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
6.比色
以A管为对照管， 用分光光度计测定
光密度。
V1100型可见光分光光度计
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分光光度计的使用
1.接通电源，开机预热30分钟。 2.通过波长旋钮选择实验需要波长510nm. 3.打开比色皿暗箱盖，将黑体、参比液、待测液依次放入 比色皿暗箱滑槽中，合上盖。 4.拉动滑杆，让黑体进入光路中按下 键切换到T档。 5.按 键校零。 6.再按 键切换到A档，将参比液放入光路中，按 键调零。 7.再将待测液放入光路中，即可得出待测液的吸光度。
家兔称重
耳缘静脉取血 2ml,加入A管。
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四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps 3. 注射药物
由耳缘缓慢注射10％水杨酸 钠1.5ml/Kg。
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四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
4.取血2次
给药后10分钟和 40分钟时，分别 从心脏取血2ml放 入B及C管，记录 取血时间
Experimental purpose
1.用比色法测定水杨酸钠浓度并计 算半衰期。
2.学习心脏取血操作。
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二、实验对象及器材
1.Experimental subjects
家兔
2.Experimental Materials
分光光度计，离心管，离心机， 移液管，注射器。10％的三氯醋酸，
10％水杨酸钠，10％三氯化铁
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三、实 验 原 理
Experimental principle （一）半衰期的概念
1.生物半衰期：药物效应下降1/2的时间。 2.药物半衰期：药物消除（浓度）下降1/2 的时间。

实验12 药物血浆半衰期的测定
【目的和原理】
绝大多数药物在体内按一级动力学的规律 消除，如以药物血浓度的对数值为纵座标，时 间为横座标，其时量关系呈一直线，该直线的 方程式为logCt= logC0-Kt/2.303,因此如按給药 后各时间测出的血药浓度数据在对数座标纸上 作点，顺着各点的分布趋势作一回归直线，
由回归直线上任意两点的座标算出斜率B，再
根据B= -K/2.303求出K值，通过t1/2=0.693/K可 算出t1/2值，此外也可通过作图法直接查出t1/2值。 对氨基水杨酸钠可与FeCl3生成一络合物呈紫红 色。该络合物在波长525nm下比色，其光密度
（OD）与对氨基水杨酸钠浓度成正比。本实
验以对氨基水杨酸钠为例，学习测定药物血浆
(4)给药后20min、40min、60min、 80min后，分别从眼眶取血50ul，加入各相 应试管中，摇匀，静置，记录取血的准确 时间。
(5)各试管离心5min(2000～3000转/min)，精 确吸取上清液3ml分别放入另一编号试管中， 每管加10％FeCl30.2ml摇匀显色。
(6)在分光光度计525nm波长下以0号管调零， 测定各管的光密度值（OD）。
2 3 4 5 ∑
(∑T)2=
∑T·∑logC= n=
∑(TlogC)=
B(斜率)＝
n∑(TlogC) -∑T·∑logC
n∑T2-(∑T)2
由此 K = -2.303·B = 从而 t1/2=0.693/K=
(7)各药后管的OD值减去药前OD值后，用 直线回归方程Y=a+bX求出各时间的血药浓 度值，数据按实验指导处理或用计算机计算 t1/2值。
表7-8 对氨基水杨酸钠血药浓度测定步骤

器材与药品:
分光光度计，离心机 试管(5ml，3只草酸钾玻璃试管，3只
干燥塑料试管) 试管架，移液枪，注射器3个 0.6%酚磺酞，10%草酸钾溶液，稀释
液(生理盐水29ml+1mol/L NaOH 1ml)
方法与步骤:
家兔，称重，心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
i.v.酚磺酞1.0ml/kg，记录时间，给药后5min， 15min分别心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
酚磺酞在碱性环境中,结构发生变 化，形成醌式盐，呈现紫红色， 可用分光光度计在560nm处进行定 量测定。
原理: d药 表 清is物 观 除tr血 分 率ibu浆布(ctli半容eoan衰积r,eV期(nadcp()hep,aaClrfe-Llni)ftev, ot1l/u2)m理布积V意估还51单积清C意药一是L0dLe血 下 所 t意 药给预度计是~c.论 应 义 位 血 除 义 物 个 肝=1(=2/LDo物药期的2药组血浆 降 需 义V0上 占 时 浆 干 自 重 、::=,f/L分间达时d物织C0浆L中 一 的:c·药 有 间 中 净 体 要 肾.K0/类隔到间分中6k全药 半 时物 的 内 的 。 内 指 等9g时稳布身3)物 间均 体 多 药 消 标 清(间态/在LK体浓./血匀 液 少 物 除 除.血eh液)度浓浆分 容 容 被 的 率 大的预于总测4和0一Lc次组给织药器后官, 药 物基本消除时间
以上试管离心10min(转速1500转/分)
离心后，分别从每管中吸出血浆0.2ml转移至另3试 管中，再分别加入稀释液3ml
用给药前管做对照调零，在560nm处用分光光度计 测每管的光密度(D)
根据标准曲线查出C1提前几分; 标本明显溶血，不能用于PSP的含量测定 定量试验，加样（血、试剂）准确; T：实际间隔时间; 离心前试管要调平衡; 分光光度计：提前打开，预热，调零。禁

药物血浆半衰期t1/2的测定
【目的】学习药物血浆半衰期测定方法。 【原理】药物血浆半衰期是血浆药物浓度下降一半所
需要的时间。按一级动力学消除的药物其血浆半衰期是一 个固定值，仅取决于Ke值的大小。
t1/2=0.693/Ke
磺胺嘧啶的测定原理：磺胺类药物为氨基苯类化合物，在酸性 溶液中可与亚硝酸钠其重氮反应生成重氮盐，此盐在碱性溶液 中与麝香草酚起偶联反应形成橙红色偶氮化和物，将该化合物 在525nm波长下比色，其OD值与磺胺类药物浓度成正比。
谢谢聆听
【药品】 20%磺胺嘧啶钠（SD-Na）， 7.ห้องสมุดไป่ตู้％三氯醋
酸， 肝素、 0.5%麝香草酚，0.5%亚硝酸钠，蒸馏水
【动物】 家兔
【方法、步骤 】
1．取3支离心管标记1、2、3，加入7.5％三氯醋酸 2.8ml ； 2．取家兔一只，称重，用0.5%肝素生理盐水清润洗 注射器和抗凝瓶。通过 耳缘静脉取血 心脏取血 取药前血2ml。 3．由一侧耳缘静脉注射20%SD-Na1.5ml/kg 4．分别于给药后5min，35min取血2ml，并记录实 际采血时间。
比色、测光密度值：以药前血管为对照 管，用分光光度计在525 nm波长下读 取5min、30min管的OD值。
．计算：
OD样 血中SD浓度（μ g / m l） 1000 OD标
OD标=0.7
t1/ 2
0.301 （lgC1 lgC 2） /T
T=两次取血时间间隔，C1，C2两次缺血的血浆药物浓度
t1 零时浓度（ C 0） C1 lg （ 1 0.301 ） t1 / 2
表观分布容积（ Vd） D0 / C 0
注意事项： 1、集血瓶和注射器用时需提前用肝素润洗 2、取血间隔为半小时，取血时针头直入直出。 3、每次所取血样中磺胺的浓度不一样，磺胺很容易被污染， 所以实验过程中注射器等应该清洗干净，避免交叉污染 4、配平时用烧杯配平，左重右轻。 5、吸取血液时，注射器不能交叉使用，避免交叉污染。 6、准确记录三个时间点（给药时刻，t1、t2） 7、分光光度计提前预热，比色杯先润洗，不能碰到比色杯 光滑面。

药物血浆半衰期的测定
辽宁医学院
【目的】
学习药物血浆半衰期测定方法。
【药品】 10%水杨酸钠，
10％三氯醋酸4ml， 0.5％肝素生理盐水， 10%三氯化铁
【动物】 家兔
【原理】
血中药物浓度随时间推移呈规律性 （一级动力学消除）下降。
Ct C0 e
kt
【方法、步骤 】
1．取3支离心管标记1、2、3，加入10 ％三氯醋酸4ml ； 取9支试管标记：A1,A2,A3 B1,B2,B3 C1,C2,C3备用。
2．取家兔一只，称重，麻醉（20％乌 拉坦5 ml/kg，2/3耳 iv，1/3 ip）
3．分离颈总动脉，头端用线结扎， 心端用动脉夹夹闭。
离 心 端
向心端 动脉夹
4．肝素化：0.5％肝素 生理盐水2 ml/只，IV 5. 动脉插管，备取血用。
开启动脉夹取血时，不 要将动脉夹抽离动脉
每次移入离心管的 血量务必准确
比色杯必须配套，擦干净;721 分光光度计调零点时至少三次 后再测；清洗比色杯后用卫生 纸单向擦拭透光面，
11．比色、测光密度值：以C1号管为 对照管，用721分光光度计在520 nm 波长下读取C2、C3号管的光密度值。
12．计算：
t1 / 2 log
0 . 301 OD OD来自1 2/OD1和OD2分别为2、3号管的光密度值。
0 . 301 OD 1 OD
2
/
零级
浓 度
零级
对 数 浓 度
一级
一级
时间
时间
操作流程图
血1～1.5ml 三氯醋酸4ml
倾入
离 心 （ 30 00 3
吸 取 上 清 液 3ml
三氯化 铁0.5ml

南华大学医学院机能学实验中心
【观 察 指 标】
吸光度值
南华大学医学院机能学实验中心
【实 验 方 法 与 步 骤】
南华大学医学院机能学实验中心
麻醉，背位固定
气管插管 颈部手术 颈总动脉插管
体内肝素化 加样试管的准备，各管加入6％三氯醋酸7．8m1
耳缘静脉注入20％SD溶液,Leabharlann 别于给药后的第0、5、10、20、
南华大学医学院机能学实验中心
南华大学医学院机能学实验中心
【分析讨论】
磺胺类药物在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重 氮反应，产生重氮盐，此盐在碱性溶液中，与酚类 化合物（麝香草酚）起偶联反应，形成橙色的偶氮
化合物。利用光电比色法测定给药前后不同时间血
浆药物浓度的变化
南华大学医学院机能学实验中心
当符合一室模型药物静脉注射后，可准确地测
比率。T1/2与Rt的关系如下：代入公式：
T （t2-t1） t =-0.301 = -0.301 Igc2-Igc1 IgRt 1/2 式中c1，c2为不同时间的血药浓度。t2-t1为两次取 血的时间间隔。本实验以磺胺嘧啶钠盐为例介绍药 物半衰期 t1/2 的测定方法并求出该药物的血浆半衰 期t1/2
血药浓度半衰期的测定
南华大学医学院机能学实验中心
【目 的 与 要 求 】
1、掌握t1/2比色测定法 2 、了解药物 t1/2、生物利用度和表观分布容积 等概念
3、学会绘制药物时—量曲线
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【实验原理】
血浆药物浓度半衰期是指血浆药物浓度下降一半 所要的时间 临床上多数药物在体内按一级代谢动力学的规律 而消除，也就是血浆中药物消除速率与瞬时药物浓度 成正比，根据这一规律可知：药物静脉注射后，如以 血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其 时量关系常呈直线。只要我们测出消除相任意两个时 间的血浆药物浓度，又知道这两个浓度变化的时间间 隔，就可以通过公式计算出血浆药物浓度的半衰期